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大熊猫脑源性神经营养因子基因的克隆与表达 被引量:16
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作者 林峰 杨玉华 +5 位作者 张义正 陈红卫 费立松 宋云芳 何光昕 张安居 《兽类学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期95-99,80,共5页
参照人BDNF基因序列设计出一对引物和利用聚合酶链式反应(PCR),首次从大熊猫基因组DNA中扩增和克隆到BDNF基因,并使其在大肠杆菌中得到了表达。序列分析表明,大熊猫和人的BDNF基因的核苷酸序列同源性高达94%... 参照人BDNF基因序列设计出一对引物和利用聚合酶链式反应(PCR),首次从大熊猫基因组DNA中扩增和克隆到BDNF基因,并使其在大肠杆菌中得到了表达。序列分析表明,大熊猫和人的BDNF基因的核苷酸序列同源性高达94%。在推导的多肽序列中,除在前导肽区有两个氨基酸的差异外,大熊猫BDNF的成熟区与人和其它已报道的哺乳动物BDNF成熟区的氨基酸序列完全一致,显示了极高的保守性。本文首次在分子生物学水平上对大熊猫核基因组功能基因进行研究分析,其结果为深入开展大熊猫的神经系统疾病防治,神经生理以及分子进化,系统发育等方面的研究奠定了重要基础。 展开更多
关键词 大熊猫 脑源性 神经营养因子 PCR 基因表达
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甘麦大枣汤对抑郁症模型大鼠前额叶和杏仁核中BDNF、SERT基因表达及血清5-HT水平的影响 被引量:15
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作者 徐铭悦 王瑜 +3 位作者 赵妍 倪红梅 雷媛瑛 李娟 《上海中医药杂志》 2019年第3期89-92,99,共5页
目的研究甘麦大枣汤对抑郁症模型大鼠前额叶和杏仁核中脑源性神经营养因子(BDNF)、5-羟色胺转运体(SERT)基因表达及血清5-羟色胺(5-HT)水平的影响。方法将40只Wistar雄性大鼠随机分为正常组、模型组、甘麦大枣汤组和盐酸氟西汀组,每组1... 目的研究甘麦大枣汤对抑郁症模型大鼠前额叶和杏仁核中脑源性神经营养因子(BDNF)、5-羟色胺转运体(SERT)基因表达及血清5-羟色胺(5-HT)水平的影响。方法将40只Wistar雄性大鼠随机分为正常组、模型组、甘麦大枣汤组和盐酸氟西汀组,每组10只。除正常组外,其余各组以慢性不可预见性温和刺激配合孤养的方法制备抑郁症模型。造模后,甘麦大枣汤组灌胃给予甘麦大枣汤浓缩药液(12.5 ml/kg),盐酸氟西汀组灌胃给予盐酸氟西汀药液(10 ml/kg),正常组和模型组灌胃给予蒸馏水2 ml。各组均干预28天,气相色谱-质谱联用检测血清5-HT水平,实时荧光定量PCR检测大鼠前额叶及杏仁核中BDNF mRNA、SERT mRNA的相对表达量。结果①与正常组比较,模型组大鼠血清5-HT水平降低(P<0.05),前额叶及杏仁核中BDNF mRNA、SERT mRNA相对表达量减少(P<0.05)。②与模型组比较,甘麦大枣汤组、盐酸氟西汀组大鼠血清5-HT水平升高(P<0.05);甘麦大枣汤组大鼠前额叶中BDNF mRNA相对表达量增加(P<0.05),盐酸氟西汀组大鼠前额叶中BDNF mRNA和SERT mRNA相对表达量增加(P<0.05);甘麦大枣汤组、盐酸氟西汀组大鼠杏仁核中BDNF mRNA、SERT mRNA相对表达量增加(P<0.05)。③与盐酸氟西汀组比较,甘麦大枣汤组大鼠血清5-HT水平,前额叶及杏仁核中BDNF mRNA、SERT mRNA的相对表达量差异无统计学意义(P>0.05)。结论甘麦大枣汤可能通过升高血清5-HT水平、增加前额叶和杏仁核中BDNF mRNA及杏仁核中SERT mRNA的表达,对抑郁症发挥干预作用。 展开更多
关键词 抑郁症 大鼠 甘麦大枣汤 5-羟色胺 脑源性神经营养因子 5-羟色胺转运体 基因表达
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脑源性神经营养因子基因修饰神经干细胞对体外培养的脊髓背根神经节细胞的生物学作用 被引量:11
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作者 蒋晖 金大地 +2 位作者 瞿东滨 王春婷 鞠躬 《中华外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第24期1609-1612,共4页
