穿心莲内酯对人皮肤基底细胞癌A431细胞生长、凋亡及增殖细胞核抗原蛋白表达的影响 被引量：8

1

作者 石静 梁勇刚 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期73-78,共6页

目的探讨穿心莲内酯(AD)对人皮肤基底细胞癌A431细胞生长、凋亡及增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达的影响。方法应用酸性磷酸酶(APA)法检测细胞增殖抑制率,荧光显微镜观察细胞形态,Annexin V-FITC/PI双染法、流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率... 目的探讨穿心莲内酯(AD)对人皮肤基底细胞癌A431细胞生长、凋亡及增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达的影响。方法应用酸性磷酸酶(APA)法检测细胞增殖抑制率,荧光显微镜观察细胞形态,Annexin V-FITC/PI双染法、流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率,Rh123染色FCM检测细胞线粒体膜电位,免疫细胞化学法检测细胞PCNA蛋白表达。结果 AD呈时间、剂量依赖性抑制A431细胞生长增殖;且同一时间点50mg/L、100mg/LAD组与溶媒对照组相比差异显著(P<0.05)。AD组作用A431细胞24h时,部分细胞核染色质出现典型凋亡形态学改变。不同浓度AD作用A431细胞24h,早期凋亡率、晚期凋亡及坏死率均随AD浓度升高而逐渐增加,且50mg/L、100mg/L AD组与溶媒对照组相比差异显著(P<0.05)。AD作用A431 24h细胞内PCNA蛋白随AD浓度升高表达逐渐减少。AD作用A431细胞24h后,线粒体膜电位下降明显,与溶媒对照组相比较,50mg/L、100mg/LAD组差异有统计学意义(P<0.05)。结论 AD可明显抑制A431细胞生长增殖,其抑制细胞增殖可能与下调PCNA蛋白表达有关。AD能诱导A431细胞凋亡,其凋亡机制可能与细胞线粒体膜电位下降有关。 展开更多

关键词 穿心莲内酯 A431细胞 线粒体膜电位 增殖细胞核抗原蛋白 流式细胞术 酸性磷酸酶法 人

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姜黄挥发油对皮肤鳞癌A431细胞增殖及凋亡的影响 被引量：8

2

作者 昝雪娟 荣冬芸 +5 位作者 涂云华 薛月翠 叶振源 康颖倩 周英 曹煜 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第15期2883-2887,共5页

为研究姜黄挥发油（turmeric volatile oil,TVO）对皮肤鳞癌（CSCC）A431（以下简称A431）细胞增殖及凋亡的影响并探讨其机制,该实验采用不同质量浓度（5~80 mg·L^-1）TVO体外作用于A431细胞,利用细胞增殖/毒性检测试剂盒（celcoun... 为研究姜黄挥发油（turmeric volatile oil,TVO）对皮肤鳞癌（CSCC）A431（以下简称A431）细胞增殖及凋亡的影响并探讨其机制,该实验采用不同质量浓度（5~80 mg·L^-1）TVO体外作用于A431细胞,利用细胞增殖/毒性检测试剂盒（celcounting kit-8,CCK-8）法检测细胞增殖活性;倒置显微镜观察细胞形态变化;吖啶橙（AO）/溴化乙锭（EB）双染色荧光显微镜观察A431细胞凋亡情况;流式细胞仪检测细胞凋亡;Western blot法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（caspase-3）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9（caspase-9）表达量。结果显示,随TVO质量浓度的增加对A431细胞生长具有显著的抑制增殖作用,呈剂量依赖关系,各组间差异有统计学意义（P〈0.05）。与对照组比较,不同质量浓度TVO组均出现细胞皱缩及细胞破碎现象,细胞凋亡率增加,并呈剂量依赖性,caspase-3,caspase-9的相对表达量上调,各组间差异有统计学意义（P〈0.05）,提示了TVO能抑制皮肤鳞癌A431细胞增殖,并诱导其凋亡,其机制可能与上调caspase-3,caspase-9的表达有关。 展开更多

关键词 姜黄挥发油 A431细胞 细胞凋亡 线粒体途径 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3

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辣木籽异硫氰酸酯抑制皮肤鳞状癌A431细胞的生长 被引量：4

3

作者 钱颖艳 杨茗茸 +2 位作者 罗凤仙 解静 田洋 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2020年第8期8-14,共7页

研究辣木籽异硫氰酸酯(MITC)对皮肤鳞状细胞癌A431细胞生长的影响。通过MTT法、克隆形成实验及流式细胞术检测经不同浓度MITC处理后的A431细胞增殖、凋亡和细胞周期的变化情况;采用异种移植瘤模型检测MITC对A431细胞体内生长的影响。研... 研究辣木籽异硫氰酸酯(MITC)对皮肤鳞状细胞癌A431细胞生长的影响。通过MTT法、克隆形成实验及流式细胞术检测经不同浓度MITC处理后的A431细胞增殖、凋亡和细胞周期的变化情况;采用异种移植瘤模型检测MITC对A431细胞体内生长的影响。研究结果表明,随着MITC浓度和处理时间增加,A431细胞活力逐渐降低,在12μM的MITC刺激72 h后,细胞存活率降低为10%(p<0.001);克隆形成实验表明,MITC(5和10μM)显著抑制A431细胞克隆形成,24 h的细胞克隆形成率分别从100%降低到63.22%(p<0.001)和26.07%(p<0.001);细胞凋亡和周期检测结果表明,当MITC处理细胞48 h后,细胞凋亡率分别从17.22%增加到31.73%(p<0.001)和44.77%(p<0.001),S期细胞从7.43%显著增加到14.44%(p<0.001)和17.43%(p<0.001)。体内实验结果表明,用MITC干预异种移植瘤小鼠20天后,小鼠肿瘤体积从1549.02 mm3降低到857.77 mm3(p<0.05);肿瘤重量从1.30 g降低到0.91 g(p<0.05)。以上结果表明,MITC在体外和体内均能够抑制A431细胞的生长。 展开更多

