芩百清肺浓缩丸对肺炎支原体感染大鼠肺组织中TGF-β和SP-A表达的影响 被引量：13

1

作者 姚琳 张俊威 +2 位作者 王博 隋美娇 王伟明 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期564-569,共6页

目的探讨芩百清肺浓缩丸对肺炎支原体感染大鼠肺组织的修复作用机制.方法60只Wistar大鼠,♀♂各半,体质量80～100g,随机分为6组,每组10只,分别为空白、模型、阳性对照组,芩百清肺浓缩丸高、中、低剂量组,采用滴鼻法造模;给药10d后,腹主... 目的探讨芩百清肺浓缩丸对肺炎支原体感染大鼠肺组织的修复作用机制.方法60只Wistar大鼠,♀♂各半,体质量80～100g,随机分为6组,每组10只,分别为空白、模型、阳性对照组,芩百清肺浓缩丸高、中、低剂量组,采用滴鼻法造模;给药10d后,腹主动脉采血分离血清,测定血清中IL-6、IL-8及TNFα的水平;采集大鼠左肺及右肺组织中叶,常规HE染色,显微镜下观察肺组织病理改变;实时荧光定量PCR法测定肺组织中转化生长因子-β（TGF-β）及表面活性相关蛋白A（SP-A）mRNA的表达;免疫印迹法检测肺组织中TGF-β、SP-A的蛋白表达.结果芩百清肺浓缩丸能够明显减轻MP感染大鼠肺组织炎症,可下调肺组织中TGF-β的表达,并增加SP-A的表达.结论芩百清肺浓缩丸通过降低TGF-β,抑制肺泡Ⅱ型上皮细胞发生上皮间质转化,并增加SP-A的表达,恢复肺的正常形态与功能. 展开更多

关键词 肺炎支原体 芩百清肺浓缩丸 转化生长因子-Β 表面活性相关蛋白A aec-ⅱ 细胞因子

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芩百清肺浓缩丸对肺炎支原体感染大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞修复作用的研究 被引量：10

2

作者 姚琳 张俊威 +2 位作者 王博 隋美娇 王伟明 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1493-1497,共5页

通过对转化生长因子-β（TGF-β）和表面活性相关蛋白A（SP-A）给药前后的表达变化及分布,探讨芩百清肺浓缩丸对肺炎支原体（MP）感染大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的修复作用机制。取60只Wistar大鼠,雌雄各半,体重80～100 g,随机分为6组,每组10... 通过对转化生长因子-β（TGF-β）和表面活性相关蛋白A（SP-A）给药前后的表达变化及分布,探讨芩百清肺浓缩丸对肺炎支原体（MP）感染大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的修复作用机制。取60只Wistar大鼠,雌雄各半,体重80～100 g,随机分为6组,每组10只,分别为空白组,模型组,阳性对照组,芩百清肺浓缩丸高、中、低剂量组,采用滴鼻法造模;给药10 d后收集大鼠肺泡灌洗液、血清、左肺及右肺组织中叶,采用免疫组化法检测肺组织中TGF-β及SP-A的蛋白表达及分布;实时荧光定量PCR法测定肺组织中TGF-β,SP-A mRNA的表达;酶联免疫法测定血清及肺泡灌洗液（BALF）中SP-A的含量。通过数据分析可知,芩百清肺浓缩丸能够下调肺组织中TGF-β的表达,增加SP-A的表达,其中TGF-β主要分布于肺间质,SP-A主要分布于AEC-Ⅱ及部分肺泡巨噬细胞内;同时,能够降低血清中SP-A含量,增加BALF中SP-A含量。通过以上结果可知,芩百清肺浓缩丸通过降低TGF-β的表达抑制AEC-Ⅱ发生上皮间质转化,并增加SP-A的表达,恢复肺的正常形态与功能;同时,对MP引起的肺组织毛细血管损伤具有一定的修复作用。 展开更多

关键词 肺炎支原体 芩百清肺浓缩丸 肺泡ⅱ型上皮细胞 转化生长因子-Β 表面活性相关蛋白A

原文传递

急性肺缺氧代谢对肺泡上皮Ⅱ型细胞超微结构、转化生长因子β1及凋亡诱导因子表达的影响 被引量：7

3

作者 苌恩强 潘灵辉 林飞 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期69-71,共3页

目的研究急性肺缺氧代谢对肺泡Ⅱ型上皮细胞(AEC-Ⅱ)超微结构、肺组织及血清中转化生长因子β1(TGF-β1)和凋亡诱导因子(AIF)表达的影响。方法 40只SD大鼠随机均分为A、B、C及D组,A、B、C组行单肺通气;D组行双肺通气。分别于实验30min(A... 目的研究急性肺缺氧代谢对肺泡Ⅱ型上皮细胞(AEC-Ⅱ)超微结构、肺组织及血清中转化生长因子β1(TGF-β1)和凋亡诱导因子(AIF)表达的影响。方法 40只SD大鼠随机均分为A、B、C及D组,A、B、C组行单肺通气;D组行双肺通气。分别于实验30min(A组)、60min(B组)及120min(C和D组)测定肺组织超微结构变化以及血清和肺组织TGF-β1、AIF表达。结果 A、B及C组均出现了不同程度的AEC-Ⅱ细胞超微结构的改变,而D组基本正常。A、B、C组肺组织与血清中TGF-β1、AIF表达高于D组,且随缺氧时间延长呈上升趋势(D组<A组<B组<C组,P<0.01)。结论低氧代谢引起大鼠肺组织细胞结构发生改变及TGF-β1和AIF表达上调。 展开更多