目的建立稳定表达脑源性神经营养因子(BDNF)基因的神经干细胞并观察其对于体外培养的脊髓背根神经节(DRG)细胞存活及突起生长的影响。方法以PCR技术从人脑cDNA文库中获取人BDNF基因片段。采用分子克隆技术构建带有绿色荧光蛋白报告基因... 目的建立稳定表达脑源性神经营养因子(BDNF)基因的神经干细胞并观察其对于体外培养的脊髓背根神经节(DRG)细胞存活及突起生长的影响。方法以PCR技术从人脑cDNA文库中获取人BDNF基因片段。采用分子克隆技术构建带有绿色荧光蛋白报告基因的多顺反子的MSCVBDNFIRES2EGFP重组鼠干细胞病毒表达载体,病毒经PT67细胞包装后感染神经干细胞株C17.2。通过免疫组化,RTPCR,ELISA检测BDNF的表达,在双室共培养系统中共培养3,10d后观察经筛选的稳定表达株对原代培养DRG细胞的生物学作用。结果RTPCR证实BDNF基因在C17.2细胞中转录,ELISA分析显示转基因C17.2培养上清中在转染24h后即可检测到BDNF表达,并在3个月后仍表达(14.6±0.8)ng·d-1·10-1细胞;免疫细胞化学显示,与对照组相比较,BDNF基因修饰的神经干细胞组,DRG细胞突起生长较长交织呈网状的,节细胞存活较多。结论干细胞病毒介导转染的BDNF基因能够在神经干细胞C17.2中稳定表达,并且BDNF基因修饰的神经干细胞对体外培养的DRG细胞的存活及突起、延伸具有显著促进作用。 展开更多
关键词 神经干细胞 脊髓损伤 脑源性神经营养因子 基因治疗
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BDNF基因与抑郁 被引量:12
4
作者 田相娟 王美萍 《心理科学进展》 CSSCI CSCD 北大核心 2016年第10期1583-1591,共9页
抑郁的发生发展具有重要的遗传基础。随着细胞分子生物学实验方法以及分子遗传技术的进步,与神经可塑性有关的BDNF基因作为抑郁遗传学研究的候选基因日益受到关注。概观而言,已有相关研究主要探查了BDNF基因与抑郁的直接关联,BDNF基因... 抑郁的发生发展具有重要的遗传基础。随着细胞分子生物学实验方法以及分子遗传技术的进步,与神经可塑性有关的BDNF基因作为抑郁遗传学研究的候选基因日益受到关注。概观而言,已有相关研究主要探查了BDNF基因与抑郁的直接关联,BDNF基因与其他基因对抑郁的交互作用,以及环境因素对BDNF基因与抑郁关系的调节作用。然而,研究结论尚存在分歧甚至相互矛盾。其原因包括研究设计、环境测量指标、抑郁测量方法与研究对象种族背景等方面的差异。未来研究可通过采用多基因–环境设计,考察被试种族、性别和年龄的调节作用,以及探究潜在的作用机制等进一步推进和深化有关BDNF基因与抑郁关系的研究。 展开更多
关键词 bdnf基因 抑郁 基因–环境交互作用 神经营养因子假说
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腺病毒介导的脑源性神经营养因子表达对大鼠损伤脊髓轴突的保护作用 被引量:10
5
作者 沈岳 廖维宏 +5 位作者 王国强 李芳 伍亚民 龙在云 李应玉 陈恒胜 《第三军医大学学报》 CSCD 北大核心 2000年第2期146-149,共4页
目的 :研究腺病毒介导的脑源性神经营养因子(BDNF)基因在大鼠损伤脊髓内的表达规律 ,观察外源性BDNF对损伤脊髓的作用。方法 :利用激光束描记位移的重力打击装置 ,制备可靠的定量损伤模型 ;以直接注射法将带有BDNF基因表达框的复制缺陷... 目的 :研究腺病毒介导的脑源性神经营养因子(BDNF)基因在大鼠损伤脊髓内的表达规律 ,观察外源性BDNF对损伤脊髓的作用。方法 :利用激光束描记位移的重力打击装置 ,制备可靠的定量损伤模型 ;以直接注射法将带有BDNF基因表达框的复制缺陷重组腺病毒载体直接转移至大鼠损伤脊髓 ,用X Gal染色检测基因转移有效性 ,并观察损伤轴突计量形态学改变 ,损伤脊髓BDNFmRNA表达 ,BDNF和神经中丝(Neurofilament,NF)免疫组化活性的改变。结果 :腺病毒载体直接引入脊髓可有效地感染脊髓组织和表达报告基因。直接转染BDNF腺病毒载体可明显减少伤后两周轴突丧失 ;同时 ,NF免疫反应阳性的轴突较正常增多。结论 :实验性腺病毒介导的BDNF基因损伤脊髓转移是可行的。在基因直接转移局部外源性BDNF过表达对神经具有保护作用 ,可减少轴突丧失 ,促进神经元骨架蛋白的修复。这种双重作用可能在脊髓损伤治疗中有重要的价值。 展开更多
关键词 疹髓损伤 腺病毒载体 基因治疗 大鼠 bdnf
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脑源性神经营养因子基因rs6265与抑郁障碍患者焦虑症状的关联分析 被引量:10
6
作者 刘莎 任燕 +5 位作者 杨红 赵新苗 刘伟 齐志宏 杨爱国 张克让 《中华行为医学与脑科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期772-774,共3页
目的探讨脑源性神经营养因子(BDNF)基因rs6265与抑郁障碍患者焦虑症状的关联性。方法采用聚合酶链反应技术(PCR)对458例抑郁障碍患者BDNF基因的多态性进行基因分型;运用汉密尔顿焦虑量表(HAMA)评估患者的焦虑症状及严重程度;采... 目的探讨脑源性神经营养因子(BDNF)基因rs6265与抑郁障碍患者焦虑症状的关联性。方法采用聚合酶链反应技术(PCR)对458例抑郁障碍患者BDNF基因的多态性进行基因分型;运用汉密尔顿焦虑量表(HAMA)评估患者的焦虑症状及严重程度;采用数量性状分析比较不同等位基因及基因型间患者的焦虑症状是否有差异。结果①未发现抑郁障碍患者BDNF基因rs6265多态性与HAMA总分有关(等位基因:x2=1.947,P=0.163;基因型:x2=2.184,P=0.336)。②rs6265等位基因多态性与精神性焦虑因子及焦虑心境有关(x2=4.908,P=0.027;x2=4.312,P=0.038)。③未发现rs6265多态性与躯体性焦虑因子及其他条目有关(P〉0.05)。结论BDNF等位基因多态性可能与抑郁障碍的焦虑症状有关。 展开更多