关键词 辣木籽异硫氰酸酯(MITC) A431细胞 生长 体内实验

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葡萄糖转运蛋白3在皮肤鳞状细胞癌中的表达及其对A431细胞增殖、侵袭及迁移的影响

4

作者 王媛 王艺萌 +3 位作者 吴雯婷 李婷婷 王冠钰 张春雷 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期421-427,共7页

目的探究葡萄糖转运蛋白3(GLUT3)在皮肤鳞状细胞癌(cSCC)中的表达及其对cSCC细胞系A431的影响。方法收集2016年6月至2020年12月经北京大学第三医院皮肤科病理确诊为cSCC患者的石蜡组织标本22份,皮肤科手术中废弃的正常皮肤组织20份作为... 目的探究葡萄糖转运蛋白3(GLUT3)在皮肤鳞状细胞癌(cSCC)中的表达及其对cSCC细胞系A431的影响。方法收集2016年6月至2020年12月经北京大学第三医院皮肤科病理确诊为cSCC患者的石蜡组织标本22份,皮肤科手术中废弃的正常皮肤组织20份作为对照,采用免疫组化法检测cSCC和正常皮肤组织中GLUT3的表达。将A431细胞分为GLUT3过表达组和阴性对照组,分别转染携带SLC2A3基因的慢病毒载体和慢病毒空载体。实时荧光定量PCR及Western印迹法检测各组细胞中GLUT3 mRNA及蛋白的表达水平,MTS法检测各组细胞增殖活力,动态细胞成像分析系统Incucyte S3实时检测各组细胞的迁移和侵袭能力。分别用葡萄糖及乳酸试剂盒检测并比较各组细胞48 h葡萄糖消耗量及乳酸产生量。两组间比较采用两独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果cSCC组织中GLUT3的表达[免疫组化评分:(9.39±2.56)分]显著高于正常皮肤组织[(2.30±2.60)分],t=8.91,P<0.05。与A431细胞阴性对照组相比,GLUT3过表达组GLUT3 mRNA及蛋白表达水平均明显升高。MTS细胞增殖实验显示,在24和96 h时,GLUT3过表达组A431细胞增殖活力显著高于阴性对照组,t值分别为2.49、3.54,P值分别为0.048、0.012;细胞迁移实验在6、12、18、24 h及侵袭实验12、18、24 h时,GLUT3过表达组划痕区域细胞融合率均显著高于阴性对照组(均P<0.05)。48 h时,GLUT3过表达组A431细胞的葡萄糖相对消耗量及乳酸相对产生量亦显著高于阴性对照组(t值分别为2.98、2.20,P值分别为0.011、0.038)。结论GLUT3在cSCC组织中高表达,并可能通过促进细胞对葡萄糖的摄取能力为cSCC细胞提供能量以增强其增殖、迁移和侵袭能力,从而参与cSCC的发生发展。 展开更多

关键词 癌 鳞状细胞 细胞增殖 细胞迁移分析 侵袭 葡萄糖转运蛋白3 A431细胞

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亚甲蓝介导的光动力疗法诱导人表皮鳞状细胞癌A431细胞株凋亡机制研究

5

作者 黎雯 刘成利 +1 位作者 曾维花 吴伟伟 《皮肤科学通报》 2023年第3期313-318,共6页

目的研究亚甲蓝介导的光动力疗法对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞株的杀伤作用以及其诱导凋亡的机制,为亚甲蓝光动力临床应用提供理论依据以及最佳治疗参数。方法采用亚甲蓝与人皮肤鳞状细胞癌A431细胞株共同孵育,经630 nm红光照射。采用CC... 目的研究亚甲蓝介导的光动力疗法对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞株的杀伤作用以及其诱导凋亡的机制,为亚甲蓝光动力临床应用提供理论依据以及最佳治疗参数。方法采用亚甲蓝与人皮肤鳞状细胞癌A431细胞株共同孵育,经630 nm红光照射。采用CCK-8法检测细胞生长的抑制率,确定培育时间、亚甲蓝浓度对A431细胞株的抑制作用。采用免疫组化法检测A431细胞在亚甲蓝光动力作用前后细胞色素c(Cyt-c)在细胞内的分布情况。最后,采用Western-blot方法检测亚甲蓝光动力治疗后细胞凋亡过程中,线粒体凋亡途径相关蛋白Bcl-2和Bax的表达情况。结果CCK8法检测结果显示亚甲蓝光动力组对A431细胞具有杀伤作用,其杀伤作用与亚甲蓝的药物浓度以及亚甲蓝光动力作用后的孵育时间具有密切相关。Cyt-c免疫荧光结果显示亚甲蓝光光动力作用后,细胞凋亡率空白对照0%,光照对照组8%,亚甲蓝对照组12%,光照后1 h 22%,光照后2 h 26%,光照后4 h 31%,光照后6 h 54%。Western blot的检测结果显示亚甲蓝光动力作用激活A431细胞线粒体凋亡途径,启动Bcl-2家族参与凋亡过程。随着亚甲蓝光动力作用后孵育时间的延长,促凋亡蛋白Bax上调,抗凋亡蛋白Bcl-2下调。结论亚甲蓝光动力能明显抑制A431细胞的增殖,并诱导其发生凋亡。凋亡的发生与启动细胞色素c相关的线粒体凋亡途径相关。 展开更多

关键词 亚甲蓝 光动力疗法 鳞状细胞癌 A431细胞株 凋亡

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黄连水提物对人皮肤肿瘤A431细胞凋亡、增殖的影响 被引量：4

