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LncRNA的结构、功能及其与疾病的关系 被引量:33
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作者 王婷梅 曲丽娜 李莹辉 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期659-666,共8页
70%的人类基因组能够被转录,而其中仅有1%~2%的转录本能够编码蛋白,余下98%均为非编码RNA(non-codingRNA,ncRNA).在ncRNA中,长度大于200核苷酸称为长链非编码RNA(long non-codingRNA,LncRNA),占全部ncRNA的80%-90%.L... 70%的人类基因组能够被转录,而其中仅有1%~2%的转录本能够编码蛋白,余下98%均为非编码RNA(non-codingRNA,ncRNA).在ncRNA中,长度大于200核苷酸称为长链非编码RNA(long non-codingRNA,LncRNA),占全部ncRNA的80%-90%.LncRNA除了数量庞大以外,还具有表达量较低、物种间保守性较差及细胞表达特异性等特点,使LncRNA结构及作用机制等研究充满挑战.目前关于LncRNA的研究主要集中于功能方面.LncRNA能够广泛参与生物体的各种生理及病理过程,如表观遗传学调控、癌症、神经系统功能等.LncRNA作用机制众多,能够以分子诱饵、分子向导、分子支架及信号通路的调节剂等多种角色参与调节机体各种生物学过程.解析LncRNA的分子结构、深入研究其在生物体生理及病理过程中所发挥的作用,并揭示其作用机制,不仅能够加深对生物体生理及病理过程的认识,同时也能给某些疾病的诊断、防治提供新的思路及解决途径.本文综述了近年来有关LncRNA结构、功能及作用机制相关研究进展,以期为后续LncRNA相关研究提供参考. 展开更多
关键词 长链非编码RNA 表观遗传学 可变剪切 分子支架 分子向导
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mRNA选择性剪接的分子机制 被引量:19
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作者 章国卫 宋怀东 陈竺 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第1期102-107,共6页
真核细胞mRNA前体经过剪接成为成熟的mRNA ,而mRNA前体的选择性剪接极大地增加了蛋白质的多样性和基因表达的复杂程度 ,剪接位点的识别可以以跨越内含子的机制 (内含子限定 )或跨越外显子的机制 (外显子限定 )进行。选择性剪接有多种剪... 真核细胞mRNA前体经过剪接成为成熟的mRNA ,而mRNA前体的选择性剪接极大地增加了蛋白质的多样性和基因表达的复杂程度 ,剪接位点的识别可以以跨越内含子的机制 (内含子限定 )或跨越外显子的机制 (外显子限定 )进行。选择性剪接有多种剪接形式 :选择不同的剪接位点 ,选择不同的剪接末端 ,外显子的不同组合及内含子的剪接与否等。选择性剪接过程受到许多顺式元件和反式因子的调控 ,并与基本剪接过程紧密联系 ,剪接体中的一些剪接因子也参与了对选择性剪接的调控。选择性剪接也是 1个伴随转录发生的过程 ,不同的启动子可调控产生不同的剪接产物。mRNA的选择性剪接机制多种多样 ,已发现RNA编辑和反式剪接也可参与选择性剪接过程。 展开更多
关键词 MRNA 选择性剪接
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东方蜜蜂微孢子虫基因的可变剪接及可变腺苷酸化解析 被引量:22
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作者 陈华枝 范小雪 +11 位作者 范元婵 王杰 祝智威 蒋海宾 张文德 隆琦 熊翠玲 郑燕珍 付中民 徐国钧 陈大福 郭睿 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期161-173,共13页
本研究旨在基于已获得的第三代纳米孔全长转录组数据对东方蜜蜂微孢子虫Nosema ceranae基因的可变剪接(alternative splicing,AS)和可变多聚腺苷酸化(alternative polyadenylation,APA)进行分析。通过Astalavista软件鉴定东方蜜蜂微孢... 本研究旨在基于已获得的第三代纳米孔全长转录组数据对东方蜜蜂微孢子虫Nosema ceranae基因的可变剪接(alternative splicing,AS)和可变多聚腺苷酸化(alternative polyadenylation,APA)进行分析。通过Astalavista软件鉴定东方蜜蜂微孢子虫基因的AS事件类型。采用TAPISpipeline对东方蜜蜂微孢子虫基因的APA位点进行鉴定。利用MEME软件分析所有全长转录本的poly (A)剪接位点上游50bp的序列特征并鉴定motif。共鉴定出发生于5个基因的5次AS事件,包括1次可变供体位点(alternative donor site,ADS)和4次内含子保留(intron retention,IR)。鉴定出233个基因发生APA,其中含有1个poly (A)剪接位点的基因数量最多(143,61.37%)。序列特征分析结果显示,东方蜜蜂微孢子虫全长转录本的3’ UTR的上下游表现出明显的碱基倾向性,U在3’ UTR的上游富集,而A在3’ UTR的下游富集。此外,在东方蜜蜂微孢子虫全长转录本的poly (A)剪接位点上游鉴定到3个motif(AAUAAA、UGAUGC和GCGACG)。研究结果揭示了东方蜜蜂微孢子虫转录组的复杂性,完善了现有的参考基因组和转录组注释,也为深入探究不同剪接异构体的分子功能提供了基础。此外,本研究为其他真菌的AS和APA研究提供了有益的思路和方法借鉴。 展开更多
