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大肠杆菌耐药株的体外诱导及其acrA和marA基因分析 被引量:13
1
作者 张海旺 邓旭明 +4 位作者 韩春田 张煜 苏杰 胡仲明 曾凡勤 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期553-557,共5页
为检测大肠杆菌在某抗菌素的环境压力下耐药性的变化及其与acrA和marA基因突变的关系。分别用四环素、氯霉素和环丙沙星对大肠杆菌质控株ATCC25922进行体外诱导培养,测定诱导前后多种抗菌药的MIC的变化;对各菌株的acrA和marA基因进行克... 为检测大肠杆菌在某抗菌素的环境压力下耐药性的变化及其与acrA和marA基因突变的关系。分别用四环素、氯霉素和环丙沙星对大肠杆菌质控株ATCC25922进行体外诱导培养,测定诱导前后多种抗菌药的MIC的变化;对各菌株的acrA和marA基因进行克隆和测定。四环素诱导株产生重耐药,氯霉素和环丙沙星的诱导引起单药耐药;四环素诱导株、氯霉素诱导株和环丙沙星诱导株的acrA和marA基因序列均与ATCC25922的一致。四环素、氯霉素和环丙沙星的诱导培养并未引起ATCC25922的acrA和marA基因突变,诱导引起的大肠杆菌耐药性变化是由于其acrA和marA基因突变以外的其他原因所致。 展开更多
关键词 大肠杆菌 多重耐药 外输泵 acra marA
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大肠杆菌acrA基因的克隆、表达、抗体制备及不同耐药水平大肠杆菌AcrA表达水平的检测 被引量:8
2
作者 张海旺 张丽云 +3 位作者 刘旭东 邓旭明 胡仲明 曾凡勤 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期279-284,共6页
检测不同耐药水平大肠杆菌AcrA表达水平,探讨耐药水平与AcrA蛋白表达水平之间的关系。对acrA基因进行克隆、表达、制备抗AcrA抗体,Westernblot方法比较同耐药水平大肠杆菌AcrA表达水平。结果表明,多重耐药株SEMR的AcrA表达明显高于单药... 检测不同耐药水平大肠杆菌AcrA表达水平,探讨耐药水平与AcrA蛋白表达水平之间的关系。对acrA基因进行克隆、表达、制备抗AcrA抗体,Westernblot方法比较同耐药水平大肠杆菌AcrA表达水平。结果表明,多重耐药株SEMR的AcrA表达明显高于单药耐药株SEICI和SEICH以及质控株ATCC25922。因此SEMR多重耐药性的产生与AcrA的高效表达直接有关。 展开更多
关键词 大肠杆菌 多重耐药 acra 基因表达
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不同源性大肠杆菌多药耐药基因AcrA、AcrB部分基因的同源性分析 被引量:7
3
作者 马红霞 邓旭明 +1 位作者 欧阳红生 阎继业 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期111-113,共3页
通过聚合酶链式反应从不同源性大肠杆菌的染色体DNA上扩增出大肠杆菌多药耐药基因AcrA、AcrB的部分片段 ,将该片段分别连接到克隆载体pMD_18T的BamHI、XhoI酶切位点中 ,测定插入片段的核苷酸序列 ,并分别推导出其氨基酸序列。序列分析表... 通过聚合酶链式反应从不同源性大肠杆菌的染色体DNA上扩增出大肠杆菌多药耐药基因AcrA、AcrB的部分片段 ,将该片段分别连接到克隆载体pMD_18T的BamHI、XhoI酶切位点中 ,测定插入片段的核苷酸序列 ,并分别推导出其氨基酸序列。序列分析表明 :不同源性大肠杆菌的AcrA的部分基因的核苷酸序列及所推导的氨基酸序列与GeneBank中该基因序列的同源性较高 ;不同源性大肠杆菌的AcrB的部分基因的核苷酸序列的同源性较低 。 展开更多
关键词 大肠杆菌多药耐药基因 acra ACRB 测序 同源性分析
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大肠杆菌多重耐药基因AcrA、AcrB内标准DNA的构建 被引量:7
4
作者 马红霞 潘建民 +2 位作者 邓旭明 欧阳红生 阎继业 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期68-71,共4页
