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龙牙百合的植株再生与遗传转化 被引量:37
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作者 刘菊华 金志强 +2 位作者 徐碧玉 郑思乡 刘志敏 《分子植物育种》 CAS CSCD 2003年第4期465-474,共10页
以龙牙百合鳞片叶切块为外植体 ,通过多种培养基的比较试验 ,得出MS +2 ,4 -D 2mg/L +6 -BA0 2mg/L是诱导愈伤的最佳培养基 ,MS +6 -BA 1mg/L +NAA 0 0 5mg/L是不定芽诱导及伸长的适宜培养基。MS +NAA 2mg/L是生根的最佳培养基。本试... 以龙牙百合鳞片叶切块为外植体 ,通过多种培养基的比较试验 ,得出MS +2 ,4 -D 2mg/L +6 -BA0 2mg/L是诱导愈伤的最佳培养基 ,MS +6 -BA 1mg/L +NAA 0 0 5mg/L是不定芽诱导及伸长的适宜培养基。MS +NAA 2mg/L是生根的最佳培养基。本试验已建立了适用于龙牙百合遗传转化的快速高频再生系统。用携带有几丁质酶基因和 β - 1、 3葡聚糖酶基因的工程菌 ,通过农杆菌介导法和基因枪转化法转化龙牙百合 ,经PCR和点杂交检测证明外源基因已经整合到植物染色体中。同时对农杆菌介导法和基因枪法进行比较 ,发现农杆菌介导法的转化率为 16 7% ,基因枪法的转化率为 5 0 % ,因此可能基因枪转化法更适于龙牙百合的遗传转化。 展开更多
关键词 龙牙百合 植株再生 遗传转化 外植体 培养基 基因枪法 蔬菜
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转果聚糖蔗糖转移酶基因银腺杨的获得(英文) 被引量:21
2
作者 张冰玉 苏晓华 +2 位作者 黄秦军 张香华 胡赞民 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第3期48-53,共6页
采用农杆菌介导的遗传转化方法,将来自枯草杆菌的果聚糖蔗糖转移酶基因(SacB)导入银腺杨,以提高杨树对水分胁迫的抗性。以来自无菌培养的叶片为外植体,通过大约10 0 0个叶盘与农杆菌LBA4 4 0 4共培养,将植物双元表达载体pKP中SacB基因... 采用农杆菌介导的遗传转化方法,将来自枯草杆菌的果聚糖蔗糖转移酶基因(SacB)导入银腺杨,以提高杨树对水分胁迫的抗性。以来自无菌培养的叶片为外植体,通过大约10 0 0个叶盘与农杆菌LBA4 4 0 4共培养,将植物双元表达载体pKP中SacB基因导入银腺杨基因组,经卡那霉素筛选后,共获得10 2株卡那霉素抗性植株。经PCR特异性扩增和Southern点杂交分析,证明其中97株再生植株基因组DNA中整合了SacB基因。对其中的6 2个无性系进行RT PCR分析,结果表明SacB基因在其中的5 0个无性系中获得表达。温室生长观察表明,转基因无性系外部形态与对照相比没有稳定的显著差异,少数部分转基因无性系的生长明显受到抑制,其他转基因无性系生长正常。这些转基因无性系的获得为培育抗旱转基因杨树奠定了基础。 展开更多
关键词 银腺杨 果聚糖蔗糖转移酶基因 转基因 农杆菌介导
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农杆菌介导的植物原位转基因方法研究进展 被引量:12
3
作者 刘凡 王国英 曹鸣庆 《分子植物育种》 CAS CSCD 2003年第1期108-115,共8页
本文介绍了农杆菌介导的植物原位转基因方法目前的发展状况、技术环节、以及在转化机制上的研究结果 。
关键词 植物原位转化 农杆菌介导 转化机制 基因工程
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离体培养植物细胞的表面与农杆菌介导基因转化频率的研究 被引量:3
4
作者 郭骁才 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2001年第3期23-27,共5页