关键词 第三代测序技术 全长转录组 东方蜜蜂微孢子虫 可变剪接 可变腺苷酸化
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基于RNA-seq测序数据鉴定和分析猪基因组可变剪接事件 被引量:21
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作者 冉茂良 陈斌 +3 位作者 李智 董莲花 贺长青 柳小春 《中国科学:生命科学》 CSCD 北大核心 2016年第3期274-284,共11页
可变剪接作为一种增加基因组和蛋白质组多样性的重要机制,广泛发生于真核生物基因转录的过程中.本文采用Illumina Hiseq 2500测序平台对猪睾丸组织4个不同发育时期(60胚龄、90胚龄、30日龄和180日龄)进行转录组测序,以猪基因组数据为参... 可变剪接作为一种增加基因组和蛋白质组多样性的重要机制,广泛发生于真核生物基因转录的过程中.本文采用Illumina Hiseq 2500测序平台对猪睾丸组织4个不同发育时期(60胚龄、90胚龄、30日龄和180日龄)进行转录组测序,以猪基因组数据为参考,鉴定和分析了猪基因组可变剪接事件.从猪基因组中鉴定出20398个基因(80.6%)对应的92738个可变剪接事件.在不同的可变剪接类型中,以第一个外显子可变剪切(alternative 5′first exon,TSS)、最后一个外显子可变剪切(alternative 3′last exon,TTS)、单外显子跳跃(skipped exon,SKIP)和可变5′或3′端剪切(alternative exon ends,AE)4种类型为主,分别占所有可变剪接事件的41.0%,32.9%,7.6%和7.4%.GO功能富集分析显示,发生可变剪接的基因主要富集于物质合成、物质结合及酶活性相关的GO项中,而各发育时期特异的可变剪接基因与发育时期的生理状态密切相关,60胚龄时主要与酶活性和组织形成相关,30日龄时主要与抗环境应激和离子通道活性相关,180日龄时则主要与循环系统相关.此外,在筛选出64个与睾丸素代谢相关的基因中,63个基因发生可变剪接,且以TSS和TTS为主,表明这两种可变剪接类型与睾丸素合成和分泌密切相关.通过对猪基因组可变剪接的分析,为深入研究可变剪接生物学功能及进一步开展分子育种工作提供理论依据. 展开更多
关键词 可变剪接 睾丸素 RNA-SEQ
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低氧性肺动脉高压小鼠肺的环状RNA表达谱研究 被引量:17
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作者 夏世金 邰先桃 +5 位作者 李炳 苏晋燕 狄桦 刘露梅 万文斌 胡明冬 《中华肺部疾病杂志(电子版)》 CAS 2015年第1期34-38,共5页
目的 采用环状RNA(circRNA)芯片筛选低氧性肺动脉高压(HPH)小鼠肺组织中差异表达的circRNA,分析circRNA表达谱特征,为HPH发生机制提供研究方法。方法 20只健康雄性C57BL/6小鼠(体质量17~20g)按数字表法随机分为HPH模型组与常... 目的 采用环状RNA(circRNA)芯片筛选低氧性肺动脉高压(HPH)小鼠肺组织中差异表达的circRNA,分析circRNA表达谱特征,为HPH发生机制提供研究方法。方法 20只健康雄性C57BL/6小鼠(体质量17~20g)按数字表法随机分为HPH模型组与常氧组,每组10只。HPH模型组小鼠置于自制常压低氧舱内,舱内氧浓度(10±0.5)%O2。每天连续低氧处理8h,连续21d。常氧组小鼠置于常氧环境饲养。通过测定右心室收缩压和右心肥大指数验证HPH小鼠模型复制成功后,处死小鼠,取肺组织,用circRNA芯片检测各组肺组织circRNA表达谱,并进行组间比较与分析,以明确差异表达的circRNAs。结果 与常氧组比较,HPH模型组肺组织中表达显著上调的circRNAs共有23个(P〈0.01,P〈0.05);表达显著下调的circRNAs共有41个(P〈0.01,P〈0.05)。结论 circRNA芯片可用于筛选HPH差异表达的circRNA,circRNA可能参与HPH调控机制。 展开更多
关键词 环状RNA 低氧性肺动脉高压 小鼠 芯片 非编码RNA 可变剪接 微小RNA
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草菇gpi基因结构及其异核体表达协同增效作用 被引量:16
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作者 刘朋虎 谢宝贵 +5 位作者 邓优锦 陈炳智 贵甫 朱坚 江玉姬 刘新锐 《食用菌学报》 北大核心 2011年第4期1-5,共5页
