白藜芦醇对人皮肤癌细胞株A431生长抑制机制实验研究 被引量：10

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作者 焦慧琴 王蕤 +4 位作者 孙海梅 刘永 郭敏 苏红星 周德山 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2009年第2期212-217,共6页

目的探讨白藜芦醇(resveratrol,Res)对人皮肤癌细胞株A431和正常角质形成细胞株HaCaT体外生长的影响及其机制;并与顺铂(DDP)比较,评价Res作为天然抗肿瘤药物的潜在价值。方法培养A431细胞和HaCaT细胞,使用不同浓度Res或单独DDP处理后,... 目的探讨白藜芦醇(resveratrol,Res)对人皮肤癌细胞株A431和正常角质形成细胞株HaCaT体外生长的影响及其机制;并与顺铂(DDP)比较,评价Res作为天然抗肿瘤药物的潜在价值。方法培养A431细胞和HaCaT细胞,使用不同浓度Res或单独DDP处理后,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测其对细胞的增生抑制率;相差显微镜下观察细胞的形态改变;流式细胞术分析细胞凋亡情况;免疫组织化学染色法检测Bcl-2和Caspase-3蛋白。结果①Res和DDP均能明显抑制A431细胞的增生,并呈时间——剂量依赖性;在各自相应半数抑制浓度(IC50),DDP对HaCaT细胞的增生抑制率高于Res(P<0.05);②镜下观察可见Res处理后A431细胞呈现凋亡的形态特征;流式细胞检测发现A431细胞的凋亡呈时间——剂量依赖性;免疫组织化学染色可见Bcl-2蛋白着色减弱、Caspase-3蛋白表达增强。结论Res对A431的增生具有一定的抑制作用,且不良反应较DDP弱;Res也可诱导A431发生凋亡,可能与抑制Bcl-2表达、促进caspase-3表达有关。 展开更多

关键词 白藜芦醇 顺铂 A431细胞株 皮肤癌 BCL-2 CASPASE-3

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白藜芦醇降低缺氧诱导因子1α蛋白SUMO化抑制皮肤鳞状细胞癌新生血管形成

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作者 盛凤 国书雅 +3 位作者 鲍京京 张春艳 刘晓智 邢卫斌 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期1035-1042,共8页

目的从蛋白质泛素/类泛素化修饰平衡角度探讨白藜芦醇抑制皮肤鳞状细胞癌新生血管形成的内在机制。方法以人皮肤鳞状细胞癌A431细胞株为研究对象,分别给予培养基中加入50μmol/L和100μmol/L白藜芦醇处理对数生长期A431细胞作为实验组,... 目的从蛋白质泛素/类泛素化修饰平衡角度探讨白藜芦醇抑制皮肤鳞状细胞癌新生血管形成的内在机制。方法以人皮肤鳞状细胞癌A431细胞株为研究对象,分别给予培养基中加入50μmol/L和100μmol/L白藜芦醇处理对数生长期A431细胞作为实验组,以不加白藜芦醇培养基处理为对照组。按照上述实验分组,培养48 h采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)实验检测各组细胞增殖活性;采用血管模拟形成实验检测白藜芦醇处理12 h对A431细胞血管拟态形成能力的影响;采用Western印迹检测白藜芦醇处理48 h各组细胞泛素(ubiquitin)、小泛素相关修饰蛋白1(SUMO1)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子受体(VEGFR)相对表达水平。将24只8周龄BALB/c雄性去胸腺小鼠随机均分3组,于腹股沟皮下接种A431细胞,治疗组予1 mg/kg或2 mg/kg白藜芦醇腹腔注射给药,对照组注射相同体积的生理NaCl溶液,每3天注射1次,第21天处死小鼠,解剖肿瘤称重;采用免疫组化检测各组肿瘤组织中CD31的表达。多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验。结果对照组、50μmol/L组、100μmol/L组A431细胞增殖率差异有统计学意义(F=17.75,P=0.017),50μmol/L组、100μmol/L组低于对照组(66.53%±5.09%、35.88%±4.28%比100%,LSD-t=21.17、29.04,P=0.011、0.004);3组A431细胞血管管壁样细胞嵴的总长度差异有统计学意义(F=21.37,P=0.004),50μmol/L组、100μmol/L组低于对照组[(102.73±11.36)μm、(37.83±4.19)μm比(185.26±8.02)μm,均P<0.05];3组细胞泛素、SUMO1、HIF-1α、VEGFR相对表达差异均有统计学意义,50μmol/L组、100μmol/L组泛素相对表达均高于对照组(2.09±0.13、3.53±0.16比0.68±0.11,均P<0.05),SUMO1、HIF-1α、VEGFR的相对表达均低于对照组(SUMO1:1.87±0.13、1.02±0.11比3.10±0.11,HIF-1α:0.81±0.06、0.45±0.06比0.97±0.08,VEGFR:0.73±0.09、0.39±0.05比0.98±0.07,均P<0.05)。动物试� 展开更多

