线粒体自噬在脑缺血再灌注损伤中的研究进展 被引量：19

1

作者 颜思阳 陈瑶 +2 位作者 周德生 郭纯 刘利娟 《医学综述》 2019年第4期659-664,670,共7页

线粒体自噬是一种控制线粒体数量的选择性自噬过程,其对维持细胞正常表型和功能至关重要,且与心脑血管疾病(神经退行性疾病、缺血性脑卒中、心力衰竭等)密切相关。脑缺血再灌注损伤是指缺血脑组织在梗死相关血管开通后,可能导致比血管... 线粒体自噬是一种控制线粒体数量的选择性自噬过程,其对维持细胞正常表型和功能至关重要,且与心脑血管疾病(神经退行性疾病、缺血性脑卒中、心力衰竭等)密切相关。脑缺血再灌注损伤是指缺血脑组织在梗死相关血管开通后,可能导致比血管闭塞时更严重的急性损伤。而线粒体自噬与脑缺血再灌注损伤密切相关,其与氧化应激、线粒体动力学等有关。而这些过程受线粒体自噬相关蛋白(第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物诱导的假定激酶1、Parkin、Bcl-2/腺病毒E1B 19 k Da相互作用蛋白3等)的调控。适度的线粒体自噬对细胞具有保护作用,从而减轻脑缺血再灌注损伤;但线粒体自噬功能受损清除不足或过度激活的线粒体自噬,可以加重脑缺血再灌注损伤。未来,脑缺血再灌注中的线粒体自噬将成为缺血性脑卒中的新研究方向。 展开更多

关键词 脑缺血再灌注损伤 缺血性脑卒中 线粒体自噬 氧化应激 自噬相关蛋白

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参附强心丸对心肾综合征模型大鼠心肌细胞中LC3b、Bax表达的影响 被引量：11

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作者 李旭 王梓 +1 位作者 郝迪 王蕾 《中国药房》 CAS 北大核心 2016年第19期2602-2605,共4页

目的:研究参附强心丸对心肾综合征(CRS)模型大鼠心肌细胞中自噬相关蛋白LC3b和促凋亡基因Bax表达的影响。方法:取大鼠随机分为假手术组(水)、模型组(水)、阳性对照组(卡托普利片2.3 mg/kg)和参附强心丸高、中、低剂量组[13.2、6.6、3.3g... 目的:研究参附强心丸对心肾综合征(CRS)模型大鼠心肌细胞中自噬相关蛋白LC3b和促凋亡基因Bax表达的影响。方法:取大鼠随机分为假手术组(水)、模型组(水)、阳性对照组(卡托普利片2.3 mg/kg)和参附强心丸高、中、低剂量组[13.2、6.6、3.3g(生药)/kg],每组10只,除假手术组外其余各组大鼠采用腹主动脉缩窄合并肾脏急性缺血再灌注法复制CRS模型;术后8周开始ig相应药物,每天1次,连续4周。末次给药后24 h检测各组大鼠血浆中肌酐(Cr)、醛固酮(ALD)含量和心肌组织中LC3b、Bax蛋白表达,计算心室指数,观察心肌组织形态学变化。结果:与假手术组比较,模型组大鼠血浆中Cr、ALD含量,心室指数和心肌组织中LC3b蛋白表达均明显升高(P<0.05或P<0.01);心肌细胞出现胞浆红色缺失,心肌横纹排列紊乱,细胞间隙有纤维化加重等现象。与模型组比较,阳性对照组和参附强心丸高剂量组大鼠血浆中Cr、ALD含量(除阳性对照组)和心肌组织中LC3b蛋白表达均明显降低,心肌组织中Bax蛋白表达明显降低(P<0.05或P<0.01),心肌细胞病理变化得到改善;参附强心丸低、中剂量组大鼠的心室指数明显降低(P<0.05)。结论:参附强心丸可降低CRS模型大鼠血浆中Cr、ALD含量,抑制心肌细胞的自噬和凋亡。 展开更多

关键词 参附强心丸 心肾综合征 自噬相关蛋白 醛固酮 大鼠 促凋亡基因

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华蟾素胶囊对中晚期非小细胞肺癌手术患者血清基质金属蛋白酶、自噬相关蛋白水平的影响 被引量：8

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作者 张童 何弢 +2 位作者 刘勇志 李晓菲 贺丹 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第14期20-24,共5页

目的探讨华蟾素胶囊对中晚期肺癌手术患者血清基质金属蛋白酶(MMP)、自噬相关蛋白水平的影响。方法选取2017年9月—2021年4月成都医学院第二附属医院就诊的中晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者108例,将患者分为对照组和研究组,各54例。患者... 目的探讨华蟾素胶囊对中晚期肺癌手术患者血清基质金属蛋白酶(MMP)、自噬相关蛋白水平的影响。方法选取2017年9月—2021年4月成都医学院第二附属医院就诊的中晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者108例,将患者分为对照组和研究组,各54例。患者均接受肺癌根治术,对照组术后采取常规化疗,研究组在对照组基础上加用华蟾素胶囊。比较两组患者临床疗效、免疫功能、血清肿瘤标志物、血清MMP和自噬相关蛋白、不良反应等指标。结果研究组治疗后客观缓解率高于对照组(P<0.05)。研究组治疗前后CD3^(+)、CD4^(+)下降程度,CD8+升高程度小于对照组。(P<0.05)。研究组患者治疗前后糖类抗原125、癌胚抗原、神经元特异性烯醇化酶的下降程度大于对照组(P<0.05)。研究组治疗前后基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶9下降程度,自噬相关蛋白1、微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ升高程度大于对照组(P<0.05)。两组患者血小板减少、肝功能损伤、白细胞减少、恶心呕吐发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论华蟾素胶囊可有效提高中晚期肺癌手术患者辅助治疗的疗效,改善免疫功能和血清肿瘤标志物水平,抑制MMP水平,提高细胞自噬活性,且未增加不良反应。 展开更多

