脱氧核糖核酸和核糖核酸与铽离子的荧光反应及其在分析中的应用 被引量：14

1

作者 慈云祥 胡晓雷 +1 位作者 李元宗 常文保 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1992年第9期1083-1087,共5页

本文提出了一种简单灵敏的测定DNA和RNA的方法。实验结果表明RNA可直接与铽离子发生荧光反应,但DNA只有在发生变性之后才能发生同样的反应。酸变性的最佳pH范围在2.2～2.8之间,通过实验确定了荧光反应的最佳条件。在最佳条件下测定DNA和... 本文提出了一种简单灵敏的测定DNA和RNA的方法。实验结果表明RNA可直接与铽离子发生荧光反应,但DNA只有在发生变性之后才能发生同样的反应。酸变性的最佳pH范围在2.2～2.8之间,通过实验确定了荧光反应的最佳条件。在最佳条件下测定DNA和RNA的线性范围在0.5～20.0μg/ml,标准偏差在5％以內。小牛胸腺DNA和鱼精子DNA在酸变性时其对铽离子荧光增强效应提高数十倍,而RNA变性前后对铽离子荧光增强效应变化不大,这本身反映了DNA与RNA二级结构的不同。利用DNA和RNA在酸变性时对Tb(Ⅱ)荧光增强变化的不同可在一定量的DNA存在下测定RNA或在一定量的RNA存在下利用差减法测DNA。 展开更多

关键词 铽离子 酸变性 荧光增强 DNA RNA

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酸诱导拥挤条件下肌红蛋白及突变体去折叠过程 被引量：7

2

作者 张玉姣 唐乾 +1 位作者 曹洪玉 郑学仿 《物理化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1785-1792,共8页

采用紫外-可见吸收光谱、同步荧光光谱和圆二色(CD)光谱法研究拥挤试剂葡聚糖70(Dextran70)和聚蔗糖70(Ficoll70)存在条件下,酸诱导野生型肌红蛋白Mb(WT)及其突变体Mb(D60K)的去折叠过程.结果显示:在Dextran70和Ficoll70两种拥挤环境下,... 采用紫外-可见吸收光谱、同步荧光光谱和圆二色(CD)光谱法研究拥挤试剂葡聚糖70(Dextran70)和聚蔗糖70(Ficoll70)存在条件下,酸诱导野生型肌红蛋白Mb(WT)及其突变体Mb(D60K)的去折叠过程.结果显示:在Dextran70和Ficoll70两种拥挤环境下,Mb(WT)的变性中点pH值由4.25分别降低到3.78与3.76,拥挤试剂加入后增强了Mb(WT)的耐酸能力;肌红蛋白60位天冬氨酸(Asp)突变为赖氨酸(Lys)后,变性中点pH值由4.25降低到4.19,耐酸性比野生型肌红蛋白有所增强,Mb(D60K)在Dextran70和Ficoll70两种拥挤环境下变性中点pH值由4.19分别降至3.74和3.12.以上实验说明肌红蛋白表面氨基酸突变和拥挤试剂的添加起到了稳定血红素微环境、芳香族氨基酸及二级结构和保护蛋白天然状态的作用. 展开更多

关键词 拥挤试剂 酸变性 肌红蛋白 突变体 光谱法

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BMD-PCR技术在新型冠状病毒核酸快速检测中的应用 被引量：3

3

作者 焦洋 王恒伟 +7 位作者 李崇 刘丹 仲一 韩晓瑄 赵剑虹 吕志 王绍成 孙灵利 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2021年第6期664-668,共5页

