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补阳还五汤四类有效部位对大鼠脑缺血再灌注后Caspase表达的作用 被引量：18
1
作者 陈瑞芬 邓常青 +1 位作者 陈北阳 李花 《中医药导报》 2009年第6期4-8,共5页
目的:研究大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑组织半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase-1、Caspase-3)蛋白表达的变化,探讨补阳还五汤四类有效部位对它的影响。方法:采用线栓法,建立大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)后脑缺血再灌注模型。将SD大鼠随... 目的:研究大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑组织半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase-1、Caspase-3)蛋白表达的变化,探讨补阳还五汤四类有效部位对它的影响。方法:采用线栓法,建立大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)后脑缺血再灌注模型。将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、生物碱组、苷组、苷元组、多糖组和尼莫地平对照组,采用免疫组化法测定脑组织Caspase-1、Caspase-3蛋白表达的变化。结果:脑缺血2 h再灌注46 h后,在脉络膜可以见到Caspase-1表达增强,生物碱、苷、多糖、苷元可以抑制Caspase-1表达;在海马区、皮质区和髓质区均可见到Caspase-3蛋白表达增强,生物碱、苷、苷元和尼莫地平可以抑制Caspase-3表达。结论:补阳还五汤具有抗大鼠脑缺血再灌注损伤的作用,生物碱、苷、多糖和苷元可能为其抗缺血性脑损伤的主要物质基础,其作用机制可能与抑制Caspase-1、Caspase-3蛋白的表达,拮抗脑缺血后神经元凋亡有关。 展开更多
关键词 脑缺血 补阳还五汤 有效部位 半胱氨酰天冬氨酸蛋白酶
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太子参抗心肌细胞缺氧/复氧损伤的活性部位筛选及作用机制研究 被引量：17
2
作者 杨馨 张金娟 +3 位作者 宛蕾 邓连力 廖尚高 何迅 《中国药房》 CAS 北大核心 2018年第14期1958-1964,共7页
目的:筛选太子参抗心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的活性部位,并探讨其作用机制。方法:太子参药材水提物经D101大孔吸附树脂柱以水-乙醇梯度洗脱,得水洗脱部位(Fr.A)、30%乙醇洗脱部位(Fr.B)、50%乙醇洗脱部位(Fr.C)、95%乙醇洗脱部位(Fr.D... 目的:筛选太子参抗心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的活性部位,并探讨其作用机制。方法:太子参药材水提物经D101大孔吸附树脂柱以水-乙醇梯度洗脱,得水洗脱部位(Fr.A)、30%乙醇洗脱部位(Fr.B)、50%乙醇洗脱部位(Fr.C)、95%乙醇洗脱部位(Fr.D)。采用化学缺氧法以连二亚硫酸钠复制大鼠H9c2心肌细胞H/R损伤模型,采用MTS法检测经太子参各部位低、中、高剂量(Fr.A、Fr.B、Fr.C低、中、高剂量均分别为750、1 500、3 000 mg/L,Fr.D低、中、高剂量分别为5、10、20 mg/L)预处理后的细胞存活率,筛选活性最强部位。分别采用微板法、硫代巴比妥酸比色法、WST-1法测定经太子参活性最强部位低、中、高剂量预处理后细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性以及细胞内丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,采用流式细胞术检测细胞凋亡率,采用蛋白质印迹法检测细胞胱天蛋白酶3(Caspase-3)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达水平。结果:经4个部位预处理后,Fr.A高剂量组,Fr.B高剂量组,Fr.C各剂量组的细胞存活率均较模型组显著升高(P<0.05或P<0.01),且以Fr.C的活性最强。经Fr.C预处理后,各剂量组细胞培养液中LDH活性,中、高剂量组细胞内MDA含量、细胞凋亡率及Caspase-3和Bax蛋白的表达量均较模型组显著下降(P<0.05或P<0.01);高剂量组细胞内SOD活性以及中、高剂量组细胞Bcl-2蛋白的表达量均较模型组显著升高(P<0.05)。结论:太子参Fr.A、Fr.B、Fr.C部位均具有抗心肌细胞H/R损伤的作用,其中以Fr.C的活性最强;Fr.C抗心肌细胞H/R损伤作用可能与其改善细胞的氧化应激状态,提高细胞清除氧自由基的能力,降低细胞脂质过氧化程度,抑制细胞凋亡,上调Bcl-2蛋白表达以及下调Caspase-3、Bax蛋白表达有关。 展开更多
关键词 太子参 活性部位 大鼠H9c2心肌细胞 缺氧/复氧损伤 氧化应激 细胞凋亡 胱天蛋白酶3 B细胞淋巴瘤/白血病-2 Bcl-2相关X蛋白
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低氧预适应对缺血再灌注损伤大鼠视网膜促红细胞生成素及活性Caspase-3蛋白表达的影响 被引量：12
3
作者 赵岩松 赵堪兴 +3 位作者 王晓莉 牟青杰 王丽 毕学辉 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2013年第1期5-8,共4页