以草菇(Volvariella volvacea)单孢菌株PYd21(基因组测序菌株)和PYd15(基因组重测序菌株)为材料,配对获得可正常出菇的异核菌株H15-21。克隆测序了PYd21和PYd15的葡萄糖-6-磷酸异构酶基因(gpi),并对基因的结构和表达谱的表达量进行分析... 以草菇(Volvariella volvacea)单孢菌株PYd21(基因组测序菌株)和PYd15(基因组重测序菌株)为材料,配对获得可正常出菇的异核菌株H15-21。克隆测序了PYd21和PYd15的葡萄糖-6-磷酸异构酶基因(gpi),并对基因的结构和表达谱的表达量进行分析。结果表明,PYd21和PYd15的gpi基因序列相同;转录组reads定位、paired-end分析结果显示,gpi基因全长2404bp,ORF全长1659bp,编码552个氨基酸,含有8个外显子、7个内含子,5'UTR长度为101bp、3'UTR为183bp,RNA加工过程中有2种可变剪切类型、3个可变剪接位点;表达谱测序结果,PYd21、H15-21和PYd15 gpi基因的表达量分别为84.53、1079.31和270.95TPM,草菇gpi基因表达表现出异核体表达协同增效作用,暗示着异核菌株中的2种不同来源的细胞核可能存在相互作用,这一结果在实时荧光定量PCR检测后得到证实。 展开更多
关键词 葡萄糖-6-磷酸异构酶 基因结构 可变剪切 协同增效作用
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环状RNA的产生、研究方法及功能 被引量:16
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作者 刘旭庆 高宇帮 +5 位作者 赵良真 蔡宇晨 王汇源 苗苗 顾连峰 张航晓 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期469-485,共17页
随着高通量测序技术的发展,环状RNA(circular RNAs,circRNAs)逐渐成为非编码RNA研究领域的热点。本文系统综述了环状RNA侧翼内含子自身互补配对驱动、RNA结合蛋白驱动以及套索驱动这3种环状RNA形成模型,并从高通量文库构建、生物信息学... 随着高通量测序技术的发展,环状RNA(circular RNAs,circRNAs)逐渐成为非编码RNA研究领域的热点。本文系统综述了环状RNA侧翼内含子自身互补配对驱动、RNA结合蛋白驱动以及套索驱动这3种环状RNA形成模型,并从高通量文库构建、生物信息学鉴别和常用的实验验证等3个方面对环状RNA的研究方法进行了介绍。同时,本文详细归纳了环状RNA作为microRNA(miRNA)或蛋白的海绵体、调控宿主基因的选择性剪接和表达、翻译成多肽等多种功能。最后通过系统综述植物环状RNA的特征及最新研究进展,为环状RNA在植物学中的进一步研究提供了新的视野。 展开更多
关键词 环状RNA 反向剪接 选择性剪接 海绵体
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Emerging roles of lncRNAs in the post-transcriptional regulation in cancer 被引量:16
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作者 Rong-Zhang He Di-Xian Luo Yin-Yuan Mo 《Genes & Diseases》 SCIE 2019年第1期6-15,共10页
Accumulating evidence indicates that long non-coding RNAs(lncRNAs)can play a pivotal role in regulation of diverse cellular processes.In particular,lncRNAs can serve as master gene regulators at transcriptional and po... Accumulating evidence indicates that long non-coding RNAs(lncRNAs)can play a pivotal role in regulation of diverse cellular processes.In particular,lncRNAs can serve as master gene regulators at transcriptional and posttranscriptional levels,leading to tumorigenesis.In this review,we discuss latest developments in lncRNA-meditated gene expression at the post-transcriptional level,including gene splicing,mRNA stability,protein stability and nuclear trafficking. 展开更多
关键词 alternative splicing LncRNA Posttranscriptional regulation Protein stability RNA binding proteins RNA stability