关键词 抑郁障碍 焦虑 bdnf基因 多态性
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BDNF重组腺病毒的构建及在大鼠骨髓间质干细胞的表达 被引量:7
7
作者 李红乐 李浩威 +5 位作者 邢飞跃 孙学刚 邓宇斌 张秀明 姜勇 李树浓 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期438-442,T001,共6页
目的 :利用大肠杆菌细菌内同源重组构建带有增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)报告基因的脑源性神经营养因子前体 (proBDNF)和脑源性神经营养因子 (BDNF)重组腺病毒并在大鼠骨髓间质干细胞 (rMSC)高效表达。方法 :采用两步亚克隆的方法将proBDN... 目的 :利用大肠杆菌细菌内同源重组构建带有增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)报告基因的脑源性神经营养因子前体 (proBDNF)和脑源性神经营养因子 (BDNF)重组腺病毒并在大鼠骨髓间质干细胞 (rMSC)高效表达。方法 :采用两步亚克隆的方法将proBDNF和BDNF构建入带有EGFP表达盒的腺病毒穿梭质粒pAdTrack -CMV中 ,形成转移载体pAdTrack -proBDNF和pAdTrack -BDNF ,采用化学转化法在大肠杆菌BJ5 183内与腺病毒骨架质粒pAdEasy- 1同源重组 ,得到重组腺病毒载体pAd -proBDNF和pAd -BDNF ;转染 2 93细胞 ,包装成重组病毒颗粒 ;将重组病毒上清感染rMSC ,用荧光显微镜下观察和Western -blotting鉴定重组病毒在rMSC表达 ;用Ad -proBDNF和Ad -BDNF感染的rMSC在体外诱导向神经样细胞分化 ;用Ad -proBDNF和Ad -BDNF的感染的rMSC接种于裸鼠肌肉内 ,两周后荧光显微镜下直接观察。结果 :成功地构建了proBDNF和BDNF重组腺病毒载体并制备出高滴度重组病毒 ,重组病毒能在体外培养的rMSC高效表达并不影响其分化潜能 ,体内移植实验表明Ad -proBDNF和Ad -BDNF感染的rMSC能在体内表达。结论 :重组腺病毒具有较高的介导proBDNF和BDNF基因表达于rMSC的效率 ,带有报告基因EGFP的Ad -proBDNF和Ad -BDNF感染的rMSC可以用于体内移植实验。 展开更多
关键词 bdnf 重组腺病毒 构建 大鼠 骨髓间质干细胞 表达 增强型绿色荧光蛋白 基因融合 脑源性神经营养因子
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miR-191靶向BDNF基因通过激活PI3K/AKT信号通路促进猪未成熟支持细胞增殖 被引量:8
8
作者 唐湘薇 楚丹 +5 位作者 颜赛娜 尹艳飞 卞桥 翁波 陈斌 冉茂良 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期680-693,共14页
睾丸支持细胞数量是影响精子生成能力的主要因素之一,microRNA(miRNA)参与调控猪未成熟支持细胞的发育过程,然而,大多数被鉴定出的miRNA对支持细胞的作用及其机制尚不明确。基于本课题组前期高内涵筛选结果,本文进一步通过流式细胞术、... 睾丸支持细胞数量是影响精子生成能力的主要因素之一,microRNA(miRNA)参与调控猪未成熟支持细胞的发育过程,然而,大多数被鉴定出的miRNA对支持细胞的作用及其机制尚不明确。基于本课题组前期高内涵筛选结果,本文进一步通过流式细胞术、蛋白免疫印迹和双荧光素酶报告基因等方法,研究了miR-191调控猪未成熟支持细胞增殖和凋亡的作用机理。结果表明:过表达miR-191显著促进细胞周期由G1期进入S期和G2期,细胞增殖能力显著增强,细胞凋亡率显著降低;而抑制表达miR-191则与之相反。双荧光素酶报告基因系统验证miR-191直接靶向BDNF基因3′-UTR。抑制表达BDNF基因促进细胞周期进入S期,并促进细胞增殖而抑制细胞凋亡,与过表达miR-191的作用一致。共转染试验结果显示,BDNF基因可以拮抗miR-191对细胞增殖和凋亡的调控作用。此外,过表达miR-191和抑制表达BDNF基因均可显著促进PI3K/AKT信号通路中关键蛋白PI3K和AKT的磷酸化水平,且BDNF基因同样拮抗miR-191对PI3K和AKT蛋白的调控作用。本研究结果证实miR-191靶向BDNF基因,通过激活PI3K/AKT信号通路促进猪未成熟支持细胞增殖且抑制其凋亡,为进一步解析miR-191调控猪精子生成的生物学功能提供了理论基础。 展开更多