目的观察低氧预适应(hypoxic preconditioning,HPC)后视网膜缺血再灌注损伤(retinal ischemia-reperfusion injury,RIRI)大鼠视网膜促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)蛋白及活性Caspase-3蛋白表达的动态变化,探讨HPC预防RIRI的机制,为... 目的观察低氧预适应(hypoxic preconditioning,HPC)后视网膜缺血再灌注损伤(retinal ischemia-reperfusion injury,RIRI)大鼠视网膜促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)蛋白及活性Caspase-3蛋白表达的动态变化,探讨HPC预防RIRI的机制,为RIRI的防治提供有效的治疗方案。方法取健康Sprague Dawley成年大鼠随机分为正常对照组(CON组),RIRI组与HPC+缺血再灌注损伤组(HPC组,HPC后采用高眼压法制成RIRI模型),每组根据RIRI时间分为6h、12h、24h及72h4个亚组。采用免疫组织化学法动态观察HPC对RIRI大鼠视网膜细胞EPO蛋白、活性Caspase-3蛋白表达的影响。结果 CON组大鼠视网膜仅见极少量的EPO+细胞;RIRI后6h,HPC组EPO+细胞数开始增加;RIRI后12h,HPC组EPO+细胞数(171±21)mm-2进一步增加,显著高于RIRI组[(149±20)mm-2,P<0.05];RIRI后24h,HPC组EPO+细胞数(287±24)mm-2达较高水平并显著高于RIRI组[(238±22)mm-2,P<0.01];RIRI后72h,HPC组EPO+细胞数开始下降,但仍显著高于RIRI组(P<0.05)。RIRI后6h,RIRI组活性Caspase-3+细胞数(60±5)mm-2开始增加,显著多于HPC组[(53±5)mm-2,P<0.05];RIRI后12h,RIRI组与HPC组活性Caspase-3+细胞数进一步增加,HPC组活性Caspase-3+细胞显著少于RIRI组(P<0.01);RIRI后24h,RIRI组与HPC组活性Caspase-3+细胞数达较高水平,HPC组活性Caspase-3+细胞数(578±26)mm-2显著少于RIRI组[(624±25)mm-2,P<0.01];RIRI后72h,HPC组与RIRI组活性Caspase-3+细胞数均开始下降,HPC组Caspase-3+细胞数仍少于RIRI组(P<0.05)。结论 HPC可促进RIRI大鼠视网膜细胞EPO蛋白的表达,减轻活性Caspase-3蛋白的表达,从而减轻细胞凋亡,具有神经保护作用。 展开更多
关键词 视网膜缺血再灌注损伤 低氧预适应 促红细胞生成素 活性caspase-3蛋白
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N-乙酰-5-羟色胺(NAS)对视网膜缺血再灌注损伤(RIRI)大鼠视网膜活性Caspase-3、Bcl-2、Bax表达的影响 被引量：12
4
作者 张婷婷 赵岩松 +4 位作者 王海宇 杨明 程丹丹 牟青杰 王晓莉 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2017年第8期701-704,708,共5页
目的探讨N-乙酰-5-羟色胺(N-acetylserotonin,NAS)对视网膜缺血再灌注损伤(retinal ischemia-reperfusion injury,RIRI)大鼠视网膜活性Caspase-3、Bcl-2、Bax表达的影响。方法取健康成年Sprague-Dawley大鼠66只,采用随机数字表法随机分... 目的探讨N-乙酰-5-羟色胺(N-acetylserotonin,NAS)对视网膜缺血再灌注损伤(retinal ischemia-reperfusion injury,RIRI)大鼠视网膜活性Caspase-3、Bcl-2、Bax表达的影响。方法取健康成年Sprague-Dawley大鼠66只,采用随机数字表法随机分为正常对照组(6只)、缺血再灌注组(30只)与药物组(30只),药物组于造模前30 min腹腔注射5 mg·kg-1NAS,缺血再灌注组腹腔注射同等剂量的生理盐水,缺血再灌注组与药物组按RIRI后时间,分为6 h、12 h、24 h、48 h、72 h五个亚组。采用HE染色法观察各组视网膜形态学变化,免疫组织化学染色检测各组大鼠视网膜活性Caspase-3、Bcl-2及Bax蛋白表达。结果HE染色显示正常对照组大鼠视网膜结构清晰,各层细胞排列紧密;缺血再灌注组大鼠RIRI后6 h、12 h视网膜各层高度水肿,24 h后水肿逐渐减轻,神经节细胞逐渐减少,分布较紊乱,随着时间延长,视网膜神经节细胞大片缺失;药物组6 h、12 h较缺血再灌注组细胞水肿明显减轻,24 h、48 h、72 h组较缺血再灌注组细胞排列规整,神经节细胞数量减少减轻。缺血再灌注组视网膜活性Caspase-3阳性细胞数在灌注后6 h开始表达增加,阳性细胞数为(561.15±37.19)个·mm^(-2),24 h达到较高水平,阳性细胞数为(1522.61±84.36)个·mm^(-2),随后逐渐下降,药物组视网膜各时间点活性Caspase-3阳性细胞数均显著少于缺血再灌注组,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。正常对照组视网膜可见大量Bcl-2阳性细胞;缺血再灌注组RIRI后6 h Bcl-2阳性细胞开始下降,12 h后继续减少,24 h降至较低水平;药物组各时间点Bcl-2阳性细胞数均显著多于缺血再灌注组,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。正常对照组大鼠视网膜几乎未见Bax阳性细胞;缺血再灌注组RIRI后6 h神经节细胞层及内核层可见Bax阳性细胞,24 h达到较高水平,48 h开始下降;药物组各时间点Bax阳性细胞均显著少于缺血再灌注组,差异均有� 展开更多
关键词 N-乙酰-5-羟色胺 视网膜缺血再灌注损伤 活性caspase-3 BCL-2 BAX
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筋脉通含药血清对高糖培养施万细胞8-羟基脱氧鸟苷和活化的caspase-3表达的影响 被引量：11
5
作者 朴元林 梁晓春 +3 位作者 赵丽 张宏 李伯武 黄文智 《医学研究杂志》 2011年第10期35-39,共5页
