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流式细胞术检测体外微核方法的建立 被引量：13
1
作者 欧红梅 周长慧 +2 位作者 涂宏刚 黄鹏程 常艳 《癌变．畸变．突变》 CAS CSCD 2015年第1期39-43,共5页
目的:建立96孔板流式细胞术体外微核自动化检测的方法,并探讨其用于药物早期遗传毒性筛选和遗传毒性评价的可能性。方法:试验分为+S9短时处理组(4 h)和-S9持续处理组(24 h),分别选择3个不同浓度的环磷酰胺和丝裂霉素C处理CHO-K1细胞,24 ... 目的:建立96孔板流式细胞术体外微核自动化检测的方法,并探讨其用于药物早期遗传毒性筛选和遗传毒性评价的可能性。方法:试验分为+S9短时处理组(4 h)和-S9持续处理组(24 h),分别选择3个不同浓度的环磷酰胺和丝裂霉素C处理CHO-K1细胞,24 h后收获细胞。采用EMA和SYTOX Green双色标记,流式细胞仪分析96孔板的微核率,并与常规标准平皿培养、细胞分裂阻滞法的双核微核结果进行比较。结果:在有或无S9处理条件下,不同浓度的环磷酰胺、丝裂霉素C诱导产生的微核率较溶剂对照组均显著增加(P均<0.05),剂量-效应关系明显。两种微核检测方法的Spearman相关系数(r s)为1.000。结论:流式细胞术检测环磷酰胺、丝裂霉素C作用于CHO-K1细胞的微核试验结果均为阳性,与文献报道一致,因而本试验初步建立了流式细胞术体外微核检测方法。流式细胞术检测微核的方法与人工阅片的方法相关性好,提示该方法用于化合物早期遗传毒性筛选和遗传毒性评价具有良好的前景。 展开更多
关键词 CHO-K1细胞 体外微核试验 流式细胞术 96孔板
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第三代流式细胞分选仪及96孔板分选单个细胞的方法及参数优化 被引量：8
2
作者 闵智慧 程韵枫 《中国临床医学》 2016年第6期846-850,共5页
目的：用第三代流式细胞分选仪比较不同直径喷嘴分选的单细胞的得率及细胞活性,进一步完善单细胞微孔板分选的参数设置及条件优化。方法：用FACSAriaⅢ流式细胞分选仪及96孔板对Raji细胞、A549、DT 40、RAW 264.7细胞系进行单细胞分选,... 目的：用第三代流式细胞分选仪比较不同直径喷嘴分选的单细胞的得率及细胞活性,进一步完善单细胞微孔板分选的参数设置及条件优化。方法：用FACSAriaⅢ流式细胞分选仪及96孔板对Raji细胞、A549、DT 40、RAW 264.7细胞系进行单细胞分选,分别采用70μm、100μm和130μm喷嘴分选,比较分选后单细胞得率及克隆形成率。结果：在单细胞分选模式下,用3种不同直径喷嘴及96孔板分选后的单细胞得率为86.55%-93.44%,即96孔板有单细胞的孔数为84-92孔;分选后的单个细胞培养7d后,经70μm、100μm和130μm喷嘴分选的单细胞克隆孔数分别为31-52孔、49-70孔、58-78孔。结论：进行单细胞微孔板分选时,在精确调节及优化实验参数的前提下,为了保证单细胞的活性,应优先选择100μm或130μm喷嘴。 展开更多
关键词 单细胞分选 流式细胞分选仪 96孔板 喷嘴 液滴延迟
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采用96微孔板测定尿碘的研究 被引量：1
3
作者 赵长容 方芳 +3 位作者 周咸吉 楼晓明 丁钢强 曹建明 《中国卫生检验杂志》 CAS 2011年第2期296-299,共4页
目的:建立一种快速、简便、可用于批量尿样中碘含量检测的新方法。方法:根据过硫酸氨消化-砷铈催化分光光度法测定尿碘的原理,在96微孔板中同时对60份微量尿样进行密封消化,然后在酶标仪上同时测定60份样品的吸光度,得出60份样品的尿碘... 目的:建立一种快速、简便、可用于批量尿样中碘含量检测的新方法。方法:根据过硫酸氨消化-砷铈催化分光光度法测定尿碘的原理,在96微孔板中同时对60份微量尿样进行密封消化,然后在酶标仪上同时测定60份样品的吸光度,得出60份样品的尿碘含量。结果:采用96微孔板进行批量尿碘的消化和测定,未出现样品的损失和交叉污染;方法的线性范围为0μg/L^300μg/L,标准曲线方程为C(μg/L)=17.68-367.4 lgA,R=0.9985,方法的批内精密度为2.32%~5.60%,批间精密度为4.50%,回收率为93.3%~105.9%;60份尿碘样品的测定结果与标准方法测定结果吻合。结论:采用96微孔板测定尿碘含量,试剂用量省、操作简便快速、结果准确可靠,适合大规模样品的批量测定,该方法具有较高的实际推广应用价值。 展开更多