在克隆AcrA、AcrB部分基因片段并进行基因及编码蛋白的同源性分析的基础上,设计合成构建AcrA、AcrB的内标准DNA所需引物,经过3次(12个)PCR成功地合成了AcrA、AcrB的内标准DNA。合成法构建定量RT-PCR内标准DNA快捷、成功率高。
关键词 大肠杆菌 耐药基因 acra ACRB 内标准DNA 合成法 引物 动物
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竞争性RT-PCR法及对大肠杆菌acrA基因mRNA表达水平的定量研究 被引量:3
5
作者 陈爱美 陈仪本 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期235-239,共5页
建立了用于检测大肠杆菌(Escherichia coli)ATCC25922的acrA基因mRNA表达水平的定量竞争性RT-PCR(QC-RT-PCR)体系。PCR合成目标片段的突变型片段(321bp)作为内标准模板(Internal standard,IS),与目标片段一致的片段(389bp)作为目标模板(... 建立了用于检测大肠杆菌(Escherichia coli)ATCC25922的acrA基因mRNA表达水平的定量竞争性RT-PCR(QC-RT-PCR)体系。PCR合成目标片段的突变型片段(321bp)作为内标准模板(Internal standard,IS),与目标片段一致的片段(389bp)作为目标模板(Target standard,TS),优化两种模板共扩增体系;梯度稀释IS与等量大肠杆菌cDNA样本共扩增,扫描电泳条带,软件分析数据。结果表明,引物设计合适,以IS和TS为模板实现共扩增,产物(321bp和389bp)通过1.5%琼脂糖凝胶电泳有效分离;梯度稀释IS与cDNA共扩增产物出现亮度梯度电泳条带;获得一元回归曲线y=-0.345+0.097x(相关系数r=0.959,标准差s=0.05997)。该研究成功构建内标准模板,优化的共扩增PCR体系实现了对大肠杆菌ATCC25922中acrA基因mRNA表达水平的检测,具有简便、高效、敏感度高等优点。 展开更多
关键词 acra 定量竞争性RT-PCR 外排系统
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新生儿科产NDM-1耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌主动外排泵基因acrA的研究 被引量:3
6
作者 李碰玲 王敏 +9 位作者 赵志丹 李先平 张晓煜 岳贺佳 吕少刚 曹伟 刘礼 周晓岚 谢益欣 唐爱国 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2016年第5期405-410,共6页
目的研究主动外排泵基因arcA在耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌中抗生素转录水平,探讨主动外排机制在耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌中的作用。方法收集2012年8月-2013年12月中南大学湘雅二医院新生儿科患者的痰及血液标本分离的7株耐碳青霉... 目的研究主动外排泵基因arcA在耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌中抗生素转录水平,探讨主动外排机制在耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌中的作用。方法收集2012年8月-2013年12月中南大学湘雅二医院新生儿科患者的痰及血液标本分离的7株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌株作为实验组,10株同一新生儿科碳青霉烯类敏感肺炎克雷伯菌株作为对照组,采用Phoenix100全自动微生物分析系统进行鉴定及药敏检测,采用K-B法和Etest进行表型确认,采用改良Hodge确证试验确定细菌耐药表型,采用RAPD技术检测细菌基因型,采用PCR扩增NDM-1、acrA基因,采用RT-PCR检测acrA mRNA表达。结果7株试验菌均产碳青霉烯酶。PCR扩增显示其染色体和质粒上均携带NDM-1基因;RAPD显示7株试验菌为同一ST17型;5株试验菌和8株敏感菌株检出外排泵基因acrA;RT-PCR显示试验组和对照组acrA mRNA表达水平平均值分别为0.545和1.899,两组arcA mRNA扩增产物电泳条带与16SrRNA扩增产物电泳条带的灰度比值分别为0.13和0.317,结果进行Fisher精确概率检验,P=0.317>0.05,差异无统计学意义。结论 acrA的表达可能不是产NDM-1耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌耐药的必要原因。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 acraB外排泵 acra 碳青霉烯类抗生素 NDM-1 耐药性
