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Fasudil联合骨髓源神经干细胞对EAE小鼠的神经保护作用 被引量:4
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作者 宋国娬 席国萍 +6 位作者 李艳花 李加善 刘建春 柴智 肖保国 张光先 马存根 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期2113-2120,共8页
目的:探讨Rho激酶抑制剂法舒地尔(fasudil)联合骨髓源神经干细胞(bone marrow-derived neural stem cells,BM-NSCs)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠的神经保护作用。方法:32只雌性C57B... 目的:探讨Rho激酶抑制剂法舒地尔(fasudil)联合骨髓源神经干细胞(bone marrow-derived neural stem cells,BM-NSCs)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠的神经保护作用。方法:32只雌性C57BL/6小鼠(8~10周龄),用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(MOG35-55)免疫,制备EAE,随机分为对照(dd H_2O)组、fasudil组、BM-NSCs组和fasudil+BM-NSCs组,并分别给予相应处理。免疫后检测小鼠临床症状和相关神经营养因子的表达,Image-Pro Plus 6.0软件进行阳性细胞计数,Graph Pad Prism 5软件统计分析。结果:与dd H_2O组比较,fasudil+BM-NSCs处理组明显延迟小鼠的平均起病时间,降低最高临床评分,并缓解EAE小鼠的临床症状;fasudil组、BM-NSCs组和fasudil+BM-NSCs组中脑源性神经营养因子、胶质细胞源性神经营养因子、神经生长因子、神经营养因子3和睫状神经营养因子阳性细胞数均有不同程度的增加,其中,fasudil+BM-NSCs组上述神经营养因子的表达明显多于dd H_2O组、fasudil组和BM-NSCs组(P<0.01)。结论:Fasudil联合BM-NSCs通过协同和叠加效应促进神经营养因子表达,改善中枢神经系统微环境,发挥神经保护作用,从而缓解EAE的临床症状。 展开更多
关键词 法舒地尔 骨髓源神经干细胞 实验性自身免疫性脑脊髓炎 神经营养因子
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Fasudil促进体外培养骨髓源神经干细胞的增殖与存活 被引量:2
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作者 宋国斌 席国萍 +5 位作者 尉杰忠 丰玲 黄建军 肖保国 李艳花 马存根 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1488-1491,1496,共5页
目的探讨法舒地尔(Fasudil)对体外培养骨髓源神经干细胞(BMNSC)增殖和存活的影响。方法取3~4周龄的C57BL/6小鼠,分离骨髓基质细胞并诱导产生细胞球,用免疫荧光染色鉴定细胞类型。羧基荧光素二乙酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记细... 目的探讨法舒地尔(Fasudil)对体外培养骨髓源神经干细胞(BMNSC)增殖和存活的影响。方法取3~4周龄的C57BL/6小鼠,分离骨髓基质细胞并诱导产生细胞球,用免疫荧光染色鉴定细胞类型。羧基荧光素二乙酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记细胞,检测Fasudil促进BMNSC增殖能力。利用脂多糖(LPS)和γ干扰素(IFN-γ)联合处理BV-2小胶质细胞制备炎性条件培养液处理BMNSC,Fasudil干预,通过流式细胞术检测线粒体膜电位、碘化丙啶(PI)荧光值,探讨Fasudil对BMNSC的保护效果。结果免疫荧光染色证明骨髓源细胞球为神经上皮干细胞蛋白(nestin)阳性的神经干细胞。Fasudil处理明显降低CFSE平均荧光值。在LPS和IFN-γ联合作用下,BV-2小胶质细胞释放更多的白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)等炎性细胞因子,显著高于PBS处理组。该炎性条件培养液导致BMNSC线粒体膜电位明显降低并诱导更多的细胞死亡,而Fasudil处理则显著恢复线粒体膜电位接近正常值,减少细胞死亡,并且具有明显的剂量依赖性。结论Fasudil对体外培养BMNSC的增殖和存活具有显著的促进作用。 展开更多
关键词 法舒地尔(Fasudil) 骨髓源神经干细胞 线粒体膜电位
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CCR5基因转染对骨髓源神经干细胞生物学行为的影响 被引量:2
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作者 胡昱 郝海光 +3 位作者 张晓丹 赵丹 孙东 杨静娴 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期976-982,共7页
骨髓源神经干细胞(bone marrow-derived neural stem cells,BM-NSCs)具有自我更新和分化为神经元与神经胶质细胞的潜能,可用于修复治疗多种神经系统退变与损伤性疾病。但由于其表面缺乏趋化因子受体,移植后向中枢病变部位迁移的速度较慢... 骨髓源神经干细胞(bone marrow-derived neural stem cells,BM-NSCs)具有自我更新和分化为神经元与神经胶质细胞的潜能,可用于修复治疗多种神经系统退变与损伤性疾病。但由于其表面缺乏趋化因子受体,移植后向中枢病变部位迁移的速度较慢,疗效欠佳。该研究构建了趋化因子受体CCR5基因,并转染BM-NSCs,用免疫荧光细胞化学法、流式细胞仪法及Boyden小室细胞趋化实验,体外研究了CCR5高表达对BM-NSCs增殖、分化与迁移能力的影响。结果表明,CCR5高表达能显著增强BM-NSCs的趋化能力,而不影响其自我更新和分化为神经元与神经胶质细胞的能力,说明其植入体内后可保持细胞替代与神经修复作用,并能快速大量迁移到病灶部位,显著增强疗效。 展开更多
关键词 骨髓源神经干细胞 趋化因子受体CCR5 增殖 分化 迁移
原文传递
GDNF对Nurr1基因的大鼠骨髓源神经干细胞的诱导分化作用
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作者 姚谦明 徐如祥 +4 位作者 姜晓丹 蔡颖谦 何启 程国雄 汤冬旋 《广州医学院学报》 2006年第3期1-5,共5页
目的:利用胶质细胞系源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotroph ic factor,GDNF)对经过转染核相关因子1(nuc lear related factor 1,Nurr1)基因的大鼠骨髓源神经干细胞(bone m arrow strom al cells de-rived from neural s... 目的:利用胶质细胞系源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotroph ic factor,GDNF)对经过转染核相关因子1(nuc lear related factor 1,Nurr1)基因的大鼠骨髓源神经干细胞(bone m arrow strom al cells de-rived from neural stem cells,BMSCs-D-NSCs)进行培养和诱导分化,研究其能否促进Nurr1-BMSCs-D-NSCs向多巴胺能神经元转化。方法:(1)构建AAV-pcDNA3.1-Nurr1载体;(2)诱导SD大鼠BMSCs分化为成熟的神经元样细胞;(3)用脂质体法转染Nurr1基因到大鼠BMSCs-D-NSCs后用GDNF进行培养和诱导分化。结果:(1)AAV-pcDNA3.1-Nurr1载体携带预期的Nurr1遗传信息;(2)Nurr1基因成功转染到BMSCs-D-NSCs中并且持续表达;(3)Nurr1-BMSCs-D-NSCs以GDNF培养后表达TH因子。结论:GDNF能促进经过转染Nurr1基因的大鼠BMSCs-D-NSCs向多巴胺能神经元定向分化。 展开更多
关键词 胶质细胞系源性神经营养因子 核相关因子 骨髓源神经干细胞
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