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棉花腺苷酸核糖基化作用因子1(arf1)的结构特征、替换剪接和遗传表达分析 被引量:10
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作者 任茂智 陈全家 +1 位作者 张锐 郭三堆 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第8期850-857,共8页
用已建立的新型染色体步移技术同尾酶反向PCR和快速分离目的基因cDNA 5′未知序列方法从陆地棉品种Y18中分离到腺苷酸核糖基化作用因子 1(arf1)的全长cDNA、DNA和启动子序列。结果表明 ,该基因全长 436 0bp ,具有 6个内含子和 7个外显... 用已建立的新型染色体步移技术同尾酶反向PCR和快速分离目的基因cDNA 5′未知序列方法从陆地棉品种Y18中分离到腺苷酸核糖基化作用因子 1(arf1)的全长cDNA、DNA和启动子序列。结果表明 ,该基因全长 436 0bp ,具有 6个内含子和 7个外显子 ,在第一个内含子处存在替换剪接现象 ,使该基因在棉花中分别形成 10 2 6、110 3和 15 4 4bp的 3种mRNA。该基因编码 181个氨基酸 ,转录起始位点上游具有转录起始子、TATA盒、CAAT盒、GC盒、多个正向重复序列和反向重复序列 ,在转录起始位点下游具有富含AT序列和回文结构等启动子特征序列。Southern杂交结果表明 :该基因在棉花基因组中有两个拷贝。Northern杂交结果表明 :该基因在棉花的蕾、花。 展开更多
关键词 腺苷酸核糖基化作用因子1 结构特征 替换剪接 遗传表达 棉花
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Fine-Tuning of MiR528 Accumulation Modulates Flowering Time in Rice 被引量:15
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作者 Rongxin Yang Pingchuan Li +9 位作者 Hailiang Mei Dong Wang Jing Sun Chao Yang Lili Hao Shouyun Cao Chengcai Chu Songnian Hu Xianwei Song Xiaofeng Cao 《Molecular Plant》 SCIE CAS CSCD 2019年第8期1103-1113,共11页
In plants,microRNA (miRNA) functions in the post-transcriptional repression of target mRNAs have been well explored.However,the mechanisms regulating the accumulation of miRNAs remain poorly under.stood.Here,we report... In plants,microRNA (miRNA) functions in the post-transcriptional repression of target mRNAs have been well explored.However,the mechanisms regulating the accumulation of miRNAs remain poorly under.stood.Here,we report that distinct mechanisms regulate accumulation of a monocot-specific miRNA,rice (Oryza sativa) miR528.At the transcriptional level,miR528 accumulated to higher levels in older plants than in young seedlings and exhibited aging-modulated gradual accumulation and diurnal rhythms in leaves;at the post-transcriptional level,aging also modulated miR528 levels by enhancing pri-miR528 alter.native splicing.We found that miR528 promotes rice flowering under long-day conditions by targeting RED AND FAR-RED INSENSITIVE2 (OsRFI2).Moreover,natural variations in the MIR528 promoter region caused differences in miR528 expression among rice varieties,which are correlated with their different binding affinities with the transcription factor OsSPL9 that activates the expression of miR528.Taken together,our findings reveal rice plants have evolved sophisticated modes fine-tuning miR528 levels and provide insight into the mechanisms that regulate MIRNA expression in plants. 展开更多