6

作者 高耀星 于建设 +3 位作者 都日娜 杨丽敏 赵鹏伟 孙鹏 《中国医药导报》 CAS 2019年第16期21-24,49,F0004,共6页

目的探讨黄连水提物对人皮肤肿瘤A431细胞凋亡、增殖的影响。方法采用低温提取工艺,从药材中提取出水溶性的小分子混合物,用紫外色谱分析仪检测混合物成分;采用MTT法检测药物对人皮肤肿瘤A431细胞的抑制作用,药物设4个浓度,即6.3、12.5... 目的探讨黄连水提物对人皮肤肿瘤A431细胞凋亡、增殖的影响。方法采用低温提取工艺,从药材中提取出水溶性的小分子混合物,用紫外色谱分析仪检测混合物成分;采用MTT法检测药物对人皮肤肿瘤A431细胞的抑制作用,药物设4个浓度,即6.3、12.5、25、50μg/μL,并将其作为药物组,未加药物的为对照组,观察24、48、72 h抑瘤率;然后用Tunel检测细胞凋亡现象;通过MTT筛选后,用25μg/μL黄连水提物作用肿瘤A431细胞48 h后,用Western blot检测Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、Bcl-2凋亡途径的影响。结果紫外光谱分析黄连水提物主要成分为核酸、生物碱等,MTT显示25μg/μL黄连水提取物在48 h对A431细胞的抑制率已达到最佳(P <0.05)。显微镜下,对照组无变化。25μg/μL黄连水提物孵育48 h后,细胞明显的数量减少、变圆、漂浮;Tunel显示25μg/μL黄连水提物核定位处绿光明显增多,提示细胞大量凋亡。本研究检测显示,25μg/μL黄连水提取物孵育48 h后,肿瘤A-431细胞中Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9表达量显著升高,而Bcl-2的表达量显著降低。结论本研究初步表明黄连水提小分子混合物可促进A-431细胞凋亡,抑制细胞增殖。其机制包括细胞外凋亡通路和细胞内凋亡通路,导致肿瘤细胞中Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9上调及抑制凋亡蛋白Bcl-2的下调。这进一步明确了黄连水提物在治疗皮肤肿瘤中的作用机制,为皮肤肿瘤的治疗提供的方法。 展开更多

关键词 黄连水提物 皮肤肿瘤 A431细胞 细胞凋亡 BCL-2 CASPASE-3 CASPASE-8 CASPASE-9

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伊曲康唑对皮肤鳞状细胞癌A431细胞抑制作用的初步研究 被引量：3

7

作者 黄桃源 何仁亮 《中国烧伤创疡杂志》 2020年第1期46-51,共6页

目的研究伊曲康唑(itraconazole,ITZ)对皮肤鳞状细胞癌(cutaneous squamous cell carcinoma,CSCC)A431细胞的生物学效应,探讨其对皮肤鳞状细胞癌的抑制机制。方法取对数生长期A431细胞随机分为2、5、10、15、20、25及30μg/mL浓度组与... 目的研究伊曲康唑(itraconazole,ITZ)对皮肤鳞状细胞癌(cutaneous squamous cell carcinoma,CSCC)A431细胞的生物学效应,探讨其对皮肤鳞状细胞癌的抑制机制。方法取对数生长期A431细胞随机分为2、5、10、15、20、25及30μg/mL浓度组与对照组,依据分组分别采用等体积2、5、10、15、20、25及30μg/mL浓度ITZ溶液及DMEM培养基对细胞进行处理,并分别采用MTT法、流式细胞仪检测法、RT-PCR法和Western blotting法检测各组A431细胞的增殖情况、细胞周期和血管内皮生长因子(VEGF)mRNA及蛋白的表达水平。结果随着ITZ浓度的增加及作用时间的增长,ITZ对A431细胞的抑制作用逐渐增强,且除培养24 h时2μg/mL组细胞生长抑制率与对照组无明显差异(P>0.05)外,培养24 h时5、10、15、20、25、30μg/mL组细胞生长抑制率及培养48、72 h时2、5、10、15、20、25、30μg/mL组细胞生长抑制率分别与对照组对比,P均<0.05,差异具有统计学意义;与对照组相比,经浓度分别为2、5、10、15、20、25及30μg/mL的ITZ处理后,A431细胞的G0/G1期均出现延长,且除15μg/mL组与对照组无明显差异(P>0.05)外,其余各组与对照组对比,P均<0.05,差异具有统计学意义;与对照组相比,除ITZ浓度为10μg/mL时,VEGF mRNA及蛋白的表达水平明显降低(P均<0.05)外,ITZ浓度为2、5、15、20、25及30μg/mL时,VEGF mRNA及蛋白的表达水平均明显升高(P均<0.05)。结论ITZ能够抑制CSCC A431细胞的增殖并延长细胞周期,然而其对VEGF的影响却没有规律性,故其抑制细胞增殖的具体机制仍需进一步深入研究。 展开更多

关键词 伊曲康唑 皮肤 鳞状细胞癌 A431细胞 抑制 血管内皮生长因子 研究

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NOD/SCID小鼠中A431侧群与非侧群细胞成瘤组织中EMT相关分子的表达 被引量：2

8

作者 邵玲巧 王倩倩 +1 位作者 郭圆圆 耿松梅 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期733-737,共5页

