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BimS真核质粒过表达载体构建及诱导ACC-2细胞凋亡作用 被引量:1
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作者 李旭奎 姚佳 饶国洲 《北京口腔医学》 CAS 2016年第2期75-78,共4页
目的构建BimS真核质粒过表达载体及鉴定并转染ACC-2细胞,观察其在细胞中上调BimS蛋白表达及促凋亡作用。方法根据人BimS基因设计引物,扩增目的基因片段,挑选阳性克隆,分别采用PCR扩增电泳和DNA测序鉴定。分为对照组和实验组将构建的质... 目的构建BimS真核质粒过表达载体及鉴定并转染ACC-2细胞,观察其在细胞中上调BimS蛋白表达及促凋亡作用。方法根据人BimS基因设计引物,扩增目的基因片段,挑选阳性克隆,分别采用PCR扩增电泳和DNA测序鉴定。分为对照组和实验组将构建的质粒表达载体转染ACC-2细胞,通过定量PCR和Western biot检测其基因和蛋白相对表达水平,检测细胞凋亡率和超微结构的变化。结果实验组细胞凋亡明显,凋亡率为(29.6±0.3)%;对照组细胞凋亡率仅为(0.83±0.2)%,实验组与对照组细胞凋亡率比较具有统计学差异(P<0.05)。电镜下实验组细胞呈典型的细胞凋亡形态学改变,对照组细胞形态未发生变化。结论 BimS真核质粒过表达载体构建成功,并能显著上调ACC-2细胞中BimS mRNA、蛋白表达及诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 BimS acc-2细胞 细胞凋亡
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复方苦参注射液对泪腺腺样囊性癌ACC-2细胞增殖、凋亡及Caspase-3蛋白表达的影响 被引量:1
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作者 石博 徐慧 《环球中医药》 CAS 2012年第10期721-724,共4页
目的探讨复方苦参注射液对泪腺腺样囊性癌ACC-2细胞增殖、凋亡及Caspases-3蛋白表达的影响。方法体外培养人泪腺腺样囊性癌ACC-2细胞,应用MTT法检测细胞增殖;AnnexinV/PI双染色流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期;ELISA法检测Caspases-3... 目的探讨复方苦参注射液对泪腺腺样囊性癌ACC-2细胞增殖、凋亡及Caspases-3蛋白表达的影响。方法体外培养人泪腺腺样囊性癌ACC-2细胞,应用MTT法检测细胞增殖;AnnexinV/PI双染色流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期;ELISA法检测Caspases-3蛋白表达。结果复方苦参注射液对ACC-2细胞的体外增殖具有抑制作用,量效关系显著,与对照组比较有统计学差异(P<0.01),半数抑制浓度(IC50)为0.84g/ml。经流式细胞仪检测表明,复方苦参注射液能使ACC-2细胞G0-G1期逐渐增加,G2-M期和S期逐渐减少,并且随着剂量的增加,ACC-2细胞凋亡率明显增加(P<0.05或P<0.01)。复方苦参注射液能增强ACC-2细胞Caspases-3蛋白的表达(P<0.05或P<0.01),并呈剂量依赖性。结论复方苦参注射液能有效抑制人泪腺腺样囊性癌ACC-2细胞Caspases-3蛋白表达,诱导ACC-2细胞凋亡,抑制肿瘤细胞增殖。 展开更多
关键词 复方苦参注射液 acc-2细胞 增殖 凋亡 Caspases-3
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△ψm和Caspase3在As_2O_3诱导腺样囊性癌ACC-2细胞凋亡过程中的作用 被引量:6
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作者 欧阳艳艳 姜涛 +6 位作者 高萌 肖利华 周杨 顿月丽 赵桂秋 刘世海 梁晔 《国际眼科杂志》 CAS 2014年第2期232-235,共4页
目的:探讨线粒体膜电位(△ψm)、Caspase 3在As2O3诱导ACC-2细胞凋亡中的作用。方法:进行ACC-2细胞培养,将As2O3建立不同药物浓度梯度(0,1.0,2.0,4.0,8.0μmol/L)分别作用于ACC-2细胞,用Rh123染色,流式细胞仪检测8.0μmol/L As2O3作用... 目的:探讨线粒体膜电位(△ψm)、Caspase 3在As2O3诱导ACC-2细胞凋亡中的作用。方法:进行ACC-2细胞培养,将As2O3建立不同药物浓度梯度(0,1.0,2.0,4.0,8.0μmol/L)分别作用于ACC-2细胞,用Rh123染色,流式细胞仪检测8.0μmol/L As2O3作用前、后(24h),ACC-2细胞的线粒体膜电位(△ψm)变化;用多功能酶标仪进行Caspase 3活性检测。结果:空白对照组ACC-2细胞内Rh123荧光强度最强,8.0μmol/L As2O3处理组ACC-2细胞内Rh123荧光强度减弱,其差异有显著性(P<0.05);随着As2O3药物浓度的增高(0,1,2,4,8μmol/L),ACC-2细胞的Caspase 3酶活力单位逐渐增加。结论:As2O3作用于ACC-2细胞,可通过降低线粒体膜电位从而引起细胞凋亡。随着As2O3药物浓度的增高,ACC-2细胞的Caspase 3酶活力单位逐渐增加,Caspase 3被激活,细胞可发生不可逆转的凋亡过程。 展开更多
关键词 三氧化二砷 腺样囊性癌acc-2细胞 凋亡 线粒体膜电位 半胱氨酸蛋白酶3
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银杏叶提取物对泪腺腺样囊性癌ACC-2细胞增殖及Survivin,TIP30基因表达的影响 被引量:8
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作者 牛坡 赵新霞 +2 位作者 燕飞 周雍明 简鹏 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第24期4860-4864,共5页
探讨银杏叶提取物(EGB)对泪腺腺样囊性癌ACC-2细胞增殖、凋亡的影响,并从基因和蛋白水平上分析EGB对Survivin和TIP30基因表达的影响。不同浓度EGB处理体外培养的人泪腺腺样囊性癌ACC-2细胞,应用MTT法检测细胞增殖;Annexin V/PI双染色流... 探讨银杏叶提取物(EGB)对泪腺腺样囊性癌ACC-2细胞增殖、凋亡的影响,并从基因和蛋白水平上分析EGB对Survivin和TIP30基因表达的影响。不同浓度EGB处理体外培养的人泪腺腺样囊性癌ACC-2细胞,应用MTT法检测细胞增殖;Annexin V/PI双染色流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期;RT-PCR和Western blotting分析Survivin,TIP30基因和蛋白的表达。结果发现EGB对ACC-2细胞的体外增殖具有抑制作用,量效关系显著,与对照组比较有统计学差异(P<0.01),半数抑制浓度(IC50)为88 mg·L-1。经流式细胞仪检测表明,EGB能使ACC-2细胞G0/G1期逐渐增加,G2/M期和S期逐渐减少,并且随着剂量的增加,ACC-2细胞凋亡率明显增加(P<0.05或P<0.01)。RT-PCR与Western杂交结果一致表明随着EGB浓度的升高,Survivin基因表达明显减少(P<0.01),而TIP30基因表达则显著提高(P<0.01)。因此,EGB能有效抑制人泪腺腺样囊性癌ACC-2细胞Survivin基因表达,并促进TIP30的表达,诱导ACC-2细胞凋亡,从而抑制肿瘤细胞增殖。该研究为中药成分在肿瘤治疗中的应用提供了一定的理论和实验依据。 展开更多
