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西瓜细菌性果斑病菌在不同场所存活期的检测 被引量:12
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作者 李艳嫦 孔静月 +3 位作者 吴九玲 王琳 任小平 刘琼光 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期332-336,共5页
选择西瓜细菌性果斑病菌(Acidovorax avenae subsp.citrulli,Aac)的抗利福平菌株RifAac,通过人工模拟接种试验,采用选择性平板分离、菌落PCR(Bio-PCR)和常规PCR方法,观察该病原细菌在西瓜种子、土壤、病残体和田水中的存活期。结果表明... 选择西瓜细菌性果斑病菌(Acidovorax avenae subsp.citrulli,Aac)的抗利福平菌株RifAac,通过人工模拟接种试验,采用选择性平板分离、菌落PCR(Bio-PCR)和常规PCR方法,观察该病原细菌在西瓜种子、土壤、病残体和田水中的存活期。结果表明,果斑病细菌在种子表面可存活4~5个月,在田水中可存活2个月,在不含植物残体的土壤中可存活8个月,在含西瓜残体的土壤中可以存活12个月以上。 展开更多
关键词 西瓜细菌性果斑病 燕麦嗜酸菌西瓜亚种 存活期 菌落pcr 检测
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利用Bio-real-time PCR技术检测玉米内州萎蔫病菌 被引量:5
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作者 高文娜 李建光 +1 位作者 骆卫峰 汪万春 《植物检疫》 北大核心 2014年第2期52-57,共6页
玉米内州萎蔫病是北美玉米生产上的严重病害之一,为预防其传入我国,利用人工注射接种的方法模拟自然感病的玉米籽粒,通过Clavibacter michiganensis不同亚种的转录间隔区序列,设计了特异性的TaqMan-MGB探针,将Clavibacter michiganensis... 玉米内州萎蔫病是北美玉米生产上的严重病害之一,为预防其传入我国,利用人工注射接种的方法模拟自然感病的玉米籽粒,通过Clavibacter michiganensis不同亚种的转录间隔区序列,设计了特异性的TaqMan-MGB探针,将Clavibacter michiganensis subsp.nebraskensis(Cmn)的半选择性培养基sCNS和特异性的探针结合,建立了进出境玉米种子上Cmn的Bio-real-time PCR检测方法,该方法可以检测到105粒玉米种子中含有一粒感病籽粒(带菌量为1.2×106 CFU/粒)的种子样品,可以应用于实际检测。 展开更多
关键词 玉米内州萎蔫病菌 bio—real—time pcr 快速检测
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Bio-PCR方法检测葫芦科作物种子携带西瓜嗜酸菌的特异性引物筛选 被引量:2
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作者 阚玉敏 云晓敏 +2 位作者 李玉文 李健强 罗来鑫 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期263-270,共8页
由西瓜嗜酸菌(Acidovorax citrulli)引起的细菌性果斑病是一种毁灭性的种传病害,可为害多种葫芦科作物并造成重大经济损失。该病原菌为检疫性有害生物,种子带菌是田间病害发生的最重要初侵染来源,因此,种子健康检测成为病害综合防控过... 由西瓜嗜酸菌(Acidovorax citrulli)引起的细菌性果斑病是一种毁灭性的种传病害,可为害多种葫芦科作物并造成重大经济损失。该病原菌为检疫性有害生物,种子带菌是田间病害发生的最重要初侵染来源,因此,种子健康检测成为病害综合防控过程中的重要环节。Bio-PCR是当前种子携带细菌检测的常用方法,而特异性引物的选择和使用是检测的关键。本研究使用已报道的7对引物对17株西瓜嗜酸菌、10株嗜酸菌属其它种的菌株和6株其它属的植物病原细菌进行了BioPCR检测,筛选出对西瓜嗜酸菌特异性最好的引物为SEQID4m/SEQID5。研究表明:使用该引物对西瓜嗜酸菌M H21纯菌菌悬液的检测限度为10~2CFU·m L^(-1);在人工添加菌悬液的模拟带菌西瓜种子中,使用ASCM和EBBA两种半选择性培养基结合引物SEQID4~m/SEQID5进行Bio-PCR检测,ASCM对种子中带菌量的检测限度可达到0.01 CFU·g^(-1),EBBA对种子中带菌量的检测限度为0.1 CFU·g^(-1)。 展开更多
关键词 西瓜嗜酸菌 bio-pcr 引物 特异性 灵敏度
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九种单核细胞增生性李斯特菌检测技术效果比较及评价 被引量:3
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作者 刘雅莉 刘芳 +4 位作者 韩舜愈 刘箐 孙志博 夏俊芳 朱小清 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期84-92,共9页
采用传统生物学方法、显色培养基方法、自制三抗体夹心ELISA试剂盒(TAS-ELISA)、基因组直接PCR(DNA Direct-PCR)、菌裂解直接PCR(Bacterium Direct-PCR)、免疫捕捉PCR(IC-PCR)、生物PCR(Bio-PCR)、SYBR Green染料实时荧光PCR(SYBR Green... 采用传统生物学方法、显色培养基方法、自制三抗体夹心ELISA试剂盒(TAS-ELISA)、基因组直接PCR(DNA Direct-PCR)、菌裂解直接PCR(Bacterium Direct-PCR)、免疫捕捉PCR(IC-PCR)、生物PCR(Bio-PCR)、SYBR Green染料实时荧光PCR(SYBR Green Real time-PCR)、探针实时荧光PCR(TaqMan Real time-PCR)检测纯菌液及模拟带菌食品中的单核细胞增生性李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)。结果表明:传统生物学培养方法出现假阳性;TAS-ELISA、DNADirect-PCR、Bacterium Direct-PCR、IC-PCR最低检测限分别为106、102、105、104CFU/ml;显色培养基、SYBR Green Real time-PCR灵敏度达102CFU/ml;Bio-PCR、TaqMan Real time-PCR检测灵敏度最高,均为101CFU/ml。显色培养基、TAS-ELISA操作简单,适合大量样品的初检;IC-PCR具有灵敏、特异、快速、经济的优点,特别适合大体积样品中微量病原的检测;Bio-PCR、TaqMan Real time-PCR灵敏度高、特异性好,适合阳性样品的复检以及科研使用。 展开更多
关键词 单核细胞增生性李斯特菌 三抗体夹心ELISA 免疫捕捉pcr 生物pcr 实时荧光 定量pcr
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生物芯片、PCR在啤酒工厂的应用分析 被引量:1
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作者 任河山 尹曙光 +2 位作者 刘振亚 邓丽娜 文启来 《啤酒科技》 2010年第11期18-20,共3页
本文介绍了生物芯片及PCR检测方法,通过试验比较了生物芯片、PCR及常规微生物检测结果的吻合率,并比较了三者的固定设备投入及检测成本。为啤酒工厂采用生物芯片及PCR检测提供技术支持。
关键词 生物芯片 pcr 啤酒
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