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农杆菌不同菌液浓度对柳枝稷种子萌发及幼苗生长发育的影响 被引量：7
1
作者 徐开杰 燕明献 +3 位作者 柴乖强 孙风丽 刘曙东 奚亚军 《草业学报》 CSCD 北大核心 2012年第1期206-212,共7页
以柳枝稷品系‘西稷1号’、‘西稷2号’和‘西稷3号’为主区,以农杆菌菌液浓度为副区,对农杆菌浸种处理后柳枝稷种子萌发及幼苗生长发育相关性状进行了研究。结果表明,品系与农杆菌菌液浓度的互作效应不显著;不同基因型品系对农杆菌的... 以柳枝稷品系‘西稷1号’、‘西稷2号’和‘西稷3号’为主区,以农杆菌菌液浓度为副区,对农杆菌浸种处理后柳枝稷种子萌发及幼苗生长发育相关性状进行了研究。结果表明,品系与农杆菌菌液浓度的互作效应不显著;不同基因型品系对农杆菌的敏感程度不同,其中西稷3号最不敏感;随着农杆菌菌液浓度的升高,柳枝稷种子发芽率、幼苗成苗率及叶绿素含量呈下降趋势,幼苗POD活性、CAT活性、MDA含量呈上升趋势,SOD活性呈先升后降的趋势。综合农杆菌对柳枝稷种子萌发及幼苗生理生化特性影响,在柳枝稷农杆菌浸种转化法中菌液浓度控制在1.2OD600较为适宜。 展开更多
关键词 柳枝稷 农杆菌 菌液浓度 浸种
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蝴蝶兰ACC氧化酶和ACC合成酶融合反义表达载体的构建 被引量：4
2
作者 王宇腾 崔波 +3 位作者 蒋素华 武思 牛苏燕 叶永忠 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2011年第6期115-117,121,共4页
为了获得具有超常花期的蝴蝶兰新品系,根据已报道的蝴蝶兰ACC合成酶(ACS)基因和ACC氧化酶(ACO)基因的序列,设计引物从蝴蝶兰总RNA中克隆出ACS保守区的461 bp片段和ACO的333 bp片段,完成2个基因的克隆和测序后,将ACS基因片段和ACO基因片... 为了获得具有超常花期的蝴蝶兰新品系,根据已报道的蝴蝶兰ACC合成酶(ACS)基因和ACC氧化酶(ACO)基因的序列,设计引物从蝴蝶兰总RNA中克隆出ACS保守区的461 bp片段和ACO的333 bp片段,完成2个基因的克隆和测序后,将ACS基因片段和ACO基因片段以反义的方向插入到中间载体pBI221 CaMV启动子的下游,酶切后获得含有CaMV启动子的ACS和ACO基因的反义融合片段。将此包含启动子的反义融合片段连接到植物表达载体pCAM-BIA3301中,获得ACC合成酶基因和ACC氧化酶基因融合的反义表达载体,将构建好的植物表达载体转化农杆菌LBA4404,用于侵染蝴蝶兰原球茎。 展开更多
关键词 蝴蝶兰 ACC氧化酶 ACC合成酶 融合反义基因 根癌农杆菌
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棉花黄萎病菌T-DNA插入突变体库的构建及致病缺陷突变体筛选 被引量：6
3
作者 谷素静 汪敏 +2 位作者 桑茜 赵静 李洪连 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2014年第1期69-73,83,共6页
大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)侵染引起的棉花黄萎病是棉花生产上的重要病害之一,而其致病的分子机制尚不清楚,为此,以强致病力落叶型黄萎病菌FGH2为材料,利用农杆菌介导转化技术构建棉花黄萎病菌T-DNA插入突变体库并进行致病缺陷... 大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)侵染引起的棉花黄萎病是棉花生产上的重要病害之一,而其致病的分子机制尚不清楚,为此,以强致病力落叶型黄萎病菌FGH2为材料,利用农杆菌介导转化技术构建棉花黄萎病菌T-DNA插入突变体库并进行致病缺陷突变体的筛选。当农杆菌与黄萎病菌分生孢子浓度比为250∶1、承载介质为NC膜、乙酰丁香酮浓度400μmol/L、共培养时间48h时,转化效率高达每106个分生孢子产生612.5个转化子。通过采用优化后的转化体系,构建了含1 200个T-DNA插入转化子的棉花黄萎病菌突变体库。利用苗期分生孢子蘸根法测定300个转化子在棉花幼苗上的致病力,获得3个致病力显著降低的突变体181、546、1009,其中546的微菌核形成能力丧失,1009的微菌核形成能力明显下降。黄萎病菌T-DNA插入突变体库的构建,为棉花黄萎病菌致病及微菌核形成机制的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 棉花黄萎病 大丽轮枝菌 农杆菌介导的遗传转化 T-DNA插入突变 致病性
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匍匐翦股颖农杆菌转化体系的研究 被引量：3
4
作者 陈智勇 易自力 +2 位作者 蒋建雄 覃静萍 储成才 《中国草地学报》 CSCD 2007年第5期59-63,共5页
以匍匐翦股颖品种回旋、潘娜A-1、L-93的胚性愈伤组织为受体材料,利用根癌农杆菌EHA105介导将外源NAS基因导入其中,通过G418(40mg/L)筛选40d,分化培养得到再生植株,通过分子检测检出阳性株,最终农杆菌的转化率分别为0.90%、1.54%、2.02%。
关键词 匍匐翦股颖 农杆菌介导 转化 NAS基因
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