关键词 尿碘 96微孔板 酶标仪 催化分光光度法
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96微孔板鉴定芯片在媒介蚊类鉴定中的应用前景
4
作者 苏影 廉国胜 +2 位作者 汪海波 柯明剑 王琪 《热带医学杂志》 CAS 2016年第9期1212-1213,1222,共3页
蚊类是常见的重要医学媒介昆虫,种类繁多、形态多样,不仅骚扰吸血,部分种类更是多种严重疾病的重要传播媒介。不同的蚊类携带病原体的类型也不同,因此,蚊类鉴定对于了解疾病的扩散和传播非常重要。本文参阅已发表的文献,并结合实际工作,... 蚊类是常见的重要医学媒介昆虫,种类繁多、形态多样,不仅骚扰吸血,部分种类更是多种严重疾病的重要传播媒介。不同的蚊类携带病原体的类型也不同,因此,蚊类鉴定对于了解疾病的扩散和传播非常重要。本文参阅已发表的文献,并结合实际工作,对96微孔板鉴定芯片的原理、优越性及其在蚊类快速鉴定上的应用前景展望进行综述。该技术具有准确、快速、高通量等特点,对缩短鉴定周期,提高鉴定常见蚊虫效率,构筑卫生检疫安全屏障具有重要意义。 展开更多
关键词 96微孔板 基因芯片 蚊类鉴定
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96孔酶标板法检测家蝇血淋巴黑化反应的初步研究
5
作者 郭文宗 辛正 +3 位作者 刘政明 王蕾 朱文刚 李殿香 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS CSCD 2014年第5期388-392,共5页
目的 探讨用96孔酶标板法检测家蝇血淋巴黑化反应的可行性。方法 用大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、藤黄微球菌单菌和大肠埃希菌与金黄色葡萄球菌混合菌分别体外刺激家蝇3龄幼虫的血淋巴,通过96孔酶标板法分析菌刺引起的家蝇幼虫血淋巴酚... 目的 探讨用96孔酶标板法检测家蝇血淋巴黑化反应的可行性。方法 用大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、藤黄微球菌单菌和大肠埃希菌与金黄色葡萄球菌混合菌分别体外刺激家蝇3龄幼虫的血淋巴,通过96孔酶标板法分析菌刺引起的家蝇幼虫血淋巴酚氧化酶活性的变化,进一步探讨菌刺与家蝇黑化反应的关系。结果 相比正常对照的起始A490值,1~3号样品的起始A490值随加菌量的增多依次递增,其增幅分别为大肠埃希菌1.33~1.38倍,金黄色葡萄球菌1.30~2.40倍,藤黄微球菌2.60~3.00倍,大肠埃希菌与金黄色葡萄球菌混合菌1.40~3.80倍。显然,菌刺可使家蝇血淋巴酚氧化酶活性增高,菌刺浓度越大,黑化反应越强,单菌刺激的效果依次为藤黄微球菌〉金黄色葡萄球菌〉大肠埃希菌,大肠埃希菌与金黄色葡萄球菌混合菌刺激的效果要比单菌好。结论 用96孔酶标板法检测菌刺家蝇血淋巴黑化反应的变化可行。 展开更多
关键词 家蝇血淋巴 96孔酶标板 黑化反应 酚氧化酶
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用紫外-荧光微孔板酶检测技术测定两种土壤的酶活性 被引量：3
6
作者 何建州 杨金燕 +1 位作者 田丽燕 李廷强 《四川农业大学学报》 CSCD 北大核心 2012年第2期181-185,共5页
【目的】土壤酶活性是土壤质量的重要指示指标,本文对土壤酶的快速检测方法进行了探讨。【方法】采用荧光微孔板酶检测技术,测定土壤硫酸酯酶、磷酸酶、β-葡萄糖苷酶和肽酶活性,采用紫外微孔板酶检测技术测定多酚氧化酶和过氧化物酶活... 【目的】土壤酶活性是土壤质量的重要指示指标,本文对土壤酶的快速检测方法进行了探讨。【方法】采用荧光微孔板酶检测技术,测定土壤硫酸酯酶、磷酸酶、β-葡萄糖苷酶和肽酶活性,采用紫外微孔板酶检测技术测定多酚氧化酶和过氧化物酶活性。【结果】结果表明,采自农田的赤红壤的硫酸酯酶、磷酸酶和肽酶活性高于紫色土和采自矿山的赤红壤的相应的酶活性;矿山赤红壤的多酚氧化酶和过氧化物酶活性在三者中最高;紫色土的β-葡萄糖苷酶活性高于赤红壤的β-葡萄糖苷酶活性。【结论】紫外-荧光微孔板酶检测技术可快速测定土壤中酶的活性。 展开更多