关键词 miR-191 bdnf基因 PI3K/AKT信号通路 增殖 猪睾丸支持细胞
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BDNF基因修饰神经干细胞移植后大鼠脊髓损伤移植处的基因表达变化 被引量:5
9
作者 李巍 李成仁 +1 位作者 蔡文琴 周德山 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期43-46,共4页
目的 了解脑源性神经营养因子 (Brain derivedneurotrophicfactor ,BDNF)基因修饰神经干细胞移植到大鼠脊髓损伤处后的基因表达变化 ,为脊髓损伤修复提供基础研究资料。方法 大鼠随机分为 4组 :正常对照组 ,手术对照组 ,神经干细胞 (N... 目的 了解脑源性神经营养因子 (Brain derivedneurotrophicfactor ,BDNF)基因修饰神经干细胞移植到大鼠脊髓损伤处后的基因表达变化 ,为脊髓损伤修复提供基础研究资料。方法 大鼠随机分为 4组 :正常对照组 ,手术对照组 ,神经干细胞 (Neuralstemcells ,NSCs)移植组 ,BDNF NSCs移植组 ,各组分 4个时相点 (7d、1个月、2个月、3个月 ) ,利用细胞移植、X gal组化、免疫组化、原位杂交等方法 ,观察了移植处细胞的标记基因 (LacZ)表达和BDNF、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、神经丝 2 0 0 (NF 2 0 0 )的表达。结果 大鼠脊髓损伤移植处细胞中 ,有标记基因阳性细胞 ,BDNF强烈表达 ,尤其是BDNF NSCs移植组的移植后 1周和 1个月时。各组各时相点均有GFAP和NF 2 0 0免疫反应阳性细胞和纤维。结论 BD NF基因修饰神经干细胞能在脊髓损伤移植处存活 ,强烈表达BDNF ,BDNF基因修饰神经干细胞可以作为脊髓损伤修复的移植材料。 展开更多
关键词 bdnf基因 神经干细胞移植 神经干细胞 脊髓损伤 SCI
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脑源性神经营养因子基因多态性对腹腔镜子宫切除术患者右美托咪定麻醉苏醒期的影响 被引量:7
10
作者 李彦东 赵英花 +3 位作者 陈国栋 张成栋 江海滨 张来柱 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第17期52-57,共6页
目的探讨脑源性神经营养因子(BDNF)基因多态性对腹腔镜子宫切除术患者右美托咪定麻醉苏醒期的影响。方法选取2019年8月—2021年1月济宁医学院附属医院行腹腔镜子宫切除术患者98例。所有患者均应用右美托咪定。通过聚合酶链反应-限制性... 目的探讨脑源性神经营养因子(BDNF)基因多态性对腹腔镜子宫切除术患者右美托咪定麻醉苏醒期的影响。方法选取2019年8月—2021年1月济宁医学院附属医院行腹腔镜子宫切除术患者98例。所有患者均应用右美托咪定。通过聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测患者BDNF基因rs6265位点的单核苷酸多态性(SNP),按照基因型分为GG组、GA组、AA组。比较3组患者基本特征、疼痛程度、舒适度、苏醒质量及不良反应。结果BDNF基因rs6265位点的基因型频率符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05);BDNF基因rs6265位点GG组、GA组、AA组患者的年龄、体重指数(BMI)、美国麻醉医师协会(ASA)分级、疾病类型及手术时间、术中出血量比较,差异无统计学意义(P>0.05);GG组、GA组、AA组术后4 h、12 h、24 h的VAS及BCS评分比较,采用重复测量设计的方差分析,不同时间点的VAS及BCS评分有差异(P<0.05);3组的VAS评分及BCS评分有差异(P<0.05),相比GG组、GA组,AA组VAS评分较高、BCS评分较低,相对镇痛效果、舒适度较差;3组的VAS评分及BCS评分的变化趋势有差异(P<0.05);苏醒时间、自主呼吸恢复时间、拔管时间AA组>GA组>GG组,Steward苏醒评分、麻醉苏醒后MMSE评分AA组<GA组<GG组(P<0.05);AA组不良反应发生率(41.38%)比GG组(17.86%)、GA组(14.63%)高(P<0.05)。结论BDNF基因rs6265位点多态性与右美托咪定在腹腔镜子宫切除术的麻醉效果关系密切,携带A等位基因的基因型(AA+AG)可能延长苏醒时间,增加疼痛程度及不良反应,降低舒适度,影响术后认知功能。 展开更多
关键词 腹腔镜子宫切除术 麻醉苏醒期 bdnf基因多态性 右美托咪定
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四川山鹧鸪脑源性神经营养因子(BDNF)基因的扩增与序列分析 被引量:6
11
