目的:制备山豆根多糖(polysaccharide of Sophorae Tonkinensis Radix et Rhizoma, SRP)并分析其单糖组成,探索SRP的体外抗肿瘤作用。方法:水提醇沉法制备SRP,紫外-可见分光光度法测定SRP中多糖、黄酮、皂苷、酚类和蛋白质含量,高效液...目的:制备山豆根多糖(polysaccharide of Sophorae Tonkinensis Radix et Rhizoma, SRP)并分析其单糖组成,探索SRP的体外抗肿瘤作用。方法:水提醇沉法制备SRP,紫外-可见分光光度法测定SRP中多糖、黄酮、皂苷、酚类和蛋白质含量,高效液相色谱法测定生物碱含量,返滴定法测定有机酸含量。通过高效液相色谱仪,色谱柱采用Waters X Bridge C_(18)柱(250 mm×4.6 mm, 5μm),以乙腈:磷酸盐缓冲液(0.05 mol·L^(-1),pH=6.8)=18∶82为流动相,等梯度洗脱,流速为0.8 mL·min^(-1),柱温为30℃,检测波长为245 nm,建立SRP的单糖组成分析方法,测定SRP中各单糖含量并计算摩尔比。采用MTT法检测SRP抑制肿瘤细胞增殖的活性。结果:水提醇沉法制得SRP,棕黄色粉末,得率为3.95%,其中不含生物碱成分,多糖、黄酮、皂苷、有机酸和酚类含量分别为66.08%,7.17%,3.45%,2.54%和4.33%,蛋白质含量可忽略不计。SRP由甘露糖、鼠李糖、葡糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖组成,各单糖的摩尔比为1.25∶0.31∶0.28∶0.50∶40.47∶1.00∶10.46,SRP的质量分数为64.97%。SRP对Hepa1-6,HepG2,HT29和4T1细胞均具有显著的增殖抑制作用且呈浓度依赖性,IC_(50)值分别为770,1 910,1 870和1 880μg·mL^(-1)。结论:本研究制备的SRP中多糖含量大于60%,已知成分含量大于80%,其中不含生物碱。1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(1-phenyl-3-methyl-5-pyrazolo, PMP)柱前衍生化-HPLC法精密度、重复性和准确性良好,可用于分析SRP的单糖组成。SRP是一类以葡萄糖和阿拉伯糖为主要成分的杂多糖。SRP具有明显的细胞毒作用,提示SRP可通过抑制肿瘤细胞增殖发挥抗肿瘤作用。本研究为推进SRP成分的基础研究和促进SRP的抗肿瘤作用研究提供了参考。展开更多