关键词 肺癌 手术 华蟾素胶囊 MMP 自噬相关蛋白

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RFRP-3对大鼠附睾生殖功能的影响 被引量：1

4

作者 李鸣 石博妹 +2 位作者 张鑫 李飞飞 李珣 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期405-411,共7页

【目的】探究RFRP-3对大鼠附睾生殖功能的影响,为全面了解RFRP-3调控雄性动物的生殖生理功能提供理论依据。【方法】通过半定量RT-PCR检测不同发育阶段(20、40、60和80日龄)SD大鼠附睾中RFRP-3及其受体GPR147的表达情况;选取60日龄雄性S... 【目的】探究RFRP-3对大鼠附睾生殖功能的影响,为全面了解RFRP-3调控雄性动物的生殖生理功能提供理论依据。【方法】通过半定量RT-PCR检测不同发育阶段(20、40、60和80日龄)SD大鼠附睾中RFRP-3及其受体GPR147的表达情况;选取60日龄雄性SD大鼠,分别对其睾丸注射0(CK)、0.1、1.0和10.0μg/d的RFRP-3,连续注射7 d,然后通过组织石蜡切片、酶活性测定、Western blotting等分别检测不同剂量RFRP-3对SD大鼠附睾形态学、Caspase-3活性、凋亡相关蛋白(Caspase-3和Bcl-2)和自噬相关蛋白(Beclin-1、LC3和Atg5)表达的影响。【结果】RFRP-3和GPR147在不同发育阶段SD大鼠附睾中的表达水平呈波动性变化,均以60日龄的表达水平最高;不同剂量的RFRP-3均能导致SD大鼠附睾上皮细胞发生异常,使精子数量减少。与CK相比,不同剂量的RFRP-3均能极显著增加SD大鼠附睾Caspase-3活性(P<0.01,下同),还能显著(P<0.05,下同)或极显著提高附睾中活化Caspase-3与完整Caspase-3的比值,有效抑制Bcl-2的表达,且呈明显的剂量依赖关系。RFRP-3对SD大鼠附睾内自噬标志蛋白Beclin-1、LC3-II/LC3-I和Atg5的表达出现相互矛盾的结果。【结论】RFRP-3在雄性大鼠附睾中有表达,但对附睾活性有直接抑制作用,具体作用原理是RFRP-3能诱导附睾中总Caspase-3裂解为活性Caspase-3并下调Bcl-2表达以触发附睾细胞凋亡,而附睾细胞的凋亡促使附睾退化及精子数量减少。 展开更多

关键词 大鼠 RFRP-3 附睾 生殖功能 凋亡相关蛋白 自噬相关蛋白

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泡球蚴感染中自噬相关蛋白对巨噬细胞极化的影响 被引量：1

5

作者 蔡璇琳 李斌 +7 位作者 古力米热·买买提吐尔逊 周璇 吕洁 麦迪乃姆·艾比布拉 赵慧 单骄宇 齐新伟 马秀敏 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2021年第6期634-638,共5页

目的通过对感染泡球蚴小鼠肝脏的自噬相关蛋白以及巨噬细胞不同分型的检测,探讨在泡球蚴感染过程中自噬对巨噬细胞极化的影响及可能机制。方法取雌性BALB/c小鼠16只,随机分为实验组与对照组。实验组建立泡球蚴感染小鼠模型,于感染90天处... 目的通过对感染泡球蚴小鼠肝脏的自噬相关蛋白以及巨噬细胞不同分型的检测,探讨在泡球蚴感染过程中自噬对巨噬细胞极化的影响及可能机制。方法取雌性BALB/c小鼠16只,随机分为实验组与对照组。实验组建立泡球蚴感染小鼠模型,于感染90天处死,通过HE染色观察小鼠肝脏的病理学变化,利用免疫组化等技术检测肝脏中自噬相关蛋白的表达,利用免疫荧光激光共聚焦法进行肝脏组织巨噬细胞与自噬相关蛋白共定位,采用流式细胞术检测肝脏巨噬细胞M1、M2表达水平。结果感染90天时,实验组小鼠肝脏自噬相关蛋白LC3、p62表达均增高,相对表达量分别为2.08±0.3和1.85±0.2,与对照组比较差异均有统计学意义(F值分别为260.114和434.116,均P<0.01);实验组小鼠肝脏组织中自噬相关蛋白LC3、p62与巨噬细胞存在共定位表达,Pearson’s相关系数与对照组比较有统计学意义(F值分别为132.219和36.325,均P<0.01),Manders重叠系数与对照组比较有统计学意义(F值分别为205.410和140.665,均P<0.01);实验组小鼠肝脏巨噬细胞数增加至31.74±1.68,M1型巨噬细胞增加至66.46±1.82,M2型巨噬细胞减少至22.46±0.63,与对照组比较差异均有统计学意义(F值分别为309.358、194.001和759.194,均P<0.01)。结论泡球蚴感染小鼠肝脏自噬相关蛋白高表达,促进巨噬细胞以M1型极化,抑制M2型极化,以减轻炎症反应,帮助机体清除病原体。 展开更多