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水源性肢端角化症 被引量:5
7
作者 陈伟 李宝江 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2010年第7期656-657,共2页
患者男,28岁。半年前开始双手接触水数分后钟局部出现丘疹和斑块,伴肿胀,脱离水源约15min后,皮损及不适感消失。临床表现为:双手掌可见细小、白色的扁平丘疹及斑块。皮损组织病理示:表皮角质层明显增厚,棘层肥厚。诊断:水源性肢端角化症。
关键词 水源性 肢端 角化病
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嗜水气单胞菌acrA缺失菌株的构建及其生理功能的测定 被引量:2
8
作者 李小艳 李泽琦 +3 位作者 汪玉倩 于晶 林镇平 林向民 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期63-69,共7页
AcrA是革兰氏阴性菌中的一种膜融合蛋白,现今关于AcrA蛋白的研究,以AcrA蛋白在细菌中药物外排等膜转运过程中的调节作用为主。为了阐明细菌中acrA基因敲除后,该菌在溶血性、毒理性、压力胁迫性及抗生素敏感性等生理功能的变化,以嗜水气... AcrA是革兰氏阴性菌中的一种膜融合蛋白,现今关于AcrA蛋白的研究,以AcrA蛋白在细菌中药物外排等膜转运过程中的调节作用为主。为了阐明细菌中acrA基因敲除后,该菌在溶血性、毒理性、压力胁迫性及抗生素敏感性等生理功能的变化,以嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)为研究对象,利用无痕敲除等分子生物学手段构建acrA(AHA_2911)的缺失菌株,并对野生菌株和缺失菌株的溶血性、胞外蛋白酶活、抗生素敏感性、高温胁迫、生长趋势以及生物膜形成能力等生理特性进行了测定。结果显示,敲除菌株的溶血性和胞外蛋白酶活并未受到影响,但acrA基因敲除后增加了该菌对卡那霉素、罗红霉素、巴罗沙星抗生素及吖啶黄素染料的敏感度并且显著提高了嗜水气单胞菌的生物膜形成能力。但是,ΔacrA在42℃下的生长趋势及其生物膜形成能力明显弱于野生株。以上研究证明嗜水气单胞菌acrA基因在药物外排泵中有一定的功能,并且提示该基因可能在细菌的高温耐受性及生物膜形成中起重要作用。 展开更多
关键词 acra 嗜水气单胞菌 同源重组 生理表型 生物被膜 高温
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加减三黄汤对耐药大肠杆菌acrA mRNA表达水平的影响 被引量:2
9
作者 尹秀玲 白迎春 +2 位作者 张立永 顾小龙 牛发良 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2012年第6期60-63,共4页
为了解加减三黄汤对大肠杆菌耐药性的影响,采用实时荧光定量方法检测了外输泵acrA mRNA表达水平的变化。将100只昆明系小鼠分为阳性组(感染耐药性大肠杆菌2 751株和2 952株),阴性组,攻毒治疗组(2 751株+加减三黄汤,2 952株+加减三黄汤)... 为了解加减三黄汤对大肠杆菌耐药性的影响,采用实时荧光定量方法检测了外输泵acrA mRNA表达水平的变化。将100只昆明系小鼠分为阳性组(感染耐药性大肠杆菌2 751株和2 952株),阴性组,攻毒治疗组(2 751株+加减三黄汤,2 952株+加减三黄汤),8d后将鼠随机剖杀,取肝组织抹片培养大肠杆菌,做药敏试验,同时提取质粒,检测大肠杆菌外输泵基因acrA的mRNA表达量。结果显示,经加减三黄汤在体治疗后的大肠杆菌耐药性下降了,每μL中mRNA拷贝数为2 751株最高达1016,2 952株1015;用药后各菌株均有下降;相差极显著(P≤0.01),耐药性越大的拷贝数越多。表明加减三黄汤对耐药大肠杆菌外输泵基因acrA的mRNA表达水平影响与耐药性有一定的相关性。 展开更多
关键词 加减三黄汤 大肠杆菌 实时荧光定量 acra 表达水平