关键词 肿瘤 鳞状细胞 细胞增殖 泛素 SUMO1蛋白 缺氧诱导因子1 Α亚基 小鼠 近交BALB C 白藜芦醇 A431细胞系 血管生成抑制

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黄芩素抑制皮肤鳞癌细胞株A431增殖的体外研究 被引量：2

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作者 伍斌 谢红付 +1 位作者 李吉 张江林 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期786-792,共7页

目的研究黄芩素(BAI)对鳞状细胞癌A431细胞的增殖、集落形成及细胞周期的影响,探索BAI抗肿瘤的作用机制。方法以体外培养的人表皮鳞癌A431细胞株为研究对象,MTT法观察BAI对A431细胞的生长抑制作用,光镜和电镜观察细胞形态,集落形成实验... 目的研究黄芩素(BAI)对鳞状细胞癌A431细胞的增殖、集落形成及细胞周期的影响,探索BAI抗肿瘤的作用机制。方法以体外培养的人表皮鳞癌A431细胞株为研究对象,MTT法观察BAI对A431细胞的生长抑制作用,光镜和电镜观察细胞形态,集落形成实验观察BAI对瘤细胞的生长抑制,流式细胞仪检测细胞周期中各期细胞比例和凋亡率。结果 MTT法显示,随着BAI作用时间延长及剂量增加对A431细胞增殖的抑制作用增强,有明显的时间和剂量依赖性,与对照组比较差异有显著性(P<0.01);光镜显示,随黄芩素浓度的增大细胞生长速度明显受到抑制,形态变圆;电镜显示,A431细胞伪足明显缩短,数量减少;流式细胞仪检测显示,随BAI浓度及作用时间的延长,细胞周期被明显阻断在S期,凋亡率增高,与对照组比较差异有显著性(P<0.05)。结论①BAI处理48h后,抑制A431细胞增殖而无细胞毒性的最适剂量范围为10～30μM;②BAI能明显地抑制皮肤鳞癌A431细胞增殖、细胞周期的进程、瘤细胞集落及伪足形成。 展开更多

关键词 黄芩素 A431细胞 伪足 细胞周期 最适浓度范围

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姜黄挥发油联合顺铂对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖和凋亡的影响及机制 被引量：2

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作者 昝雪娟 荣冬芸 +3 位作者 潘军玲 吕琳娜 肖露 曹煜 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期294-298,共5页