目的探讨筋脉通含药血清对高糖培养施万细胞8-羟基脱氧鸟苷(8-hydoxydeoxyguanosine,8-OHdG)水平及活化的半胱氨酸天冬氨酸酶3(cysteine aspartase-3,caspase-3,)(17kDa)蛋白及mRNA表达的影响。方法将体外培养的施万细胞分为高糖组、筋... 目的探讨筋脉通含药血清对高糖培养施万细胞8-羟基脱氧鸟苷(8-hydoxydeoxyguanosine,8-OHdG)水平及活化的半胱氨酸天冬氨酸酶3(cysteine aspartase-3,caspase-3,)(17kDa)蛋白及mRNA表达的影响。方法将体外培养的施万细胞分为高糖组、筋脉通组(加入筋脉通含药血清)、维生素C组(加入维生素C含药血清)及正常对照组,采用酶联免疫吸附法检测施万细胞上清液中8-OHdG的分泌量,免疫荧光法检测活化的caspase-3(17kDa)蛋白表达,实时荧光定量PCR法检测活化的caspase-3(17kDa)mRNA的表达。结果与正常对照组比较,高糖培养施万细胞上清液中8-OHdG的分泌量及细胞内活化的caspase-3(17kDa)蛋白和mRNA表达均明显升高(P<0.01);与高糖组比较,筋脉通组细胞上清液中8-OHdG的分泌量及细胞内活化的caspase-3(17kDa)蛋白和mRNA表达明显降低(P<0.01)。结论筋脉通含药血清可改善高糖导致的施万细胞DNA氧化损伤和细胞凋亡,提示筋脉通可能改善糖尿病神经病变之氧化损伤及细胞凋亡。 展开更多
关键词 施万细胞 8-羟基脱氧鸟苷 caspase-3 筋脉通
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TLR_4/P38/JNK信号通路在海马神经元凋亡中的作用 被引量：11
6
作者 蒋伟 张弦 周爱玲 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2016年第6期571-576,共6页
目的:探讨Toll样受体4(TLR4)/P38/JNK信号通路在海马神经元凋亡中的作用及其机制,为神经退行性疾病(ND)的发病机制与防治研究提供新的实验依据。方法:采用体外培养7 d的新生大鼠海马神经元,免疫荧光双标法鉴定海马神经元纯度。用TLR4配... 目的:探讨Toll样受体4(TLR4)/P38/JNK信号通路在海马神经元凋亡中的作用及其机制,为神经退行性疾病(ND)的发病机制与防治研究提供新的实验依据。方法:采用体外培养7 d的新生大鼠海马神经元,免疫荧光双标法鉴定海马神经元纯度。用TLR4配体脂多糖(LPS)或TLR4抗体预处理海马神经元,以激活或阻断TLR4的作用。实验1设正常对照组、LPS组及TLR4抗体+LPS组;免疫荧光法检测P-P38,P-JNK的表达。实验2分为6组:正常对照组,LPS组,TLR4抗体+LPS组,SB202190(抑制P38)+LPS组,SP600125(抑制JNK)+LPS组,PD98059(抑制ERK)+LPS组;分别用TLR4抗体、P38、JNK及ERK的抑制剂预处理海马神经元后再给以LPS刺激24 h,Western blot法检测Bcl-2,Bax,Active-caspase-3的表达变化;流式细胞术检测海马神经元凋亡率。结果:LPS组海马神经元P-P38、P-JNK的表达明显高于正常对照组(P<0.01),TLR4抗体+LPS组P-P38,P-JNK表达显著低于LPS组(P<0.01)。与正常对照组相比,LPS组海马神经元Bcl-2/Bax表达减少、Active-caspase-3表达增加,海马神经元凋亡率增加(P<0.01)。而TLR4抗体+LPS组、SB202190+LPS组、SP600125+LPS组Bcl-2/Bax显著高于LPS组、Active caspase-3显著低于LPS组(P<0.01),海马神经元凋亡率显著低于LPS组(P<0.05,P<0.01)。PD98059+LPS组与LPS组海马神经元凋亡率无明显差异。结论:1海马神经元中有TLR4介导的P38/JNK信号通路。2海马神经元TLR4激活后,P-P38、P-JNK表达增加,使Bcl-2/Bax的比例降低和Active-caspase-3表达增加,从而促进海马神经元的凋亡。海马神经元凋亡过程中有TLR4介导的P38/JNK信号通路的参与。 展开更多
关键词 海马神经元 TLR4/P38/JNK信号通路 BCL-2/BAX 凋亡蛋白酶-3 细胞凋亡 脂多糖
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益肾降浊冲剂对慢性肾功能衰竭肾脏的保护作用及其对肾脏自由基、肾小管Caspase-3和Caspase-9表达的影响 被引量：9
7
作者 郑敏麟 骆丹岚 阮诗玮 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期3460-3464,共5页
目的:探讨益肾降浊冲剂减缓慢性肾功能衰竭(CRF)的恶化进程是否通过减少活性氧、并抑制线粒体介导的肾小管细胞凋亡实现的。方法:采用5/6肾切除大鼠CRF模型,随机分为模型组、大黄组及益肾降浊冲剂大、小剂量组,观察肾脏病理改变、测定... 目的:探讨益肾降浊冲剂减缓慢性肾功能衰竭(CRF)的恶化进程是否通过减少活性氧、并抑制线粒体介导的肾小管细胞凋亡实现的。方法:采用5/6肾切除大鼠CRF模型,随机分为模型组、大黄组及益肾降浊冲剂大、小剂量组,观察肾脏病理改变、测定各组尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的表达水平,以及利用免疫组化观察肾脏组织的Caspase-3和Caspase-9的表达情况。结果:大黄素组和益肾降浊冲剂大剂量组BUN、Scr、TG、MDA的表达水平和Caspase-3与Caspase-9的IOD值均显著低于模型组(P<0.01),SOD显著高于模型组(P<0.01);HE染色下观察肾脏细胞,模型组的病变最重;益肾降浊冲剂大剂量组的病变最轻;大鼠肾组织自由基的水平与Scr、BUN呈显著正相关,并与肾脏病理、肾小管上皮细胞Caspase-3和Caspase-9的表达量相一致。结论:益肾降浊冲剂可能通过减少和清除产生的活性氧保护肾小管线粒体,从而最大限度减少肾小管的细胞凋亡,起到治疗CRF的作用。 展开更多
关键词 益肾降浊冲剂 慢性肾功能衰竭 肾小管 活性氧 线粒体 caspase-3 caspase-9
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两种不同褪黑素治疗途径对局灶性脑缺血大鼠行为学及组织病理学的影响 被引量：6
8
作者 程丹丹 陈岚芬 +4 位作者 陈伟 李振 李光祖 王海宇 王晓莉 《中华行为医学与脑科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期310-315,共6页