关键词 泡球蚴 自噬相关蛋白 巨噬细胞极化

原文传递

大鼠生前与死后损伤肌肉组织中自噬相关蛋白表达

6

作者 时福霞 李鹏 +4 位作者 鲁翰霖 李娜 杜秋香 王英元 孙俊红 《法医学杂志》 CAS CSCD 2020年第3期293-298,共6页

目的研究大鼠骨骼肌损伤后BECN1、LC3和p62三种自噬相关蛋白的表达,探讨其在鉴别生前与死后损伤中的应用。方法 72只健康成年Sprague-Dawley大鼠被随机分为未损伤的对照组、生前损伤组(0.5、1、2、4、8、16和24 h)和死后损伤组(0.5、1、... 目的研究大鼠骨骼肌损伤后BECN1、LC3和p62三种自噬相关蛋白的表达,探讨其在鉴别生前与死后损伤中的应用。方法 72只健康成年Sprague-Dawley大鼠被随机分为未损伤的对照组、生前损伤组(0.5、1、2、4、8、16和24 h)和死后损伤组(0.5、1、2和4 h),制作大鼠右后肢损伤模型。运用Western印迹法检测对照组、生前损伤组以及死后损伤组骨骼肌中自噬蛋白BECN1、LC3-2/LC3-1和p62的表达,分别将数据中心化和标准化处理,建立生前损伤和死后损伤正交偏最小二乘判别分析(orthogonal partial least square-discriminate analysis,OPLS-DA)鉴别模型。结果大鼠骨骼肌挫伤后BECN1、p62蛋白的表达以及LC3-2/LC3-1值在生前损伤和死后损伤组中虽有不同程度的变化,但差异无统计学意义。BECN1的表达量及LC3-2/LC3-1值经中心化和标准化处理后,可区分生前损伤和死后损伤。生前损伤和死后损伤OPLSDA模型提取的主成分对模型的解释程度较好(Rx^2=0.563,Ry^2=0.439),但预测程度稍差(Q^2=0.366)。结论大鼠骨骼肌损伤局部组织中BECN1、LC3-2/LC3-1值可用于生前损伤和死后损伤的鉴别。 展开更多

关键词 法医病理学 创伤和损伤 自噬相关蛋白 骨骼肌 生前损伤 死后损伤 大鼠

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通络益脑方对急性局灶性脑缺血模型大鼠炎症因子及脑细胞自噬相关蛋白的影响

7

作者 于法敖 林艳 +3 位作者 吴栋 盛正乾 矫琰庆 梁琳 《中国中医急症》 2020年第6期1035-1039,共5页

目的观察通络益脑方对急性局灶性脑缺血模型大鼠脑组织病理学、炎症因子及脑细胞自噬相关蛋白的影响。方法将50只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性组和试验组(低剂量和高剂量),每组10只。模型组,高、低剂量组和尼莫地平组采用... 目的观察通络益脑方对急性局灶性脑缺血模型大鼠脑组织病理学、炎症因子及脑细胞自噬相关蛋白的影响。方法将50只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性组和试验组(低剂量和高剂量),每组10只。模型组,高、低剂量组和尼莫地平组采用开颅结扎法制备急性局灶性脑缺血大鼠模型,假手术组和模型组给予0.9%氯化钠注射液灌胃,尼莫地平组给予尼莫地平灌胃,高、低剂量组给予通络益脑方灌胃,3周后评估各组大鼠的神经功能评分、神经行为学评分,比较脑梗死体积和神经细胞凋亡。ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-1β(IL-1β)、白介素-2(IL-2)、白介素-6(IL-6)炎症因子水平以及ICAM-1水平,RT-PCR检测PI3K、Akt、Beclin-1以及Bcl-2蛋白相对表达水平。结果与假手术组比较,模型组大鼠的神经功能评分、神经行为学评分、脑梗死体积、神经细胞凋亡、ICAM-1水平、TNF-α、IL-1β、IL-2以及IL-6水平、PI3K、Akt、Beclin-1以及Bcl-2水平明显高于其余3组(P<0.05)。给药后,尼莫地平组和高、低剂量组大鼠的神经功能评分和神经行为学评分、脑梗死体积、神经细胞凋亡、ICAM-1水平、炎症因子水平以及自噬相关蛋白水平明显低于模型组(P<0.05),低剂量组与高剂量组以及尼莫地平组比较均有显著性差异(P<0.05),高剂量组与尼莫地平组比较无显著性差异(P>0.05)。结论通络益脑方对急性局灶性脑缺血大鼠脑组织有较好的保护作用,可减少其脑梗死面积,保护脑组织免受炎症因子的损伤,增加自噬相关蛋白水平,减少神经细胞的凋亡,激活脑细胞自我保护。 展开更多

关键词 急性局灶性脑缺血 通络益脑方 脑组织病理学 炎症因子 自噬相关蛋白 大鼠

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脑缺血再灌注损伤程度与自噬相关基因LC3、mTOR表达的相关性研究 被引量：15

8

作者 李丹丹 肖学进 +1 位作者 秦书俭 包翠芬 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第2期182-186,共5页

目的探讨局灶性脑缺血再灌注损伤（cerebral ischemia reperfusion,CIR）程度与自噬微管相关蛋白轻链3抗体-Ⅱ（Autophagy microtubule associated protein light chain 3 antibody-Ⅱ,LC3-Ⅱ）、雷帕霉素靶蛋白抗体（Rapamycin target ... 目的探讨局灶性脑缺血再灌注损伤（cerebral ischemia reperfusion,CIR）程度与自噬微管相关蛋白轻链3抗体-Ⅱ（Autophagy microtubule associated protein light chain 3 antibody-Ⅱ,LC3-Ⅱ）、雷帕霉素靶蛋白抗体（Rapamycin target protein antibody,m TOR）表达的相关性。方法采用线栓阻断法阻塞大脑中动脉2 h制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型;观察各组间的神经功能缺失评分、TTC梗死体积;应用免疫印迹、免疫荧光法检测大脑顶叶的LC3-Ⅱ、m TOR的表达。结果 TTC染色显示,梗死体积在缺血再灌24 h达高峰。WB、免疫荧光显示,LC3-Ⅱ在IR中表达增加,且在缺血再灌24 h表达最高;m TOR在缺血再灌24 h、48 h表达最低。相关性分析显示,TTC染色梗死体积与LC3-Ⅱ表达水平高度正相关。结论脑缺血再灌注损伤程度可能与LC3、m TOR的表达水平相关。 展开更多