目的 探讨姜黄挥发油（TVO）联合顺铂对人皮肤鳞状细胞癌（鳞癌）A431细胞增殖、凋亡的影响及机制。方法 取对数生长期A431细胞，用5、10、20、40、80 mg/L TVO处理，对照组用含有1％二甲基亚砜（DMSO）的DMEM高糖培养基处理，24 h后，C... 目的 探讨姜黄挥发油（TVO）联合顺铂对人皮肤鳞状细胞癌（鳞癌）A431细胞增殖、凋亡的影响及机制。方法 取对数生长期A431细胞，用5、10、20、40、80 mg/L TVO处理，对照组用含有1％二甲基亚砜（DMSO）的DMEM高糖培养基处理，24 h后，CCK8法检测细胞增殖情况。另取部分A431细胞，分为4组，分别用含1％ DMSO的DMEM高糖培养基（对照组）、40 mg/L TVO（TVO组）、10 mg/L顺铂（顺铂组）、40 mg/L TVO和10 mg/L顺铂（TVO ＋ 顺铂组）处理24 h后，利用CCK8法检测细胞增殖活性；倒置显微镜观察细胞形态变化；吖啶橙（AO）/溴化乙锭（EB）双染色荧光显微镜观察细胞凋亡情况；比色法检测Caspase-3、Caspase-9酶活性；Western印迹检测Caspase-3、P糖蛋白表达。结果 5、10、20、40、80 mg/L TVO作用A431细胞24 h，对细胞增殖抑制率分别是（12.83 ± 6.4）%、（16.27 ± 11.4）%、（21.61 ± 9.1）%、（33.11 ± 2.0）%和（46.00 ± 3.3）%，与对照组（4.03 ± 1.4）%比较差异均有统计学意义（P 〈 0.05）；24 h时抑制50%细胞增殖的TVO浓度为（61.66 ± 1.03） mg/L；TVO组、顺铂组及TVO ＋ 顺铂组细胞增殖抑制率显著上升，与对照组比较差异均有统计学意义（P 〈 0.05），联合用药有协同作用，联合指数（CI）为1.366（P 〈 0.05）。TVO组、顺铂组细胞均不同程度变圆并出现凋亡，TVO ＋ 顺铂组细胞明显减少，出现大量细胞碎片。TVO组、顺铂组及TVO ＋ 顺铂组细胞Caspase-3酶活性分别是1.117 ± 0.095、1.381 ± 0.089、1.520 ± 0.115，Caspase-9酶活性分别是1.259 ± 0.059、1.829 ± 0.171、2.760 ± 0.297，Caspase-3蛋白表达量分别是1.156 ± 0.006、1.296 ± 0.021、1.482 ± 0.016，P糖蛋白表达量分别是1.311 ± 0.011、1.169 ± 0.012、0.528 ± 0.014，其中TVO ＋ 顺铂组细胞Caspase-3、Caspase-9酶活性及Caspase-3蛋白表达量显著高于TVO组和顺铂组，P糖蛋白表达量显著低于TVO组和 展开更多

关键词 肿瘤 鳞状细胞 细胞系 肿瘤 姜黄△ 顺铂 药物疗法 联合 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 P糖蛋白 A431细胞

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人参皂甙Rg3联合Lewis Y单克隆抗体对子宫内膜癌的治疗作用 被引量：2

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作者 刘佳 邓燕杰 +1 位作者 李秀娟 燕秋 《中国妇幼保健》 CAS 北大核心 2014年第14期2248-2252,共5页

目的:研究人参皂甙Rg3(GS-Rg3)联合Lewis Y(LeY)单克隆抗体对人子宫内膜移行上皮癌细胞株A431的增殖抑制作用及诱导其凋亡的作用。方法:体外培养A431细胞,分为对照组和实验组。采用MTT法观察GS-Rg3联合LeY单克隆抗体对A431细胞的增殖抑... 目的:研究人参皂甙Rg3(GS-Rg3)联合Lewis Y(LeY)单克隆抗体对人子宫内膜移行上皮癌细胞株A431的增殖抑制作用及诱导其凋亡的作用。方法:体外培养A431细胞,分为对照组和实验组。采用MTT法观察GS-Rg3联合LeY单克隆抗体对A431细胞的增殖抑制作用;Hoechst33342荧光染色观察各组细胞凋亡的形态学情况;流式细胞术分析各组细胞周期变化及凋亡情况;western-blot方法检测各组Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果:GS-Rg3和LeY单克隆抗体对A431细胞的增殖有明显的抑制作用,且以二者联合处理组作用最显著,呈协同作用,差异有统计学意义(P<0.05);经GS-Rg3和LeY单克隆抗体处理后,细胞周期停滞于G1期,S期无明显变化,A431细胞的凋亡率与对照组相比明显增加,以联合处理组最显著,差异有统计学意义(P<0.05);western-blot显示,GS-Rg3和LeY单克隆抗体作用A431细胞后,与对照组相比,Bcl-2表达减少,Bax表达增多,以联合作用组最为显著,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:人参皂甙Rg3和Lewis Y单克隆抗体均能够抑制A431细胞的增殖,并通过下调Bcl-2和上调Bax诱导其凋亡,且二者具有协同增效作用。 展开更多