关键词 低氧代谢 肺上皮ⅱ型细胞 转化生长因子Β1 凋亡诱导因子

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miR-223对肺炎链球菌诱导的肺泡上皮细胞损伤的影响

4

作者 李勤英 唐斌 《实验与检验医学》 CAS 2022年第4期387-390,400,共5页

目的 研究miR-223对肺炎链球菌诱导的肺泡上皮细胞凋亡和炎症的作用及机制。方法 将肺泡Ⅱ型上皮细胞(AEC-Ⅱ)分为对照组、干扰组、miR-NC组、miR-223组、anti-miR-NC组和anti-miR-223组;对照组AEC-Ⅱ细胞常规培养,干扰组用1×10~8C... 目的 研究miR-223对肺炎链球菌诱导的肺泡上皮细胞凋亡和炎症的作用及机制。方法 将肺泡Ⅱ型上皮细胞(AEC-Ⅱ)分为对照组、干扰组、miR-NC组、miR-223组、anti-miR-NC组和anti-miR-223组;对照组AEC-Ⅱ细胞常规培养,干扰组用1×10~8CFU/mL肺炎链球菌培养AEC-Ⅱ细胞,miR-NC组、miR-223组、anti-miR-NC组和anti-miR-223组AEC-Ⅱ细胞分别转染不同载体,然后进行肺炎链球菌处理。流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot检测细胞中cl-caspase-3和pro-caspase-3蛋白表达水平,ELISA法检测细胞培养上清中白介素-6(IL-6)和白介素-10(IL-10)的含量;qRT-PCR检测细胞中miR-223的水平,双荧光素酶报告系统验证miR-223与FGD5-AS1的靶向关系。结果 与对照组相比,肺炎链球菌干扰组AEC-Ⅱ细胞凋亡率升高,培养上清液中IL-6增多且IL-10减少,细胞中miR-223和cl-caspase-3含量升高,凋亡蛋白前体pro-caspase-3含量降低,差异均有统计学意义(P<0.05);过表达miR-223可促进肺炎链球菌诱导的AEC-Ⅱ细胞凋亡和炎症;抑制miR-223表达可抑制肺炎链球菌诱导的AEC-Ⅱ细胞凋亡和炎症;双荧光素酶报告实验发现,miR-223与FGD5-AS1存在靶向结合关系。结论 miR-223可能靶向FGD5-AS1调控肺炎链球菌诱导的AEC-Ⅱ炎症和细胞凋亡。 展开更多

关键词 肺泡上皮细胞 aec-ⅱ 肺炎链球菌 miR-223 FGD5-AS1 炎症

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促炎症细胞因子对新生猪肺泡Ⅱ型上皮细胞相关生长因子表达的影响 被引量：1

5

作者 吴盼盼 刘海沛 +2 位作者 钱莉玲 俞彰 孙波 《中国小儿急救医学》 CAS 2010年第3期244-247,I0002,共5页

下载PDF阅读器目的 建立出生后1～3 d新生猪肺泡Ⅱ型上皮细胞（AEC-Ⅱ）体外分离纯化及鉴定方法,探讨促炎症细胞因子对AEC-Ⅱ长因子（GFs）的影响,比较不同消化酶溶液、纯化方法获得细胞产量、活力及AEC-Ⅱ纯度的差异.方法 原代培养AEC-... 下载PDF阅读器目的 建立出生后1～3 d新生猪肺泡Ⅱ型上皮细胞（AEC-Ⅱ）体外分离纯化及鉴定方法,探讨促炎症细胞因子对AEC-Ⅱ长因子（GFs）的影响,比较不同消化酶溶液、纯化方法获得细胞产量、活力及AEC-Ⅱ纯度的差异.方法 原代培养AEC-Ⅱ24 h给予不同浓度IL-1β、IL-6刺激48 h,观察AEC-Ⅱ增殖变化,RT-PCR检测胰岛素样生长因子-1（IGF-Ⅰ）、血小板源性生长因子（PDGF）、表面活性物质蛋白（SP）-A及-B mRNA的表达情况,并检测IGF-Ⅰ抗体对AEC-Ⅱ增殖及SP-A、SP-B mRNA表达的影响.结果 30000 U/L弹力蛋白酶/0.1%胰酶在37℃下消化新生猪肺组织20 min获得细胞产量为（5.33±0.54）×106/g（肺重＋心重）,显著高于其他各组（P〈0.01）.免疫黏附法纯化AEC-Ⅱ产量明显高于Percoll法,为（38.0±28.0）×106/头新生猪.AEC-Ⅱ原代培养24～96 h状态最佳.随IL-1β、IL-6刺激浓度升高,AEC-Ⅱ增殖能力及IGF-Ⅰ及SP-A mRNA表达水平降低,但PDGF、SP-B mRNA的表达无明显变化.IGF-Ⅰ抗体刺激下,AEC-Ⅱ增殖能力及SP-A、SP-B mRNA表达水平均降低.结论 IL-1B、IL-6可能通过调节AEC-Ⅱ中IGF-Ⅰ mRNA的表达影响细胞的增殖及功能. 展开更多