关键词 自噬 局灶性脑缺血再灌注 自噬微管相关蛋白轻链3抗体 雷帕霉素靶蛋白抗体

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微RNA-30b-5p通过靶向Atg5抑制多囊卵巢综合征大鼠卵巢颗粒细胞自噬 被引量：5

9

作者 王雪敏 王亚楠 +2 位作者 牛爱琴 叶英 李飞 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期20-28,共9页

目的·探究microRNA-30b-5p(miR-30b-5p)在多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)大鼠中的表达及miR-30b-5p过表达对卵巢颗粒细胞(granulosa cell,GC)自噬的影响。方法·采用脱氢表雄酮(dehydroepiandrosterone,DHEA... 目的·探究microRNA-30b-5p(miR-30b-5p)在多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)大鼠中的表达及miR-30b-5p过表达对卵巢颗粒细胞(granulosa cell,GC)自噬的影响。方法·采用脱氢表雄酮(dehydroepiandrosterone,DHEA)建立PCOS大鼠模型,实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitative PCR,qRT-PCR)和Western blotting检测正常组和PCOS组大鼠卵巢组织中miR-30b-5p和自噬相关蛋白5同源物(autophagy-associated protein 5 homologue,Atg5)的表达。分离并培养原代PCOS大鼠卵巢GC,分为对照组、miR-NC组、miR-30b-5p过表达组、miR-30b-5p过表达+pcDNA3.1-NC组、miR-30b-5p过表达+pcDNA3.1-Atg5组,另取正常组大鼠卵巢GC为空白组;将miR-30b-5p mimic和pcDNA3.1-Atg5及相应的阴性对照转染到细胞中,转染48 h后,qRT-PCR检测各组细胞中miR-30b-5p和Atg5 mRNA表达,验证转染效果。CCK-8及流式细胞仪分别检测细胞活力和凋亡率;免疫荧光染色检测各组细胞微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)阳性表达;Western blotting检测自噬相关蛋白Atg5、p62、Beclin-1和LC3蛋白表达。结果·PCOS组大鼠卵巢组织中miR-30b-5p表达水平显著低于正常组,Atg5 mRNA和蛋白水平显著高于正常组(均P=0.000)。转染后,与空白组相比,对照组卵巢GC中miR-30b-5p水平、细胞凋亡率、p62蛋白水平显著降低,Atg5 mRNA和蛋白水平、细胞增殖活性、LC3阳性细胞百分比、Beclin-1蛋白水平和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值显著升高(均P=0.000);与对照组相比,miR-30b-5p过表达组卵巢GC中miR-30b-5p水平、细胞凋亡率、p62蛋白水平显著升高,Atg5 mRNA和蛋白水平、细胞增殖活性、LC3阳性细胞百分比、Beclin-1蛋白水平和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值显著降低(均P=0.000)。上调Atg5可明显减弱miR-30b-5p过表达对卵巢GC增殖和自噬的抑制作用(均P=0.000)。结论·MiR-30b-5p在PCOS中呈低表达;过表达miR-30b-5p可抑制PCOS大鼠卵巢GC增殖和自噬,促进细胞凋亡,其作用 展开更多

关键词 多囊卵巢综合征 microRNA-30b-5p 自噬 自噬相关蛋白5同源物 增殖 凋亡

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垂盆草总黄酮对肝损伤大鼠肝细胞活性的作用机制 被引量：4

10

作者 赵娜 黄丽华 《世界中西医结合杂志》 2022年第9期1745-1750,1770,共7页

目的探究垂盆草总黄酮对肝损伤大鼠肝细胞活性的作用机制。方法将60只8周龄雄性SD大鼠随机分为正常组(NC组)、肝损伤大鼠模型组(LI组)、联苯双酯组(BDS组)、垂盆草总黄酮1组(SSTF1组)、垂盆草总黄酮2组(SSTF2组)、垂盆草总黄酮3组(SSTF3... 目的探究垂盆草总黄酮对肝损伤大鼠肝细胞活性的作用机制。方法将60只8周龄雄性SD大鼠随机分为正常组(NC组)、肝损伤大鼠模型组(LI组)、联苯双酯组(BDS组)、垂盆草总黄酮1组(SSTF1组)、垂盆草总黄酮2组(SSTF2组)、垂盆草总黄酮3组(SSTF3组),每组各10只。检测各组大鼠肝指数、生化指标谷草转氨酶(Aspartate aminotransferase,AST)和谷丙转氨酶(Alanine aminotransferase,ALT)、氧化指标微量还原型谷胱甘肽(Glutathione,GSH)、超氧化物歧化酶(Superoxidedismutase,SOD)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA);检测肝组织病理学变化、肝细胞凋亡指数、自噬相关蛋白IC3、Beclin-1表达、JAK2和STAT3 mRNA表达。结果与NC组比较,LI组大鼠肝指数、ALT、AST、SOD、GSH水平及AI均明显升高,MDA水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);SSTF1组、SSTF2组和SSTF3组肝指数、ALT、AST、SOD、GSH水平及AI均低于LI组,MDA水平明显高于LI组,差异均有统计学意义(P<0.05)。与NC组比较,LI组大鼠肝组织中IC3-Ⅱ/IC3-Ι比值、Beclin-1蛋白表达及JAK2、STAT mRNA表达明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);SSTF1组、SSTF2组、SSTF3组大鼠肝组织中IC3-Ⅱ/IC3-Ι比值、Beclin-1蛋白表达及JAK2、STAT mRNA表达明显低于LI组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论垂盆草总黄酮可减少肝损伤大鼠肝细胞凋亡,降低自噬相关蛋白IC3蛋白表达,抑制JAK/STAT信号通路,进而防治肝损伤。 展开更多