关键词 人参皂甙RG3 LEWIS Y A431细胞株 细胞生长 凋亡

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白藜芦醇诱导人皮肤癌细胞系凋亡的可能信号通路 被引量：2

6

作者 赵冬芝 李小双 +3 位作者 孙海梅 张国权 闫继红 周德山 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2011年第5期534-539,共6页

目的探讨白藜芦醇(Res)诱导人皮肤癌细胞系(A431细胞)凋亡的可能信号分子,为临床相关疾病的治疗提供新的实验依据。方法培养的A431细胞分为:对照组(A组)、Res(B组)、Res加SP600125(C组)以及单纯SP600125组(D组)。免疫荧光染色、Western ... 目的探讨白藜芦醇(Res)诱导人皮肤癌细胞系(A431细胞)凋亡的可能信号分子,为临床相关疾病的治疗提供新的实验依据。方法培养的A431细胞分为:对照组(A组)、Res(B组)、Res加SP600125(C组)以及单纯SP600125组(D组)。免疫荧光染色、Western blot及相差显微镜观察等方法检测细胞形态和caspase-3、BAX、BCL-2、JNK以及P-JNK蛋白分布和含量。结果 Res处理后,A431细胞出现较典型的细胞凋亡形态特征,同时可见BAX/BCL-2比值升高,caspase-3蛋白表达增加,磷酸化(P-JNK蛋白)明显增加,且集聚在细胞核(由225 463±672增至289 469±3 729,P<0.05);经SP600125预处理后,上述改变明显减少(降至248 198±4 367,P<0.05),A431细胞的生长状态与对照组相似。结论 Res可能首先使JNK蛋白磷酸化,进入细胞核,发挥抑制BCL-2蛋白表达,上调BAX和caspase-3蛋白表达,进而引起细胞凋亡。 展开更多

关键词 白藜芦醇 A431细胞系 P-JNK JNK CASPASE-3

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全反式维A酸对皮肤鳞癌细胞增殖影响实验研究 被引量：2

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作者 潘敏 彭振辉 +4 位作者 肖生祥 任建文 李晓莉 刘艳 李政霄 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2008年第2期74-76,共3页

目的探讨全反式维A酸对体外培养皮肤鳞癌细胞增殖的影响。方法传代培养皮肤鳞癌细胞,不同浓度维A酸作用后,MTT法观察维A酸对细胞增殖的影响,流式细胞仪进行细胞凋亡及周期分析。结果低浓度维A酸作用后细胞增殖率高于对照组,其中1μM浓... 目的探讨全反式维A酸对体外培养皮肤鳞癌细胞增殖的影响。方法传代培养皮肤鳞癌细胞,不同浓度维A酸作用后,MTT法观察维A酸对细胞增殖的影响,流式细胞仪进行细胞凋亡及周期分析。结果低浓度维A酸作用后细胞增殖率高于对照组,其中1μM浓度组作用最强,而高浓度维A酸作用后细胞增殖率低于对照组,且呈剂量依赖性抑制;ATRA不能诱导A431细胞发生显著凋亡;维A酸对皮肤鳞癌细胞的促进增殖作用可能与S期细胞数百分比增多有关。结论全反式维A酸对体外皮肤鳞癌细胞的增殖抑制作用有严格的剂量范围,为皮肤鳞癌的临床治疗提供实验依据。 展开更多

关键词 皮肤鳞癌细胞 全反式维A酸 增殖 凋亡

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Caspase-3/Caspase-9活化与皮鳞癌1号方抑制A431细胞生长的关系研究 被引量：1

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作者 许俏 罗俊 +4 位作者 潘年松 刘英波 丁斗 张学愈 张珏 《安徽医药》 CAS 2015年第1期23-27,共5页

目的研究Caspase-3和Caspase-9活化与皮鳞癌1号方抑制A431细胞生长的关系。方法培养A431细胞,用不同浓度的皮鳞癌1号方分别作用于A431细胞;Hochest染色检测细胞凋亡形态;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测细胞色素C含量;比色法测定Caspase-... 目的研究Caspase-3和Caspase-9活化与皮鳞癌1号方抑制A431细胞生长的关系。方法培养A431细胞,用不同浓度的皮鳞癌1号方分别作用于A431细胞;Hochest染色检测细胞凋亡形态;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测细胞色素C含量;比色法测定Caspase-3和Caspase-9活性。结果 Hochest33258染色可见皮鳞癌1号方组A431细胞发生核固缩、凋亡小体等典型的凋亡形态学特征;与对照组比较,Cytc、Caspase-3、Caspase-9表达增加。结论 Caspase-3和Caspase-9的活化与皮鳞癌1号方可诱导A431发生凋亡有关。 展开更多