关键词 aec-ⅱ 生长因子 促炎症细胞因子 新生猪

原文传递

地塞米松联合重组BPI蛋白干预对肺炎支原体感染小鼠的肺功能及AEC-Ⅱ细胞超微结构和血清sB7-H3、sPD-1水平的影响 被引量：7

6

作者 王晶晶 袁文杏 +2 位作者 张向民 郭陶陶 刘敏 《标记免疫分析与临床》 CAS 2020年第3期508-512,共5页

目的探究并分析地塞米松联合重组杀菌性/通透性增加蛋白(bactericidal/permeability-enhancing protein,BPI)对肺炎支原体感染小鼠肺功能、肺泡Ⅱ型上皮细胞(alveolar epithelial cell typeⅡ,AEC-Ⅱ)超微结构及可溶性B7-H3(sB7-H3)及... 目的探究并分析地塞米松联合重组杀菌性/通透性增加蛋白(bactericidal/permeability-enhancing protein,BPI)对肺炎支原体感染小鼠肺功能、肺泡Ⅱ型上皮细胞(alveolar epithelial cell typeⅡ,AEC-Ⅱ)超微结构及可溶性B7-H3(sB7-H3)及可溶程序性死亡分子-1(soluble programmed death molecule-1,sPD-1)表达的影响。方法选取健康小鼠120只(清洁级,体重20~25g),按照随机数字表法将其分为对照组和观察组,每组60只。所有小鼠均肺炎支原体感染造模成功(经过肺炎支原体感染)。对照组小鼠又随机分为未处理组、处理后1周组(地塞米松处理)、处理后2周组(地塞米松处理),每组20只。观察组小鼠又随机分为未处理组、处理后1周组(地塞米松+重组BPI蛋白)、处理后2周组(地塞米松+重组BPI蛋白),每组20只。观察两组小鼠处理前、处理后1周、处理后2周肺功能、AEC-Ⅱ细胞超微结构、sB7-H3、sPD-1相对表达量。结果两组小鼠处理前后肺功能差异具有统计学意义(P<0.05),处理后两组小鼠肺功能显著提高,且观察组小鼠处理1周、2周肺功能显著高于对照组(P<0.05);处理前两组小鼠AEC-II超微结构差异无统计学意义,处理后观察组小鼠AEC-II超微结构显著比对照组小鼠正常。经重复方差分析,两组小鼠处理前后sB7-H3、sPD-1水平差异具有统计学意义(P<0.05),处理后,两组小鼠sB7-H3、sPD-1水平显著降低(P<0.05),处理1周、2周观察组小鼠sB7-H3、sPD-1水平明显低于对照组(P<0.05),差异具有统计学意义。结论重组BPI蛋白联合地塞米松能有效降低肺炎支原体感染小鼠sB7-H3及sPD-1表达,增强肺炎支原体感染小鼠肺功能,减少AEC-Ⅱ细胞超微结构损伤。 展开更多

关键词 肺炎支原体感染 小鼠 地塞米松 aec-ⅱ细胞超微结构

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鸡肺泡上皮Ⅱ型细胞的培养与鉴定 被引量：2

7

作者 侯海燕 赵立红 +3 位作者 乔健 金继昌 赵慧颖 胡永峰 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期6-10,共5页

为研究禽流感等敏感病毒及其他致病因子对肺泡上皮Ⅱ型细胞（AEC-Ⅱ）的致病性,建立了鸡AEC-Ⅱ细胞体外培养方法。采用胰蛋白酶和Ⅳ型胶原酶联合消化法对18日龄鸡胚肺组织进行消化,经差速离心和免疫黏附,获得了鸡AEC-Ⅱ细胞,再经纯化、... 为研究禽流感等敏感病毒及其他致病因子对肺泡上皮Ⅱ型细胞（AEC-Ⅱ）的致病性,建立了鸡AEC-Ⅱ细胞体外培养方法。采用胰蛋白酶和Ⅳ型胶原酶联合消化法对18日龄鸡胚肺组织进行消化,经差速离心和免疫黏附,获得了鸡AEC-Ⅱ细胞,再经纯化、体外培养和碱性磷酸酶染色法鉴定。结果表明,鸡AEC-Ⅱ细胞在接种后18 h开始贴壁进入适应期,细胞为圆形,呈岛屿状生长;接种后24-72 h,进入对数生长期,细胞为多边形,并融合成单层,胞浆内有明显的颗粒;接种后第4天细胞数量达到高峰（1.38×10^5个/mL）,并进入稳定生长期,胞浆内颗粒开始减少;接种后6-7 d,细胞进入衰退期,胞浆内颗粒显著减少,细胞逐渐死亡、脱落。另外,4代（F4）之前的AEC-Ⅱ传代细胞贴壁时间早,形态均一,纯度高。说明接种后24-72 h内获得的AEC-Ⅱ原代细胞和F4之前的传代细胞可以供体外试验研究。 展开更多

关键词 鸡胚 肺泡上皮ⅱ型细胞 原代培养 传代培养 细胞生长曲线 细胞鉴定

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Ⅱ型肺泡上皮细胞与急性肺损伤的研究进展 被引量：8

8

作者 李超然 王智刚 朱运奎 《中国医药科学》 2011年第11期23-24,28,共3页

AECⅡ是肺泡壁的重要组成部分,也是ALI/ARDS发生、发展的重要参与者。AECⅡ可通过分泌炎症介质和促凝、抗凝因子参与ALI时全身炎症反应综合征和凝血反应失衡的形成。AECⅡ上Na+-K+-ATP酶活性以及数量的下调加重了ALI时的肺水肿。肺组织... AECⅡ是肺泡壁的重要组成部分,也是ALI/ARDS发生、发展的重要参与者。AECⅡ可通过分泌炎症介质和促凝、抗凝因子参与ALI时全身炎症反应综合征和凝血反应失衡的形成。AECⅡ上Na+-K+-ATP酶活性以及数量的下调加重了ALI时的肺水肿。肺组织内的AECⅡ增生并转化为AECⅠ以及间质细胞参与了肺损伤后的修复和纤维化的形成。而且,AECⅡ还具有免疫调节功能,参与肺组织内的防御反应。近年来研究发现,与AECⅡ相关的生物标志物SP-D和KL-6与ALI/ARDS肺损伤的严重程度及疾病的预后相关,但尚无对SP-D或KL-6与炎症反应相关性的研究。 展开更多

