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miR-142-3p靶向ATG4c调控RAW264.7巨噬细胞自噬 被引量:4
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作者 高倩 段相国 +3 位作者 李振昊 徐向荣 蒋丹 徐广贤 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1578-1582,1588,共6页
目的:研究miR-142-3p对自噬相关基因ATG4c的靶向调控作用,探究miR-142-3p影响RAW264.7细胞自噬途径的作用机制。方法:生物信息学软件分析miR-142-3p的靶基因为ATG4c,构建pMIR-Report-ATG4c和pMIR-Report-ATG4c mut重组质粒,双荧光素酶... 目的:研究miR-142-3p对自噬相关基因ATG4c的靶向调控作用,探究miR-142-3p影响RAW264.7细胞自噬途径的作用机制。方法:生物信息学软件分析miR-142-3p的靶基因为ATG4c,构建pMIR-Report-ATG4c和pMIR-Report-ATG4c mut重组质粒,双荧光素酶报告系统、qRT-PCR、Western blot验证miR-142-3p与ATG4c的靶向作用;将做不同处理的RAW264.7细胞分为4组:正常细胞作为对照、50ng/ml雷帕霉素作用2h、EBSS饥饿作用12 h、10 nmol/L的3-甲基腺嘌呤(3-MA)作用12h后,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-142-3p不同干预组中的相对表达情况;将miR-142-3p mimics、miR-142-3p inhibitor及miR-142-3p control分别转染到RAW264.7细胞中,检测miR-142-3p和LC3Ⅱ的相对表达。结果:双荧光素酶报告系统、qRT-PCR、Western blot验证miR-142-3p通过靶向作用于ATG4c的3'-UTR抑制其表达;与对照组相比,雷帕霉素和饥饿处理的RAW264.7细胞miR-142-3p明显上调,而3-MA处理组miR-142-3p明显下调;与miR-142-3p control组相比,转染miR-142-3p mimics组中LC3Ⅱ蛋白表达显著下调,而miR-142-3p inhibitor组中表达显著上调。结论:miR-142-3p通过靶向调控自噬相关基因ATG4c,参与RAW264.7小鼠巨噬细胞自噬的调控。 展开更多
关键词 miR-142-3p 细胞自噬 atg4c
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EphB2和Atg4C在宫颈鳞癌中的表达及其临床意义
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作者 史慧 王瑞 +1 位作者 陆红梅 陈洪雷 《武汉大学学报(医学版)》 CAS 2022年第4期645-650,共6页
目的:探讨EphB2和Atg4C在宫颈鳞癌中的分布、表达水平及其与患者临床病理参数的关系。方法:随访74例宫颈鳞癌患者并将其肿瘤组织和10例癌旁宫颈组织构建组织芯片。采用量子点免疫荧光组织化学和蛋白印迹技术检测EphB2和Atg4C蛋白在宫颈... 目的:探讨EphB2和Atg4C在宫颈鳞癌中的分布、表达水平及其与患者临床病理参数的关系。方法:随访74例宫颈鳞癌患者并将其肿瘤组织和10例癌旁宫颈组织构建组织芯片。采用量子点免疫荧光组织化学和蛋白印迹技术检测EphB2和Atg4C蛋白在宫颈鳞癌中的表达和分布。结果:免疫组化和蛋白印迹实验均表明EphB2在宫颈鳞癌组织中的表达信号高于癌旁宫颈组织(P=0.036),而Atg4C在宫颈鳞癌组织中的表达信号显著低于癌旁宫颈组织(P=0.042)。在宫颈鳞癌患者中,EphB2的高表达与淋巴结转移(P<0.001)和TNM分期(P=0.002)均显著相关,并可预测患者的不良预后(P=0.003)。Atg4C的低表达与高的TNM分期呈正相关(P=0.002),可预测宫颈鳞癌患者的不良预后(P=0.009)。在宫颈鳞癌中,Atg4C与EphB2的表达水平呈显著负相关性(rs=-0.303;P=0.009),并且,宫颈鳞癌患者肿瘤细胞中高表达EphB2和低表达Atg4C较其他组总体生存最差(P<0.001)。结论:EphB2和Atg4C在宫颈鳞癌中存在异常表达,且Atg4C与EphB2的表达水平存在负相关性,提示自噬可能参与宫颈鳞癌的发生发展。高EphB2和低Atg4C表型是宫颈鳞癌患者总体生存的独立预后因素。 展开更多
关键词 宫颈鳞癌 EPHB2 atg4c 自噬 预后
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