目的旨在分离A431中侧群(SP)细胞及非侧群(NSP)细胞亚群,比较二者在小鼠皮下成瘤能力差异及组织中上皮间质转化(EMT)相关分子表达。方法培养A431细胞经荧光染料Hoeehst33342染色后,流式细胞仪分选出SP细胞和NSP细胞,接种到NOD/SCID小鼠... 目的旨在分离A431中侧群(SP)细胞及非侧群(NSP)细胞亚群,比较二者在小鼠皮下成瘤能力差异及组织中上皮间质转化(EMT)相关分子表达。方法培养A431细胞经荧光染料Hoeehst33342染色后,流式细胞仪分选出SP细胞和NSP细胞,接种到NOD/SCID小鼠皮下,观察各自成瘤能力,取瘤体组织免疫组织化学染色检测EMT相关分子E-Cadherin、β-catenin、Vimentin、AXL和Erbb3的表达。结果 A431细胞系中成功分选出SP细胞,小鼠皮下成瘤迅速。在SP细胞小鼠成瘤组织周围细胞中,E-Cadherin、Erbb3表达降低,β-catenin、Vimentin、AXL表达增高。结论 A431细胞中含有SP细胞亚群,该亚群细胞具有较强的肿瘤形成能力,且显示较强的EMT特性。 展开更多

关键词 鳞癌 侧群细胞 上皮间质转化 肿瘤干细胞

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重组抗表皮生长因子受体单克隆抗体生物学活性检测方法的建立 被引量：2

9

作者 刘培培 廖辉辉 +2 位作者 刘伟旭 陈香 谭青乔 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2015年第4期414-417,共4页

目的建立重组抗表皮生长因子受体(epithelial growth factor receptor,EGFR)单克隆抗体生物学活性检测方法。方法利用A-431细胞,对系列梯度稀释的重组抗EGFR单克隆抗体参考品和供试品进行检测,通过四参数方程进行拟合,计算二者的半数有... 目的建立重组抗表皮生长因子受体(epithelial growth factor receptor,EGFR)单克隆抗体生物学活性检测方法。方法利用A-431细胞,对系列梯度稀释的重组抗EGFR单克隆抗体参考品和供试品进行检测,通过四参数方程进行拟合,计算二者的半数有效浓度(EC50)及供试品的相对比活性,并对该方法进行专属性、精密度(重复性、中间精密度)和准确度验证。结果重组抗EGFR单克隆抗体供试品及参考品在该方法中均存在明显的量效关系,四参数拟合的曲线呈典型的反S型曲线。人Ig G1亚型免疫球蛋白(阴性对照)与A-431细胞无交叉反应,不呈现与重组抗EGFR单克隆抗体供试品相似的剂量-反应曲线;同一名试验人员重复6次检测结果的RSD为5%,同一名试验人员3个工作日检测结果的RSD为4%,3名试验人员3次检测结果的RSD为10%,不同浓度的3个供试品溶液生物学活性理论值和检测值的相对误差分别为10%、8%和12%,均满足方法验证的可接受标准。结论成功建立了重组抗EGFR单克隆抗体生物学活性检测方法,该方法专属性较强,精密度良好,准确度较高,可作为重组抗EGFR单克隆抗体生物学活性的常规检测方法。 展开更多

关键词 表皮生长因子受体 单克隆抗体 生物学活性 A-431细胞

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5-氮-2-脱氧胞苷对A431细胞Gadd45α表达及细胞凋亡的影响 被引量：2

10

作者 李小静 李柳君 +3 位作者 李志锋 张秀娟 张西克 苗国英 《中华实用诊断与治疗杂志》 2013年第2期150-152,共3页

目的探讨去甲基化药物5-氮-2-脱氧胞苷对体外培养表皮癌细胞株A431细胞Gadd45α表达及细胞凋亡的影响。方法体外培养A431细胞,采用10μmol/L 5-氮-2-脱氧胞苷处理,药物处理前及处理48h后分别采用RT-PCR、Western印记法及免疫细胞化... 目的探讨去甲基化药物5-氮-2-脱氧胞苷对体外培养表皮癌细胞株A431细胞Gadd45α表达及细胞凋亡的影响。方法体外培养A431细胞,采用10μmol/L 5-氮-2-脱氧胞苷处理,药物处理前及处理48h后分别采用RT-PCR、Western印记法及免疫细胞化学法检测A431细胞Gadd45αmRNA和蛋白的表达情况,采用流式细胞仪检测药物处理前、后A431细胞凋亡率。结果药物处理48h后,A431细胞Gadd45αmRNA及蛋白表达均高于处理前(P<0.05);A431细胞早期凋亡率、晚期凋亡率及总凋亡率高于处理前(P<0.05)。结论 DNA甲基化参与调控A431细胞Gadd45α基因的表达,5-氮-2-脱氧胞苷具有诱导A431细胞凋亡的作用。 展开更多

关键词 A431细胞 5-氮-2'-脱氧胞苷 Gadd45α

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姜黄挥发油联合顺铂对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖和凋亡的影响及机制 被引量：2

11

作者 昝雪娟 荣冬芸 +3 位作者 潘军玲 吕琳娜 肖露 曹煜 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期294-298,共5页