关键词 皮鳞癌1号方 A431细胞 凋亡 CASPASE-3 CASPASE-9

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外阴鳞状细胞癌肿瘤干细胞的分选和鉴定

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作者 宋子璇 韩雪 +1 位作者 李宝俊 欧阳玲 《现代肿瘤医学》 CAS 2018年第3期339-343,共5页

目的:分离外阴鳞状细胞癌A-431细胞系中CD44^+的细胞亚群,鉴定其具有肿瘤干细胞特性。方法:采用流式细胞术分选出CD44免疫荧光抗体标记的CD44^+细胞亚群,检测CD133、CD34蛋白在CD44^+和CD44^-中表达的差异,检测CD44^+及CD44^-细胞亚群... 目的:分离外阴鳞状细胞癌A-431细胞系中CD44^+的细胞亚群,鉴定其具有肿瘤干细胞特性。方法:采用流式细胞术分选出CD44免疫荧光抗体标记的CD44^+细胞亚群,检测CD133、CD34蛋白在CD44^+和CD44^-中表达的差异,检测CD44^+及CD44^-细胞亚群的细胞周期。结果:A-431细胞系中CD44^+细胞亚群约占4%,胚胎干细胞因子CD133、CD34在CD44^+和CD44^-的VSCC中表达存在显著性差异,主要在细胞膜上表达,CD44^+的肿瘤细胞亚群97.69%处于G_1期,CD44^-的肿瘤细胞亚群61.12%处于S期。结论:在A-431细胞系中CD44可以作为分选肿瘤干细胞的特异性表面标志物,CD133、CD34在CD44^+的肿瘤细胞高表达,可能成为分选外阴鳞癌肿瘤干细胞的特异性表面标志物,CD44^+肿瘤细胞具有典型的干细胞增殖特点。 展开更多

关键词 外阴鳞状细胞癌 肿瘤干细胞 A-431细胞系

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新型维A酸CD437对表皮样癌A431细胞的致凋亡作用

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作者 潘敏 彭振辉 +4 位作者 肖生祥 李晓莉 刘艳 李政霄 任建文 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期305-308,共4页

目的研究一种新合成的维A酸CD437及全反式维A酸(ATRA)对体外培养的人表皮样癌细胞系(A431)及正常人类表皮角质形成细胞的增殖抑制及诱导凋亡作用。方法MTT法测定CD437及ATRA对A431细胞系及正常人类表皮角质形成细胞的增殖抑制作用,光镜... 目的研究一种新合成的维A酸CD437及全反式维A酸(ATRA)对体外培养的人表皮样癌细胞系(A431)及正常人类表皮角质形成细胞的增殖抑制及诱导凋亡作用。方法MTT法测定CD437及ATRA对A431细胞系及正常人类表皮角质形成细胞的增殖抑制作用,光镜观察两种药物对细胞形态的影响,用流式细胞术研究两种药物对细胞凋亡及细胞周期的影响。结果维A酸CD437较传统ATRA更显著抑制A431细胞系的生长,并具有时间、浓度依赖性;显微镜观察可见细胞有细胞毒性、凋亡特征性改变;CD437可促进A431细胞的快速凋亡及正常人类表皮角质形成细胞G1期抑制;与CD437相比,ATRA对A431细胞的促凋亡作用相对无效;CD437不能诱导正常人类表皮角质形成细胞发生显著凋亡。结论与传统维A酸ATRA相比较,CD437更有效抑制表皮样癌细胞的增殖并显著诱导其凋亡;相对于正常表皮角质形成细胞,CD437对A431细胞具有选择性诱导凋亡作用,从而为临床治疗或预防皮肤癌提供实验依据。 展开更多

