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基于核酸侵入反应的生物分子检测技术的研究进展 被引量：3
1
作者 马寅姣 邹秉杰 +1 位作者 王建平 周国华 《现代生物医学进展》 CAS 2011年第12期2384-2388,共5页
核酸侵入反应是由5'核酸内切酶或flap内切酶催化的,能够识别切割核酸片段形成的特异性结构的一类反应。近年来发展了很多基于该反应的生物大分子检测技术,能够对DNA、RNA、miRNA及蛋白质进行高灵敏、高特异性的测定。这些技术大都... 核酸侵入反应是由5'核酸内切酶或flap内切酶催化的,能够识别切割核酸片段形成的特异性结构的一类反应。近年来发展了很多基于该反应的生物大分子检测技术,能够对DNA、RNA、miRNA及蛋白质进行高灵敏、高特异性的测定。这些技术大都无需扩增待测靶标,极大地降低了扩增产物交叉污染的风险,在临床检测中具有很大的应用前景。本文对这些检测技术的原理及应用作简要综述。 展开更多
关键词 核酸侵入反应 5'核酸内切酶 Flap内切酶 信号扩增
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姜黄素通过降低miR-135b-5p和FEN1表达增强卵巢癌OVCAR-3细胞顺铂敏感性
2
作者 马蓉 李娟 王芳 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2024年第4期324-330,共7页
目的:探究姜黄素对卵巢癌OVCAR-3细胞顺铂敏感性的影响及其潜在机制。方法:(1)体外常规培养卵巢癌亲本细胞OVCAR-3并构建顺铂耐药OVCAR-3/DDP细胞,将OVCAR-3细胞分为Control(常规培养)、DDP-1(1μmol/L顺铂)、DDP-5(5μmol/L顺铂)、DDP-... 目的:探究姜黄素对卵巢癌OVCAR-3细胞顺铂敏感性的影响及其潜在机制。方法:(1)体外常规培养卵巢癌亲本细胞OVCAR-3并构建顺铂耐药OVCAR-3/DDP细胞,将OVCAR-3细胞分为Control(常规培养)、DDP-1(1μmol/L顺铂)、DDP-5(5μmol/L顺铂)、DDP-10(10μmol/L顺铂)、DDP-15(15μmol/L顺铂)、DDP-20(20μmol/L顺铂)、DDP-30(30μmol/L顺铂)、姜黄素+DDP-1(20μmol/L姜黄素+1μmol/L顺铂)、姜黄素+DDP-5(20μmol/L姜黄素+5μmol/L顺铂)、姜黄素+DDP-10(20μmol/L姜黄素+10μmol/L顺铂)、姜黄素+DDP-15(20μmol/L姜黄素+15μmol/L顺铂)、姜黄素+DDP-20(20μmol/L姜黄素+20μmol/L顺铂)、姜黄素+DDP-30组(20μmol/L姜黄素+30μmol/L顺铂);将OVCAR-3/DDP细胞分为Control(常规处理)、DDP-10(10μmol/L顺铂)、DDP-20(20μmol/L顺铂)、DDP-30(30μmol/L顺铂)、DDP-40(40μmol/L顺铂)、DDP-50(50μmol/L顺铂)、DDP-60(60μmol/L顺铂)、姜黄素+DDP-10(20μmol/L姜黄素+10μmol/L顺铂)、姜黄素+DDP-20(20μmol/L姜黄素+20μmol/L顺铂)、姜黄素+DDP-30(20μmol/L姜黄素+30μmol/L顺铂)、姜黄素+DDP-40(20μmol/L姜黄素+40μmol/L顺铂)、姜黄素+DDP-50(20μmol/L姜黄素+50μmol/L顺铂)、姜黄素+DDP-60组(20μmol/L姜黄素+60μmol/L顺铂),CCK-8法检测细胞活性,计算顺铂半数抑制浓度(IC 50),筛选顺铂和姜黄素的合适作用浓度。(2)将OVCAR-3细胞分为对照组(常规处理)、DDP组(20.5μg/mL顺铂)、姜黄素组(20μmol/L姜黄素)、姜黄素+DDP组(20μmol/L姜黄素+20.5μg/mL顺铂);将OVCAR-3/DDP细胞分为对照组(常规处理)、DDP组(42.1μg/mL顺铂)、姜黄素组(20μmol/L姜黄素)、姜黄素+DDP组(20μmol/L姜黄素+42.1μg/mL顺铂),采用流式细胞术检测细胞凋亡率,实时荧光定量(qRT)-PCR检测miR-135b-5p表达,qRT-PCR和免疫印迹法分别检测瓣状核酸内切酶-1(flap endonuclease 1,FEN1)mRNA和蛋白表达。结果:相同顺铂浓度时,与DDP组比较,姜黄素+DDP联合组OVCAR-3和OVCAR-3/DDP细胞活性明显降低(P均<0.001)。DDP作用于OVCAR-3和 展开更多