关键词 miRNA OsSPL9 alternative splicing POST-TRANSCRIPTIONAL regulation Natural variation FLOWERING
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Role of PRMTs in cancer: Could minor isoforms be leaving a mark? 被引量:14
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作者 R Mitchell Baldwin Alan Morettin Jocelyn C té 《World Journal of Biological Chemistry》 CAS 2014年第2期115-129,共15页
Protein arginine methyltransferases(PRMTs) catalyze the methylation of a variety of protein substrates, many of which have been linked to the development, progression and aggressiveness of different types of cancer. M... Protein arginine methyltransferases(PRMTs) catalyze the methylation of a variety of protein substrates, many of which have been linked to the development, progression and aggressiveness of different types of cancer. Moreover, aberrant expression of PRMTs has been observed in several cancer types. While the link between PRMTs and cancer is a relatively new area of interest, the functional implications documented thus far warrant further investigations into its therapeutic potential. However, the expression of these enzymes and the regulation of their activity in cancer are still significantly understudied. Currently there are nine main members of the PRMT family. Further, the existence of alternatively spliced isoforms for several of these family members provides an additional layer of complexity. Specifically, PRMT1, PRMT2, CARM1 and PRMT7 have been shown to have alternative isoforms and others may be currently unrealized. Our knowledge with respect to the relative expression and the specific functions of these isoforms is largely lacking and needs attention. Here we present a review of the current knowledge of theknown alternative PRMT isoforms and provide a rationale for how they may impact on cancer and represent potentially useful targets for the development of novel therapeutic strategies. 展开更多
关键词 Protein ARGININE METHYLTRANSFERASE ARGININE methylation Cancer alternative splicing ISOFORMS
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绒山羊肌内脂肪细胞成熟前后比较转录组分析 被引量:14
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作者 杜琛 付绍印 +6 位作者 高鸿雁 郑竹清 孟宪然 阿娜 萨仁 张文广 李金泉 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期714-721,共8页