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消白软膏联合308nm准分子激光治疗白癜风疗效观察 被引量:4
10
作者 何佳骏 何渊民 熊霞 《中国美容医学》 CAS 2017年第4期23-25,共3页
目的:探讨外用消白软膏联合308nm准分子激光治疗白癜风的疗效及安全性。方法:选取白癜风患者80例(均为稳定期患者),随机分为治疗组和对照组。对照组:单独使用308nm准分子激光治疗,每周治疗2次,间隔2~3d,连续治疗16周;治疗组:除按上述方... 目的:探讨外用消白软膏联合308nm准分子激光治疗白癜风的疗效及安全性。方法:选取白癜风患者80例(均为稳定期患者),随机分为治疗组和对照组。对照组:单独使用308nm准分子激光治疗,每周治疗2次,间隔2~3d,连续治疗16周;治疗组:除按上述方法使用308nm准分子激光治疗外,同时皮损处外用消白软膏,每天2次。在治疗后4、8、12、16周比较两组疗效差异,并且比较治疗组中肢端和非肢端处皮损的疗效差异。同时观察两组治疗后的不良反应。结果:两组治疗有效率存在差异,差异在12周开始具有统计学意义(P<0.05);治疗组中非肢端皮损有效率明显高于肢端皮损,差异有统计学意义。结论:消白软膏联合308nm准分子激光治疗白癜风疗效好、副作用少。非肢端皮损效果优于肢端皮损。 展开更多
关键词 消白软膏 308NM准分子激光 白癜风 肢端 治疗
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不同耐药水平大肠杆菌acrA和marA基因转录水平的比较 被引量:1
11
作者 邓旭明 吉淑娟 +3 位作者 李喜旺 张海旺 胡仲明 曾凡勤 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期185-190,共6页
为检测不同耐药水平大肠杆菌的acrA和marA基因转录水平,阐明耐药大肠杆菌株药物敏感性变化与acrA和marA的mRNA水平之间的关系。用定量RT-PCR的方法比较多重耐药菌株SEMR、单药耐药菌株SEICI和SEICH以及质控株ATCC25922的acrA和marA的mRN... 为检测不同耐药水平大肠杆菌的acrA和marA基因转录水平,阐明耐药大肠杆菌株药物敏感性变化与acrA和marA的mRNA水平之间的关系。用定量RT-PCR的方法比较多重耐药菌株SEMR、单药耐药菌株SEICI和SEICH以及质控株ATCC25922的acrA和marA的mRNA水平。结果表明,acrAmRNA水平,SEMR均是SEICI、SEICH和ATCC25922的16倍;marAmRNA水平,SEMR是SEICH的4倍、SEICI和ATCC25922的8倍;SEICI和SEICH的acrAmRNA和marAmRNA水平与ATCC25922无明显差异;同一菌株acrAmRNA和marAmRNA水平的变化保持了较为稳定的一致性。因此认为,大肠杆菌多重耐药菌株SEMR的acrAmRNA和marAmRNA水平与其耐药水平存在相关性。 展开更多
关键词 大肠杆菌 acra marA 转录水平
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肢端无色素性黑素瘤 被引量:2
12
作者 冯林 张颖 +1 位作者 江阳 卢阳 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期609-611,共3页
报告1例肢端无色素性黑素瘤。患者男,72岁。左足跟部红色结节2个月。皮肤科检查:左足跟部一蚕豆大红色结节,表面溃疡,溃疡面清洁干燥,压痛(+)。皮损组织病理检查:表皮变薄,局部与真皮分界不清,真皮全层及皮下见大量肿瘤细胞,部分呈巢状... 报告1例肢端无色素性黑素瘤。患者男,72岁。左足跟部红色结节2个月。皮肤科检查:左足跟部一蚕豆大红色结节,表面溃疡,溃疡面清洁干燥,压痛(+)。皮损组织病理检查:表皮变薄,局部与真皮分界不清,真皮全层及皮下见大量肿瘤细胞,部分呈巢状分布,肿瘤细胞胞质丰富,核大深染,异形性显著,可见脉管,未见溃疡;Breslow厚度约13.6 mm,Clark 5级,核分裂1个/mm^(2);侧切缘及基底切缘可见肿瘤细胞。免疫组化:HMB45、Y染色体性别决定区-盒转录因子10(SOX10)及S-100蛋白均(+);增殖核抗原(Ki-67)(约5%+);波形蛋白(vimentin)、肌酸激酶(CK)、平滑肌肌动蛋白(SMA)及上皮膜抗原(EMA)均(-)。诊断:肢端无色素性黑素瘤。 展开更多
关键词 黑素瘤 无色素性 肢端