关键词 ⅱ型肺泡上皮细胞 急性肺损伤 生物标志物

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右归饮对肺纤维化大鼠前列腺素及其受体的影响 被引量：4

9

作者 邱岳 刘金民 +9 位作者 唐磊 申萌萌 南亚楠 田如玉 朱曼 康荻 李彧 牛建昭 高誉珊 李亚东 《临床和实验医学杂志》 2019年第6期561-565,共5页

目的探讨前列腺素及其受体EP2/EP3在右归饮改善大鼠肺纤维化中的作用机制。方法 SPF级雄性SD大32只采用随机数字表完全随机法分为正常组、模型组、右归饮低剂量组(右低组)、右归饮高剂量组(右高组)各8只。正常组无任何干预,模型及用药... 目的探讨前列腺素及其受体EP2/EP3在右归饮改善大鼠肺纤维化中的作用机制。方法 SPF级雄性SD大32只采用随机数字表完全随机法分为正常组、模型组、右归饮低剂量组(右低组)、右归饮高剂量组(右高组)各8只。正常组无任何干预,模型及用药组经气管插管雾化博来霉素(6 mg/kg)建立实验性肺纤维化大鼠模型。造模后第14天右低组和右高组分别定时给予5 g/kg、10 g/kg右归饮灌胃1次,模型组等量饮用水灌胃,连续给药20 d。记录大鼠肺脏质量和体重,计算肺脏系数,ELISA法检测血清和肺组织中前列腺素E2(PGE2)的浓度,免疫组织化学染色分析肺组织中EP2和EP3的表达情况以及组织定位,分别计数阳性细胞数目。结果与正常组相比,模型组大鼠肺脏质量(3. 1±0. 44 g,P <0. 05)和肺脏系数(0. 69±0. 13%,P <0. 05)均病理性升高;血清PGE2为45. 49±7. 38 pg/ml(P <0. 05),肺组织中PGE2为113. 64±16. 78 pg/ml(P <0. 05),均显著升高;与正常组相比,模型大鼠肺组织实变区内可见大量EP2强阳性的AECⅡs异常增生,肺泡管和肺泡腔内大量聚集的巨噬细胞部分呈EP3阳性,EP2阳性和EP3阳性的细胞数量均显著增加(P <0. 05);与模型组比较,右低组大鼠肺脏质量(2. 63±0. 24 g,P <0. 05)和肺脏系数下降(0. 57±0. 08%,P <0. 05),血清中的PGE2(23. 01±8. 61 pg/ml,P <0. 05)和肺组织的PGE2(89. 84±20. 54 pg/ml,P<0. 05)水平均降低,EP2阳性的Ⅱ型肺泡上皮细胞(AECⅡs)细胞EP2表达减弱,细胞数量减少(P <0. 05),而EP3阳性的巨噬细胞数增加(P <0. 05),右高组除血清中的PGE2水平降低(P <0. 05)外,其他未见统计学差异。结论右归饮能够明显改善博来霉素所致大鼠肺纤维化,可能与降低肺脏组织中PGE2水平,抑制实变区EP2的表达,减少EP2阳性的AECⅡs数量,增加EP3阳性的巨噬细胞有关。 展开更多

关键词 大鼠 肺纤维化 右归饮 前列腺素E2 EP2 EP3 aecⅱs 巨噬细胞

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敲除Brg1基因对小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞数量和功能的影响及其机制研究 被引量：3

10

作者 阮玲瑛 薛坤娇 +2 位作者 应林燕 符州 邹文静 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期656-663,共8页

目的研究染色质重构复合物核心催化亚基(Brahma-related gene 1,Brg1)对C57BL/6小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞数量和功能的影响及其可能的机制。方法取6~8周龄雌性野生型C57BL/6小鼠(Wild type,WT)及Ⅱ型肺泡上皮细胞(alveolar epithelial cell ... 目的研究染色质重构复合物核心催化亚基(Brahma-related gene 1,Brg1)对C57BL/6小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞数量和功能的影响及其可能的机制。方法取6~8周龄雌性野生型C57BL/6小鼠(Wild type,WT)及Ⅱ型肺泡上皮细胞(alveolar epithelial cell Ⅱ,AECⅡs)上特异性敲除Brg1的C57BL/6小鼠(Brg1fl/fl)作为实验对象,每组选取8只小鼠,收取标本,利用免疫组化及免疫荧光分析肺组织中表面活性物质相关蛋白C(surfactant-associated protein C,SFTPC)阳性的细胞率,流式细胞术分析小鼠肺组织中表面活性物质蛋白C前体蛋白(prosurfactant protein C,pro SP-C)阳性的细胞(即AECⅡs)数量。Western blot检测各组小鼠肺组织中pro SP-C、SFTPC、表面活性物质相关蛋白A(surfactant-associated protein A,SFTPA)、表面活性物质相关蛋白D(surfactant-associated protein D,SFTPD)的表达水平。Western blot检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)表达及增殖相关信号转导途径中关键蛋白EGFR、p-EGFR、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT及NF-κB p65的活化水平。结果抗SFTPC免疫组化、免疫荧光显示其在肺泡上皮表达较WT小鼠增多(P<0.05);流式细胞术显示Brg1fl/fl组小鼠肺组织中pro SP-C+的细胞百分比较WT小鼠明显增高(P<0.05),Western blot检测结果显示AECⅡs的功能性蛋白pro SP-C、SFTPC、SFTPA及SFTPD在Brg1^fl/fl小鼠中明显增多;Brg1^fl/fl组小鼠肺组织中NF-κB p65及周期蛋白CyclinD1的表达增加,且p-EGFR/EGFR、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT百分比显著提高,且差异均有统计学意义(P<0.05)。结论特异性敲除C57BL/6小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞中的Brg1可促使AECⅡs数量和分泌功能的增加,其可能机制与敲除Brg1促进EGFR/PI3K/AKT/NF-κB信号通路的激活,且与增殖周期蛋白CyclinD1表达的增加有关。 展开更多