关键词 姜黄素 miR-135b-5p 瓣状核酸内切酶-1(FEN1) 卵巢癌 顺铂敏感性
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BIRC5、NEIL2表达水平与鼻咽癌放疗敏感性的相关性 被引量：4
3
作者 贾全凡 袁龙 +1 位作者 刘冬梅 常艺琼 《热带医学杂志》 CAS 2018年第10期1322-1325,共4页
目的探讨含重复凋亡结构杆状病毒抑制剂5(BIRC5)、内切核酸酶Ⅷ样蛋白2(NEIL2)与鼻咽癌(NPC)患者放疗敏感性的关系。方法选取2012年4月-2014年4月于本院诊治的NPC患者56例(NPC组),选取同期鼻咽炎患者50例作为对照组。根据随访结果,将NP... 目的探讨含重复凋亡结构杆状病毒抑制剂5(BIRC5)、内切核酸酶Ⅷ样蛋白2(NEIL2)与鼻咽癌(NPC)患者放疗敏感性的关系。方法选取2012年4月-2014年4月于本院诊治的NPC患者56例(NPC组),选取同期鼻咽炎患者50例作为对照组。根据随访结果,将NPC患者分为放疗敏感组(n=42)和放疗不敏感组(n=14),采用免疫组化SP法检测病理组织BIRC5、NEIL2水平,比较二者在NPC组和对照组中差异,以及在NPC患者中治疗前后的变化。结果与对照组比较,NPC组患者BIRC5、NEIL2相对表达量均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。放疗前敏感组患者BIRC5、NEIL2相对表达水平显著低于不敏感组(P<0.05),放疗后敏感组患者NEIL2相对表达水平明显低于不敏感组(P<0.05)。BIRC5、NEIL2预测NPC放疗敏感性ROC曲线下面积分别为0.839、0.817,敏感性分别为79.12%、78.77%,特异性分别为79.53%、79.86%,约登指数分别为0.587、0.586。BIRC5低表达者3年存活率明显高于BIRC5高表达者(94.87%vs. 70.59%,P<0.05);NEIL2低表达者3年存活率明显高于NEIL2高表达者(97.14%vs. 71.43%,P<0.05)。结论 BIRC5、NEIL2在鼻咽癌患者中高表达,且与患者3年生存率相关,对NPC患者放疗敏感性具有一定预测价值。 展开更多
关键词 鼻咽癌 含重复凋亡结构杆状病毒抑制剂5 内切核酸酶Ⅷ样蛋白2 放疗敏感性
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酿酒酵母W5核酸内切酶基因HO的克隆及生物信息学分析 被引量：2
4
作者 尹紫良 王长丽 葛菁萍 《生物技术通讯》 CAS 2019年第4期473-478,537,共7页
目的:以酿酒酵母W5为出发菌株,对其核酸内切酶基因HO进行克隆及生物信息学分析。方法:首先运用Primer 5.0软件,设计一对扩增HO基因序列的引物,并以酿酒酵母W5全基因组为模板进行PCR扩增,获得酿酒酵母W5核酸内切酶HO基因片段,利用生物信... 目的:以酿酒酵母W5为出发菌株,对其核酸内切酶基因HO进行克隆及生物信息学分析。方法:首先运用Primer 5.0软件,设计一对扩增HO基因序列的引物,并以酿酒酵母W5全基因组为模板进行PCR扩增,获得酿酒酵母W5核酸内切酶HO基因片段,利用生物信息学技术对该序列进行验证及分析。结果:测序显示HO基因长度为1760 bp,无碱基缺失,且该基因序列具有完整的开放读框。该基因编码的HO蛋白包含586个氨基酸残基,强酸性和强碱性氨基酸残基数量有明显差异;HO蛋白等电点为9.56,存在激酶位点,疏水性最大值为1.722,亚细胞定位预测其位于细胞核内,属于碱性胞内蛋白质,并构建了其空间结构模型。结论:对酿酒酵母W5核酸内切酶HO基因序列进行了克隆及生物信息学分析,所得数据可为酿酒酵母遗传背景研究提供一定的理论支持。 展开更多
关键词 酿酒酵母W5 生物信息学分析 核酸内切酶 基因克隆
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