目的探讨腹腔与尾静脉注射褪黑素（melatonin，MT）两种治疗途径对局灶性脑缺血大鼠行为学、组织病理学及髓鞘碱性蛋白（MBP）、活性半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（caspase-3）蛋白表达的影响。方法84只成年雄性Sprangue—Dawley大鼠随机... 目的探讨腹腔与尾静脉注射褪黑素（melatonin，MT）两种治疗途径对局灶性脑缺血大鼠行为学、组织病理学及髓鞘碱性蛋白（MBP）、活性半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（caspase-3）蛋白表达的影响。方法84只成年雄性Sprangue—Dawley大鼠随机数字表法分为正常对照组（CON组，n=12）、大脑中动脉栓塞组（MCAO组，n=24）、腹腔注射组（n=24）及静脉注射组（n=24）。缺血再灌注（ischemia reperfusion，IR）损伤后24h，Morris水迷宫测试行为学改变；IR后7d行MBP免疫组化法及HE染色法观察纹状体髓鞘的变化及海马CA1区组织病理学变化。IR后24h、72h、7d行免疫组化法观察海马CA1区活性caspase-3蛋白的变化。结果各时间点静脉注射组Morns水迷宫平均逃避潜伏期均短于腹腔注射组，且二者均低于MCAO组，静脉注射组目标象限时间百分比均高于腹腔注射组，且二者均显著高于MCAO组（均P〈O．01）；IR后7d，MCAO组细胞形态失常，排列稀疏、紊乱；静脉及腹腔组海马CA1区细胞损伤明显减轻；静脉注射组MBP平均吸光度（105．60±4．04）显著高于MCAO组（95．60±2．07）及腹腔注射组（98．00±4．18），差异具有统计学意义（均P〈0．01）。各个时间点静脉注射组活性caspase-3阳性细胞数[（116．93±12．58）个／mm2；（130．16±21．22）个／mm2、（88．25±7．80）个／mm2]均少于腹腔注射组[（156．64±32．54）个／mm2；（176．49±17．44）个／mm2、（127．96±16．73）个／mm2]，差异均具有统计学意义（均P〈0．05），IR后24h及72h，二者活性caspase-3阳性细胞数均显著少于MCAO组[（273．56±32．54）个／mm2；（288．63±35．17）个/mm2]（均P〈0．01）。结论腹腔及静脉MT治疗均能显著改善局灶性脑缺血大鼠行为学并减轻组织病理学损伤及纹状体白质损伤，减少海马CA1区细胞凋亡，静脉途径治疗效果优于腹腔途径。 展开更多
关键词 MORRIS水迷宫 脑缺血 褪黑素 活性caspase-3 髓鞘碱性蛋白 大鼠
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具有线粒体靶向性的雷公藤甲素TPP-PEG-PCL脂质体的制备及其促肝肿瘤细胞凋亡研究 被引量：5
9
作者 王锋 张超 郑栓 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2021年第24期7473-7483,共11页
目的成功制备雷公藤甲素(3-丙羧基)三苯基溴化膦(TPP)-聚乙二醇-b-聚己内脂(PEG-PCL)脂质体(Tr@TPP/Lip),评价其靶向性及促肝肿瘤细胞凋亡效果。方法采用正交试验优选Tr@TPP/Lip的制备工艺,再研究该载药系统的粒径、Zeta电位、载药量、... 目的成功制备雷公藤甲素(3-丙羧基)三苯基溴化膦(TPP)-聚乙二醇-b-聚己内脂(PEG-PCL)脂质体(Tr@TPP/Lip),评价其靶向性及促肝肿瘤细胞凋亡效果。方法采用正交试验优选Tr@TPP/Lip的制备工艺,再研究该载药系统的粒径、Zeta电位、载药量、包封率和多分散系数及透射电镜微观形态,评价Tr@TPP/Lip的稳定性、溶血性、释放情况;采用荧光试验,研究脂质体与肝肿瘤细胞的融合情况、线粒体靶向性和肝脏靶向性;在等剂量给药条件下,评价Tr@TPP/Lip促肝癌细胞凋亡效果。结果正交试验优选的Tr@TPP/Lip粒径为(113.5±17.6)nm,Zeta电位(12.6±0.7)m V,包封率为(71.3±3.2)%,载药量为(3.9±1.1)%,多分散系数为0.12±0.04;透射电子显微镜图片显示Tr@TPP/Lip呈规则圆球形,该脂质体稳定性良好,具有较小的溶血率和良好的缓释药物性能;荧光试验结果显示,TPP阳离子能促进脂质体与肿瘤细胞的融合,并靶向线粒体,还能提高药物在肝肿瘤部位的靶向和滞留效果;细胞药效结果显示,Tr@TPP/Lip具有良好的促肝肿瘤细胞凋亡效果,能明显降低线粒体膜Zeta电位、增加细胞内活性氧水平和Caspase-3的释放,显著增加促凋亡蛋白Bcl-2、减少抗凋亡Bax蛋白的表达,这些细胞凋亡试验结果均明显优于雷公藤甲素普通脂质体和雷公藤甲素。结论 Tr@TPP/Lip具有较好的线粒体靶向功能,能增强药物促肝肿瘤细胞凋亡效果。 展开更多
关键词 雷公藤甲素 正交试验 细胞凋亡 TPP-PEG-PCL 线粒体靶向 脂质体 肝肿瘤 溶血性 缓释 活性氧 caspase-3 Bcl-2 Bax
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淫羊藿苷抗自发性高血压大鼠肾小管上皮细胞凋亡的作用 被引量：5
10
作者 朱玲 王颖婉 +3 位作者 李叶丽 钱志强 杨华 杨丹莉 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期537-541,共5页