关键词 Brg1 aecⅱ EGFR/PI3K/AKT信号通路 NF-ΚB P65 细胞周期蛋白1

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不同体积分数氧对胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞体外生长状态的影响 被引量：1

11

作者 李祝 方芳 +3 位作者 冉迎春 敖晓晓 姚兰 许峰 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期686-689,共4页

目的:探讨不同氧体积分数状态下,胎鼠原代肺泡Ⅱ型上皮细胞(Alveolar typeⅡepithelial cell,AECⅡ)体外生长状态的变化。方法:原代培养胎鼠AECⅡ并用电镜鉴定;建立氧体积分数0.95组(95%O2)、氧体积分数0.4组(40%O2)和空气组(21%O2)3种... 目的:探讨不同氧体积分数状态下,胎鼠原代肺泡Ⅱ型上皮细胞(Alveolar typeⅡepithelial cell,AECⅡ)体外生长状态的变化。方法:原代培养胎鼠AECⅡ并用电镜鉴定;建立氧体积分数0.95组(95%O2)、氧体积分数0.4组(40%O2)和空气组(21%O2)3种氧化损伤性细胞模型,各自暴露12、24 h和48 h;用倒置相差显微镜观察各组细胞的形态变化;四甲基偶氮唑盐反应比色法(MTT法)检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞内活性氧(Reactive oxygen species,ROS)浓度。结果:与空气组相比,氧体积分数0.4组在12、24 h存活率和凋亡率均无统计学差异,但48 h后出现统计学差异,ROS在24 h即出现统计学差异;氧体积分数0.95组每组均和空气组有统计学差异。此外,氧体积分数0.4组细胞的形态变化较氧体积分数0.95组损伤轻,但仍重于空气组。结论:体外40%O2的氧刺激在超过48 h以后,AECⅡ也会出现相应的氧化损伤。 展开更多

关键词 氧化应激 肺泡ⅱ型上皮细胞 高氧 活性氧

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醇醚羧酸/盐(Ⅱ)的绿色制备及性能研究 被引量：1

12

作者 杨志 林雨 +2 位作者 李锦辉 焦飞祥 弓亚琼 《山西化工》 2020年第1期5-7,共3页

以脂肪醇醚(AEO9)、琥珀酸酐及NaOH为原料通过绿色的方法合成了新型醇醚羧酸(AECⅡ-H)和醇醚羧酸盐(AECⅡ-Na),并通过FT-IR对AECⅡ结构进行表征.与传统AEC的合成工艺相比,本实验中设计的AECⅡ的制备方法具有能耗低、反应条件温和、转化... 以脂肪醇醚(AEO9)、琥珀酸酐及NaOH为原料通过绿色的方法合成了新型醇醚羧酸(AECⅡ-H)和醇醚羧酸盐(AECⅡ-Na),并通过FT-IR对AECⅡ结构进行表征.与传统AEC的合成工艺相比,本实验中设计的AECⅡ的制备方法具有能耗低、反应条件温和、转化率高、安全性好的特点.将制得的AECⅡ从润湿性、乳化性及泡沫性与传统氯乙酸化法制得的AEC进行比较.结果表明,AECⅡ展现出优异的性能,这为今后的实际工业应用提供了一个新的选择. 展开更多

关键词 aecⅱ 润湿性 乳化性 泡沫性

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构建一种分离培养原代小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞改良方法

13

作者 严玉玲 周园红 叶红 《海南医学》 CAS 2016年第20期3280-3282,共3页

目的建立可靠稳定的小鼠肺泡Ⅱ上皮细胞(AECⅡ)的分离、原代培养技术,为进一步研究AECⅡ转分化分泌生长转化因子β1(TGF-β1)等物质与乳腺癌休眠细胞激活的相关机制奠定基础。方法采用传统的方法和改良后方法分别提取20只小鼠AECⅡ,将... 目的建立可靠稳定的小鼠肺泡Ⅱ上皮细胞(AECⅡ)的分离、原代培养技术,为进一步研究AECⅡ转分化分泌生长转化因子β1(TGF-β1)等物质与乳腺癌休眠细胞激活的相关机制奠定基础。方法采用传统的方法和改良后方法分别提取20只小鼠AECⅡ,将其所提取的细胞数量进行对比。结果传统组小鼠可获得(4.21±2.31)×106个,改良组小鼠可获得(13.0±2.20)×106个,差异有统计学意义(P<0.05),而两组小鼠在体质量、年龄以及肺组织重量方面比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论此改良方法可成功获得大量稳定的AECⅡ,为进一步研究AECⅡ转分化分泌TGF-β1等物质与乳腺癌休眠细胞激活的相关机制奠定基础。 展开更多