关键词 银杏叶提取物 acc-2细胞 Survivin基因 TIP30基因
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丁胱亚磺酰亚胺对A cc 2细胞的放射增敏效应研究 被引量:1
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作者 万光勇 林国础 +1 位作者 王中和 陈万涛 《上海口腔医学》 CAS CSCD 1999年第3期134-137,共4页
目的 研究新型放射增敏剂丁胱亚磺酰亚胺(buthione sulfoxim in, B S O)对 Acc2 细胞的放射增敏效应。方法 采用克隆形成法,首先观察了 B S O 在乏氧状态和有氧状态下对 Acc2 细胞的药物毒... 目的 研究新型放射增敏剂丁胱亚磺酰亚胺(buthione sulfoxim in, B S O)对 Acc2 细胞的放射增敏效应。方法 采用克隆形成法,首先观察了 B S O 在乏氧状态和有氧状态下对 Acc2 细胞的药物毒性,然后研究了 B S O 在乏氧和有氧状态下对 Acc2 细胞的放射增敏效应。结果  B S O 在乏氧状态和有氧状态时,其半数抑制剂量分别为80μm ol/ L、120μm ol/ L。当 B S O 在 I D20、 I D10 的药物剂量时,在乏氧状态下,其 S E R 值分别为1521 和1263,在有氧状态下其 S E R 值分别为1296 和1153。结论  B S O 对 Acc2 细胞有放射增敏作用, B S O 在乏氧状态下的增敏效应比有氧状态下的放射增敏效应强。 展开更多
关键词 丁胱亚磺酰亚胺 acc-2细胞 放射增敏 肿瘤
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Influence of Ginkgo biloba extract on the proliferation,apoptosis of ACC-2 cell and Survivin gene expression in adenoid cystic carcinoma of lacrimal gland
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作者 Li-Xiao Zhou Yu Zhu 《Asian Pacific Journal of Tropical Medicine》 SCIE CAS 2012年第11期897-900,共4页
Objective:To explore the influence of extract of Ginkgo biloba(EGB) on the proliferation, apoptosis of ACC-2 cell and Survivin gene expression in adenoid cystic carcinoma(ACC) of lacrimal gland.Methods:ACC-2 cell ... Objective:To explore the influence of extract of Ginkgo biloba(EGB) on the proliferation, apoptosis of ACC-2 cell and Survivin gene expression in adenoid cystic carcinoma(ACC) of lacrimal gland.Methods:ACC-2 cell in human with ACC of lacrimal gland was in vitro cultured. MTT method was used for cell proliferation detection.Annexin V/PI double-staining flow cytometer was used to detect cell apoptosis and cell cycle.Survivin gene expression was analyzed by RT-PCR and Western blotting.Results:EGB had inhibitory effect on the proliferation of ACC-2 cell with significant dose-effect relationship,and there was statistical difference when compared with the control group(P【0.01).The inhibitory concentration 50%(IC<sub>50</sub>) is 88 mg/L. The flow cytometer test indicated that CGB can gradually increase ACC-2 cell in G<sub>0</sub>-G<sub>1</sub> stage and decrease it in G<sub>2</sub>-M and S stage.With the increase of dose,the apoptosis rate of ACC-2 cell was obviously increased(P【0.05 or P【0.01).EGB had certain inhibitor)’ effect on Survivin gene expression of ACC-2 cell,and Survivin gene expression was decreased with the increasing of the EGB concentration(P【0.01).Conclusions:EGB can effectively inhibit Survivin gene expression of ACC-2 cell in human with ACC of lacrimal gland,induce the apoptosis of ACC-2 cell and inhibit tumor cell proliferation. 展开更多
关键词 GINKGO biloba EXTRACT acc-2 cell PROLIFERATION APOPTOSIS Survivin gene
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