目的 探讨姜黄挥发油（TVO）联合顺铂对人皮肤鳞状细胞癌（鳞癌）A431细胞增殖、凋亡的影响及机制。方法 取对数生长期A431细胞，用5、10、20、40、80 mg/L TVO处理，对照组用含有1％二甲基亚砜（DMSO）的DMEM高糖培养基处理，24 h后，C... 目的 探讨姜黄挥发油（TVO）联合顺铂对人皮肤鳞状细胞癌（鳞癌）A431细胞增殖、凋亡的影响及机制。方法 取对数生长期A431细胞，用5、10、20、40、80 mg/L TVO处理，对照组用含有1％二甲基亚砜（DMSO）的DMEM高糖培养基处理，24 h后，CCK8法检测细胞增殖情况。另取部分A431细胞，分为4组，分别用含1％ DMSO的DMEM高糖培养基（对照组）、40 mg/L TVO（TVO组）、10 mg/L顺铂（顺铂组）、40 mg/L TVO和10 mg/L顺铂（TVO ＋ 顺铂组）处理24 h后，利用CCK8法检测细胞增殖活性；倒置显微镜观察细胞形态变化；吖啶橙（AO）/溴化乙锭（EB）双染色荧光显微镜观察细胞凋亡情况；比色法检测Caspase-3、Caspase-9酶活性；Western印迹检测Caspase-3、P糖蛋白表达。结果 5、10、20、40、80 mg/L TVO作用A431细胞24 h，对细胞增殖抑制率分别是（12.83 ± 6.4）%、（16.27 ± 11.4）%、（21.61 ± 9.1）%、（33.11 ± 2.0）%和（46.00 ± 3.3）%，与对照组（4.03 ± 1.4）%比较差异均有统计学意义（P 〈 0.05）；24 h时抑制50%细胞增殖的TVO浓度为（61.66 ± 1.03） mg/L；TVO组、顺铂组及TVO ＋ 顺铂组细胞增殖抑制率显著上升，与对照组比较差异均有统计学意义（P 〈 0.05），联合用药有协同作用，联合指数（CI）为1.366（P 〈 0.05）。TVO组、顺铂组细胞均不同程度变圆并出现凋亡，TVO ＋ 顺铂组细胞明显减少，出现大量细胞碎片。TVO组、顺铂组及TVO ＋ 顺铂组细胞Caspase-3酶活性分别是1.117 ± 0.095、1.381 ± 0.089、1.520 ± 0.115，Caspase-9酶活性分别是1.259 ± 0.059、1.829 ± 0.171、2.760 ± 0.297，Caspase-3蛋白表达量分别是1.156 ± 0.006、1.296 ± 0.021、1.482 ± 0.016，P糖蛋白表达量分别是1.311 ± 0.011、1.169 ± 0.012、0.528 ± 0.014，其中TVO ＋ 顺铂组细胞Caspase-3、Caspase-9酶活性及Caspase-3蛋白表达量显著高于TVO组和顺铂组，P糖蛋白表达量显著低于TVO组和 展开更多

关键词 肿瘤 鳞状细胞 细胞系 肿瘤 姜黄△ 顺铂 药物疗法 联合 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 P糖蛋白 A431细胞

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生存素小分子干扰RNA对皮肤鳞状细胞癌A431细胞生存素基因表达及生物学功能的影响 被引量：2

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作者 魏明 师广勇 +4 位作者 刘佳 龚艳杰 陈河涛 梁颖红 涂玲 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期305-309,共5页

目的 探讨生存素小分子干扰RNA（siRNA）对皮肤鳞状细胞癌A431细胞生存素基因表达及细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭力的影响。方法 培养的A431细胞分为3组：生存素siRNA组、阴性对照组和空白对照组，分别用50.0 nmol/L脂质体包裹的生存素... 目的 探讨生存素小分子干扰RNA（siRNA）对皮肤鳞状细胞癌A431细胞生存素基因表达及细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭力的影响。方法 培养的A431细胞分为3组：生存素siRNA组、阴性对照组和空白对照组，分别用50.0 nmol/L脂质体包裹的生存素基因序列特异性siRNA、无关序列siRNA阴性脂质体及预制囊泡转染。实时定量反转录-聚合酶链反应（RT？PCR）、Western印迹法分别检测A431细胞生存素mRNA及蛋白的表达。采用MTT比色法检测细胞增殖，流式细胞仪膜联蛋白Ⅴ/碘化丙锭双染法检测细胞凋亡，Transwell实验检测细胞迁移和侵袭力，流式细胞仪检测细胞周期变化。结果 转染后48 h，生存素siRNA组、阴性对照组、空白对照组A431细胞中生存素mRNA水平分别为0.56 ± 0.15、0.88 ± 0.37、0.90 ± 0.43，蛋白表达水平分别为0.59 ± 0.04、0.86 ± 0.05、0.91 ± 0.07，差异均有统计学意义（F = 276.67、243.61，均P 〈 0.001），且生存素siRNA组生存素mRNA和蛋白表达水平均显著低于阴性对照组和空白对照组，差异均有统计学意义（P 〈 0.05），而阴性对照组与空白对照组间差异无统计学意义（均P 〉 0.05）。重复测量方差分析显示，转染生存素siRNA能抑制A431细胞增殖（F = 13.19，P = 0.004），且生存素siRNA组A431细胞增殖抑制率明显高于阴性对照组和空白对照组（均P 〈 0.05），而阴性对照组与空白对照组比较，差异无统计学意义（P 〉 0.05）。转染后24 h， 3组间A431细胞凋亡率差异有统计学意义（F = 83.97，P = 0.002），且生存素siRNA组A431细胞凋亡率显著高于阴性对照组（P 〈 0.05）和空白对照组（P 〈 0.05），而阴性对照组与空白对照组间差异无统计学意义（P 〉 0.05）。转染后48 h，生存素siRNA组G2/M期细胞比例显著高于阴性对照组（P 〈 0.05）和空白对照组（P 〈 0.05），而生存素siRNA组A431细胞迁移数及侵� 展开更多

关键词 肿瘤 鳞状细胞 RNA 小分子干扰 细胞增殖 细胞凋亡 细胞周期 细胞运动 生存素 A431细胞

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小檗碱对皮肤鳞状细胞癌裸鼠模型的抑制作用及其机制研究 被引量：2

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作者 邢天娇 李东霞 +1 位作者 张娟 贾敏鑫 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期685-691,共7页