关键词 小鼠肺泡ⅱ上皮细胞 传统方法 改良方法 原代培养

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砷暴露及雌激素受体拮抗剂对雌、雄胎鼠AECⅡ内ERβ表达的影响

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作者 杨梦平 车望军 +2 位作者 程亚龄 熊林森 张浩 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期364-368,共5页

目的观察砷暴露及雌激素受体拮抗剂(ICI182,780)对雌、雄胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)内雌激素受体β(ERβ)表达的影响。方法孕19~20dICR小鼠剖腹取胎鼠,分离、纯化雌性组和雄性组胎鼠AECⅡ。四甲基亚唑蓝(MTT)法确定亚砷酸钠(NaAsO2)染... 目的观察砷暴露及雌激素受体拮抗剂(ICI182,780)对雌、雄胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)内雌激素受体β(ERβ)表达的影响。方法孕19~20dICR小鼠剖腹取胎鼠,分离、纯化雌性组和雄性组胎鼠AECⅡ。四甲基亚唑蓝(MTT)法确定亚砷酸钠(NaAsO2)染毒AECⅡ细胞的剂量。将AECⅡ细胞分为以不同剂量(低、中、高)NaAsO2染毒的砷暴露组,培养24h;另取AECⅡ细胞为联合暴露组,分别加入二甲基亚砜(DMSO)(溶剂对照组)、NaAsO25μmol/L(单独砷染毒组)、NaAsO2(5μmol/L)+ICI182,780(1×10-4 mol/L)(砷+拮抗剂组),培养24h;均设空白对照组(不加任何试剂)。24h后,砷暴露组行流式细胞术测凋亡率,砷暴露组、联合暴露组行实时荧光定量PCR法和Western blot检测胎鼠AECⅡ内ERβmRNA和蛋白的表达水平。结果AECⅡ纯度达(87.0±2.5)%。MTT法将0.5(低)、1.25(中)、5(高)μmol/L的浓度设置为染毒剂量。砷暴露组中:雌、雄中、高剂量组细胞凋亡率均高于空白对照组(P<0.05),而雌、雄各剂量组间比较差异无统计学意义。雌性中、高剂量组ERβmRNA和蛋白表达水平高于空白对照组(P<0.05)和同剂量组雄性(P<0.05);雄性各剂量组ERβmRNA和蛋白表达水平与空白对照组比较差异无统计学意义。联合暴露组中:雌性单独砷染毒组ERβmRNA和蛋白表达水平高于砷+拮抗剂组(P<0.01)及同剂量组雄性(P<0.05),且高于空白对照组和溶剂对照组(P<0.05),雄性各组间比较差异无统计学意义;雌、雄其余各组间比较差异无统计学意义。结论砷暴露可使雌性胎鼠AECⅡ内ERβ表达上调且高于雄性,此过程可被雌激素受体拮抗剂阻断。 展开更多

关键词 胎鼠 肺泡ⅱ型上皮细胞 雌激素受体Β 雌激素受体拮抗剂 亚砷酸钠

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不同浓度VEGF对AECII表达SP-B和TGF-β1的影响及意义

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作者 薛春红 曾万江 +2 位作者 乔福元 刘海意 祝秀 《中国优生与遗传杂志》 2011年第4期20-21,38,共3页

目的探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)对肺泡II型细胞(type 2 alveolar epi-thelial cell,AECⅡ)表面活性蛋白-B(surfactant associated protein,SP-B)和转化生长因子-β1(transforming growth fac-tor b... 目的探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)对肺泡II型细胞(type 2 alveolar epi-thelial cell,AECⅡ)表面活性蛋白-B(surfactant associated protein,SP-B)和转化生长因子-β1(transforming growth fac-tor beta-1,TGF-β1)表达的影响及意义。方法原代培养早产鼠AECII,采用real-time RT-PCR、细胞免疫染色等方法,观察VEGF对AECII SP-B及TGF-β1表达的影响。结果 Real-time PCR结果显示25ng/ml VEGF组与正常组相比SP-B mRNA表达水平明显上升(P<0.05)。25ng/ml VEGF组与正常组相比TGF-β1 mRNA表达明显下降(P<0.05),其他各组与正常组相比无统计学差异(P>0.05)。结论 VEGF在适宜浓度时有促进SP-B表达的作用,同时有抑制TGF-β1表达的作用,推测VEGF促进SP-B表达的作用与直接或间接抑制TGF-β1的表达有关。 展开更多

关键词 血管内皮细胞生长因子 肺泡ⅱ型细胞 表面活性蛋白-B 转化生长因子

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黄曲霉素对裸鼹鼠肺泡上皮Ⅱ型细胞基因表达的影响

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作者 丛薇 余琛琳 +7 位作者 林丽芳 赵善民 杨文静 蔡丽萍 汤球 孙伟 徐晨 李莉 《现代生物医学进展》 CAS 2016年第15期2847-2851,共5页