关键词 CD437 全反式维A酸 A431细胞系 增殖抑制 细胞凋亡

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西罗莫司和饥饿处理对人A431细胞自噬水平的影响

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作者 张云 杨晓雯 +8 位作者 徐倩倩 施辛 陈旭 李莉 徐松 黄丹 鞠梅 陈崑 顾恒 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期776-780,共5页

目的：探讨经典自噬诱导剂西罗莫司和饥饿处理对人皮肤鳞状细胞癌细胞系A431自噬水平的影响。方法分别将A431细胞和人宫颈癌细胞系HeLa分为对照组（单纯DMEM培养基处理）、二甲基亚砜（DMSO）组、20 nmol/L西罗莫司组、80 nmol/L西罗莫... 目的：探讨经典自噬诱导剂西罗莫司和饥饿处理对人皮肤鳞状细胞癌细胞系A431自噬水平的影响。方法分别将A431细胞和人宫颈癌细胞系HeLa分为对照组（单纯DMEM培养基处理）、二甲基亚砜（DMSO）组、20 nmol/L西罗莫司组、80 nmol/L西罗莫司组、平衡盐溶液（EBSS）组。作用4 h后，Western印迹检测A431细胞和HeLa细胞自噬微管相关蛋白轻链3A/3B（LC3A/B）、重组人γ-氨基丁酸受体相关蛋白（GABARAP）的表达水平。吖啶橙染色分析细胞自噬体表达水平。结果 Western印迹检测显示，对照组与DMSO组A431细胞中LC3A/B-Ⅱ与LC3 A/B-Ⅰ比值差异无统计学意义（P〉0.05）；20 nmol/L西罗莫司组、80 nmol/L西罗莫司组、EBSS组LC3 A/B-Ⅱ与LC3 A/B-Ⅰ比值较对照组均明显升高，差异均有统计学意义（P〈0.05）。HeLa细胞Western印迹检测结果与A431细胞类似。双变量相关性分析显示，HeLa细胞中LC3A/B-Ⅰ与GABARAP表达呈正相关（r=0.869，95%CI：0.807~0.999，P=0.051），LC3A/B-Ⅱ与GABARAP表达呈负相关（r=-0.742，95%CI：-0.982~0.406，P=0.042）；A431细胞中LC3A/B-Ⅰ与GABARAP表达亦呈正相关（r=0.837，95%CI：-0.173~0.989，P=0.037），LC3A/B-Ⅱ与GABARAP表达呈负相关（r=-0.684，95%CI：-0.977~0.500，P=0.047）。吖啶橙染色显示，A431细胞自噬阳性细胞比例在西罗莫司组（23.750%±0.260%）与EBSS组（32.450%±0.488%）同样高于对照组（15.987%±0.242%，均P 〈0.05）；HeLa细胞自噬阳性细胞比例在西罗莫司组（33.307%±0.715%）和EBSS组（66.097%±1.141%）高于对照组（14.117%±0.295%，均P〈0.05）。结论经典自噬诱导剂西罗莫司和饥饿能够上调A431细胞的自噬水平，GABARAP蛋白可能与LC3A/B高度相关。 展开更多

关键词 自噬 细胞系 肿瘤 HELA细胞 西罗莫司 饥饿 A431细胞 GABARAP

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纳米雄黄对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞株增殖抑制及诱导凋亡作用的研究 被引量：21

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作者 齐元富 李慧杰 聂奔 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2013年第4期187-191,共5页

目的:探讨纳米雄黄对人皮肤鳞癌A431细胞株增殖抑制及诱导凋亡作用及作用机制。方法:应用MTT比色法、流式细胞仪观察纳米雄黄体对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞的增殖及凋亡情况、RT-PCR检测纳米雄黄对生存素(Survivin)mRNA,Caspase-3 mRNA... 目的:探讨纳米雄黄对人皮肤鳞癌A431细胞株增殖抑制及诱导凋亡作用及作用机制。方法:应用MTT比色法、流式细胞仪观察纳米雄黄体对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞的增殖及凋亡情况、RT-PCR检测纳米雄黄对生存素(Survivin)mRNA,Caspase-3 mRNA表达的影响。结果:MTT实验及流式细胞仪提示纳米雄黄具有诱导皮肤鳞癌A431细胞凋亡和抑制细胞增殖作用,且随着纳米雄黄剂量的增加作用增强,与顺铂联合应用有协同作用;对照组,5%,10%,20%纳米雄黄组,DDP组,DDP+10%纳米雄黄组的Survivin相对表达量依次为(68.74±1.96)%,(63.93±3.57)%,(57.12±3.93)%,(47.64±6.44)%,(41.44±4.83)%及(32.18±4.10)%;Casepase-3相对表达量依次为(26.26±2.07)%,(32.660±4.42)%,(35.29±5.26)%,(38.52±8.37)%,(45.69±4.19)%及(52.98±6.52)%;纳米雄黄剂量增加可促进Caspase-3的表达,降低Survivin的表达。结论:纳米雄黄可通过诱导肿瘤细胞凋亡和抑制其增殖发挥抗肿瘤作用;其作用机制可能与上调Caspase-3的表达和下调Survivin的表达有关。 展开更多