目的建立一种可在基层实验室推广的灵敏、快速的新型冠状病毒(2019-nCoV)核酸检测方法。方法利用bubble mediated nucleic acid denaturation(BMD)-PCR技术和2019-nCoV特异性引物及探针建立新型冠状病毒核酸快速检测方法,并利用实验室... 目的建立一种可在基层实验室推广的灵敏、快速的新型冠状病毒(2019-nCoV)核酸检测方法。方法利用bubble mediated nucleic acid denaturation(BMD)-PCR技术和2019-nCoV特异性引物及探针建立新型冠状病毒核酸快速检测方法,并利用实验室保存的60份2019-nCoV核酸阳性和68份阴性临床样本对该方法和已批准上市的2019-nCoV核酸检测试剂盒进行比较研究,同时利用实验室保存的11种常见的涵盖常见基因型的经呼吸道和肠道传播的病毒验证该方法的特异性。结果BMD-PCR方法在2019-nCoV核酸检测中具有良好的特异性,与常见的11种经呼吸道和肠道传播的病毒无交叉反应,最低检出限低于600拷贝/ml。与已批准上市的2019-nCoV核酸检测试剂盒相比,128份临床样品的定性检测结果一致性为100%,且检测时间缩短至28 min。结论BMD-PCR 2019-nCoV核酸快速检测可以对临床样品进行快速诊断和鉴定,可以满足目前大规模人群、高通量筛查的紧急需求,具有重要的公共卫生意义。 展开更多

关键词 新型冠状病毒 BMD-PCR 核酸检测 特异性 检出限

原文传递

DNA酸解后甲基绿—派洛宁改良染色法在胃癌、食管癌诊断中的应用 被引量：2

4

作者 黄庆玉 申姜颖 +3 位作者 龙跃洲 高慧英 张友灿 张树鹏 《泰山医学院学报》 CAS 2000年第4期270-273,共4页

目的　对DNA酸解后甲基绿一派洛宁染色进行改良并用于肿瘤诊断。方法　收集已明确诊断的常规外检标本胃癌及食管癌共 12 6例 ,应用改良染色法对DNA酸解后组织进行染色观察。结果　被染组织色彩艳丽可清楚显示肿瘤细胞的染色强度及染色数... 目的　对DNA酸解后甲基绿一派洛宁染色进行改良并用于肿瘤诊断。方法　收集已明确诊断的常规外检标本胃癌及食管癌共 12 6例 ,应用改良染色法对DNA酸解后组织进行染色观察。结果　被染组织色彩艳丽可清楚显示肿瘤细胞的染色强度及染色数量 ,清楚显示肥大细胞的形态特点 ,也显示其他多种组织成分。结论　DNA酸解后甲基绿一派洛宁改良染色法可用于判定肿瘤的增殖活性及分化程度 ,用于区别良、恶性病变 。 展开更多

关键词 胃癌 食管癌 诊断 DND MG-P 组织化学染色法

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胃癌食管癌组化染色法的改良及应用

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作者 申姜颖 张晓明 +2 位作者 黄庆玉 金岩 程传芬 《泰山医学院学报》 CAS 1999年第2期137-138,共2页

目的对ＤＮＡ酸解后甲基绿—派洛宁染色法进行改良和应用。方法收集我室常规病理活检标本，已明确病理诊断的消化道恶性肿瘤：胃癌、食管癌，应用改良后的染色法，进行组织切片染色。结果染出切片色彩鲜艳，组织结构清晰，能显示多种组... 目的对ＤＮＡ酸解后甲基绿—派洛宁染色法进行改良和应用。方法收集我室常规病理活检标本，已明确病理诊断的消化道恶性肿瘤：胃癌、食管癌，应用改良后的染色法，进行组织切片染色。结果染出切片色彩鲜艳，组织结构清晰，能显示多种组织细胞成份，尤其能同时显示肿瘤细胞的增殖活力，分化程度和肥大细胞的形态及成熟程度。结论改良后的染色法对比度强，染色时间短，操作步骤简便易掌握，适用于组织形态学研究和临床病理外检的辅助诊断。 展开更多