以玉米、黑麦、烟草为材料 ,对细胞表面进行了扫描电镜观察 ,研究了离体培养植物细胞的细胞壁外表面的结构及其变化与农杆菌介导转化频率之间的关系。正常继代培养的烟草细胞 ,其细胞壁外表面光滑 ,大部分细胞在扫描电镜下坍陷或皱折 ;... 以玉米、黑麦、烟草为材料 ,对细胞表面进行了扫描电镜观察 ,研究了离体培养植物细胞的细胞壁外表面的结构及其变化与农杆菌介导转化频率之间的关系。正常继代培养的烟草细胞 ,其细胞壁外表面光滑 ,大部分细胞在扫描电镜下坍陷或皱折 ;经处理用于农杆菌介导转化的烟草细胞 ,其表面有很多颗粒状突起和纤丝状物或纤丝状网 ;光滑的表面很少见到菌 ,而粗糙表面则有很多菌。玉米和黑麦愈伤组织中 ,浅黄色、疏松易散的胚性细胞团 ,其表面细胞有很多未坍陷 ,相当一部分未坍陷细胞的细胞壁外表面与烟草细胞一样 ,具有很多较小的颗粒状突起和纤丝状物或纤丝状网 ;白色松软的愈伤组织 ,其外层细胞大多坍陷或呈柱状 ,未坍陷细胞的表面光滑 ,有些似有一层膜状物。 展开更多
关键词 离体培养 细胞壁外表面 农杆菌介导 转化频率 植物细胞 基因转化
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转基因棉花早代材料细胞学变异研究 被引量:3
5
作者 王坤波 宋国立 +5 位作者 李付广 张香娣 黎绍惠 王春英 刘方 李凤莲 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2001年第2期70-74,共5页
农杆菌介导转基因棉花早代 ( T0 )材料 ,花粉母细胞的染色体构型变异很大 ,只有部分二价体 ( 7~ 1 6个 ) ,多数是单价体 ,没有更高的价体。二价体位于赤道面 ,但多形成染色体桥。单价体多散布在两极。减数分裂后形成 1~ 8个分体的多分... 农杆菌介导转基因棉花早代 ( T0 )材料 ,花粉母细胞的染色体构型变异很大 ,只有部分二价体 ( 7~ 1 6个 ) ,多数是单价体 ,没有更高的价体。二价体位于赤道面 ,但多形成染色体桥。单价体多散布在两极。减数分裂后形成 1~ 8个分体的多分体 ,其中四分体虽然比例很高 ,多为畸形。染色体数目的减少、PMC染色体构型变异等 。 展开更多
关键词 农杆菌介导 转基因棉花 细胞学变异 早代材料 染色体构型
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辣椒农杆菌介导转化体系的建立及外源基因的转化 被引量:5
6
作者 上官小霞 吴霞 +4 位作者 张林水 刘珍 李波 李燕娥 朱祯 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2003年第2期5-8,共4页
辣椒农杆菌介导转化体系主要包括无菌苗制备、菌株培养、农杆菌介导转化、芽诱导、芽伸长、生根及移栽等 6个步骤。芽诱导培养基以MS +4.0~ 6 .0mg/L 6 BA +0 .5mg/LNAA +2 .0mg/LAgNO3 较好 ,诱芽分化率因品种不同而异 ,高的可达 70 ... 辣椒农杆菌介导转化体系主要包括无菌苗制备、菌株培养、农杆菌介导转化、芽诱导、芽伸长、生根及移栽等 6个步骤。芽诱导培养基以MS +4.0~ 6 .0mg/L 6 BA +0 .5mg/LNAA +2 .0mg/LAgNO3 较好 ,诱芽分化率因品种不同而异 ,高的可达 70 %以上 ,子叶的分化率明显高于下胚轴 ;诱芽伸长培养基以MS +3.0mg/L 6 BA +0 .3mg/LNAA +1.0mg/LGA3 较好 ,伸长率达 4 0 % ;生根培养基以 1/2MS +0 .3mg/LNAA(或 0 .5mg/LIAA)较好 ,平均生根率达 6 5 %。经过对 3个品种的抗虫基因转化研究 。 展开更多
关键词 辣椒 农杆菌 介导转化体系 外源基因 基因转化 激素浓度 无菌苗制备 菌株培养
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农杆菌介导胡萝卜遗传转化体系的建立与转基因胡萝卜栽培试验 被引量:4
7
作者 郭蓉 李霞 +3 位作者 张金文 李兴涛 杨慧 刘玲 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2006年第6期6-10,共5页