关键词 垂盆草总黄酮 肝损伤 肝细胞活性 自噬蛋白LC3 JAK水平

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自噬相关蛋白ULK1与Raptor、Rictor在不同宫颈组织的表达及临床意义 被引量：2

11

作者 高敏 陆晓媛 孙洁芸 《徐州医科大学学报》 CAS 2022年第12期931-936,共6页

目的 研究不同宫颈组织中丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶ULK1与Raptor、Rictor蛋白表达水平,并探讨其意义。方法 选取宫颈癌组织95例、宫颈鳞状上皮高级别病变(HSIL)组织30例、宫颈鳞状上皮低级别病变(LSIL)组织30例和慢性宫颈炎组织30例。采用... 目的 研究不同宫颈组织中丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶ULK1与Raptor、Rictor蛋白表达水平,并探讨其意义。方法 选取宫颈癌组织95例、宫颈鳞状上皮高级别病变(HSIL)组织30例、宫颈鳞状上皮低级别病变(LSIL)组织30例和慢性宫颈炎组织30例。采用免疫组织化学方法检测各组宫颈组织中ULK1与Raptor、Rictor的表达情况,并分析该指标与宫颈癌临床病理参数的关系。结果 ULK1与Raptor、Rictor在不同宫颈组织中表达,差异有统计学意义(P<0.05)。ULK1与Raptor、Rictor在宫颈癌组织中表达水平呈负相关(r=-0.640、-0.687,P<0.05)。ULK1、Raptor、Rictor表达与组织分化程度、FIGO分期、组织类型有关(P<0.05)。ULK1阴性表达患者的总生存率短于阳性表达患者,Raptor与Rictor阳性表达患者的总生存率短于阴性表达患者(P<0.05)。FIGO分期、组织类型、组织分化程度及ULK1、Raptor、Rictor阳性表达是宫颈癌患者预后影响因素(P<0.05),组织分化程度、淋巴结转移及Rictor是宫颈癌预后危险因素,ULK1是宫颈癌预后的独立保护因素(P<0.05)。结论 ULK1与Raptor、Rictor表达与不同宫颈病变的发生、发展及预后有关,有望成为宫颈病变进展和预后的有效预测指标。 展开更多

关键词 宫颈癌 自噬相关蛋白ULK1 RAPTOR RICTOR 免疫组织化学

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恶性疟原虫自噬相关蛋白8基因原核重组表达及多克隆抗体制备

12

作者 李缜 邹洋 +4 位作者 黄敏君 贾永根 闫爱霞 李晶晶 谷俊朝 《中国热带医学》 CAS 2019年第5期411-415,429,共6页

目的通过pET-41 Ek/LIC载体在大肠杆菌工程菌中重组表达恶性疟原虫自噬相关蛋白8(PfAtg8)基因的重组蛋白GST-PfAtg8-6×His,并用蛋白免疫法制备小鼠抗自噬相关蛋白8(PfAtg8)的多克隆抗体,并验证其效价。方法体外培养恶性疟原虫3D7株... 目的通过pET-41 Ek/LIC载体在大肠杆菌工程菌中重组表达恶性疟原虫自噬相关蛋白8(PfAtg8)基因的重组蛋白GST-PfAtg8-6×His,并用蛋白免疫法制备小鼠抗自噬相关蛋白8(PfAtg8)的多克隆抗体,并验证其效价。方法体外培养恶性疟原虫3D7株,并提取DNA,PCR扩增PfAtg8序列全长,与pET-41 Ek/LIC载体通过基因重组直接连接,在大肠杆菌Rosetta^(TM)(DE3)PLysS工程菌中诱导表达重组蛋白GST-PfAtg8-6×His,蛋白免疫法制备鼠抗PfAtg8的多克隆抗体并用Western blots和酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)进行效价验证。结果 PCR扩增PfAtg8基因并插入pET-41 Ek/LIC载体,转化入大肠杆菌。诱导表达并纯化重组蛋白,进而利用该蛋白免疫小鼠制备多克隆抗体,经验证该抗体可对重组蛋白进行特异性识别,且效价可达1∶100 000。结论成功表达、纯化了GST-PfAtg8-6×His重组蛋白,并免疫小鼠获得多克隆抗体血清。 展开更多

关键词 恶性疟原虫 自噬相关蛋白8 原核表达 多克隆抗体

原文传递

PATL1对胃癌细胞增殖和迁移能力的影响及其作用机制

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作者 徐泽宇 莱智勇 +3 位作者 任益凡 武锋 彭雨婷 徐钧 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第1期133-139,共7页

目的探讨PAT家族蛋白1(PATL1)对胃癌细胞增殖和迁移的影响及其潜在的作用机制。方法通过TCGA数据库分析PATL1在泛癌、胃癌组织与正常组织中的表达水平;采用定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)实验评估40例人胃癌组织及配对癌旁组织中PA... 目的探讨PAT家族蛋白1(PATL1)对胃癌细胞增殖和迁移的影响及其潜在的作用机制。方法通过TCGA数据库分析PATL1在泛癌、胃癌组织与正常组织中的表达水平;采用定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)实验评估40例人胃癌组织及配对癌旁组织中PATL1的表达水平;通过Kaplan-Meier Plotter数据库分析PATL1对胃癌患者预后情况;在胃癌细胞株AGS中转染PATL1干扰载体,RT-qPCR实验评估干扰效果,采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)、Transwell实验及划痕愈合实验检测PATL1对AGS增殖和迁移的影响;采用Western blot实验检测干扰PATL1后对胃癌细胞中细胞-髓细胞瘤病病毒致癌基因(c-Myc),自噬相关蛋白7(ATG7)蛋白表达的影响。结果RT-qPCR实验显示,PATL1在人胃癌组织中表达高于正常胃组织(P<0.001),并且PATL1与肠型胃癌患者预后有相关性(P<0.0001)。敲低PATL1后,增殖、迁移的胃癌细胞数目减少(P<0.05)。Western blot实验检测结果显示敲低PATL1后c-Myc、ATG7蛋白表达水平也随之下降(P<0.05)。结论PATL1可能通过与c-Myc、ATG7相互串扰抑制了胃癌细胞的增殖和迁移。 展开更多