为了研究绒山羊肌内脂肪细胞在成熟前后差异表达的基因和主要信号转导通路,从而进一步筛选出与脂肪沉积相关的基因。本研究通过利用Illumina MiSeq对绒山羊肌内脂肪细胞在成熟前后转录组进行高通量测序,并用测序评估,基因功能注释,鉴定... 为了研究绒山羊肌内脂肪细胞在成熟前后差异表达的基因和主要信号转导通路,从而进一步筛选出与脂肪沉积相关的基因。本研究通过利用Illumina MiSeq对绒山羊肌内脂肪细胞在成熟前后转录组进行高通量测序,并用测序评估,基因功能注释,鉴定基因的可变剪接等生物信息学方法进行分析。组装后共获得93 930个contigs,N50为1 586nt,通过CLCGenomicsworkbench6软件找到差异基因78个(Fold Change>4,FDR<0.01)。这些差异基因基于GO功能注释可分为骨骼肌发育、胞外区、胰岛素样生长因子结合等46个分支,利用KEGG数据库作为参考,这些基因主要参与吞噬体、I型糖尿病、风湿性关节炎等通路中。本研究中分析绒山羊肌内脂肪细胞中4种主要可变剪接类型,为A3SS(Alternative 3′splice site)、A5SS(Alternative 5′splice site)、SE(Exon skipping)和RI((Intron retention),其中A3SS最为普遍。高通量RNA-seq提供了全部转录本信息,获得了在肌内脂肪细胞增殖分化过程中有重要功能的基因,其中上调基因在与胰岛素样生长因子结合和糖尿病的代谢通路中有着重要的作用,为人们进一步研究绒山羊脂肪沉积的功能基因组学及优化山羊肉品质奠定基础。 展开更多
关键词 绒山羊 肌内脂肪细胞 高通量测序 可变剪接
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基因选择性剪接的生物信息学研究概况 被引量:6
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作者 林鲁萍 马飞 王义权 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期1001-1006,共6页
基因选择性剪接现象是真核生物基本而又重要的调控机制。由于基因的选择性剪接在形成生物复杂性和多样性上具有极其重要的作用,同时选择性剪接与许多人类疾病也密切相关。因此,研究基因选择性剪接是一项十分重要的工作。生物信息学作为... 基因选择性剪接现象是真核生物基本而又重要的调控机制。由于基因的选择性剪接在形成生物复杂性和多样性上具有极其重要的作用,同时选择性剪接与许多人类疾病也密切相关。因此,研究基因选择性剪接是一项十分重要的工作。生物信息学作为一门新兴的学科在研究基因选择性剪接上起关键的作用,尤其在研究基因表达调控机制、选择性剪接基因预测以及选择性剪接基因进化上。文章综述了这方面的最新研究进展,为更深入了解真核生物基因的表达调控机理提供依据。 展开更多
关键词 选择性剪接 生物信息学 基因组
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南方鲇Vasa基因两种亚型cDNA的克隆及其表达 被引量:12
14
作者 胡重江 吴风瑞 +3 位作者 刘智皓 黄宝锋 张耀光 王德寿 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第6期1051-1060,共10页
采用RT-PCR和RACE相结合的方法,从南方鲇分离到Vasa基因的两个亚型scVasa和scVasa-s。它们是同一基因在5′端经选择性剪接的产物,其cDNA全长分别为2525bp和2438bp,编码662和641个氨基酸。两者均具有DEAD-box家族成员特有的8个保守基序和... 采用RT-PCR和RACE相结合的方法,从南方鲇分离到Vasa基因的两个亚型scVasa和scVasa-s。它们是同一基因在5′端经选择性剪接的产物,其cDNA全长分别为2525bp和2438bp,编码662和641个氨基酸。两者均具有DEAD-box家族成员特有的8个保守基序和Vasa的典型特征。南方鲇Vasa与银鲫相似性最高(73.3%)。两个亚型均特异地表达于雌雄性腺中。原位杂交结果表明:scVasa主要在卵巢Ⅰ、Ⅱ时相的卵母细胞和精巢的精原细胞和初级精母细胞中表达。半定量PCR结果显示,在生殖周期中,两种亚型在以Ⅱ时相卵母细胞为主体的卵巢恢复期表达均高于以Ⅲ-Ⅳ时相卵母细胞为主体的卵黄生成期。 展开更多
关键词 南方鲇 Vasa基因克隆 选择性剪接 表达 RT-PCR 原位杂交
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家蚕Fhx/P25基因的一种新的转录模式分析研究(英文) 被引量:8
15
作者 刘春 赵萍 +3 位作者 程廷才 查幸福 夏庆友 向仲怀 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第8期740-746,共7页
