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根癌农杆菌介导致病疫霉转化体系的建立
被引量：
2
1
作者
赵冬梅
何佳昱
+2 位作者
杨志辉
朱杰华
徐进
《河南农业科学》
CSCD
北大核心
2014年第9期83-87,共5页
为建立低成本、快速、高效的根癌农杆菌介导的致病疫霉转化体系，以菌株 HK0919为材料，从抗生素筛选浓度、共培养转膜方式、乙酰丁香酮（AS）浓度、共培养时间和共培养温度等方面对致病疫霉的转化体系进行了研究。综合各因素优化结果...
为建立低成本、快速、高效的根癌农杆菌介导的致病疫霉转化体系，以菌株 HK0919为材料，从抗生素筛选浓度、共培养转膜方式、乙酰丁香酮（AS）浓度、共培养时间和共培养温度等方面对致病疫霉的转化体系进行了研究。综合各因素优化结果，建立的转化体系条件为：以1．0μg/mL的潮霉素B进行转化子筛选，采用玻璃纸作为共培养介质，AS浓度为200μmol/L，培养6 d，温度为22℃。在此条件下的转化效率为每106个游动孢子获得50～60个转化子。随机选取10个转化子，利用特异性引物对潮霉素抗性基因hph进行PCR扩增，转化子均能扩增出800 bp左右的预期条带；同时，利用根癌农杆菌vir基因特异引物对转化子进行 PCR扩增，排除了转化子被农杆菌污染所致的假阳性；转化子继代培养5代后，仍能在含潮霉素 B的黑麦培养基上生长。说明外源T DNA已成功整合到致病疫霉基因组中，并能稳定遗传。
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关键词
致病疫霉
根癌农杆菌介导的转化
T—
dna
转化效率
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职称材料
题名
根癌农杆菌介导致病疫霉转化体系的建立
被引量：
2
1
作者
赵冬梅
何佳昱
杨志辉
朱杰华
徐进
机构
河北农业大学植物保护学院
出处
《河南农业科学》
CSCD
北大核心
2014年第9期83-87,共5页
基金
现代农业产业技术体系建设专项资金资助项目(CARS-10-P12)
文摘
为建立低成本、快速、高效的根癌农杆菌介导的致病疫霉转化体系，以菌株 HK0919为材料，从抗生素筛选浓度、共培养转膜方式、乙酰丁香酮（AS）浓度、共培养时间和共培养温度等方面对致病疫霉的转化体系进行了研究。综合各因素优化结果，建立的转化体系条件为：以1．0μg/mL的潮霉素B进行转化子筛选，采用玻璃纸作为共培养介质，AS浓度为200μmol/L，培养6 d，温度为22℃。在此条件下的转化效率为每106个游动孢子获得50～60个转化子。随机选取10个转化子，利用特异性引物对潮霉素抗性基因hph进行PCR扩增，转化子均能扩增出800 bp左右的预期条带；同时，利用根癌农杆菌vir基因特异引物对转化子进行 PCR扩增，排除了转化子被农杆菌污染所致的假阳性；转化子继代培养5代后，仍能在含潮霉素 B的黑麦培养基上生长。说明外源T DNA已成功整合到致病疫霉基因组中，并能稳定遗传。
关键词
致病疫霉
根癌农杆菌介导的转化
T—
dna
转化效率
Keywords
Phytophthora
infestans
agrobacterium
tumefaciens
-
mediated
transformation
（
atmt
）T-
dna
transformation
efficiency
分类号
S436.31 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
根癌农杆菌介导致病疫霉转化体系的建立
赵冬梅
何佳昱
杨志辉
朱杰华
徐进
《河南农业科学》
CSCD
北大核心
2014
2
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