目的观察淫羊藿苷(icariin,Ica)对自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)肾小管上皮细胞凋亡的影响,探讨其可能的机制。方法将21只14周龄♂SHR随机分为模型组,Ica低、高剂量组(20、40 mg·kg-1,ig,bid,至26周龄),1... 目的观察淫羊藿苷(icariin,Ica)对自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)肾小管上皮细胞凋亡的影响,探讨其可能的机制。方法将21只14周龄♂SHR随机分为模型组,Ica低、高剂量组(20、40 mg·kg-1,ig,bid,至26周龄),14周龄♂同源京都大鼠(WKY)为对照组,各组动物数均为7只。WKY组、模型组同期灌胃等体积双蒸水。采用HE染色观察肾脏病理学变化;原位缺口末端标记法检测肾小管上皮细胞凋亡;real time RT-PCR法检测肾Bok、Bcl-2、Bax mRNA水平;Western blot法检测肾Bcl-2、Bax、Active caspase-3蛋白表达。结果与WKY组相比,模型组肾小球囊腔狭窄且不规则,肾小球系膜基质增多,细胞排列紊乱,毛细血管扩张充血,个别肾小球出现皱缩,肾小管上皮细胞水肿、管腔狭窄;肾小管上皮细胞凋亡明显,Bok和Bax mRNA水平、Bax和Active caspase-3蛋白表达均明显上调,Bcl-2 mRNA和蛋白的水平明显下调(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,Ica-L组、Ica-H组肾小球囊腔增宽,肾小球系膜基质增生减少,细胞排列紊乱有所改善,毛细血管扩张充血、肾小管管腔狭窄均减轻;肾小管上皮细胞凋亡以及Bok、Bax mRNA水平和Bax蛋白表达均明显下调,IcaH组肾Bcl-2 mRNA水平和蛋白表达明显上调,Active caspase-3蛋白表达明显下调(P<0.05或P<0.01)。结论淫羊藿苷可抑制SHR肾小管上皮细胞凋亡,其机制可能与下调Bax、Active caspase-3、Bok,上调Bcl-2表达有关。 展开更多
关键词 淫羊藿苷 自发性高血压大鼠 凋亡 BCL-2 BAX Ac-tive caspase-3
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促卵泡刺激素对小鼠卵巢玻璃化冻存的抗凋亡作用 被引量：3
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作者 陈杰 王燕蓉 +1 位作者 常青 于泊洋 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期540-542,共3页
目的:观察小鼠卵巢组织促卵泡刺激素(FSH)在小鼠卵巢组织玻璃化冻存过程中的抗凋亡作用。方法:将4周龄C57BL/6J雌性小鼠卵巢组织,分为新鲜对照组(CG)、玻璃化冻存对照组(VCG)、0. 3 IU/ml FSH全程干预玻璃化冻存组(OG-FSH),玻璃化冻存... 目的:观察小鼠卵巢组织促卵泡刺激素(FSH)在小鼠卵巢组织玻璃化冻存过程中的抗凋亡作用。方法:将4周龄C57BL/6J雌性小鼠卵巢组织,分为新鲜对照组(CG)、玻璃化冻存对照组(VCG)、0. 3 IU/ml FSH全程干预玻璃化冻存组(OG-FSH),玻璃化冻存条件为小鼠卵巢入培养液在37℃二氧化碳培养箱培养60 min,接着入1.5 mol/L乙二醇中预渗透平衡8 min,再移入EG5.5-30玻璃化液渗透平衡3.5 min,之后投入-196℃的液氮罐中保存1 d,全过程在22～24℃下进行。每组20枚卵巢,10枚进行HE染色后的正常卵泡百分比计数,10枚进行免疫组织化学法观察。结果:与对照组(CG)比较,玻璃化冻存对照组(VCG)正常卵泡百分比显著降低,active caspase-3的表达量显著升高(P<0.05);与玻璃化冻存对照组(VCG)比较,0.3 IU/ml FSH全程干预玻璃化冻存组(OG-FSH)组的正常卵泡百分比明显升高,active caspase-3的表达量显著降低(P<0.05)。结论:小鼠卵巢玻璃化冻存全程添加FSH干预可有效抵抗凋亡执行蛋白active caspase-3的表达,有利于卵巢组织形态结构的保护。 展开更多
关键词 小鼠 卵巢 FSH 玻璃化冻存 active caspase-3
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追风透骨胶囊对脊髓损伤模型大鼠脊髓神经细胞凋亡的影响及其机制研究 被引量：2
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作者 黄旭阳 王舒涵 +1 位作者 韩冬 李润辉 《实用药物与临床》 CAS 2018年第10期1105-1108,共4页
目的观察追风透骨胶囊用于脊髓损伤模型大鼠的最优浓度及其对神经元的保护作用,探讨追风透骨胶囊降低损伤后神经元的炎症与凋亡水平的具体机制。方法将健康SD雌性大鼠随机分成3组,分别为脊髓损伤组、治疗组、假手术组。脊髓损伤组:应用... 目的观察追风透骨胶囊用于脊髓损伤模型大鼠的最优浓度及其对神经元的保护作用,探讨追风透骨胶囊降低损伤后神经元的炎症与凋亡水平的具体机制。方法将健康SD雌性大鼠随机分成3组,分别为脊髓损伤组、治疗组、假手术组。脊髓损伤组:应用经典的Allen's法制造损伤模型。治疗组:腹腔注射20 mg/kg追风透骨胶囊溶液。造模成功后,于术后第1、3、7、14、28天分别应用行为学试验(Basso、Beattie、Bresnahan locomotor rating scale,BBB评分)检测运动功能恢复情况。随后用尼式染色观察神经脊髓前角运动神经元数量。应用Western blot观察β-catenin、LRP-6、active Caspase-3表达。结果与脊髓损伤组比较,治疗组BBB评分在第7、14、28天明显升高(P <0.05,P <0.01);同时,与脊髓损伤组比较,治疗组β-catenin、LRP-6蛋白表达被激活(P <0.01),active Caspase-3表达水平明显降低(P <0.01)。结论脊髓损伤后,追风透骨胶囊可能通过β-catenin信号通路抑制损伤神经元产生的凋亡,从而对脊髓神经元产生保护作用。 展开更多
关键词 脊髓损伤 追风透骨胶囊 Β-CATENIN LRP-6 凋亡 active caspase-3
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大蒜素对D-半乳糖致衰老小鼠卵巢FSHR、LHR和active Caspase-3蛋白表达的影响 被引量：1
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作者 于洋 刘师兵 +1 位作者 李松岩 徐冶 《吉林医药学院学报》 2016年第5期321-324,共4页