选黑田五寸胡萝卜栽培种,通过农杆菌介导的转化方法,获得转基因植株。结果表明:抗性愈伤和芽分化用不同浓度Kan筛选,Kan抗性芽的分化频率可达52%,Carb 500 mg/L能够完全抑制农杆菌的生长并能促进芽的分化;适当浓度的Cef对根形成有一定... 选黑田五寸胡萝卜栽培种,通过农杆菌介导的转化方法,获得转基因植株。结果表明:抗性愈伤和芽分化用不同浓度Kan筛选,Kan抗性芽的分化频率可达52%,Carb 500 mg/L能够完全抑制农杆菌的生长并能促进芽的分化;适当浓度的Cef对根形成有一定促进作用。转基因植株炼苗,采用塑料布覆盖并逐渐打开通风口通风的方法,抗性植株长势好,抗性强,成活率可以提高35%。低温春化,大棚和陆地相比,死亡率降低了49.5%。对7个株系T1植株的PCR分析,得出其中两株系接近1∶1,另两株系为1∶3。 展开更多
关键词 胡萝卜 转化体系 低温春化 农杆菌介导
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不同甜瓜品种遗传转化再生体系的建立与基因编辑植株的快速获取
8
作者 卡地尔阿依·买买提 周婷婷 +2 位作者 韩盛 梅丽克汗·热西提 玉山江·麦麦提 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期1666-1672,共7页
【目的】研究不同甜瓜品种遗传转化再生体系的建立与基因编辑植株的快速获取。【方法】选用巴吾顿、老汉瓜、其里甘、新密杂11号(86-1)4个甜瓜品种的子叶为外植体,通过农杆菌介导法侵染甜瓜子叶,采用组织培养法建立老汉瓜的遗传转化再... 【目的】研究不同甜瓜品种遗传转化再生体系的建立与基因编辑植株的快速获取。【方法】选用巴吾顿、老汉瓜、其里甘、新密杂11号(86-1)4个甜瓜品种的子叶为外植体,通过农杆菌介导法侵染甜瓜子叶,采用组织培养法建立老汉瓜的遗传转化再生体系,运用PCR法检测获取基因编辑植株。【结果】从4个甜瓜品种中筛选出老汉瓜为优势品种作为外植体,在MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L培养基预培养2 d和共培养3 d,在MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+潮霉素5 mg/L+头孢霉素250 mg/L筛选培养基上继续培养7 d,在MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+潮霉素5 mg/L+头孢霉素250 mg/L的不定芽诱导培养基上培养1~2周可见长出的小芽,将诱导芽分别放置于不加潮霉素和加潮霉素的芽伸长培养基上培养,诱导芽在不加潮霉素的芽伸长培养基上的生长速度比加潮霉素的培养基生长快,可使芽生长至2叶苗期缩短3周,在无菌环境下剪去一个芽提取DNA,并采用RT-PCR方法检测获得21株转化植株。【结论】筛选出基因编辑植株嫩芽,不加潮霉素的芽伸长培养基可将获得基因编辑植株周期缩短3周。 展开更多
关键词 甜瓜 农杆菌介导 遗传转化 基因编辑植株
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农杆菌介导的NPKI基因转化辣椒的研究 被引量:4
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作者 谭洁 巩振辉 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期267-270,共4页
以3个辣椒(Capsicum annuum L.)品种为试材,探讨了通过农杆菌介导法将烟草NPKI(参与细胞周期调控的MAPKKK激酶)基因转化辣椒的适宜条件。结果表明,切取14 d苗龄子叶外植体,在MS无机盐成分+B5有机成分+0.5 mg/L IAA(吲哚乙酸)+5... 以3个辣椒(Capsicum annuum L.)品种为试材,探讨了通过农杆菌介导法将烟草NPKI(参与细胞周期调控的MAPKKK激酶)基因转化辣椒的适宜条件。结果表明,切取14 d苗龄子叶外植体,在MS无机盐成分+B5有机成分+0.5 mg/L IAA(吲哚乙酸)+5.0 mg/L 6-BA(苄基氨基腺嘌呤)的琼脂培养基上预培养2 d后,浸没于农杆菌菌液中侵染8-10 min,共培养于MB(MS无机盐成分+B5有机成分)+0.5 mg/L IAA+5.0 mg/L 6-BA上2 d后转移至延迟培养基MB+0.5 mg/L IAA+5.0 mg/L 6-BA+250 mg/L Cef(头孢霉素)延迟选择2 d,随后转移至MB+0.5 mg/L IAA+5.0 mg/L 6-BA+250 mg/L Cef+50 mg/L Km(卡那霉素)进行选择培养是适宜的方法。将选择得到的抗性芽再生成苗。共获得抗性植株48株,PCR检测阳性植株17株,RT-PCR检测阳性植株14株。 展开更多