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大肠杆菌AcrA、AcrB部分基因的克隆、原核表达
13
作者 隋慧 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第12期127-129,共3页
AcrAB—TolC系统可输出多种抗菌药物、化疗试剂、洗涤剂和染料类,这个复杂的系统穿越大肠杆菌的内膜和外膜,可使药物直接外输到介质中。内膜转运子AcrB和外膜孔道TolC由AcrA连接,
关键词 acra 大肠杆菌 原核表达 克隆 基因 抗菌药物 C系统 洗涤剂
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竞争性RT-PCR在定量分析沙门菌acrA基因mRNA表达中的应用
14
作者 刘芳萍 李昌文 +4 位作者 曲鹏 刘立新 李睿 佟恒敏 李一经 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2009年第5期12-13,共2页
关键词 MRNA表达 RT-PCR 沙门菌 竞争性 应用 acra 定量分析 氟喹诺酮类药物
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体外诱导和临床分离多重耐药大肠杆菌acrA和acrB基因无突变
15
作者 尹秀玲 牛发良 +2 位作者 薛瑞辰 邓旭明 柳巨雄 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2008年第3期63-64,共2页
关键词 多重耐药 大肠杆菌 临床分离 acra 基因突变 RB基因 体外诱导 基因序列
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连翘对大肠埃希菌多重耐药基因AcrA的影响研究 被引量:21
16
作者 任玲玲 关立增 《动物医学进展》 CSCD 2008年第5期43-45,共3页
为了研究和开发理想的大肠埃希菌多重耐药抑制剂,用连翘作用于多重耐药大肠埃希菌,提取其基因组DNA,并以大肠埃希菌AcrA基因的编码序列设计引物,成功扩增出AcrA基因中1005bp的片段,与多重耐药菌种中的AcrA基因序列进行对比。结果表明,... 为了研究和开发理想的大肠埃希菌多重耐药抑制剂,用连翘作用于多重耐药大肠埃希菌,提取其基因组DNA,并以大肠埃希菌AcrA基因的编码序列设计引物,成功扩增出AcrA基因中1005bp的片段,与多重耐药菌种中的AcrA基因序列进行对比。结果表明,连翘改变AcrA基因的编码序列,并能有效抑制多重耐药大肠埃希菌的生长,减弱其耐药性。 展开更多
关键词 连翘 大肠埃希菌 多重耐药 acra基因
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中药提取物对耐药大肠杆菌MIC及acrA基因表达量的影响 被引量:12
17
作者 张静 张梦华 +3 位作者 刘晴晴 刘三侠 吴俊伟 杨成竹 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期728-732,共5页
通过亚抑菌浓度中药提取物处理大肠杆菌耐药菌,利用荧光定量PCR技术检测其外排泵基因acrA表达量的变化及试管二倍稀释法测定乳酸环丙沙星对处理前后细菌MIC的变化。结果显示,经亚抑菌浓度中药提取物处理后的耐药大肠杆菌其acrA基因表达... 通过亚抑菌浓度中药提取物处理大肠杆菌耐药菌,利用荧光定量PCR技术检测其外排泵基因acrA表达量的变化及试管二倍稀释法测定乳酸环丙沙星对处理前后细菌MIC的变化。结果显示,经亚抑菌浓度中药提取物处理后的耐药大肠杆菌其acrA基因表达量存在显著变化。其中经中药A,I,S,X处理过的大肠杆菌外排泵基因表达量分别降低到原来的0.20,0.16,0.05和0.24倍,表明亚抑菌浓度中药提取物对大肠杆菌耐药菌的外排泵基因表达量有明显的抑制作用,提示在中药提取物中寻找大肠杆菌耐药外排泵抑制剂有一定前景。 展开更多
关键词 中药 大肠杆菌 acra基因表达量 外排泵
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中药复方制剂对大肠埃希菌多重耐药基因AcrA-mRNA表达水平的影响 被引量:11
18
作者 任玲玲 鞠玉琳 +1 位作者 平家奇 张宇 《湖北农业科学》 北大核心 2010年第2期257-259,共3页