目的观察大蒜素对D-半乳糖所致的雌性衰老小鼠促卵泡素受体(FSHR)与促黄体素受体(LHR)表达水平的影响,结合凋亡相关蛋白active Caspase-3表达变化初步探讨原因。方法 SPF级雌性昆明小鼠40只,随机分为对照组、模型组、大蒜素组和维生素C... 目的观察大蒜素对D-半乳糖所致的雌性衰老小鼠促卵泡素受体(FSHR)与促黄体素受体(LHR)表达水平的影响,结合凋亡相关蛋白active Caspase-3表达变化初步探讨原因。方法 SPF级雌性昆明小鼠40只,随机分为对照组、模型组、大蒜素组和维生素C组,每组10只。模型组、大蒜素组和维生素C组小鼠以100 mg/kg体重剂量皮下注射D-半乳糖生理盐水溶液,对照组小鼠注射同体积生理盐水,每日1次,同期大蒜素组以20 mg/kg剂量腹腔注射大蒜素注射液,维生素C组以50 mg/kg剂量腹腔注射维生素C,对照组及模型组腹腔注射同体积生理盐水,共持续6周。给药结束后采集标本,Western blot法检测卵巢组织FSHR与LHR表达水平,免疫荧光法观察active Caspase-3表达变化。结果与对照组相比,模型组FSHR与LHR表达水平明显升高(P<0.05),active Caspase-3表达增强,大蒜素组FSHR与LHR表达水平(与β-actin比较)分别为0.63±0.07和0.82±0.06,较模型组明显下降(P<0.05),active Caspase-3表达亦有减弱趋势。结论大蒜素能下调FSHR与LHR表达水平,提示其一定程度上延缓了D-半乳糖所致小鼠卵巢的衰老,该作用可能与其减少卵巢细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 大蒜素 衰老 卵巢 FSHR LHR active caspase-3
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孕期DEHP暴露对新生大鼠海马神经元凋亡的影响 被引量：1
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作者 张云玲 王晶 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期425-429,共5页
目的:探讨孕鼠DEHP暴露对新生小鼠海马神经元凋亡的影响。方法:SD雌性孕鼠24只,随机分为对照组(Control)、DEHP低剂量组(DEHP-L)、DEHP中剂量组(DEHP-M)和DEHP高剂量组(DEHP-H),通过灌胃方法给予孕鼠不同剂量DEHP进行染毒,通过测量新生... 目的:探讨孕鼠DEHP暴露对新生小鼠海马神经元凋亡的影响。方法:SD雌性孕鼠24只,随机分为对照组(Control)、DEHP低剂量组(DEHP-L)、DEHP中剂量组(DEHP-M)和DEHP高剂量组(DEHP-H),通过灌胃方法给予孕鼠不同剂量DEHP进行染毒,通过测量新生大鼠的体长、尾长和体重,观察孕期DEHP暴露对新生大鼠发育的影响;通过尼氏(Nissl)染色观察仔鼠海马神经元形态和排列方式的变化,通过TUNEL检测新生大鼠海马部位细胞凋亡,通过Western Blot检测新生大鼠海马组织active caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果:与对照组相比,DEHP暴露可导致新生大鼠发育迟缓,海马神经元数量稀少、结构排列紊乱;TUNEL染色检测显示DEHP可导致仔鼠海马细胞凋亡增多(P<0.05);Western Blot检测结果显示DEHP暴露组新生大鼠海马组织active caspase-3和Bax表达增加,Bcl-2表达下降(P<0.05),Bax/Bcl-2比值随着DEHP浓度增加而增加。结论:孕期DEHP暴露会影响子代大鼠发育迟缓、海马细胞凋亡增加。 展开更多
关键词 邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯 海马 凋亡 活性caspase-3 新生大鼠
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Accutase消化传代对人胚胎纹状体来源神经干细胞凋亡的影响
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作者 李婷 王小莉 +4 位作者 宋娟 李晨 张翠英 赵杰 王金胜 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期471-478,共8页
目的:观察人类胚胎纹状体来源神经干细胞(neural stem cells,NSCs)经消化酶accutase消化传代后是否发生了大量细胞凋亡。方法:提取人13~18周自然流产胚胎脑组织纹状体的NSCs,体外形成神经球并培养至3~5代。经消化酶accutase消化后传代,... 目的:观察人类胚胎纹状体来源神经干细胞(neural stem cells,NSCs)经消化酶accutase消化传代后是否发生了大量细胞凋亡。方法:提取人13~18周自然流产胚胎脑组织纹状体的NSCs,体外形成神经球并培养至3~5代。经消化酶accutase消化后传代,运用活性caspase-3染色、TUNEL(Td T-mediated d UTP nick end labeling)染色等方法对多聚甲醛固定的NSCs进行凋亡检测,同时采用Annexin V和Hoechst33342/PI等联合染色方法对活细胞进行凋亡鉴定,以确定NSCs在体外传代后的凋亡情况。结果:在传代后检测的3个时间点(1,24,72 h)中TUNEL染色和活性caspase-3染色均高度重合。传代后1 h,TUNEL和活性caspase-3染色所检测到的凋亡率为20%~25%,传代后24 h增高为75%~80%(P<0.01),而传代后72 h,由于存活下来的细胞开始增殖,所以整体凋亡率降为60%~70%,明显低于24 h(P<0.01)。结论:由人类纹状体来源NSCs形成的神经球,经accutase消化传代后24 h内即发生大量细胞凋亡。对于体外培养的NSCs,抑制其凋亡可能是促使其自我更新和增殖,最终起到提高细胞扩增能力的有效手段。 展开更多
关键词 神经干细胞 神经球 accutase TUNEL 凋亡 活性caspase-3
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不同N-乙酰-5-羟色胺(NAS)给药途径对大鼠视网膜缺血-再灌注损伤的影响
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作者 徐宁 殷慧文 +3 位作者 张宁 刘建晓 王晓莉 赵岩松 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2020年第5期415-419,共5页