关键词 辣椒 遗传转化 农杆菌介导 NPKl基因
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农杆菌介导的体外萌发花粉玉米转基因方法研究
10
作者 韩雅利 焦宏业 +3 位作者 王磊 史明山 范子洋 刘康 《玉米科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期42-52,共11页
目前,玉米转基因方法主要采用农杆菌介导法和基因枪法,但是这两种方法都需要经过组织培养,实验条件要求较高、耗时长,且受转基因受体的基因型限制。选取杂交种苏玉19为材料,在优化玉米花粉离体萌发培养基的基础上,探索通过农杆菌侵染萌... 目前,玉米转基因方法主要采用农杆菌介导法和基因枪法,但是这两种方法都需要经过组织培养,实验条件要求较高、耗时长,且受转基因受体的基因型限制。选取杂交种苏玉19为材料,在优化玉米花粉离体萌发培养基的基础上,探索通过农杆菌侵染萌发花粉将外源基因导入玉米花粉,再将农杆菌侵染后的花粉给雌穗授粉从而获得转基因玉米。通过对培养基配方、培养温度、萌发时间、农杆菌浸染时间等技术因子的优化,建立农杆菌介导的外源基因导入离体萌发花粉的玉米转基因新方法,转化率最高可达7.27%。Southern杂交试验结果表明,外源基因整合到了玉米基因组中,该方法为外源基因导入,具有操作简单、成本低、快速培育高产新品种等优点,为玉米转基因提供技术支撑。 展开更多
关键词 玉米 转基因 农杆菌介导 花粉离体培养
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茶树遗传转化体系研究进展 被引量:5
11
作者 陈兰 朱晨 +2 位作者 李小桢 傅海峰 郭玉琼 《安徽农业科学》 CAS 2019年第12期14-18,23,共6页
茶树遗传转化技术是指应用重组DNA技术、细胞组织培养技术或种质系统转化技术,有目的地将外源基因或DNA片段插入到茶树受体基因组中并使其在后代植株中得以表达的过程,在茶树遗传改良、品种选育中发挥重要作用。对茶树遗传转化中受体系... 茶树遗传转化技术是指应用重组DNA技术、细胞组织培养技术或种质系统转化技术,有目的地将外源基因或DNA片段插入到茶树受体基因组中并使其在后代植株中得以表达的过程,在茶树遗传改良、品种选育中发挥重要作用。对茶树遗传转化中受体系统建立、茶树遗传转化方法进行概述,阐述了茶树遗传转化研究重点、方向以及当前茶树遗传转化研究所面临的转化效率低和离体再生困难的问题,提出了原位转化技术在茶树遗传转化中的应用潜力,从而达到优化茶树遗传转化体系的目的。 展开更多
关键词 遗传转化 外植体 农杆菌介导法 基因枪法
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农杆菌介导的BcWRKY2基因原位转化玉米茎尖的初步研究 被引量:5
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作者 曹士亮 李文滨 +2 位作者 王石 林忠平 卢翠华 《作物杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期51-56,I0002,共7页