关键词 胃癌 食管癌 染色法 肥大细胞 酸解

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酸变性淀粉改性酪蛋白啤酒瓶标签胶的制备研究 被引量：7

6

作者 陆雪良 曾小君 许一峰 《应用化工》 CAS CSCD 2005年第11期715-718,共4页

采用于酪素、聚乙烯醇、酸变性淀粉为主要原料,制备改性酪蛋白啤酒瓶标签胶,讨论了固含量、碱、反应温度、反应时间、交联剂、酸变性淀粉、聚乙烯醇、终点判断、耐水性、碱洗净性等因素对酪蛋白商标胶的制备与性能的影响.结果表明,制备... 采用于酪素、聚乙烯醇、酸变性淀粉为主要原料,制备改性酪蛋白啤酒瓶标签胶,讨论了固含量、碱、反应温度、反应时间、交联剂、酸变性淀粉、聚乙烯醇、终点判断、耐水性、碱洗净性等因素对酪蛋白商标胶的制备与性能的影响.结果表明,制备改性酪蛋白啤酒瓶标签胶的优化配方及工艺条件为:干酪素15 g,聚乙烯醇10 g,酸变性淀粉10 g,尿素8.4 g;聚丙酰胺1.0 g,磷酸钠1.5 g,交联剂0.8 g,防腐剂0.2 g,氢氧化钠0.6 g,水87.3 g,反应温度58～62℃,反应时间2～3 h.对啤酒瓶贴标过程中存在的问题提出了相应的解决方法. 展开更多

关键词 标签胶 干酪素 酸变性淀粉 聚乙烯醇

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人肌和兔肌肌酸激酶在低pH条件下再折叠的研究 被引量：3

7

作者 李锦平 侯立向 周海梦 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第1期35-41,共7页

利用蛋白质内源荧光和远紫外ＣＤ光谱研究了在低ｐＨ条件下人肌肌酸激酶和兔肌肌酸激酶的构象状态。结果表明，在低离子强度下，随着酸的加入人肌和兔肌肌酸激酶去折叠，至ｐＨ２．０附近几乎都达到充分去折叠。它们的色氨酸荧光发射峰... 利用蛋白质内源荧光和远紫外ＣＤ光谱研究了在低ｐＨ条件下人肌肌酸激酶和兔肌肌酸激酶的构象状态。结果表明，在低离子强度下，随着酸的加入人肌和兔肌肌酸激酶去折叠，至ｐＨ２．０附近几乎都达到充分去折叠。它们的色氨酸荧光发射峰位红移至３５０ｎｍ，这表明了内埋的色氨酸残基已经完全暴露到极性溶剂之中，它们的远紫外ＣＤ光谱表明二级结构也遭破坏，但是仍保留有相当部分的二级结构。而且在高离子强度低ｐＨ条件下由Ｇｏｔｏ等人首先发现的中间体构象状态（融球结构状态）在我们的实验中也被观察到了。它具有与天然酶类似的二级结构。色氨酸荧光发射光谱表明与天然酶类似，它的最大发射峰位也为３３５ｎｍ表明了蛋白质已经完全折叠，然而其荧光强度远低于天然酶，表明这种结构状态具有较大运动性而导致荧光的动态淬灭。上述结果支持了Ｇｏｔｏ等人的发现，说明了融球中间体结构可能是蛋白质折叠过程需经历的一个中间态。 展开更多

关键词 肌酸激酶 酸变性 结构 蛋白 折叠 再折叠 PH值

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羊血球水解蛋白和酸变性血浆蛋白对肉仔鸡生产性能的影响 被引量：1

8

作者 余雄 徐卫锋 +1 位作者 朱文涛 王宏斌 《新疆农业科学》 CAS CSCD 2005年第1期54-56,共3页

在肉仔鸡日粮中添加盐酸水解羊血球蛋白和酸变性血浆蛋白,研究对鱼粉的替代效果。结果显示,羊血球水解蛋白和酸变性血浆蛋白均可代替鱼粉而不影响肉鸡的生长速度,且更为经济。利用盐酸来处理血液蛋白是一种较为有效的改善血粉品质的方法。

关键词 肉仔鸡 血球 鱼粉 生产性能 血液蛋白 肉鸡 日粮 血浆蛋白 羊血 影响

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羊血球水解蛋白及酸变性血浆蛋白对早期断奶仔猪生产性能的影响