关键词 土壤 酶 荧光微孔板酶检测技术 紫外微孔板酶检测技术
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新型低成本高效节能96孔洗板机的设计与实现 被引量：3
7
作者 沈增贵 邓红玉 《医疗卫生装备》 CAS 2014年第8期34-36,共3页
目的:研制一款高效率、宽条件的洗板机,解决当前洗板机常见的效率低、注液压力不均匀、存在交叉污染、系统稳定性不高等问题。方法:新型洗板机改用96针的分配头,替换原有的12针或8针分配头,并且支持双板清洗方式,缩短洗板时间,提高效率... 目的:研制一款高效率、宽条件的洗板机,解决当前洗板机常见的效率低、注液压力不均匀、存在交叉污染、系统稳定性不高等问题。方法:新型洗板机改用96针的分配头,替换原有的12针或8针分配头,并且支持双板清洗方式,缩短洗板时间,提高效率;采用压力平衡系统,调节吸液瓶与管路压力,使注液均匀,减少溢液、溅液现象,防止瓶内压力增大冲破液路连接处;采用防溢液装置实现电液分离。结果:实践表明,该洗板机效率分别为12针、8针洗板机的8倍、12倍;在临床测试与压力测试中,能有效抑制交叉污染,及时吸走残液,防止电气部分进水短路。结论:该洗板机可有效改善当前洗板机存在的常见问题,提高孔板清洗速度和质量。 展开更多
关键词 96孔洗板机 注液分配头 液路 压力平衡
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人血清抗肺炎球菌荚膜多糖的血清特异性IgG抗体ELISA检测方法的适用性验证
8
作者 石刚 杨田瑶 +7 位作者 任珍芸 李阿妮 王欣茹 郭丽娜 刘文宾 罗树权 李红 叶强 《微生物学免疫学进展》 CAS 2024年第1期31-39,共9页
目的 验证ELISA中使用国产酶标板和国产细胞壁C多糖(cell wall polysaccharides, CWPS)替代现用的进口酶标板(Greiner 655080)和丹麦国家血清研究所(Statens Serum Institut, SSI)的CWPS,用于检测肺炎球菌疫苗免疫人血清中抗荚膜多糖Ig... 目的 验证ELISA中使用国产酶标板和国产细胞壁C多糖(cell wall polysaccharides, CWPS)替代现用的进口酶标板(Greiner 655080)和丹麦国家血清研究所(Statens Serum Institut, SSI)的CWPS,用于检测肺炎球菌疫苗免疫人血清中抗荚膜多糖IgG抗体的可行性和适用性。方法 执行PnPS ELISA,以现用SSI的CWPS和Greiner 655080酶标板为对照,分别用国产CWPS和国产酶标板(96BTA),检测相同样品中24个肺炎球菌血清型别的抗荚膜多糖IgG抗体,对检测结果进行系统分析。结果 (1)国产酶标板的适用性验证结果:国产及进口酶标板检测质控血清09CS的24个血清型的荚膜多糖IgG抗体含量完全一致,林氏一致性相关系数(lin's concordance correlation coefficient,r_(c))为0.990 3;20份实验室内质控血清的结果为高度一致,r_(c)为0.958 0;24个血清型的样本最低检测限(lower limit of detection, LLQ)在0.008~0.072μg/mL,进口酶标板为0.010~0.079μg/mL之间。(2) CWPS的适用性验证结果:国产CWPS的生化检测结果和~1H核磁共振波谱图(nuclear magnetic resonance spectroscopy, NMR)与现用SSI的CWPS基本一致;国产和进口CWPS吸收后检测质控血清09CS的24个肺炎球菌血清型特异性荚膜多糖抗体值结果完全一致,r_(c)为0.999 0;国产及进口CWPS检测所选10对免前及免后血清的检测结果为高度一致,免前血清的r_(c)为0.953 0,免后血清的r_(c)为0.972 0。结论 经验证,国产CWPS可替代进口CWPS,国产酶标板可替代进口酶标板,用于肺炎球菌疫苗临床血清特异性抗体含量的检测。 展开更多
关键词 肺炎链球菌 细胞壁多糖 96孔酶标板 酶联免疫吸附试验 适用性验证
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