利用农杆菌介导的原位转化方法将植物抗旱相关转录因子BcWRKY2基因导入优良玉米自交系郑58、K10、黄早四和Mo17。采用正交设计对玉米品种、菌液浓度、乙酰丁香酮浓度(AS)、真空处理时间和表面活性剂Silwet-77浓度进行了优化。研究结果表... 利用农杆菌介导的原位转化方法将植物抗旱相关转录因子BcWRKY2基因导入优良玉米自交系郑58、K10、黄早四和Mo17。采用正交设计对玉米品种、菌液浓度、乙酰丁香酮浓度(AS)、真空处理时间和表面活性剂Silwet-77浓度进行了优化。研究结果表明,各因素对转化率影响顺序依次是菌液浓度>品种>AS浓度>真空处理时间>Silwet-77浓度。确定了最优转化条件为品种郑58、真空处理时间20min、菌液浓度为OD600=0.9、AS浓度100μmol/L、Silwet-77浓度0.05%。PCR及RT-PCR分子检测试验说明,BcWRKY2基因已经整合到玉米基因组中,并且得到表达。 展开更多
关键词 玉米 农杆菌介导 原位转化 BcWRKY2基因
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PuCAT/Bar抗逆抗除草剂基因共转化紫花苜蓿的研究 被引量:5
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作者 任伟 王嘉莹 +3 位作者 任华华 王英哲 王梦寒 徐安凯 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2017年第A01期1-6,共6页
为了提高紫花苜蓿的抗盐碱能力,利用盐生植物碱茅的PuCAT基因成功构建了p3300-35S-PuCAT-NOS植物表达载体,以Bar基因为筛选标记基因,通过农杆菌介导转化公农5号紫花苜蓿子叶,并对其遗传转化体系进行了优化(预培养、菌液浓度、侵染时间... 为了提高紫花苜蓿的抗盐碱能力,利用盐生植物碱茅的PuCAT基因成功构建了p3300-35S-PuCAT-NOS植物表达载体,以Bar基因为筛选标记基因,通过农杆菌介导转化公农5号紫花苜蓿子叶,并对其遗传转化体系进行了优化(预培养、菌液浓度、侵染时间、共培养、抗生素浓度),经草铵膦筛选获得72株抗性植株,用PCR检测和RT-PCR鉴定,最终获得30株RT-PCR阳性植株。结果表明,PuCAT基因已经整合在苜蓿基因组中,并且能够在RNA水平上表达。 展开更多
关键词 紫花苜蓿 PuCAT 转基因植物 农杆菌介导 盐碱胁迫
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木本植物瞬时转化体系的研究进展 被引量:4
14
作者 李玲 顾恒 +2 位作者 岳远征 杨秀莲 王良桂 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2020年第23期7784-7794,共11页
木本植物是经济树种与观赏植物的重要组成部分,其快繁、改良、育种一直都是研究热点。近年来,功能基因组学以及基因修饰技术的发展更为木本植物的定向培育提供了广阔空间。遗传转化体系是植物基因工程的核心,也是进行植物改良与精确育... 木本植物是经济树种与观赏植物的重要组成部分,其快繁、改良、育种一直都是研究热点。近年来,功能基因组学以及基因修饰技术的发展更为木本植物的定向培育提供了广阔空间。遗传转化体系是植物基因工程的核心,也是进行植物改良与精确育种的重要途径。稳定的遗传转化对植物自身生长和繁殖特性要求比较严格,且转化时间长,效率低,不能满足当下快速鉴定相关基因功能、了解未知代谢途径以及进行人工调控的需求,而瞬时转化技术作为一种高效便捷的手段,已被越来越多的应用于木本植物相关基因功能研究。本研究主要从瞬时转化方法以及应用情况等方面,论述了近年来木本植物瞬时转化体系的研究进展,为木本植物基因工程育种和种质创新提供参考。 展开更多
关键词 木本植物 瞬时转化 农杆菌介导 影响因素 研究进展
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向大豆导入琉璃苣Δ6-脂肪酸脱氢酶基因的初步研究 被引量:4
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作者 宋丽雅 盖燕 何聪芬 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期173-177,共5页