目的:观察不同浓度黄曲霉素对裸鼹鼠肺泡上皮Ⅱ型细胞(AEC II)相关因子m RNA表达的影响,探讨裸鼹鼠抵御肺癌的分子机制。方法:通过酶消化法分离裸鼹鼠肺组织细胞并用免疫黏附法进行纯化得到裸鼹鼠肺泡上皮Ⅱ型细胞进行原代培养,40小时后... 目的:观察不同浓度黄曲霉素对裸鼹鼠肺泡上皮Ⅱ型细胞(AEC II)相关因子m RNA表达的影响,探讨裸鼹鼠抵御肺癌的分子机制。方法:通过酶消化法分离裸鼹鼠肺组织细胞并用免疫黏附法进行纯化得到裸鼹鼠肺泡上皮Ⅱ型细胞进行原代培养,40小时后,实验组分别给予不同浓度(0.25、0.5、1.0、2.0和4.0 mg/L)的黄曲霉素处理,溶剂对照组给予DMSO(0.4 m L/L)处理。黄曲霉素作用48小时后收集细胞,用实时定量PCR技术检测裸鼹鼠AECII细胞中的SP-C基因及TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8、IL-12等炎症因子的m RNA表达变化。结果:原代分离的裸鼹鼠AEC II细胞纯度>70%,活性>90%,可用于体外实验。定量PCR结果显示黄曲霉素使裸鼹鼠AEC II细胞SP-C表达水平显著下降,TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8、IL-12等炎症因子的表达水平在黄曲霉低于2 mg/L浓度的条件下没有显著变化。结论:裸鼹鼠AEC II细胞在黄曲霉素导致细胞受损的情况下,仍然保持较低水平的炎症因子表达,这可能是其抵抗肺癌的机制之一。 展开更多

关键词 肺泡上皮ⅱ型细胞 黄曲霉素 裸鼹鼠 炎症因子

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p53和NF-κB信号通路在MTB感染AECⅡ细胞中的免疫调控作用研究 被引量：5

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作者 蔡玉荣 王媛 +4 位作者 孔云逸 曾瑾 王娟 高蔚丰 李勇(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期769-776,782,共9页

目的:研究在结核分枝杆菌(MTB)感染肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)过程中,p53和NF-κB信号通路中相关信号分子是否参与了抗结核的先天免疫调控。方法:利用实时荧光定量PCR、Western blot和蛋白芯片技术,通过过表达和抑制AECⅡ细胞中的p53和NF-... 目的:研究在结核分枝杆菌(MTB)感染肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)过程中,p53和NF-κB信号通路中相关信号分子是否参与了抗结核的先天免疫调控。方法:利用实时荧光定量PCR、Western blot和蛋白芯片技术,通过过表达和抑制AECⅡ细胞中的p53和NF-κB基因,分析在牛结核分枝杆菌弱毒株卡介苗(BCG)感染过程中p53和NF-κB信号通路的信号分子和细胞炎症因子的表达变化,并探讨p53与NF-κB信号通路在AECⅡ细胞抗MTB感染免疫应答中的“cross-talk”关系。结果:在A549细胞中,p53信号通路通过p53协同CBP来负调控NF-κB、TLR-4及TRAF6的表达,从而抑制NF-κB信号通路的活化,并上调IL-6、IL-8、TNF-α、IFN-γ的表达;而NF-κB信号通路通过NF-κB协同TLR-4、TRAF6与CBP来负调控p53与MDM2的表达,从而抑制p53信号通路的激活,同时上调了IL-6、IL-8、TNF-α、IFN-γ的表达。当BCG感染A549细胞时,p53信号通路中p53协同MDM2负调控CBP,进而上调NF-κB信号通路的TLR-4和TRAF6;同时,NF-κB信号通路通过TLR-4和TRAF6协同MDM2、CBP活化p53信号通路;细胞炎症因子IL-6、IL-8、TNF-α、IFN-γ的表达均显著上调。结论:在AECⅡ细胞中p53信号通路与NF-κB信号通路间存在拮抗作用;当受到BCG刺激时,p53信号通路与NF-κB信号通路表现出协同参与AECⅡ细胞抗MTB感染的免疫调控作用,本研究为深入探讨p53和NF-κB信号通路在肺泡上皮细胞抗结核中的免疫调控机制提供了理论参考。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌 aecⅱ细胞 P53 NF-ΚB 免疫调控

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高氧调节早产大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞CCAAT增强子结合蛋白α和肺泡表面活性蛋白的表达 被引量：6

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作者 卢衍敏 卢红艳 +3 位作者 刘姜艳 常明 王秋霞 唐炜 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期767-771,共5页

目的探讨高氧状态下早产大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AEC2)中CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)和肺泡表面活性蛋白A(SP-A)、SP-B、SP-C、SP-D的表达及两者相关性。方法原代培养早产大鼠AEC2,利用950 mL/LO_2建立高氧细胞损伤模型,随机分为空气... 目的探讨高氧状态下早产大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AEC2)中CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)和肺泡表面活性蛋白A(SP-A)、SP-B、SP-C、SP-D的表达及两者相关性。方法原代培养早产大鼠AEC2,利用950 mL/LO_2建立高氧细胞损伤模型,随机分为空气对照组和高氧实验组。分别于空气及高氧暴露后24、48、72 h,收获各组细胞。采用倒置相差显微镜观察各组细胞形态变化,实时荧光定量PCR及Western blot法分别检测C/EBPα和SP-A、SP-B、SP-C、SP-D mRNA及蛋白水平;CCK-8法检测细胞增殖。结果随培养时间延长,空气组细胞C/EBPαmRNA及蛋白表达逐渐降低,SP-A、SP-B、SP-C、SP-D mRNA和蛋白水平及AEC2增殖逐渐升高。高氧组细胞C/EBPα、SP-A、SP-B、SP-C、SP-D mRNA和蛋白水平及AEC2增殖呈先递增后递减趋势。与空气组相比,高氧组细胞C/EBPα、SP-A、SP-B、SP-C、SP-D mRNA和蛋白水平及AEC2增殖在高氧48 h明显增加。高氧组细胞C/EBPα蛋白水平与SP-A、SP-B、SP-C、SP-D蛋白水平及AEC2增殖呈正相关(r=0.96、0.98、0.92、0.97、0.90)。结论高氧暴露早期,C/EBPα可促进肺泡表面活性蛋白分泌,参与机体保护性调节作用,但随高氧暴露时间延长,丧失代偿保护作用。 展开更多