关键词 纳米雄黄 人皮肤鳞状细胞癌A431细胞株 凋亡 增殖

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黄芩素对人皮肤癌细胞A431生长和运动的影响 被引量：2

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作者 陈宇 王巍巍 唐发清 《实用预防医学》 CAS 2009年第5期1583-1585,共3页

目的研究黄芩素(BAI)对人表皮癌细胞A431生长和运动能力的影响。方法选取人表皮癌A431细胞株作为研究材料,运用四甲基偶氮唑蓝(MTT)分析黄芩素对A431细胞生长的作用,选用BAI细胞无毒性浓度(noncytotoxic concentration,NCC)进行实验;划... 目的研究黄芩素(BAI)对人表皮癌细胞A431生长和运动能力的影响。方法选取人表皮癌A431细胞株作为研究材料,运用四甲基偶氮唑蓝(MTT)分析黄芩素对A431细胞生长的作用,选用BAI细胞无毒性浓度(noncytotoxic concentration,NCC)进行实验;划痕实验测定BAI对A431细胞爬行能力的影响。结果黄芩素使A431细胞增殖能力减弱,爬行能力下降。结论黄芩素在NCC抑制A431细胞运动能力。 展开更多

关键词 黄芩素 人表皮癌A431 NCC

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人类乳头瘤病毒16 E7真核表达载体构建及对A431皮肤鳞癌细胞增殖和侵袭的影响 被引量：2

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作者 李颖 何威 +3 位作者 张斌 吴军 王儒鹏 林自华 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期818-821,共4页

目的构建HPV16 E7(E7)真核表达载体,观察E7过表达对A431细胞增殖和侵袭的影响。方法从Caski细胞中抽提总RNA,针对E7序列设计特异引物,进行逆转录和聚合酶链式反应扩增得到E7cDNA。应用基因工程方法将得到的PCR片段克隆至真核表达载体pEG... 目的构建HPV16 E7(E7)真核表达载体,观察E7过表达对A431细胞增殖和侵袭的影响。方法从Caski细胞中抽提总RNA,针对E7序列设计特异引物,进行逆转录和聚合酶链式反应扩增得到E7cDNA。应用基因工程方法将得到的PCR片段克隆至真核表达载体pEGFP-N1的多克隆位点。重组质粒经双酶切鉴定和测序后,使用LipofectamineTM 2000转染A431细胞。Western blot检测E7在细胞中的表达。WST-1和Transwell系统分别检测细胞增殖和侵袭能力。流式细胞术检测转染前后细胞周期的变化。ELISA检测TGF-β分泌情况。结果经酶切、测序鉴定,E7基因正确插入到pEGFP-N1多克隆位点,获得pEGFP-E7;Western blot检测结果显示:与未转染组相比,转染组E7蛋白高表达。过表达E7的A431细胞增殖和侵袭能力均显著增强,细胞周期中S期细胞数量增多,G1期细胞数量相对减少。TGF-β分泌增多。结论E7过表达可改变细胞周期,提高皮肤鳞癌细胞的增殖和侵袭能力,而分泌增多的TGF-β并不能抑制肿瘤的增殖和侵袭。 展开更多

关键词 HPV16 E7 A431皮肤鳞癌细胞 表达载体 增殖 侵袭 TGF-Β

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ABCG2在人皮肤鳞状细胞癌组织及A431侧群细胞中的表达及意义 被引量：2