目的探讨腹腔与尾静脉注射N-乙酰-5-羟色胺(N-acetylserotonin,NAS)两种给药途径对大鼠视网膜缺血-再灌注损伤(retinal ischemia-reperfusion injury,RIRI)组织病理学、活性半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达及细胞凋亡的影... 目的探讨腹腔与尾静脉注射N-乙酰-5-羟色胺(N-acetylserotonin,NAS)两种给药途径对大鼠视网膜缺血-再灌注损伤(retinal ischemia-reperfusion injury,RIRI)组织病理学、活性半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达及细胞凋亡的影响。方法健康无眼疾成年Sprague-Dawley雄性大鼠54只,采用随机数字表法分为正常对照组(n=6)、RIRI腹腔组(n=12)、RIRI静脉组(n=12)、NAS腹腔组(n=12)和NAS静脉组(n=12),后四组采用升高眼压法建立大鼠RIRI模型。NAS腹腔组、NAS静脉组于建模前30 min分别经腹腔、尾静脉注射NAS(10 mg·kg^-1),RIRI腹腔组、RIRI静脉组于造模前30 min分别经腹腔、尾静脉注射同等剂量的生理盐水。RIRI后24 h,采用免疫组织化学染色检测各组大鼠视网膜中活性Caspase-3的表达,TUNEL染色检测各组视网膜细胞凋亡情况;RIRI后7 d,HE染色观察各组视网膜组织病理学变化。结果HE染色结果示,正常对照组大鼠视网膜各层细胞排列整齐、规则;RIRI后7 d,RIRI腹腔组与RIRI静脉组大鼠视网膜细胞排列稀疏、紊乱,形态不规则,视网膜内层厚度变薄;NAS腹腔组视网膜细胞形态较规则,排列较规整;NAS静脉组视网膜各层形态及细胞排列均趋于正常。NAS静脉组视网膜内层厚度(91.67±1.43)μm显著高于NAS腹腔组(87.80±1.33)μm、RIRI腹腔组(82.37±1.09)μm和RIRI静脉组(82.81±0.90)μm,差异均具有统计学意义(均为P<0.05);且NAS静脉组视网膜神经节细胞数(616.90±79.51)个·mm^-2显著高于NAS腹腔组(529.25±92.05)个·mm^-2、RIRI静脉组(434.42±87.17)个·mm^-2、RIRI腹腔组(390.72±72.12)个·mm^-2,差异均具有统计学意义(均为P<0.05)。免疫组织化学染色结果发现,RIRI后24 h,NAS静脉组活性Caspase-3阳性细胞数(145.01±22.54)个·mm^-2少于NAS腹腔组(221.34±30.84)个·mm^-2,差异具有统计学意义(P<0.05),二者活性Caspase-3阳性细胞数均显著少于RIRI静脉组(380.54±41.25)个·mm^-2和RIRI腹腔组(387. 展开更多
关键词 N-乙酰-5-羟色胺 视网膜缺血-再灌注损伤 活性caspase-3 细胞凋亡 视网膜内层厚度
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蝙蝠葛活性成分对人白血病K562细胞株抗肿瘤作用的研究 被引量：2
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作者 杨万山 孙抒 +1 位作者 汪俊颖 全宗学 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期1547-1548,共2页
目的研究蝙蝠葛活性成分体外对人白血病K562细胞株的抑制增殖和诱导凋亡作用。方法应用MTT法检测蝙蝠葛活性成分对体外培养的人白血病K562细胞株的抑制增殖作用的影响及细胞毒活性;通过倒置显微镜对细胞进行形态学观察;通过免疫细胞化学... 目的研究蝙蝠葛活性成分体外对人白血病K562细胞株的抑制增殖和诱导凋亡作用。方法应用MTT法检测蝙蝠葛活性成分对体外培养的人白血病K562细胞株的抑制增殖作用的影响及细胞毒活性;通过倒置显微镜对细胞进行形态学观察;通过免疫细胞化学S-P法测定凋亡关键效应酶Caspase-9、Caspase-8和Caspase-3的表达情况。结果(1)MTT比色法结果表明,蝙蝠葛活性成分对人白血病K562细胞株的增殖抑制作用呈剂量依赖性(P<0.01);(2)倒置显微镜观察:蝙蝠葛活性成分20μg/ml作用后早期细胞出现凋亡形态学变化:细胞膜鼓泡、凋亡小体形成等;作用晚期细胞发生膜破裂坏死;(3)免疫细胞化学结果表明:蝙蝠葛活性成分作用后加药组Caspase-9、Caspase-8和Caspase-3表达增加,与对照组相比较均有显著差异(P<0.01)。结论蝙蝠葛活性成分对人白血病K562细胞株具有抑制增殖和诱导凋亡作用。 展开更多
关键词 蝙蝠葛活性成分 人白血病K562细胞株 caspase-9蛋白 caspase-8蛋白 caspase-3蛋白 细胞凋亡
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两种督脉电针对大鼠脊髓受损伤神经元存活的影响 被引量：6
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作者 杨扬 徐昊禹 +1 位作者 丁英 曾园山 《解剖学研究》 CAS 2018年第1期2-5,F0004,共5页
目的探讨脊髓损伤区近端督脉2个穴位电针和脊髓损伤区远、近端督脉4个穴位电针对全横断脊髓损伤大鼠腰段脊髓神经元存活与凋亡的影响。方法雌性SD大鼠30只,随机分为对照组、近端督脉穴电针组(EA2组)和远近端督脉穴电针组(EA4组),每组10... 目的探讨脊髓损伤区近端督脉2个穴位电针和脊髓损伤区远、近端督脉4个穴位电针对全横断脊髓损伤大鼠腰段脊髓神经元存活与凋亡的影响。方法雌性SD大鼠30只,随机分为对照组、近端督脉穴电针组(EA2组)和远近端督脉穴电针组(EA4组),每组10只大鼠,其中每组各5只分别应用于免疫荧光染色和Western blot检测。在所有大鼠脊髓第10胸段(T10)进行全横断损伤手术。EA2组在脊中(GV9)和至阳(GV6)督脉穴位入针,EA4组在GV9、GV6、腰腧(GV4)和长强(GV1)督脉穴位入针。在术后第3 d开始电针,隔天1次,每次20 min。术后14d后将3组动物取材进行后续实验。Western blot检测脊髓组织活化型半胱天冬酶-3的表达情况。结果与对照组和EA 2组相比,EA 4组可增加脊髓腰段神经元存活数量、减少脊髓腰段神经元凋亡率和下调脊髓腰段组织表达活化型半胱天冬酶-3(P<0.05)。结论脊髓损伤区远近端督脉4个穴位电针要比脊髓损伤区近端督脉2个穴位电针更有效地促进受损伤脊髓腰段神经元存活和减少其凋亡,下调受损伤脊髓腰段组织表达凋亡相关蛋白。 展开更多