家蚕Fhx/P25蛋白是丝素蛋白的主要成分之一,过去报道只在家蚕后部丝腺特异的转录表达.通过对大规模的家蚕EST序列分析发现,Fhx/P25基因不仅在家蚕后部丝腺高效转录,而且在家蚕幼虫五龄第三天的卵巢组织及其他组织也有转录;分析还发现Fhx... 家蚕Fhx/P25蛋白是丝素蛋白的主要成分之一,过去报道只在家蚕后部丝腺特异的转录表达.通过对大规模的家蚕EST序列分析发现,Fhx/P25基因不仅在家蚕后部丝腺高效转录,而且在家蚕幼虫五龄第三天的卵巢组织及其他组织也有转录;分析还发现Fhx/P25基因在丝腺和卵巢组织中有不同的转录起始位点,在卵巢组织中的转录起始位点比在丝腺中的至少要提前115bp左右.用RT-PCR和FQ-PCR进一步验证,以上分析结果均正确.分析还发现Fhx/P25mRNA存在选择性拼接.以上结果表明Fhx/P25基因并不是组织特异转录基因,它的转录表达存在复杂的调控机制,可能还有其他功能. 展开更多
关键词 家蚕 Fhx/P25蛋白 转录起始位点 选择性拼接
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大鼠Fn剪接异型体分布及皮肤损伤后表达研究 被引量:12
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作者 陈忆九 刘宁国 +1 位作者 黄晓华 李莉 《法医学杂志》 CAS CSCD 2001年第4期193-195,共3页
目的研究成年大鼠、新生幼鼠纤维连接蛋白剪接异型体EⅢA、EⅢB体内分布及皮肤切创、挫伤后表达情况,以期为法医学损伤经历时间研究探索新指标及选择阳性对照。方法组织匀浆后抽提总RNA,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术扩增目标条带。结... 目的研究成年大鼠、新生幼鼠纤维连接蛋白剪接异型体EⅢA、EⅢB体内分布及皮肤切创、挫伤后表达情况,以期为法医学损伤经历时间研究探索新指标及选择阳性对照。方法组织匀浆后抽提总RNA,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术扩增目标条带。结果(1)正常皮肤EⅢA+、EⅢB+不表达,伤后18hEⅢA+位点高丰度表达,EⅢB+位点变化不明显,两种致伤方式表达结果差别不大;(2)成年大鼠各器官分布情况依次为脑、心、肝。结论EⅢA+可作为皮肤损伤研究的敏感指标。 展开更多
关键词 皮肤损伤 纤维连接蛋白EⅢA 可变剪接 法医鉴定
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基于第三代长读段测序数据解析蜜蜂球囊菌基因的可变剪切与可变腺苷酸化 被引量:12
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作者 杜宇 王杰 +11 位作者 蒋海宾 王秀娜 范元婵 范小雪 祝智威 隆琦 张文德 熊翠玲 郑燕珍 付中民 陈大福 郭睿 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期667-682,共16页
【目的】蜜蜂球囊菌(Ascosphaera apis,简称球囊菌)是一种专性侵染蜜蜂幼虫的真菌病原,导致的白垩病是严重影响养蜂生产的顽疾,每年给养蜂业造成较大损失。本研究旨在基于已获得的第三代长读段测序数据对球囊菌菌丝(Aam)和孢子(Aas)中... 【目的】蜜蜂球囊菌(Ascosphaera apis,简称球囊菌)是一种专性侵染蜜蜂幼虫的真菌病原,导致的白垩病是严重影响养蜂生产的顽疾,每年给养蜂业造成较大损失。本研究旨在基于已获得的第三代长读段测序数据对球囊菌菌丝(Aam)和孢子(Aas)中基因的可变剪切(alternative splicing,AS)和可变多聚腺苷酸化(alternative polyadenylation,APA)进行深入分析。【方法】利用Astalavista软件鉴定Aam和Aas中基因的AS事件类型。利用IGV浏览器对部分剪切异构体(isoform)的结构进行可视化。通过TAPIS pipeline对Aam和Aas中基因的APA位点进行鉴定。通过MEME软件对Aam和Aas中全长转录本的APA位点上游50bp的序列特征进行分析并对motif进行鉴定。【结果】在Aam中共鉴定到286次AS事件,包括162次RI(Retained intron),87次A3(Alternative 3'splice-site)、32次A5(Alternative 5'splice-site)和5次SE (Skipping exon);在Aas中共鉴定到559次AS事件,包括305次RI、155次A3、85次A5、13次SE和1次MEE (Mutually exclusive exon)。进一步分析发现,现有参考基因组上的多数注释基因结构并不完整;部分注释基因在菌丝和孢子中转录形成的isoform在数量和结构方面均存在差异;部分isoform在参考基因组中没有对应的注释基因。Aam中共鉴定到2748个基因含有1个及以上的APA位点,其中含有1个APA位点的基因数量最多(726,26.42%);Aas中共鉴定到2768个基因含有1个及以上的APA位点,其中含有5个以上APA位点的基因数量最多(1180,42.63%)。部分基因在菌丝和孢子中含有不同的APA位点数。序列特征分析结果显示,球囊菌全长转录本的3'UTR的上下游表现出明显的碱基倾向性,U和A分别富集在3'UTR的上游和下游。此外,在球囊菌全长转录本的APA位点上游鉴定到4个motif,分别是UCUCCU、UCUUCU、CCCACC和CCCCCU。【结论】本研究通过对球囊菌菌丝和孢子中基因的AS和APA进行深入分析,揭示了球囊菌转录组的复杂性, 展开更多