关键词 胃癌 增殖 迁移 PATL1 自噬相关蛋白

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自噬相关蛋白4A对胃癌细胞干性及上皮间质转化的影响 被引量：3

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作者 蒋海兵 王伟 +1 位作者 盘箐 李国庆 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第16期2531-2536,共6页

目的研究自噬相关蛋白A4(autophagy associated protein 4A,ATG4A)对胃癌细胞干性、上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)的影响。方法将胃癌细胞株分为:对照组(干扰及过表达ATG4A空白载体组)、干扰组(Sh-ATG4A-1、2、3... 目的研究自噬相关蛋白A4(autophagy associated protein 4A,ATG4A)对胃癌细胞干性、上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)的影响。方法将胃癌细胞株分为:对照组(干扰及过表达ATG4A空白载体组)、干扰组(Sh-ATG4A-1、2、3)、过表达组(ATG4A-OE)。采用划痕试验检测胃癌细胞迁移能力;Transwell试验检测胃癌细胞侵袭能力;通过成球培养法研究ATG4A对胃癌细胞成球能力影响;通过Western Blot检测胃癌干性标志物SOX-2、OCT-4、Bmi-1表达变化,以及EMT标志物E-cadherin、N-cadherin、vimentin表达变化。结果干扰ATG4A表达后,胃癌细胞MGC-803迁移能力下降,而过表达ATG4A后,胃癌细胞SGC-7901迁移能力上升;Transwell侵袭实验发现,干扰ATG4A表达后,胃癌细胞MGC-803侵袭能力下将,而过表达ATG4A后,胃癌细胞SGC-7901侵袭能力上升;干扰ATG4A表达后,胃癌细胞MGC-803成球能力下将,而过表达ATG4A后,胃癌细胞SGC-7901成球能力上升;Western Blot检测显示,干扰ATG4A分子表达后,胃癌细胞中E-cadherin蛋白表达增加,N-cadherin,vimentin蛋白表达下降,而干扰ATG4A表达后,SOX-2、OCT-4、Bmi-1蛋白表达水平均下降。结论ATG4A表达与侵袭转移能力、上皮间质转化能力以及胃癌细胞干性呈正相关。 展开更多

关键词 胃癌细胞 上皮间质转化 自噬相关蛋白4A

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自噬在尿毒症小鼠心肌细胞损伤中的作用研究

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作者 龚建光 金娟 +4 位作者 赵黎 林波 梁世凯 何强 李一文 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第36期4489-4494,共6页

目的探讨自噬与尿毒症小鼠心肌细胞损伤的关系及其发生的可能机制。方法 2015年8—12月选取SPF级C57BL/6-PAX6雄性小鼠50只,采用随机数字表法将小鼠分成对照组(6只)、假手术组(8只)、实验组〔5/6NC组(6只)、5/6NC+生理盐水组(10只)、5/6... 目的探讨自噬与尿毒症小鼠心肌细胞损伤的关系及其发生的可能机制。方法 2015年8—12月选取SPF级C57BL/6-PAX6雄性小鼠50只,采用随机数字表法将小鼠分成对照组(6只)、假手术组(8只)、实验组〔5/6NC组(6只)、5/6NC+生理盐水组(10只)、5/6NC+渥曼青霉素组(10只)以及5/6NC+Beclin-1组(10只)〕。对照组研究过程中不做任何干预。假手术组仅与实验组同期进行两次手术,但不切除肾脏。实验组制备5/6肾切除尿毒症小鼠模型。造模6周时,5/6NC组不进行干预,5/6NC+生理盐水组、5/6NC+渥曼青霉素组、5/6NC+Beclin-1组分别给以0.9%氯化钠溶液1 ml腹腔内注射,隔日1次;渥曼青霉素1 mg·kg-1·次-1,腹腔内注射,1次/d;腺病毒携带的Beclin-1 1×109pfu腿部肌肉注射,1次/只。造模12周时采用超声心动图检测各组小鼠心功能,ELISA法检测肌酐、尿素氮,采用免疫组化及Western blotting法检测处死后小鼠的心肌细胞自噬相关蛋白表达情况。结果造模12周时,与对照组及假手术组比较,5/6NC组、5/6NC+生理盐水组左心室舒张末期内径(LVEDD)增厚、左心室短轴缩短率(LVFS)降低,肌酐及尿素氮上升(P<0.05);与5/6NC+生理盐水组比较,与5/6NC+渥曼青霉素组LVEDD降低,LVFS升高,肌酐、尿素氮降低(P<0.05);与对照组、5/6NC+生理盐水组比较,5/6NC+Beclin-1组LVEDD增加,LVFS降低,肌酐及尿素氮升高(P<0.05)。免疫组化染色显示5/6NC组心肌细胞Atg5、Cathepsin-D、Rab 7表达较对照组增强;对照组与5/6NC组Atg5、Cathepsin-D、Rab 7阳性细胞率比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。5/6NC+生理盐水组、5/6NC+Beclin-1组心肌组织细胞中自噬相关蛋白LC3、Beclin-1及AKT表达均较对照组升高(P<0.05),5/6NC+渥曼青霉素组LC3、Beclin-1及AKT表达虽较对照组升高,但低于5/6NC+生理盐水组、5/6NC+Beclin-1组(P<0.05),5/6NC+Beclin-1组LC3、Beclin-1、AKT表达较5/6NC+生理盐水和5/6NC+渥曼青霉素组升高(P<0.05)。结论尿毒� 展开更多

关键词 心肌疾病 尿毒症 自噬 自噬相关蛋白 PI3K/AKT信号蛋白

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麦粒灸预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤不同时期保护效应及Beclin 1表达的影响 被引量：18