关键词 电针 脊髓损伤 神经元 活化型半胱天冬酶-3 凋亡 大鼠
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褪黑素对视网膜缺血再灌注损伤大鼠视网膜细胞凋亡的影响及机制探讨 被引量：6
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作者 李光祖 王晓莉 +4 位作者 李振 张婷婷 刘萍 张帅 赵岩松 《中华眼底病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期55-59,共5页
目的 观察褪黑素对视网膜缺血再灌注损伤（RIRI）大鼠视网膜细胞凋亡的影响，并探讨其可能机制。 方法 健康无眼疾雄性Sprague-Dawley成年大鼠54只，采用随机数字表法随机分为正常对照组、RIRI组及褪黑素组，分别为6、24、24只。RIRI组... 目的 观察褪黑素对视网膜缺血再灌注损伤（RIRI）大鼠视网膜细胞凋亡的影响，并探讨其可能机制。 方法 健康无眼疾雄性Sprague-Dawley成年大鼠54只，采用随机数字表法随机分为正常对照组、RIRI组及褪黑素组，分别为6、24、24只。RIRI组及褪黑素组大鼠采用线栓法建立RIRI模型。褪黑素组大鼠按1.25 ml/kg剂量注射4 mg/ml褪黑素，RIRI组大鼠注射等量生理盐水。正常对照组大鼠不作干预。建模后6、24 h及3、7 d，RIRI组及褪黑素组分别取6只大鼠用于实验。制作视网膜切片，苏木精伊红（HE）染色观察各组大鼠视网膜组织形态变化；免疫组织化学染色计数活性半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（Caspase）-3、核转录因子NF-E2 相关因子2（Nrf2）、血红素氧合酶（HO）-1 阳性细胞数量。采用一般线性回归分析法分析建模后不同时间点褪黑素组与RIRI组活性Caspase-3阳性细胞数差值与Nrf2、HO-1阳性细胞数差值的相关性。 结果 HE染色观察发现，正常对照组大鼠视网膜各层结构清晰完整，细胞排列整齐规则。RIRI组大鼠视网膜水肿明显，视网膜内层变厚，视网膜神经节细胞（RGC）数量减少。褪黑素组大鼠视网膜各层细胞排列较整齐，形态较规则。建模后6、24 h及3、7 d，与RIRI组比较，褪黑素组大鼠视网膜内层厚度增厚（F=16.710、62.303、68.389、57.132，P＜0.01），RGC数量增加（F=24.250、11.624、14.155、32.442，P＜0.05），差异均有统计学意义。免疫组织化学染色观察发现，建模后6、24 h及3、7 d，与RIRI组比较，褪黑素组大鼠视网膜活性Caspase-3阳性细胞数量明显减少（F=49.118、134.173、76.225、18.385，P＜0.01），Nrf2（F=11.041、31.480、59.246、6.740，P＜0.05）、HO-1（F=128.993、21.606、51.349、8.244，P＜0.05）阳性细胞数量明显增加，差异均有统计学意义。相关性分析结果显示，建模后不同时间点褪黑素组 展开更多
关键词 再灌注损伤/药物疗法 褪黑激素/治疗应用 NF-E2相关因子2 血红素氧化酶-1 动物实验 活性半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3
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MicroRNA-155在肝细胞癌对索拉非尼抗药中的作用研究 被引量：3
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作者 吕峰 王伟 +2 位作者 艾麦提.牙森 金鑫 李德卫 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期657-662,共6页
目的探讨微小RNA155(microRNA-155,miR-155)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)对索拉非尼(sorafenib)抗药中的作用。方法将miR-155抑制慢病毒(miR-155 inhibitor)转染miR-155表达相对较高的SMMC-7721细胞,而miR-155过表达慢病毒... 目的探讨微小RNA155(microRNA-155,miR-155)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)对索拉非尼(sorafenib)抗药中的作用。方法将miR-155抑制慢病毒(miR-155 inhibitor)转染miR-155表达相对较高的SMMC-7721细胞,而miR-155过表达慢病毒(miR-155)转染miR-155表达相对较低的Hep G2细胞;用荧光定量PCR(qPCR)检测经慢病毒转染的SMMC-7721细胞及HepG2细胞miR-155表达量,以验证慢病毒转染效果;通过CCK-8法及流式细胞术检测各组细胞经索拉非尼作用后的存活率及凋亡情况;用Western blot检测凋亡相关蛋白活性caspase-3表达量,从而进一步探究各组细胞凋亡情况。结果与对照组相比,转染miR-155抑制慢病毒的SMMC-7721细胞表达miR-155明显下调(P<0.01),经索拉非尼处理后其存活率明显降低(P<0.05),而索拉非尼诱导其凋亡明显增加(P<0.01),其活性caspase-3表达量明显上调(P<0.01);miR-155过表达慢病毒转染HepG2细胞后,则相反。结论 miR-155参与肝细胞癌对索拉非尼的抗药,有希望成为一个肝癌治疗的新靶标。 展开更多
关键词 微小RNA155 肝细胞癌 索拉非尼 抗药 慢病毒 活性caspase-3
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