9

作者 余雄 徐卫锋 +1 位作者 朱文涛 张贤军 《新疆农业大学学报》 CAS 2006年第2期1-4,共4页

研究了在早期断奶仔猪日粮中添加盐酸水解羊血球蛋白粉和酸变性血浆蛋白粉的效果。结果显示:添加3%血球水解蛋白或酸变性血浆蛋白均十分显著(P<0.01)地提高35日龄断奶仔猪的生长性能,尤其在断奶的前期。这提示用盐酸来处理血液蛋白... 研究了在早期断奶仔猪日粮中添加盐酸水解羊血球蛋白粉和酸变性血浆蛋白粉的效果。结果显示:添加3%血球水解蛋白或酸变性血浆蛋白均十分显著(P<0.01)地提高35日龄断奶仔猪的生长性能,尤其在断奶的前期。这提示用盐酸来处理血液蛋白是一种十分有效的改善血粉品质的方法。 展开更多

关键词 羊血球水解蛋白 酸变性血浆蛋白 断奶仔猪 生长

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白蛋白酸致变性的动态激光散斑研究 被引量：1

10

作者 李新忠 甄志强 +1 位作者 李立本 陈庆东 《中国光学与应用光学》 2009年第5期426-431,共6页

利用动态激光散斑法研究了白蛋白的酸致变性过程。基于动态散斑理论模拟生成了动态散斑序列图;利用模拟和实验散斑图生成的时间序列散斑图及其灰度共生矩阵对白蛋白的酸致变性过程进行了分析;最后用灰度共生矩阵的惯性矩和不同阶段的4... 利用动态激光散斑法研究了白蛋白的酸致变性过程。基于动态散斑理论模拟生成了动态散斑序列图;利用模拟和实验散斑图生成的时间序列散斑图及其灰度共生矩阵对白蛋白的酸致变性过程进行了分析;最后用灰度共生矩阵的惯性矩和不同阶段的4幅散斑图的平均对比度图分析了不同阶段白蛋白胶体溶液中微粒数量和尺寸的变化。理论模拟和实验研究显示,在白蛋白酸致变性过程中,胶体溶液中的蛋白质微粒的运动由剧烈逐渐变得缓慢;同时,微粒数量减少而微粒尺寸增加。研究结果表明,动态激光散斑法是一种实时、快速、有效地研究白蛋白变性过程的新型检测手段。 展开更多

关键词 白蛋白 酸致变性 激光散斑法 动态测量

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β-环状糊精对pEGFPC3质粒DNA酸变性保护作用的初步研究 被引量：1

11

作者 陈郧东 蔡妙颜 +3 位作者 郑文岭 郭祀远 肖凯军 李冰 《广东医学》 CAS CSCD 2002年第10期1022-1024,共3页

目的　探讨 β -环状糊精对pEGFPC3质粒DNA酸变性的保护作用。 方法　用琼脂糖凝胶电泳法首先检测pH 1 0～ 2 5范围内的酸液对pEGFPC3质粒DNA的变性作用 ,然后用同样的方法研究了 β -环状糊精的保护效果。结果　pH 1 0的酸液对pEGFPC... 目的　探讨 β -环状糊精对pEGFPC3质粒DNA酸变性的保护作用。 方法　用琼脂糖凝胶电泳法首先检测pH 1 0～ 2 5范围内的酸液对pEGFPC3质粒DNA的变性作用 ,然后用同样的方法研究了 β -环状糊精的保护效果。结果　pH 1 0的酸液对pEGFPC3质粒DNA的变性作用最强 ,pH 1 5～ 2 5的酸液对其有部分变性作用 ,pH 1 5～ 2 .5范围内 β -环状糊精对质粒DNA具有较为明显的保护作用 ,对于pH 1 0的情况仍不足提供相应的保护。 结论　β 展开更多

关键词 Β-环状糊精 DNA pEGFPC3 质粒 酸变性 基因治疗

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