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作者 白桦 卢圣锋 +2 位作者 陈婉莹 仲泽昊 顾一煌 《针刺研究》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期471-476,共6页

目的:观察麦粒灸预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)不同时期保护效应差异,探讨该影响与自噬相关蛋白Beclin 1表达的相关性。方法:SD大鼠随机分为模型组、麦粒灸1d组、麦粒灸2d组、麦粒灸3d组、麦粒灸4d组、麦粒灸5d组、麦粒灸7d组,... 目的:观察麦粒灸预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)不同时期保护效应差异,探讨该影响与自噬相关蛋白Beclin 1表达的相关性。方法:SD大鼠随机分为模型组、麦粒灸1d组、麦粒灸2d组、麦粒灸3d组、麦粒灸4d组、麦粒灸5d组、麦粒灸7d组,每组6只。选择大鼠双侧"内关"穴进行麦粒灸预处理后,结扎心脏冠状动脉左前降支制备心肌缺血再灌注模型,进行心电图监测并于再灌注4h后取心脏,采用TTC染色评价不同时间预处理的效应差异。在明确麦粒灸预处理最佳干预时间后,增设假手术组、模型组、麦粒灸组、自噬抑制剂组,每组各12只,分别于缺血30min和再灌注240min各6只,ELISA法检测血清中肌钙蛋白(cTnT)含量,HE染色观察心肌病理学变化,Western blot法检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2同源的水溶性相关蛋白(Bax)、Beclin 1的表达水平。结果:与模型组比较,麦粒灸4、5、7d组大鼠心肌梗死面积百分比明显减少(P<0.05)。与假手术组相比,模型组心肌纤维断裂、排列紊乱,且有炎性细胞浸润,缺血期与再灌注期cTnT、Bax/Bcl-2、Beclin 1均升高(P<0.01)。与模型组相比,麦粒灸组与自噬抑制剂组心肌纤维断裂、排列紊乱程度较轻,间质水肿,少量炎性细胞浸润,缺血期与再灌注期cTnT、Bax/Bcl-2、Beclin 1含量均显著下降(P<0.01)。与自噬抑制剂组比较,麦粒灸组缺血期与再灌注期cTnT、Bax/Bcl-2、Beclin 1均升高(P<0.05)。各组再灌注期与缺血期相比,cTnT、Bax/Bcl-2、Beclin 1差异无统计学意义(P>0.05)。结论:麦粒灸"内关"穴能有效降低心肌梗死面积,该保护效应与自噬相关,其作用机制可能为促进缺血期自噬发生,抑制再灌注期自噬过表达,从而减轻MIRI。 展开更多

关键词 心肌缺血再灌注 麦粒灸 自噬 自噬相关蛋白Beclin 1

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HE4、CA125、Atg5水平在不同级别浆液性卵巢癌患者组织内表达水平变化意义分析 被引量：2

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作者 肖喜云 李倩 +2 位作者 冯静 颜瑞雪 奚杰 《中国妇产科临床杂志》 CSCD 北大核心 2024年第1期42-45,共4页

目的 探讨浆液性卵巢癌组织中人附睾蛋白4(HE4)、人自噬相关蛋白5(Atg5)、血清糖类抗原125(CA125)的表达及其临床意义。方法 选取沧州市中心医院2021年8月至2022年7月收治的112例浆液性卵巢癌患者作为病例组、因子宫肌瘤妇科手术获取的... 目的 探讨浆液性卵巢癌组织中人附睾蛋白4(HE4)、人自噬相关蛋白5(Atg5)、血清糖类抗原125(CA125)的表达及其临床意义。方法 选取沧州市中心医院2021年8月至2022年7月收治的112例浆液性卵巢癌患者作为病例组、因子宫肌瘤妇科手术获取的正常卵巢组织标本60例作为对照组;检测两组患者的卵巢组织中的HE4、Atg5表达及血清CA125水平差异,并分别比较不同病理学分级、FIGO分期、是否发生淋巴结转移的浆液性卵巢癌患者上述指标的差异。结果 病例组患者卵巢组织标本中的HE4阳性表达率为60.71%,显著高于对照组的31.67%,差异有统计学意义(P <0.05);病例组患者卵巢组织标本中的Atg5阳性表达率为34.82%,显著低于对照组的78.33%,差异有统计学意义(P <0.05);病例组血清CA125水平显著高于对照组,差异有统计学意义(P <0.05);不同FIGO分期、不同病理学分级、是否发生淋巴结转移的浆液性卵巢癌组织中HE4蛋白阳性表达率进行比较,差异有统计学意义(P <0.05);不同FIGO分期的浆液性卵巢癌组织中Atg5蛋白阳性表达率进行比较,差异均有统计学意义(P <0.05);不同FIGO分期、不同病理学分级、是否发生淋巴结转移的浆液性卵巢癌患者血清CA125水平比较,差异有统计学意义(P <0.05)。结论 浆液性卵巢癌组织中HE4蛋白表达、Atg5蛋白表达、血清CA125表达,均与浆液性卵巢癌的FIGO分期有关,HE4蛋白表达、血清CA125水平与浆液性卵巢癌分级及发生淋巴结转移有关。 展开更多

关键词 浆液性卵巢癌 人附睾蛋白4 人自噬相关蛋白5 糖类抗原125

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自噬与肾脏疾病 被引量：5

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作者 范芸 曾彩虹 《肾脏病与透析肾移植杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期268-273,共6页