目的研究小檗碱对皮肤鳞状细胞癌(cSCC)-A431裸鼠移植瘤的体积、重量、细胞增殖及凋亡的影响,探索小檗碱抑制cSCC的可能机制。方法培养A431细胞,于20只裸鼠背部皮下注射A431细胞悬液建立cSCC移植瘤裸鼠模型。接种第15天,将荷瘤裸鼠随机... 目的研究小檗碱对皮肤鳞状细胞癌(cSCC)-A431裸鼠移植瘤的体积、重量、细胞增殖及凋亡的影响,探索小檗碱抑制cSCC的可能机制。方法培养A431细胞,于20只裸鼠背部皮下注射A431细胞悬液建立cSCC移植瘤裸鼠模型。接种第15天,将荷瘤裸鼠随机平均分为4组:低、中、高剂量组裸鼠腹腔分别注射10、20、25 mg/kg小檗碱溶液,对照组腹腔注射生理氯化钠溶液,每日1次,连续给药35 d。分别于给药前、给药第7、14、21、28、35天检测移植瘤体积。实验结束后,处死裸鼠并随即剥离瘤块称重,计算肿瘤生长抑制率。移植瘤行组织病理检查,免疫组化检测Ki67表达水平,TUNNEL染色检测移植瘤组织中凋亡细胞数,荧光定量PCR和Western印迹法分别检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、caspase-3和Ezrin mRNA和蛋白的表达。多组间比较采用单因素方差分析,各组与对照组比较采用Dunnett-t检验。结果随小檗碱剂量升高和作用时间延长,肿瘤生长曲线逐渐变平缓,各小檗碱组肿瘤生长受到不同程度的抑制,其中高剂量组肿瘤生长抑制作用最明显。小檗碱低、中、高剂量组肿瘤生长抑制率分别为31.05%、66.68%、76.49%,瘤重均显著低于对照组(t=4.07、6.33、7.26,均P<0.01)。移植瘤组织病理检查显示,随小檗碱剂量的增加,肿瘤细胞坏死程度和范围增加。免疫组化显示,随小檗碱剂量的增加,Ki67阳性细胞逐渐减少。此外,低、中、高剂量组Ki67阳性细胞数均显著低于对照组(均P<0.01),而凋亡细胞数均显著高于对照组(P<0.05或<0.01)。4组Bax、Bcl-2、caspase-3、Ezrin mRNA及蛋白表达差异均有统计学意义(均P<0.01)。其中,小檗碱低、中、高剂量组Bcl-2 mRNA的表达均显著低于对照组(均P<0.01),中、高剂量组Bcl-2蛋白表达显著低于对照组(均P<0.01);高剂量组Bax mRNA及中、高剂量组caspase-3 mRNA的表达均显著高于对照组(P<0.05或<0.01),而低、中、高剂量组Bax、c 展开更多

关键词 癌 鳞状细胞 小檗碱 疾病模型 动物 细胞凋亡 A431细胞

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HPV16 E7对A431细胞中Smad7表达的影响 被引量：1

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作者 李颖 何威 +1 位作者 张斌 杨玲 《皮肤病与性病》 2016年第4期241-245,共5页

目的研究HPV16 E7对A431表皮鳞癌细胞Smad7表达的影响,并分析其潜在的意义。方法应用基因工程技术转染并筛选出稳定表达HPV16 E7的A431细胞,采用qRT-PCR、Western blotting及激光共聚焦技术,观察并比较转染前后A431细胞中Smad7的表达。... 目的研究HPV16 E7对A431表皮鳞癌细胞Smad7表达的影响,并分析其潜在的意义。方法应用基因工程技术转染并筛选出稳定表达HPV16 E7的A431细胞,采用qRT-PCR、Western blotting及激光共聚焦技术,观察并比较转染前后A431细胞中Smad7的表达。结果 A431细胞中Smad7的表达强度随转染HPV16 E7后时间的延长而升高(P<0.05)。Smad7蛋白的亚细胞定位,存在胞浆向胞核移位的现象。结论稳定高表达HPV16 E7后的A431细胞中Smad7表达水平升高,并可以影响Smad7的细胞定位。 展开更多

关键词 HPV16 E7 SMAD7 A431细胞

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色素上皮衍生因子在A431细胞的表达及对其增殖的影响 被引量：1

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作者 李春明 张颖鹏 刘志刚 《江西医药》 CAS 2013年第11期979-980,共2页

目的明确色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)在A431细胞的表达情况以及对其增殖影响。方法采用RT-PCR和Western-blot分别检测A431细胞PEDF mRNA和蛋白的表达;MTT方法检测PEDF对A431细胞增殖的影响。结果A431细胞... 目的明确色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)在A431细胞的表达情况以及对其增殖影响。方法采用RT-PCR和Western-blot分别检测A431细胞PEDF mRNA和蛋白的表达;MTT方法检测PEDF对A431细胞增殖的影响。结果A431细胞在mRNA和蛋白水平均可检测到PEDF的表达。此外,100ng/ml的PEDF可以抑制A431细胞的增殖。结论PEDF抑制A431细胞增殖,有望用于皮肤鳞癌的治疗。 展开更多

关键词 色素上皮衍生因子 A431细胞 细胞增殖

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双氢青蒿素对皮肤鳞状细胞癌A431细胞及人表皮角质形成细胞Hacat增殖凋亡影响的研究 被引量：1

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作者 惠海英 吴娜 +2 位作者 弥鹏 孙晶莹 肖生祥 《贵州医药》 CAS 2017年第9期899-901,共3页