采用RT-PCR法扩增出中国境内生长的琉璃苣Δ6-脂肪酸脱氢酶基因,序列分析表明,该基因全长为1 359个核苷酸,与美国德克萨斯州的琉璃苣Δ6-脂肪酸脱氢酶基因同源性可达到99%。将克隆到的基因连接pRTL2质粒的35S启动子,构建重组载体pPTN-D... 采用RT-PCR法扩增出中国境内生长的琉璃苣Δ6-脂肪酸脱氢酶基因,序列分析表明,该基因全长为1 359个核苷酸,与美国德克萨斯州的琉璃苣Δ6-脂肪酸脱氢酶基因同源性可达到99%。将克隆到的基因连接pRTL2质粒的35S启动子,构建重组载体pPTN-D6D,并通过农杆菌介导的子叶节转化系统,将该基因导入到垦农18和小粒豆2个大豆品种中。经PCR检测分析,初步证明琉璃苣Δ6-脂肪酸脱氢酶基因已导入并整合到大豆基因组中。 展开更多
关键词 Γ-亚麻酸 大豆 Δ6-脂肪酸脱氢酶基因 农杆菌介导
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农杆菌介导注射法建立番茄子叶瞬时表达系统
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作者 郎遥玲 王倩 +3 位作者 陈彬 白国辉 管晓燕 刘建国 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2023年第34期5462-5468,共7页
背景:转基因植物生产口服疫苗具有较大的优势及广阔的应用前景。目前,关于番茄瞬时表达系统的研究罕见报道,对番茄瞬时表达条件进行优化,可使植株的遗传转化效率大幅度提高。目的:利用农杆菌介导的注射法,建立番茄子叶瞬时表达系统,检... 背景:转基因植物生产口服疫苗具有较大的优势及广阔的应用前景。目前,关于番茄瞬时表达系统的研究罕见报道,对番茄瞬时表达条件进行优化,可使植株的遗传转化效率大幅度提高。目的:利用农杆菌介导的注射法,建立番茄子叶瞬时表达系统,检测植物表达载体pCAMBIA-E8-APB-DOCK8中外源基因的转录水平。方法:通过对番茄无菌苗的培育,观察不同番茄品种的出芽数、成苗数及农艺学性状的差异显著性,筛选出适用于此实验的番茄品种,将前期构建的植物表达载体pCAMBIA-E8-APB-DOCK8转化到农杆菌EHA105中,通过对番茄子叶、注射农杆菌浓度、农杆菌注射量、生长苗龄以及共培养天数进行筛选,建立农杆菌介导的番茄子叶瞬时表达系统,观察报告基因的转录水平。结果与结论:初步建立番茄子叶瞬时表达系统,筛选出适合的番茄品种为欧洲大红(苹果型),选材部位为番茄的子叶,注射农杆菌浓度A600为0.2-0.7,农杆菌注射量为50μL,苗龄为7-10 d,共培养24-48 h。该实验为后期外源基因蛋白表达分析研究提供一种方便、快捷和有效的方法。 展开更多
关键词 番茄 农杆菌介导 瞬时表达系统构建 E8-APB-DOCK8 植物疫苗 转录分析
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黄瓜棒孢叶斑病病原菌RFP标记转化株的构建 被引量:4
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作者 谢学文 张自心 +3 位作者 武军 石延霞 柴阿丽 李宝聚 《中国蔬菜》 北大核心 2018年第3期45-49,共5页
由多主棒孢(Corynespora cassiicola)侵染引起的黄瓜棒孢叶斑病已成为我国黄瓜生产上的重要新流行病害,目前尚缺乏抗性品种,病原菌侵染机制及与寄主的互作关系尚不清楚。为了开展多主棒孢的病原学研究,本试验采用农杆菌基因介导技术(ATM... 由多主棒孢(Corynespora cassiicola)侵染引起的黄瓜棒孢叶斑病已成为我国黄瓜生产上的重要新流行病害,目前尚缺乏抗性品种,病原菌侵染机制及与寄主的互作关系尚不清楚。为了开展多主棒孢的病原学研究,本试验采用农杆菌基因介导技术(ATMT),获得了红色荧光蛋白(RFP)标记的多主棒孢转化株,转化株在PDA培养基转接6次后仍能在菌丝和分生孢子上发出强烈的红色荧光,生物学测定和致病性测定结果表明该转化株与野生型菌株无显著差异。 展开更多
关键词 黄瓜棒孢叶斑病 多主棒孢 农杆菌介导法 RFP
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农杆菌介导的天绿香遗传转化影响因素的研究 被引量:3