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作者 李泓馨 赵勇 +1 位作者 管海宏 林麟 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期392-395,共4页

目的 探讨干细胞相关因子三磷酸腺苷（ATP）结合转运蛋白G超家族成员2（ATP-binding cassette transporter 2，ABCG2）在人皮肤鳞状细胞癌（鳞癌）组织及A431侧群细胞中的表达。方法 培养人A431细胞，流式细胞仪分选侧群细胞，噻唑蓝（... 目的 探讨干细胞相关因子三磷酸腺苷（ATP）结合转运蛋白G超家族成员2（ATP-binding cassette transporter 2，ABCG2）在人皮肤鳞状细胞癌（鳞癌）组织及A431侧群细胞中的表达。方法 培养人A431细胞，流式细胞仪分选侧群细胞，噻唑蓝（MTT）实验比较侧群、非侧群细胞生长的增殖能力，逆转录PCR检测ABCG2在两者中的表达。免疫组化MaxVision法检测人鳞癌组织中ABCG2表达情况。结果 A431细胞系中存在侧群细胞，约占总细胞数的1.1%。侧群细胞具有较强的生长能力以及克隆形成能力，侧群组和非侧群组24孔板内每孔克隆形成数分别为114.8 ± 4.95和44.5 ± 3.67（t = 27.92，P ＜ 0.01），且侧群细胞ABCG2 mRNA表达量明显高于非侧群细胞（t = 5.22，P ＜ 0.01）。在人鳞癌组织中存在少量ABCG2阳性细胞，ABCG2蛋白主要表达在细胞胞质和胞膜上。结论 人鳞癌细胞A431中存在具有干细胞特性的侧群细胞，高表达ABCG2。ABCG2可作为鳞癌干细胞的表面标志物之一。 展开更多

关键词 A431细胞系 侧群细胞 干细胞 ABCG2 鳞状细胞癌

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EGCG对A431细胞NF-κB表达的表观遗传修饰效应及对光动力的影响 被引量：1

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作者 张晨阳 倪文琼 +2 位作者 肖春才 郑乃刚 吴景兰 《现代肿瘤医学》 CAS 2018年第23期3725-3730,共6页

目的:研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对人表皮细胞癌A431细胞内核转录因子(NF-κB)表达的表观遗传修饰效应,探讨联合5-氨基酮戊酸介导光动力疗法(ALA-PDT)的增敏作用。方法:低氧诱导培养A431细胞,用MTT比色法检测不同浓度EGCG对A43... 目的:研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对人表皮细胞癌A431细胞内核转录因子(NF-κB)表达的表观遗传修饰效应,探讨联合5-氨基酮戊酸介导光动力疗法(ALA-PDT)的增敏作用。方法:低氧诱导培养A431细胞,用MTT比色法检测不同浓度EGCG对A431细胞增殖的影响,MS(methylation specific)-PCR检测p16INK4ɑ基因甲基化变化,免疫印迹检测NF-κBp65,DNMT1,HDAC1,Cyclin D1,HIF-1α,VEGF,p16INK4ɑ表达,并用免疫细胞化学染色观察A431细胞E-钙黏蛋白(E-cadherin);用流式细胞仪检测EGCG联合ALA-PDT诱导的A431细胞凋亡。结果:EGCG具有抑制A431细胞增殖并诱导凋亡的作用,抑制效应呈浓度依赖性; p16INK4ɑ基因甲基化水平减低显著;免疫印迹显示NF-κBp65,DNMT1,HDAC1,Cyclin D1,HIF-1α,VEGF表达下调,p16INK4ɑ表达上调; E-cadherin表达上调显著,呈浓度依赖性。EGCG联合ALAPDT治疗组促凋亡作用显著。结论:EGCG对A431细胞具有抑制增殖、血管生成、侵袭的作用,通过影响NF-κB表观遗传修饰诱导细胞凋亡。EGCG联合ALA-PDT的促凋亡作用,增强了A431细胞对ALA-PDT的敏感性。 展开更多

关键词 表没食子儿茶素没食子酸酯 表观遗传-NF-κB信号途径 细胞凋亡 5-氨基酮戊酸介导光动力疗法 人表皮癌A431细胞系

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