目的探讨双氢青蒿素对皮肤鳞状细胞癌A431细胞及人表皮角质形成细胞Hacat的增殖及凋亡的影响。方法研究对象为人皮肤鳞状细胞A431细胞及人表皮角质形成细胞Hacat,实验分为空白对照组、双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)组(20、40、60... 目的探讨双氢青蒿素对皮肤鳞状细胞癌A431细胞及人表皮角质形成细胞Hacat的增殖及凋亡的影响。方法研究对象为人皮肤鳞状细胞A431细胞及人表皮角质形成细胞Hacat,实验分为空白对照组、双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)组(20、40、60、80μmol/L)。各组细胞药物干预24、48、72h后进行检测,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法观察各组细胞增殖能力;流式细胞(FCM)实验检测细胞凋亡。结果 DHA以时间和剂量依赖性的方式抑制A431和HaCaT细胞增殖。不同浓度的DHA刺激细胞后24、48、72h,与对照组相比,A431细胞生长抑制率明显降低,并在80μmol/L DHA刺激72h时达到峰值。HaCaT细胞中得到了相似的结果,但生长抑制率降低的没有A431细胞那么明显。A431细胞和HaCaT细胞预处理后用60μmol/L DHA刺激48h,与对照组比较,测定细胞中,A431细胞凋亡显著增加,差异有统计学意义(P<0.05),同时对HaCaT细胞无影响,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 DHA可抑制皮肤鳞状细胞癌A431细胞的增殖及促进凋亡,而且对正常细胞影响较小。 展开更多

关键词 双氢青蒿素 A431细胞 Hacat细胞 凋亡

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葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的表达抑制对A431细胞增殖和细胞周期的影响 被引量：1

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作者 李敏 夏永华 +3 位作者 刘冬 张孟杰 田中伟 李占国 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期766-770,共5页

目的研究葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）表达下调对皮肤鳞状细胞癌（鳞癌）细胞增殖和细胞周期的影响。方法正常培养人永生化上皮细胞HaCaT、皮肤鳞癌SCL-1和A431细胞，采用Western印迹法检测细胞中G6PD蛋白的表达。当A431细胞生长至85%~... 目的研究葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）表达下调对皮肤鳞状细胞癌（鳞癌）细胞增殖和细胞周期的影响。方法正常培养人永生化上皮细胞HaCaT、皮肤鳞癌SCL-1和A431细胞，采用Western印迹法检测细胞中G6PD蛋白的表达。当A431细胞生长至85%~90%融合时，将siRNA对照（siRNA对照组）和G6PD siRNA（G6PD siRNA组）分别转染A431细胞，未转染的A431细胞则为未转染组。Western印迹法检测3组不同处理的A431细胞中G6PD蛋白及细胞周期蛋白D1、CDK4的表达，CCK-8法检测3组A431细胞的增殖情况，流式细胞仪分析3组A431细胞周期的变化。结果正常培养的2株皮肤鳞癌SCL-1和A431细胞中G6PD蛋白的表达水平（分别为0.308±0.023和0.643±0.046）均显著高于HaCaT细胞（0.100±0.019），且A431细胞显著高于SCL-1细胞（均P〈0.05）。A431细胞G6PD siRNA组G6PD、细胞周期蛋白D1和CDK4蛋白的表达（0.134±0.027、0.154±0.017、0.166±0.017）显著低于未转染组（0.425±0.029、0.344±0.024、0.330±0.020）和siRNA对照组（0.444±0.033、0.350±0.027、0.348±0.018），差异均有统计学意义（P〈0.05）。G6PD siRNA组在24~96 h各时间点的细胞增殖活性均明显低于siRNA对照组和未转染组（P〈0.001），而siRNA对照组与未转染组间细胞增殖差异无统计学意义（均P〉0.05）。G6PD siRNA组G0/G1期A431细胞比例显著高于siRNA对照组及未转染组（P〈0.001），而G6PD siRNA组S期A431细胞比例又显著低于siRNA对照组及未转染组（P〈0.001）。结论G6PD可能在调控皮肤鳞癌细胞增殖和细胞周期中发挥重要作用。 展开更多

关键词 癌 鳞状细胞 葡糖磷酸脱氢酶 细胞增殖 细胞周期 A431细胞

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西罗莫司和饥饿处理对人A431细胞自噬水平的影响

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作者 张云 杨晓雯 +8 位作者 徐倩倩 施辛 陈旭 李莉 徐松 黄丹 鞠梅 陈崑 顾恒 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期776-780,共5页

目的：探讨经典自噬诱导剂西罗莫司和饥饿处理对人皮肤鳞状细胞癌细胞系A431自噬水平的影响。方法分别将A431细胞和人宫颈癌细胞系HeLa分为对照组（单纯DMEM培养基处理）、二甲基亚砜（DMSO）组、20 nmol/L西罗莫司组、80 nmol/L西罗莫... 目的：探讨经典自噬诱导剂西罗莫司和饥饿处理对人皮肤鳞状细胞癌细胞系A431自噬水平的影响。方法分别将A431细胞和人宫颈癌细胞系HeLa分为对照组（单纯DMEM培养基处理）、二甲基亚砜（DMSO）组、20 nmol/L西罗莫司组、80 nmol/L西罗莫司组、平衡盐溶液（EBSS）组。作用4 h后，Western印迹检测A431细胞和HeLa细胞自噬微管相关蛋白轻链3A/3B（LC3A/B）、重组人γ-氨基丁酸受体相关蛋白（GABARAP）的表达水平。吖啶橙染色分析细胞自噬体表达水平。结果 Western印迹检测显示，对照组与DMSO组A431细胞中LC3A/B-Ⅱ与LC3 A/B-Ⅰ比值差异无统计学意义（P〉0.05）；20 nmol/L西罗莫司组、80 nmol/L西罗莫司组、EBSS组LC3 A/B-Ⅱ与LC3 A/B-Ⅰ比值较对照组均明显升高，差异均有统计学意义（P〈0.05）。HeLa细胞Western印迹检测结果与A431细胞类似。双变量相关性分析显示，HeLa细胞中LC3A/B-Ⅰ与GABARAP表达呈正相关（r=0.869，95%CI：0.807~0.999，P=0.051），LC3A/B-Ⅱ与GABARAP表达呈负相关（r=-0.742，95%CI：-0.982~0.406，P=0.042）；A431细胞中LC3A/B-Ⅰ与GABARAP表达亦呈正相关（r=0.837，95%CI：-0.173~0.989，P=0.037），LC3A/B-Ⅱ与GABARAP表达呈负相关（r=-0.684，95%CI：-0.977~0.500，P=0.047）。吖啶橙染色显示，A431细胞自噬阳性细胞比例在西罗莫司组（23.750%±0.260%）与EBSS组（32.450%±0.488%）同样高于对照组（15.987%±0.242%，均P 〈0.05）；HeLa细胞自噬阳性细胞比例在西罗莫司组（33.307%±0.715%）和EBSS组（66.097%±1.141%）高于对照组（14.117%±0.295%，均P〈0.05）。结论经典自噬诱导剂西罗莫司和饥饿能够上调A431细胞的自噬水平，GABARAP蛋白可能与LC3A/B高度相关。 展开更多