作者 杨光垚 陈红卫 +3 位作者 杨玉华 刘绍龙 张志和 张义正 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2000年第S1期195-198,共4页
:参照人BDNF基因序列设计出一对引物 ,利用聚合酶链式反应 (PCR)方法 ,从四川山鹧鸪 (Arborophilarufipectus)基因组DNA中扩增到BDNF基因 .序列分析表明 ,该基因序列长 736bp ,与人和鸡BDNF基因的核苷酸同源性分别为 84 % ,95% ,推导的... :参照人BDNF基因序列设计出一对引物 ,利用聚合酶链式反应 (PCR)方法 ,从四川山鹧鸪 (Arborophilarufipectus)基因组DNA中扩增到BDNF基因 .序列分析表明 ,该基因序列长 736bp ,与人和鸡BDNF基因的核苷酸同源性分别为 84 % ,95% ,推导的蛋白质序列与人和鸡相应序列的同源性分别为 92 %和 98% .实验扩增并分析了四川山鹧鸪的BDNF基因 ,为四川山鹧鸪的保护和繁育提供了重要资料 . 展开更多
关键词 四川山鹧鸪(A.rufipectus) 脑源性神经营养因子(bdnf)基因 PCR 序列分析
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Current advances in using neurotrophic factors to treat neurodegenerative disorders 被引量:7
12
作者 April M Weissmiller Chengbiao Wu 《Translational Neurodegeneration》 SCIE CAS 2012年第1期103-111,共9页
Neurotrophic factors are best known for their roles in both development and continued maintenance of the nervous system.Their strong potential to elicit pro-survival and pro-functional responses in neurons of the peri... Neurotrophic factors are best known for their roles in both development and continued maintenance of the nervous system.Their strong potential to elicit pro-survival and pro-functional responses in neurons of the peripheral and central nervous system make them good drug candidates for treatment of a multitude of neurodegenerative disorders.However,significant obstacles remain and need to be overcome before translating the potential of neurotrophins into the therapeutic arena.This article addresses current efforts and advances in resolving these challenges and provides an overview of roadmaps for future translational research and neurotrophin-based drug developments. 展开更多
关键词 NEUROTROPHIN Neurotrophic factor bdnf NGF gene delivery MIMETICS
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多药耐药基因-1、脑源性神经营养因子基因的两个多态性与小儿耐药性癫痫的关联研究 被引量:6
13
作者 王广新 杨作成 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期933-937,共5页
目的探讨多药耐药基因-1、脑源性神经营养因子(BDNF)基因的两个多态性与小儿耐药性癫痫的关联性。方法选取多药耐药基因-1的T-129C多态性、BDNF基因的C270T多态性作为研究的位点,利用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性分析技术,在耐... 目的探讨多药耐药基因-1、脑源性神经营养因子(BDNF)基因的两个多态性与小儿耐药性癫痫的关联性。方法选取多药耐药基因-1的T-129C多态性、BDNF基因的C270T多态性作为研究的位点,利用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性分析技术,在耐药性癫痫组41例患儿、药物有效癫痫组43例患儿、正常对照组30例儿童中进行这两个多态性检测,比较3组之间基因型分布及等位基因频率的差异。结果耐药性癫痫组MDR1基因T-129C多态性的TT基因型分布频率、T等位基因频率高于药物有效癫痫组及正常对照组,差异有显著性(P<0.05)。耐药性癫痫组BDNF基因C270T多态性的CC、CT、TT基因型分布频率和C、T等位基因频率与药物有效癫痫组及正常对照组差异无显著性(P>0.05)。结论MDR1基因T-129C多态性可能与小儿耐药性癫痫存在关联,在小儿耐药性癫痫的发生中可能起作用;而BDNF基因C270T多态性与小儿耐药性癫痫可能无关联。 展开更多