自噬是由溶酶体介导的蛋白质和细胞器的降解过程,参与清除衰老的细胞器及破坏的蛋白质,维持细胞内环境稳定。自噬现象高度保守,几乎存在于所有物种,广泛作用于细胞生长、增生及肿瘤发生等过程。正常肾组织也存在基础自噬,近年有研究报... 自噬是由溶酶体介导的蛋白质和细胞器的降解过程,参与清除衰老的细胞器及破坏的蛋白质,维持细胞内环境稳定。自噬现象高度保守,几乎存在于所有物种,广泛作用于细胞生长、增生及肿瘤发生等过程。正常肾组织也存在基础自噬,近年有研究报道自噬异常可导致肾脏固有细胞损伤及多种肾脏疾病,人们已逐渐认识到自噬在肾脏疾病发生发展中的作用。本文就自噬及其在肾脏疾病中的相关研究加以综述,从而为相关疾病的机制研究及治疗提供新思路。 展开更多

关键词 自噬 肾脏疾病 自噬相关基因或蛋白

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自噬相关基因Atg12和LC3-Ⅱ在脑缺血再灌注大脑表达的实验研究 被引量：4

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作者 杜晓薇 韩瑞祎 +4 位作者 闵鹤鸣 李丹丹 肖学进 包翠芬 包翠芳 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期162-166,共5页

目的:探讨局灶性脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion injury,CIR)时大脑皮质自噬相关蛋白-12(autophagy related protein-12,Atg12)和自噬微管相关蛋白轻链3抗体Ⅱ(autophagy microtubule-associated protein light chain ... 目的:探讨局灶性脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion injury,CIR)时大脑皮质自噬相关蛋白-12(autophagy related protein-12,Atg12)和自噬微管相关蛋白轻链3抗体Ⅱ(autophagy microtubule-associated protein light chain 3 antibodyⅡ,LC3-Ⅱ)的激活规律,在此基础上探讨其对脑组织自噬的影响。方法:实验分为假手术组(sham组)和缺血再灌注组(CIR组),且CIR组下设CIR 0、6、12、24、48、72h共6个亚组。除sham组和CIR 24h组为每组20只外(其中10只用于模型鉴定),其余为每组10只。采用大脑中动脉栓塞术制备局灶性脑缺血再灌注模型,再灌注24 h后采用神经功能评分、2,3,5-三苯基氯化四氮唑(2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色、脑组织含水量来鉴定脑缺血模型是否成功。采用免疫组化和免疫印迹方法检测大脑皮质Atg12和LC3-Ⅱ的表达规律。结果:与sham组比较,CIR 24h组可见明显的神经功能缺损、脑梗死和明显的脑水肿。免疫组化结果显示,Atg12和LC3-Ⅱ在大鼠脑缺血再灌注6 h开始表达[阳性率分别为(15.49±4.18)%、(18.54±3.62)%],在24~48 h达高峰[(33.63±3.26)%、(29.62±1.73)%],72 h之后逐渐减弱[(24.90±3.96)%、(20.36±3.51)%]。免疫印迹结果显示,Atg12和LC3-Ⅱ在大鼠脑缺血再灌注6 h开始表达[表达量为(0.372 3±0.076 5)、(0.148 4±0.011 5)],在24~48 h达高峰[(0.741 7±0.071 8)、(0.451 3±0.019 0)],72 h之后逐渐减弱[(0.365 0±0.042 0)、(0.245 1±0.030 3)]。结论:脑缺血时Atg12和LC3-Ⅱ在调节脑缺血的脑组织自噬方式中具有重要的作用。 展开更多

关键词 自噬 脑缺血再灌注 自噬相关蛋白-12 自噬微管相关蛋白轻链3抗体Ⅱ

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高迁移率族蛋白B1和自噬相关蛋白p62在结肠癌组织的表达及其临床意义

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作者 杨焕斌 司志龙 +1 位作者 潘丽霞 肖飞 《中华实验外科杂志》 CAS 2024年第1期133-136,共4页

目的观察高迁移率族蛋白B1(HMGB1)和自噬相关蛋白p62在结肠癌组织的表达,探讨HMGB1和p62的表达与结肠癌临床病理特征及预后的关系。方法收集武汉市第四医院2015年1月至2017年12月病理学确诊的108例结肠癌组织标本及癌旁正常组织标本,应... 目的观察高迁移率族蛋白B1(HMGB1)和自噬相关蛋白p62在结肠癌组织的表达,探讨HMGB1和p62的表达与结肠癌临床病理特征及预后的关系。方法收集武汉市第四医院2015年1月至2017年12月病理学确诊的108例结肠癌组织标本及癌旁正常组织标本,应用免疫组织化学染色法检测上述组织中HMGB1和p62表达,应用Spearman等级相关检验分析HMGB1和p62表达的关系,应用χ2检验评估HMGB1和p62的表达水平与结肠癌临床病理资料间的相关性。生存分析采用Kaplan-Meier法和Log-Rank检验,多因素分析采用COX回归模型。结果结肠癌组织中HMGB1和p62阳性表达率分别为70.37%(76/108)、80.56%(87/108),且两者表达呈正相关(rs=0.450,P<0.01)。HMGB1表达与结肠癌组织学分型、淋巴结转移明显相关(χ2=6.704、12.725,P<0.05),p62表达与结肠癌淋巴结转移明显相关(χ2=8.865,P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析显示,HMGB1阳性者的中位无进展生存期(PFS)[(32.0±4.84)个月]显著低于阴性者(χ2=10.385,P<0.01)。p62阳性者的中位PFS[(36.0±4.12)个月]显著低于阴性者(χ2=11.805,P<0.01)。多因素回归分析显示,HMGB1[风险比(HR)=2.406,95%可信区间(CI):1.053~5.493,P<0.05]和p62(HR=6.275,95%CI:1.518~25.941,P<0.05)是影响结肠癌PFS的独立危险因素。结论结直肠癌组织中HMGB1和p62呈高表达,两者检测有助于判断结肠癌生物学行为及预后评估。 展开更多

关键词 高迁移率族蛋白B1 自噬相关蛋白p62 结肠癌 细胞自噬

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