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甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2 EGF片段多克隆抗体的制备及鉴定 被引量:1
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作者 张培星 李涓 +1 位作者 窦倩倩 贾晓晖 《微生物学免疫学进展》 2018年第2期15-19,共5页
目的制备甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2(MBL-associated serine protease-2,MASP-2)EGF功能区蛋白的多克隆抗体并进行鉴定,为后续研究奠定基础。方法利用带有EGF基因片段的p GEX-6P-2原核载体诱导表达GST-EGF融合蛋白,并采用商品... 目的制备甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2(MBL-associated serine protease-2,MASP-2)EGF功能区蛋白的多克隆抗体并进行鉴定,为后续研究奠定基础。方法利用带有EGF基因片段的p GEX-6P-2原核载体诱导表达GST-EGF融合蛋白,并采用商品化GST-Beads进行纯化;将纯化的融合蛋白作为抗原,与弗氏完全佐剂充分混合后,免疫5周龄BALB/c雌性健康小鼠,制备多克隆抗体;利用琼脂双扩散法检测多克隆抗体的效价,并进一步应用Western blot鉴定多克隆抗体的特异性及效价。结果成功表达并纯化EGF蛋白,以此成功制备出特异性强的GST-EGF融合蛋白的多克隆抗体,与其他蛋白无交叉反应;琼脂双扩散法检测的EGF抗体效价为1∶8;Western blot检测的EGF抗体效价大于1∶2 000。结论成功制备出具有特异性强且效价高的GST-EGF蛋白的多克隆抗体。 展开更多
关键词 甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2 表皮生长因子功能区 多克隆抗体 琼脂双扩散法 免疫印迹
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改进的滤膜—ELISA法鉴定单克隆抗体Ig类型、亚类的研究 被引量:2
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作者 林芳清 阚兵 +2 位作者 王雅静 刘佩娜 胡孝素 《地方病通报》 1989年第3期25-28,共4页
本文报道一种改进的硝化纤维滤膜—ELISA法(简称滤膜—ELISA),用以鉴定杂交瘤细胞培养上清McAbIg类型、其敏感度高于传统的琼脂双扩法(20倍左右),10株杂交瘤细胞中有3株的上清经琼脂双扩法未能检测出McAbIg类型者,均由滤膜—ELISA法作... 本文报道一种改进的硝化纤维滤膜—ELISA法(简称滤膜—ELISA),用以鉴定杂交瘤细胞培养上清McAbIg类型、其敏感度高于传统的琼脂双扩法(20倍左右),10株杂交瘤细胞中有3株的上清经琼脂双扩法未能检测出McAbIg类型者,均由滤膜—ELISA法作出鉴定。其中McAb2H_6-E_3经双扩法检测7次均为阴性反应(包括浓缩10x~40x),而用滤膜—ELISA,上清原液(1x)即鉴定出为IgG_2b亚型。经不同浓缩倍数重复12次试验,结果一致。其余7株两种方法检测结果也完全相符。说明滤膜—ELISA法的优点弥补了琼脂双扩法敏感性不高的不足之处,本法还具有节省标准抗血清的特点。 展开更多
关键词 滤膜 单克隆抗体 杂交瘤 ELISA
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半抗原乙酰胆碱诱发抗体产生的时间规律
3
作者 王林秀 鲍忠祈 王晶 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 1989年第1期15-17,共3页
本文报道了半抗原乙酰胆碱免疫家兔产生抗体的最佳时间.与载体蛋白质不同,是在末次加强免疫后30~40天,而不是文献报道的7~14天.
关键词 乙酰胆碱抗体 [~3H]ACh结合率 琼脂双扩试验
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在琼脂双向扩散中植物病毒非特异带的产生和消除
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作者 周履谦 薛翠峰 孙富林 《病毒学杂志》 CSCD 1989年第1期109-112,共4页
检测植物病毒,通常采用琼脂双向扩散、对流免疫电泳和酶联免疫吸附测定(ELIsA)等三种方法,而在研究一些植物病毒之间的亲缘关系方面,琼脂双向扩散则能提供其他方法所不能提供的免疫学图谱。我们在做琼脂双向扩散时发现,植物病毒的某些... 检测植物病毒,通常采用琼脂双向扩散、对流免疫电泳和酶联免疫吸附测定(ELIsA)等三种方法,而在研究一些植物病毒之间的亲缘关系方面,琼脂双向扩散则能提供其他方法所不能提供的免疫学图谱。我们在做琼脂双向扩散时发现,植物病毒的某些寄主与提纯病毒时所用磷酸盐缓冲液之间常能形成非特异带。本文报道非特异带的干扰现象及其消除方法。 展开更多
关键词 琼脂双扩散 植物病毒 非特异带
原文传递
琼脂凝胶双扩散试验诊断旋毛虫病的研究 被引量:1
5
作者 王中全 崔晶 +3 位作者 晋雪香 李焕清 武烽 毛福荣 《河南医学研究》 CAS 1993年第2期138-140,共3页
本文应用琼脂凝胶双扩散试验检测旋毛虫实验感染的家兔及大白鼠血清,抗体阳性率分别为100%(8/8)和84.62%(11/13),检测旋毛虫病人血清45份,抗体阳性率为91.11%(41/45),且与丝虫、肝吸虫、囊虫及正常人血清均无交叉反应.只有1例肺吸虫病... 本文应用琼脂凝胶双扩散试验检测旋毛虫实验感染的家兔及大白鼠血清,抗体阳性率分别为100%(8/8)和84.62%(11/13),检测旋毛虫病人血清45份,抗体阳性率为91.11%(41/45),且与丝虫、肝吸虫、囊虫及正常人血清均无交叉反应.只有1例肺吸虫病人呈现假阳性反应。此外,旋毛虫病人经丙硫咪唑治疗后可提高旋毛虫抗体的检出率。该试验诊断旋毛虫病具有较高的敏感性和特异性,方法简便,可在基层单位应用。 展开更多
关键词 旋毛虫病 免疫诊断 琼脂凝胶双扩散试验 抗旋毛虫抗体 交叉反应
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