关键词 多药耐药基因-1 脑源性神经营养因子基因 小儿耐药性癫痫
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骨髓间充质干细胞经BDNF基因修饰后移植治疗大鼠半横断脊髓损伤的电生理研究 被引量:5
14
作者 纪萌 刘玉秋 +4 位作者 赵京杰 金成文 李鑫 魏志新 王晓萃 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2014年第3期93-97,I0013,共6页
目的:采用电生理的研究方法,观察脑源性神经营养因子( BDNF)基因修饰的骨髓间充质干细胞对脊髓损伤的修复作用。方法随机将大鼠分成3组:空白组10只(只切除椎板,暴露脊髓硬脊膜);SCI 组10只;SCI术后细胞移植组10只;从以上三... 目的:采用电生理的研究方法,观察脑源性神经营养因子( BDNF)基因修饰的骨髓间充质干细胞对脊髓损伤的修复作用。方法随机将大鼠分成3组:空白组10只(只切除椎板,暴露脊髓硬脊膜);SCI 组10只;SCI术后细胞移植组10只;从以上三组大鼠随机抽取8只于细胞移植后1 d、7 d、14 d、21 d、30 d、60 d进行SEP(皮层体感诱发电位)、MEP(运动诱发电位)等电生理检测技术,并观察大鼠的运动评分恢复程度。结果细胞移植4d后,大鼠饮食和活动开始增加;后肢变化过程如下:损伤后1~4d损伤侧后肢迟缓性瘫痪,拖地行走,损伤对侧后肢由损伤初期的运动减弱逐渐恢复,损伤后5~9 d损伤侧后肢痉挛性瘫痪;10~14 d损伤侧下肢恢复少量活动,损伤对侧后肢恢复至较损伤前稍弱的状态;15~21 d损伤侧后肢活动能力较之前有明显改善,至30 d损伤侧后肢活动能力及肌张力恢复程度最明显,30 d以后无更明显改善。免疫组化发现损伤处诱导标记的骨髓间充质干细胞存活,行为学观察发现细胞移植改善了损伤大鼠运动能力。结论骨髓间充质干细胞经BDNF基因修饰后可以促进脊髓损伤大鼠的神经再生及部分传导功能恢复。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 bdnf基因 脊髓损伤 电生理
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针刺足三里穴对端粒酶基因敲除小鼠海马齿状回BDNF-CREB信号通路的影响 被引量:5
15
作者 杨晓婷 齐诗仪 +1 位作者 林燊 林栋 《康复学报》 CSCD 2019年第4期37-42,共6页
目的:探讨针刺对端粒酶基因敲除小鼠(Terc-/-小鼠)海马齿状回脑源性神经营养因子-环磷腺苷效应元件结合蛋白(BDNF-CREB)信号通路的影响及其神经保护作用机制,为促进海马神经生长、延缓衰老、改善学习认知能力提供途径和实验依据。方法:... 目的:探讨针刺对端粒酶基因敲除小鼠(Terc-/-小鼠)海马齿状回脑源性神经营养因子-环磷腺苷效应元件结合蛋白(BDNF-CREB)信号通路的影响及其神经保护作用机制,为促进海马神经生长、延缓衰老、改善学习认知能力提供途径和实验依据。方法:通过聚合酶链式反应鉴定表型,选取18只PCR产物长度为转基因350 bp的端粒酶基因敲除小鼠,体质量(20±5)g,采用随机数字表法分为电针组、手针组和空白对照组,每组各6只。选用富有弹性的塑料网对干预小鼠进行固定,使小鼠所受的压力降到最低。针具采用自制的双极连体针,所用材料为2根毫针(0.30 mm×13 mm),用绝缘胶布缠绕针柄后分别套进橡胶的透明输液管内,将露出的针柄进行弯曲,弯曲后的针柄部分连接韩氏电针仪。电针组运用韩氏电针仪连接双极连体针刺激双侧足三里穴,进针深度约1.5 mm,韩氏电针仪干预参数为连续波,2 Hz,2 mA,操作时以小鼠局部肌肉轻微抖动且无明显挣扎为度。手针组针刺双侧足三里穴,进针深度约1.5 mm,每5 min行1次捻转手法(平补平泻)。空白对照组以双手轻微束缚模拟抓握动作,操作过程中不进行针刺干预,3组均每天固定时间干预1次,时长30 min,连续4 d。进针及留针期间将小鼠以黑布蒙头,以手轻微给予束缚。3组均在第4天干预结束后取材,10%水合氯醛腹腔注射麻醉后,于左心室以生理盐水灌注后取出脑组织浸泡于4%多聚甲醛中待用。采用免疫组化检测技术分析端粒酶基因敲除小鼠海马齿状回BDNF、pro-BDNF、CREB蛋白表达水平。结果:第4天干预结束后,电针组BDNF阳性目标平均光密度值较空白对照组和手针组明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);电针组pro-BDNF阳性目标平均光密度值较手针组明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);电针组与手针组CREB阳性目标平均光密度值较空白对照组明显增加,差异有统计学意义(P 展开更多