关键词 长读段测序 牛津纳米孔 蜜蜂球囊菌 可变剪切 可变腺苷酸化
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大鼠皮肤创伤后EⅢA-FN mRNA表达与损伤时间推断研究 被引量:10
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作者 刘宁国 陈忆九 +2 位作者 黄晓华 张建华 李莉 《法医学杂志》 CAS CSCD 2002年第3期129-131,共3页
目的研究皮肤创伤后不同时间纤连蛋白剪接方式变化及EⅢA剪接异型体的表达。方法提取伤区组织总RNA,RT-PCR方法扩增目的条带。结果大鼠皮肤损伤后表达出正常组织中没有的EⅢA+(526bp)片段,其中伤后1h该条带肉眼可辨认,在伤后24h内,随损... 目的研究皮肤创伤后不同时间纤连蛋白剪接方式变化及EⅢA剪接异型体的表达。方法提取伤区组织总RNA,RT-PCR方法扩增目的条带。结果大鼠皮肤损伤后表达出正常组织中没有的EⅢA+(526bp)片段,其中伤后1h该条带肉眼可辨认,在伤后24h内,随损伤时间延长其条带亮度相应升高。结论EⅢA-FN剪接异型体表达变化可为法医学损伤时间推断较理想指标。 展开更多
关键词 纤维连接蛋白 可变剪接 EⅢA 损伤时间推断 法医鉴定学
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草菇磷酸果糖激酶(PFK)基因克隆、结构及不同菌株中表达量分析 被引量:12
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作者 刘朋虎 谢宝贵 +1 位作者 邓优锦 江玉姬 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期253-260,共8页
从福建主栽品种屏优一号PY分离到2个不能正常出菇的单孢菌株PYd21、PYd15,二者配对杂交得到可正常出菇异核菌株H15-21。用solexa测序技术对PYd21基因组从头测序(de novo sequencing),对PYd15、PYd21、H15-21的菌丝体分别进行数字基因表... 从福建主栽品种屏优一号PY分离到2个不能正常出菇的单孢菌株PYd21、PYd15,二者配对杂交得到可正常出菇异核菌株H15-21。用solexa测序技术对PYd21基因组从头测序(de novo sequencing),对PYd15、PYd21、H15-21的菌丝体分别进行数字基因表达谱测序,对8个样品(PYd15、PYd21、H15-21的菌丝体,H15-21出菇后的原基、钮扣期菌柄、蛋形期菌柄、伸长期菌柄和成熟期菌柄)mRNA等量混合物进行转录组测序。克隆测序了PYd21与PYd15中磷酸果糖激酶(PFK)基因,比对结果表明二者序列一致。利用转录组数据对PFK基因结构进行分析,结果表明:该基因全长3,494bp,有12个外显子、11个内含子;开放阅读框(ORF)全长2,457bp,编码818个氨基酸,5′端非翻译区(5′UTR)长度281bp,3′端非翻译区(3′UTR)全长103bp;RNA在加工过程中存在1种可变剪切类型、6个可变剪切位点。数字基因表达谱分析结果表明,PFK基因在PYd21、PYd15及H15-21中的标准表达量分别为71.08、120.61、251.85(transcriptper million cleantags,TPM),表达量依次升高,与菌丝生长速度显著正相关。并且异核菌株H15-21表达量高于2个单孢菌株之和,基因表达存在协同增效作用。采用实时荧光定量PCR技术对基因表达量进行验证,表达谱数据切实可靠。 展开更多
关键词 草菇 基因结构 可变剪切 协同增效 异核体
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应用RNA-seq数据开展鸭基因组可变剪接的鉴定与分析 被引量:12
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作者 徐铁山 顾丽红 +1 位作者 侯水生 叶保国 《中国家禽》 北大核心 2016年第17期10-16,共7页
可变剪接是畜禽增加转录组和蛋白质结构与功能多样性的一种重要机制。研究应用前期测定的不同发育时期(2、4、6周龄)北京鸭胸肌和皮脂RNA-seq数据,挖掘北京鸭胸肌和皮脂内可变剪接及其功能注释。结果显示:1 6个样品中共鉴定出30 465个... 可变剪接是畜禽增加转录组和蛋白质结构与功能多样性的一种重要机制。研究应用前期测定的不同发育时期(2、4、6周龄)北京鸭胸肌和皮脂RNA-seq数据,挖掘北京鸭胸肌和皮脂内可变剪接及其功能注释。结果显示:1 6个样品中共鉴定出30 465个可变剪接,这些事件发生在7 587个基因上,可变剪切类型以外显子跳跃、内含子滞留、可变的5′剪接位点和可变的3′剪接位点等为主;2可变剪接的发生具有组织和发育阶段特异性;3共有可变剪接的基因主要富集于物质合成、物质结合及酶活性相关的GO条目中,胸肌特有可变剪接基因显著富集到骨骼肌发育相关的GO条目中,而皮脂特有的可变剪接基因富集到油脂合成的GO条目中。研究系统鉴定了北京鸭胸肌和皮脂内的可变剪接和基因,为北京鸭分子育种提供理论基础。 展开更多
关键词 RNA-SEQ 北京鸭 基因组 可变剪接 GO功能注释
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