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作者 肖艳华 曾幼玲 +1 位作者 兰海燕 张富春 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期564-567,573,共5页
通过农杆菌介导的方法将新疆准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白基因Mpafp149导入天绿香中,对影响农杆菌转化频率的各种因素进行了研究。结果表明农杆菌介导天绿香遗传转化的潮霉素最佳筛选浓度为8mg·L^-1,预培养时间2d,共培养时间2d,菌... 通过农杆菌介导的方法将新疆准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白基因Mpafp149导入天绿香中,对影响农杆菌转化频率的各种因素进行了研究。结果表明农杆菌介导天绿香遗传转化的潮霉素最佳筛选浓度为8mg·L^-1,预培养时间2d,共培养时间2d,菌液浓度OD600为0.2~0.25,浸染时间为8Min时适宜天绿香不定芽的诱导,有利于天绿香转基因植株的获得。通过PCR检测,初步证明外源基因,Mpafp149已整合到天绿香基因组中。 展开更多
关键词 天绿香 昆虫抗冻蛋白基因 农杆菌介导 遗传转化
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异黄酮合成酶基因高表达的大豆转基因愈伤组织的研究 被引量:3
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作者 姜楠 王东 +1 位作者 崔征 郑英秀 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期63-68,共6页
目的获得异黄酮合成酶基因高表达的转基因大豆愈伤组织。方法利用根瘤菌介导的大豆转基因方法,将异黄酮合称酶基因质粒pCAMB IA1301-C IP的T-DNA部分转入大豆基因组中并诱导转基因愈伤。结果利用GUS染色法,确认外源质粒片段基本表达良好... 目的获得异黄酮合成酶基因高表达的转基因大豆愈伤组织。方法利用根瘤菌介导的大豆转基因方法,将异黄酮合称酶基因质粒pCAMB IA1301-C IP的T-DNA部分转入大豆基因组中并诱导转基因愈伤。结果利用GUS染色法,确认外源质粒片段基本表达良好;利用PCR及反转录PCR(RT-PCR)确定外源基因片段的插入及IFS基因的表达情况良好。结论利用根瘤菌介导的转基因体系,可将外源异黄酮合成酶基因转入大豆基因组中并实现其表达,可为开发利用大豆异黄酮,以及为大豆异黄酮生物合成与调控研究提供依据。 展开更多
关键词 异黄酮合成酶基因 PCR RT-PCR 根瘤菌介导 大豆转基因 GUS染色法
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多抗转基因马铃薯植株的获得及农杆菌介导试管薯遗传转化体系优化 被引量:3
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作者 齐恩芳 贾小霞 +3 位作者 刘石 陈晓艳 黄伟 刘世海 《甘肃农业科技》 2020年第11期1-6,共6页
以马铃薯品种陇薯11号试管薯为受体材料,通过农杆菌介导法,将PVX、PVS、PVY和PLRV 4种病毒CP融合基因导入马铃薯,并对影响遗传转化的因素进行了优化。结果表明,薯片分化和生根阶段的选择压分别为Kan 50、75 mg/L,薯片分化和生根阶段有... 以马铃薯品种陇薯11号试管薯为受体材料,通过农杆菌介导法,将PVX、PVS、PVY和PLRV 4种病毒CP融合基因导入马铃薯,并对影响遗传转化的因素进行了优化。结果表明,薯片分化和生根阶段的选择压分别为Kan 50、75 mg/L,薯片分化和生根阶段有效抑菌浓度分别为Cb 500、200 mg/L,农杆菌活化时间为4.5 h、侵染时间为7 min、共培养时间为2 d时利于遗传转化。通过该体系将4种病毒CP融合基因导入马铃薯,获得了具卡那霉素抗性的转化植株,经PCR检测,外源基因已导入马铃薯基因组中。 展开更多
关键词 马铃薯 试管薯 农杆菌介导 遗传转化
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