关键词 端粒酶 基因敲除 海马 bdnf CREB 针刺 足三里 衰老 学习记忆
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BDNF基因Val66Met功能多态性与抗抑郁剂疗效及血浆BDNF水平的关联研究 被引量:5
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作者 沈鑫华 钱敏才 +7 位作者 袁勇贵 孙菊水 钟华 杨剑虹 林敏 李良 关铁峰 沈仲夏 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期196-200,共5页
目的分析BDNF基因Val66Met多态性与抗抑郁剂疗效及血浆BDNF水平的关联性。方法符合DSM—IV诊断标准的249例汉族抑郁症患者(研究组)用文拉法辛或帕罗西汀治疗。正常对照组202名。收集一般人口学资料,包括性别、年龄、受教育年限、职... 目的分析BDNF基因Val66Met多态性与抗抑郁剂疗效及血浆BDNF水平的关联性。方法符合DSM—IV诊断标准的249例汉族抑郁症患者(研究组)用文拉法辛或帕罗西汀治疗。正常对照组202名。收集一般人口学资料,包括性别、年龄、受教育年限、职业、婚姻状况等。研究组临床疗效指标采用汉密尔顿抑郁量表(HAMDl7项),在基线及治疗后1、2、4及6周进行评定。按HAMD总分及减分率来衡量疗效。治疗前和治疗6周后分别抽血10mL和5mL,采用PCR-限制性片段长度多态性分析249例抑郁症患者和202名正常人的BDNF基因Val66Met功能多态性。采用夹层酶联免疫吸附剂测定法测定抑郁症患者抗抑郁药治疗前后及正常人的血浆BDNF水平。结果(1)研究组各基因型在基线、治疗后1、2、4及6周HAMD分值、减分率差异无统计学意义。(2)研究组6周末达痊愈者和非痊愈者、正常人之间Val66Met基因型和等位基因频率分布的差异无统计学意义。(3)研究组基线血浆BDNF水平较正常对照组低;经文拉法辛或帕罗西汀抗抑郁治疗6周后均较基线显著升高,但仍较正常组低;按照6周末是否达到痊愈来分组,文拉法辛组6周末痊愈患者BDNF水平和正常对照组相似,而帕罗西汀组较正常对照组仍低;非痊愈者BDNF水平均较正常对照组低。(4)研究组基线、6周末BDNF水平和Val66Met基因多态性无关联。结论BDNF基因Val66Met多态性和文拉法辛、帕罗西汀的6周疗效无关联;抑郁症患者基线BDNF水平较正常对照组低;抗抑郁治疗后均可上升,尤其是文拉法辛治疗痊愈患者,可达正常对照组水平。BNDF水平在抗抑郁治疗中有一定的疗效预测价值;BDNF水平和BDNF基因Val66Met多态性无关联。 展开更多
关键词 抑郁症 bdnf基因 Val66Met多态性 易感性 抗抑郁药 疗效
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补肾醒脑解毒方对培养神经元单纯疱疹病毒感染后NGF和BDNF表达的影响 被引量:5
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作者 贺双腾 蒋士生 +4 位作者 蔡光先 何飞舟 李顺祥 朱冰姣 伍参荣 《中国实验方剂学杂志》 CAS 2000年第4期22-27,共6页
观察补肾醒脑解毒中药复方对 HSV- 1感染后神经元内 NGF、BDNF表达的调节作用。用 HSV- 1感染原代培养大鼠海马神经元造成急性感染与潜伏感染 ,然后运用 Northern杂交方法检测中药煎液对感染神经元 NGF和 m RNA表达水平的影响。结果显示... 观察补肾醒脑解毒中药复方对 HSV- 1感染后神经元内 NGF、BDNF表达的调节作用。用 HSV- 1感染原代培养大鼠海马神经元造成急性感染与潜伏感染 ,然后运用 Northern杂交方法检测中药煎液对感染神经元 NGF和 m RNA表达水平的影响。结果显示 :(1)正常培养海马神经元内有微量 NGF和 BDNF表达 ,加入中药煎液后 NGF和 BDNF表达明显提高 ;(2 )感染 0 .1MOI HSV- 1后 6 - 12 h出现 BDNF与 NGF表达增加 ,2 4 h后下降 ,4 8h后显著低于正常水平 ,4 d后表达消失。加中药煎液后 NGF和 BDNF表达时间延长 ;(3)补肾醒脑解毒方能使潜伏感染神经元 NGF和 BDNF表达持续增加 ,并维持潜伏感染神经元存活达 10周以上。结果表明补肾醒脑解毒方对 HSV- 1感染神经元 NGF和 展开更多
关键词 补肾醒脑解毒方 HSV VGF bdnf 中药 药理
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卵巢癌患者外周血miR-204表达变化的临床病理意义及其对BCl-2、BDNF的调控作用 被引量:4