关键词 高氧 肺泡ⅱ型上皮细胞(aec2) C/EBPΑ 肺泡表面活性蛋白 增殖 大鼠

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麦味养肺汤通过调控p53/p21信号通路抑制Ⅱ型肺泡上皮细胞衰老抗肺纤维化的作用机制研究

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作者 王单 徐泳 +4 位作者 黄同杏 韩迪 王晶 魏云 周贤梅 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期754-763,共10页

目的探讨麦味养肺汤(麦冬、五味子、党参等)通过调控p53/p21信号通路抑制Ⅱ型肺泡上皮细胞(AECⅡ)衰老抗肺纤维化的作用机制。方法将C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、麦味养肺汤组(60 g·kg^(-1)·d^(-1))和阳性对照组(吡... 目的探讨麦味养肺汤(麦冬、五味子、党参等)通过调控p53/p21信号通路抑制Ⅱ型肺泡上皮细胞(AECⅡ)衰老抗肺纤维化的作用机制。方法将C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、麦味养肺汤组(60 g·kg^(-1)·d^(-1))和阳性对照组(吡非尼酮,0.3 g·kg^(-1)·d^(-1)),每组6只。采用气管滴注博来霉素(5 mg·kg-1)复制肺纤维化小鼠模型;造模后次日开始灌胃给药,每日1次,连续给药21 d。检测并记录小鼠肺顺应性与肺阻力的变化;活体micro-CT成像法检测小鼠肺组织纤维化程度;采用HE、Masson染色法观察、评估肺组织炎症和纤维化程度;免疫组织化学法测定肺组织中Ⅰ/Ⅲ型胶原的表达;β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色法测定肺组织细胞衰老情况;ELISA法测定肺组织中羟脯氨酸(Hyp)的含量;Western Blot法测定肺组织中Fibronectin、Vimentin、α-SMA、p53、p21、p16、SP-C蛋白表达;免疫荧光法检测小鼠肺组织中p21、p16及SP-C的表达。结果与空白组比较,模型组小鼠体质量显著下降(P<0.01),肺组织中炎症及纤维化评分均显著升高(P<0.01);肺顺应性显著下降(P<0.01),肺阻力显著增加(P<0.01);肺组织中Ⅰ/Ⅲ型胶原沉积量及Hyp含量显著增加(P<0.01);肺组织中Fibronectin、Vimentin、α-SMA蛋白表达显著上调(P<0.01);肺组织呈大面积SA-β-gal蓝染,细胞衰老程度明显,肺组织中p53、p21、p16等衰老相关蛋白表达显著上调(P<0.01);肺组织中p21、p16的红色荧光表达明显增强,Merge图像显示p21、p16与SP-C共染的橙色荧光明显增多,SP-C蛋白表达显著下调(P<0.01)。与模型组比较,麦味养肺汤组小鼠的体质量明显升高(P<0.05),肺组织中炎症及纤维化评分均明显降低(P<0.05,P<0.01);肺顺应性明显上升(P<0.05),肺阻力显著下降(P<0.01);肺组织中Ⅰ/Ⅲ型胶原沉积量及Hyp含量显著减少(P<0.01);肺组织中Fibronectin、Vimentin、α-SMA蛋白表达明显下调(P<0.05);肺组织SA-β-gal蓝染明显减轻,� 展开更多

关键词 麦味养肺汤 肺纤维化 ⅱ型肺泡上皮细胞 细胞衰老 p53/p21信号通路 小鼠

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豚鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的分离、纯化与培养 被引量：1

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作者 任奇杰 程龙 +3 位作者 孙颖飞 贾元元 刘晓明 李勇 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第11期232-235,294,共5页

为了建立豚鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)分离、纯化和ROCK抑制剂培养的方法,进一步以AECⅡ为模型研究其在抗结核分枝杆菌中的免疫调控作用奠定基础,试验利用混合酶溶液全肺灌注法消化、分离含有豚鼠AECⅡ的混合细胞,经过红细胞裂解液处理... 为了建立豚鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)分离、纯化和ROCK抑制剂培养的方法,进一步以AECⅡ为模型研究其在抗结核分枝杆菌中的免疫调控作用奠定基础,试验利用混合酶溶液全肺灌注法消化、分离含有豚鼠AECⅡ的混合细胞,经过红细胞裂解液处理与免疫黏附法纯化获得AECⅡ。以3T3细胞为饲养层,并添加Rho激酶抑制剂的方法进行AECⅡ的传代培养。结果表明:混合酶溶液灌注消化法能充分消化肺脏上皮细胞,通过Ig G免疫黏附能有效去除巨噬细胞而纯化AECⅡ,并且在3T3细胞饲养层与ROCK抑制剂培养条件下促进了AECⅡ的体外增殖而抑制其分化。 展开更多

关键词 豚鼠 肺泡ⅱ型上皮细胞(aec ⅱ) 分离 培养 纯化

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