研究中药复方制剂连黄(精提、粗提)对大肠埃希菌多重耐药基因AcrA的mRNA表达水平的影响,从而深入探讨中药复方制剂连黄(精提、粗提)抑制大肠埃希菌多重耐药性的作用机理。采用实时荧光定量PCR法,定量分析了中药复方制剂连黄(精提、粗提... 研究中药复方制剂连黄(精提、粗提)对大肠埃希菌多重耐药基因AcrA的mRNA表达水平的影响,从而深入探讨中药复方制剂连黄(精提、粗提)抑制大肠埃希菌多重耐药性的作用机理。采用实时荧光定量PCR法,定量分析了中药复方制剂连黄(精提、粗提)作用前后的大肠埃希菌耐药基因AcrA的mRNA表达水平。结果表明,精提和粗提的中药复方制剂均能降低AcrA基因的mRNA表达水平,且精提制剂较粗提制剂对AcrA基因的mRNA表达水平影响更大。 展开更多
关键词 实时荧光定量PCR 中药复方制剂连黄 大肠埃希菌 acra—mRNA
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苦丁茶和小飞扬草对多重耐药性大肠杆菌外排泵acrA基因表达的影响 被引量:9
19
作者 刘坤友 周艳 +2 位作者 陈桂生 刘凤玲 李明 《广西医学》 CAS 2016年第2期207-210,共4页
目的探讨苦丁茶、小飞扬草水提物对多重耐药性大肠杆菌外排泵acrA基因表达的影响。方法用纸片扩散法筛选多重耐药性大肠杆菌,试管二倍稀释法检测苦丁茶、小飞扬草水提物和阿莫西林对多重耐药菌株的最低抑菌浓度(MIC),用1/2 MIC浓度的苦... 目的探讨苦丁茶、小飞扬草水提物对多重耐药性大肠杆菌外排泵acrA基因表达的影响。方法用纸片扩散法筛选多重耐药性大肠杆菌,试管二倍稀释法检测苦丁茶、小飞扬草水提物和阿莫西林对多重耐药菌株的最低抑菌浓度(MIC),用1/2 MIC浓度的苦丁茶、小飞扬草水提物干预多重耐药菌株,72 h后检测阿莫西林的MIC;选取苦丁茶和小飞扬草干预前后的耐药菌株进行荧光实时定量PCR检测外排泵基因acrA mRNA的表达。结果筛选出3株多重耐药性大肠杆菌,苦丁茶或小飞扬草干预后阿莫西林对多重耐药株的MIC明显低于干预前(P<0.05);苦丁茶或小飞扬草干预后acrA mRNA的表达量均较干预前明显降低(P<0.05)。结论苦丁茶和小飞扬草对多重耐药性大肠杆菌有明显抑制作用,其机制可能是与通过降低多重耐药性大肠杆菌外排泵acrA基因mRNA的表达量有关。 展开更多
关键词 大肠杆菌 多重耐药 苦丁茶 小飞扬草 外排泵 acra基因
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实时荧光定量PCR检测多重耐药大肠杆菌AcrA基因mRNA表达水平 被引量:6
20
作者 尹秀玲 王玮 +4 位作者 邓旭明 郎需龙 张晶 王丽艳 柳巨雄 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期679-682,共4页
体外单一药物诱导标准大肠杆菌ATCC25922,获得了耐氯霉素(CHL,MIC≥256 mg/L)、耐环丙沙星(CIP,MIC≥256 mg/L)、耐水杨酸钠(SAL,MIC≥275 mg/L)、耐四环素(T,MIC≥512 mg/L)的菌株。选取ATCC25922株,4株中度耐药菌SAL(175)、CHL(64)、T... 体外单一药物诱导标准大肠杆菌ATCC25922,获得了耐氯霉素(CHL,MIC≥256 mg/L)、耐环丙沙星(CIP,MIC≥256 mg/L)、耐水杨酸钠(SAL,MIC≥275 mg/L)、耐四环素(T,MIC≥512 mg/L)的菌株。选取ATCC25922株,4株中度耐药菌SAL(175)、CHL(64)、T(64)、CIP(128),4株高度耐药菌SAL(275)、CHL(256)、T(512)、CIP(256),和临床分离的3株耐药大肠杆菌H1、H9、H10,通过实时荧光定量RT-PCR方法检测外输泵AcrA基因的mRNA表达水平。系统自动分析软件显示,Ct值与标准质粒浓度的对数之间存在良好的线性关系,回归系数为0.992。检测结果表明:H10、CHL(256)、CIP(256)拷贝数最高,达1015拷贝/μL;T(512)、H9、T(128)、SAL(275)、H1为1014拷贝/μL;CHL(128)、T(64)、CHL(64)为1013拷贝/μL;ATCC25922为1012拷贝/μL。不同程度耐药株AcrA基因的表达量不同,临床分离株和诱导的各高耐药菌株均比ATCC25922株表达量高,且差异极显著(P≤0.01)。这说明不同耐药程度的11株菌cDNA的量存在差异,AcrA基因转录水平与耐药水平成正相关。 展开更多
关键词 acra基因 实时荧光定量PCR 耐药大肠杆菌 MRNA
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