关键词 自噬 细胞系 肿瘤 HELA细胞 西罗莫司 饥饿 A431细胞 GABARAP

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大蒜素对皮肤基底细胞癌细胞放射治疗敏感性的影响及其与自噬水平的关系

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作者 祁峰 《中国皮肤性病学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第6期616-618,共3页

目的探讨大蒜素(Allicin)对皮肤基底细胞癌细胞放射治疗敏感性的影响及其与自噬水平的关系。方法采用MTT法检测Allicin对A431细胞的生长抑制作用,记录半数抑制浓度(IC50);将细胞分为4组:照射组(IR组)、Allicin组、IR+Allicin组以及对照... 目的探讨大蒜素(Allicin)对皮肤基底细胞癌细胞放射治疗敏感性的影响及其与自噬水平的关系。方法采用MTT法检测Allicin对A431细胞的生长抑制作用,记录半数抑制浓度(IC50);将细胞分为4组:照射组(IR组)、Allicin组、IR+Allicin组以及对照组。细胞自噬水平的检测采用流式细胞仪。结果MTT检测结果显示,A431细胞经Allicin处理24,48,72h后,其活性受到显著的抑制,抑制程度受到时间及浓度的影响。同一浓度下,不同时间比较以及同一时间内不同浓度的比较,A431细胞活性的差异均具有统计学意义(P均<0.05)。Allicin作用于A431细胞24,48,72h的IC50分别为34.14,17.78,6.72mmol/L,差异均具有统计学意义(P均<0.05)。IR+Allicin组的SF_2,D_0,D_q分别为:75.81,6.46,1.34;IR组的SF_2,D_0,D_q分别为96.21,8.60,2.85。在各照射剂量点A431细胞的SF均显著低于IR组。与IR组比较,IR+Allicin组的肩区逐渐缩小,说明细胞的损伤修复能力呈现降低趋势。Allicin组和IR+Allicin组的A431细胞自噬水平均高于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论 Allicin能上调人皮肤基底细胞癌A431细胞的自噬水平,进而增加A431细胞的放疗敏感性。 展开更多

关键词 皮肤基底细胞癌 A431细胞 大蒜素 放射治疗敏感性 自噬水平

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lncRNA UCA1通过激活miR-143/HK2通路促进皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖、侵袭和EMT

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作者 张永红 李存涛 +1 位作者 张玉红 姚丽 《皮肤性病诊疗学杂志》 2021年第3期174-181,共8页

目的:探讨长链非编码RNA UCA1 (lncRNA UCA1)在皮肤鳞状细胞癌A431细胞中的表达及其对A431细胞增殖、侵袭及其上皮间质转化(EMT)的影响。方法:通过RT-qPCR检测皮肤鳞状细胞癌、癌旁正常组织、A431细胞、HaCaT细胞中lncRNA UCA1的表达;si... 目的:探讨长链非编码RNA UCA1 (lncRNA UCA1)在皮肤鳞状细胞癌A431细胞中的表达及其对A431细胞增殖、侵袭及其上皮间质转化(EMT)的影响。方法:通过RT-qPCR检测皮肤鳞状细胞癌、癌旁正常组织、A431细胞、HaCaT细胞中lncRNA UCA1的表达;siRNA技术下调lncRNA UCA1表达,利用四甲基偶氮唑蓝(MTT)、细胞侵袭实验和Western blot检测下调lncRNA UCA1对A431细胞增殖、侵袭和EMT的影响。通过生物信息学miRanda软件和双荧光素酶报告基因实验分析lncRNA UCA1和微小RNA-143(miR-143)之间的关系。RT-qPCR检测miR-143在A431细胞、HaCaT细胞中的表达。同时上调lncRNA UCA1和miR-143表达,分析lncRNA UCA1通过miR-143对A431细胞增殖、侵袭和EMT的影响。通过生物信息学TargetScan软件和双荧光素酶报告基因实验检测miR-143与己糖激酶Ⅱ(HK2)之间的关系;RT-qPCR检测HK2在A431细胞、HaCaT细胞中的表达。siRNA技术下调HK2表达,分析A431细胞增殖、侵袭和EMT能力。结果:在A431细胞中lncRNA UCA1的表达上调(P<0.01),miR-143表达下调(P<0.01),HK2表达上调(P<0.01)。siRNA下调lncRNA UCA1表达明显抑制了A431细胞增殖、侵袭与EMT;lncRNA UCA1靶向且负调控miR-143;下调miR-143的表达促进A431细胞增殖、侵袭与EMT;上调lncRNA UCA1通过miR-143促进A431细胞增殖、侵袭与EMT。miR-143与HK2具有靶向关系。siRNA下调HK2表达抑制了A431细胞增殖、侵袭与EMT,lncRNA UCA1通过miR-143促进HK2表达。结论:lncRNA UCA1在皮肤鳞状细胞癌A431细胞中表达上调且通过miR-143/HK2轴促进A431细胞增殖、侵袭及其EMT。 展开更多

关键词 lncRNA UCA1 MIR-143 HK2 A431细胞 增殖 EMT

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