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作者 丁祺 杨红玉 +2 位作者 常春 耿松珊 赵兴楠 《中国计划生育和妇产科》 2021年第11期37-41,共5页
目的研究卵巢癌患者外周血miR-204表达变化的临床病理意义及其对B细胞淋巴瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)的调控作用。方法选择2016年1月至2018年2月在中国人民解放... 目的研究卵巢癌患者外周血miR-204表达变化的临床病理意义及其对B细胞淋巴瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)的调控作用。方法选择2016年1月至2018年2月在中国人民解放军联勤保障部队第九八○医院诊断为卵巢癌的78例患者作为卵巢癌组、60例体检健康餉志愿者作为对照组,检测外周血miR-204的表达水平;收集卵巢癌组织,检测Bcl-2,BDNF的表达水平;随访卵巢癌患者的无进展生存情况和总生存情况,采用Kaplan-Meier曲线分析生存情况的差异;采用Targetscan生物信息学预测及双荧光素酶报告基因实验验证miR-204靶向Bcl-2、BDNF基因mRNA 3'UTR。结果卵巢癌组患者外周血中miR-204的表达水平低于对照组且FIGO分期Ⅲ~Ⅳ期、发生淋巴结转移、CA125>200 U/mL患者外周血miR-204表达水平明显低于Ⅰ~Ⅱ期、未发生淋巴结转移、CA125≤200 U/mL患者;miR-204高表达患者的无进展生存率及总生存率均高于miR-204低表达患者,卵巢癌病灶中Bcl-2,BDNF的表达水平均低于miR-204低表达患者;转染miR-204模拟物使卵巢癌SKOV3细胞中Bcl-2,BDNF报告基因的荧光活力降低(P<0.05)。结论卵巢癌患者外周血miR-204低表达与病理进展、生存时间缩短有关,靶向Bcl-2及BDNF是miR-204参与卵巢癌发生发展可能的分子机制。 展开更多
关键词 卵巢癌 miR-204 预后 BCL-2 bdnf 靶基因
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人BDNF成熟肽基因克隆及序列分析(英文) 被引量:3
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作者 马东亮 任惠民 +4 位作者 胡海涛 刘勇 陈新林 刘朝辉 李卫敏 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期75-78,共4页
为研究人脑源性神经营养因子在大肠杆菌中的表达及其在治疗 Alzheimer病中的作用 ,本文作者等克隆了其成熟肽基因并进行了序列分析。提取健康成人末梢血白细胞基因组 DNA作为模板 ,应用 PCR技术扩增人脑源性神经营养因子成熟肽基因片段 ... 为研究人脑源性神经营养因子在大肠杆菌中的表达及其在治疗 Alzheimer病中的作用 ,本文作者等克隆了其成熟肽基因并进行了序列分析。提取健康成人末梢血白细胞基因组 DNA作为模板 ,应用 PCR技术扩增人脑源性神经营养因子成熟肽基因片段 ,并将其插入 p GEM-T质粒。限制性内切酶鉴定重组质粒并进行序列测定和分析。与 Gen Bank提供的已知序列(M61181)比较 ,所克隆的人脑源性神经营养因子成熟肽基因片段长 3 5 7bp,序列完全相同。人脑源性神经营养因子成熟肽基因的克隆 ,为其在原核细胞中的表达。 展开更多
关键词 脑源性神经营养因子 聚合酶链反应 T-载体 基因克隆
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表达大鼠脑源性神经营养因子腺相关病毒(rAAV-BDNF)对体外培养海马神经元保护作用的研究 被引量:4
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作者 张惊宇 赵节绪 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1100-1102,共3页
目的:研究表达大鼠脑源性神经营养因子腺相关病毒(rAAV-BDNF)对体外培养海马神经元的保护机制。方法:通过去血清培养诱导神经元凋亡后转染rAAV-BDNF,通过DAPI、PI及Actin染色来统计rAAV-BDNF对血清饥饿引起的细胞凋亡的数量及形态的影... 目的:研究表达大鼠脑源性神经营养因子腺相关病毒(rAAV-BDNF)对体外培养海马神经元的保护机制。方法:通过去血清培养诱导神经元凋亡后转染rAAV-BDNF,通过DAPI、PI及Actin染色来统计rAAV-BDNF对血清饥饿引起的细胞凋亡的数量及形态的影响。结果:rAAV-BDNF病毒能够有效地抑制血清饥饿引起的细胞凋亡,其保护效率在65左右,并可以有效地保护血清饥饿引起的细胞形态损伤。结论:rAAV-BDNF可通过抑制凋亡的途径保护体外培养的海马神经元。 展开更多
关键词 rAAV-bdnf 细胞凋亡 基因治疗
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