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刺梨果实半乳糖内酯脱氢酶基因cDNA片段的克隆及在不同器官的表达 被引量:13
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作者 安华明 陈力耕 樊卫国 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期571-575,共5页
根据 GenBank 中登录的拟南芥、花椰菜、甘薯和草莓等植物的半乳糖内酯脱氢酶基因(GalLDH)保守序列设计引物,采用 RT-PCR 法,从刺梨果实中扩增出该基因的 cDNA 片段 855 bp 并测序。序列分析表明,刺梨 GalLDH与草莓 GalLDH 的相似性达 9... 根据 GenBank 中登录的拟南芥、花椰菜、甘薯和草莓等植物的半乳糖内酯脱氢酶基因(GalLDH)保守序列设计引物,采用 RT-PCR 法,从刺梨果实中扩增出该基因的 cDNA 片段 855 bp 并测序。序列分析表明,刺梨 GalLDH与草莓 GalLDH 的相似性达 92%,与其它植物同源基因的相似性也在 80%左右;该片段编码 285 个氨基酸,推导的氨基酸序列与其它植物同源基因的相似性高达 75%~87%。Northern 杂交分析表明,该基因在刺梨不同器官中的表达差异明显:在果实内有很高的表达水平,叶内较弱,而在茎和根内只能检测到微弱的信号。这种差异与不同器官中维生素 C 的积累量高度一致。 展开更多
关键词 梨果实 刺梨 器官 草莓 脱氢酶 内酯 酶基因 半乳糖 LDH CDNA片段
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cDNA Fragment Cloning of L-Galactono-1,4-Lactone Dehydrogenase andIt's Expression in Different Organs of R. roxburghii Tratt 被引量:3
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作者 ANHua-ming CHENLi-geng FANWei-guo 《Agricultural Sciences in China》 CAS CSCD 2004年第11期807-811,共5页
A 855 bp cDNA encoding L-galactono-1,4-lactone dehydrogenase (GalLDH) fragment was cloned from fruit of R. roxburghii Tratt by the method of RT-PCR, on the basis of the homologous genes of Arabidopsis thaliana, caul... A 855 bp cDNA encoding L-galactono-1,4-lactone dehydrogenase (GalLDH) fragment was cloned from fruit of R. roxburghii Tratt by the method of RT-PCR, on the basis of the homologous genes of Arabidopsis thaliana, cauliflower, sweet potato, strawberry, etc. in GenBank. Sequence analysis showed 79-92% identity in nucleotide sequence and 75-87% identity in amino acid sequence to that of strawberry and Arabidopsis thaliana, etc. Northern blot showed that the expression of GalLDH was significantly different in different organs. The transcription level of GalLDH in fruit was significantly higher than that in leaf, stem and root respectively. Furthermore, this expression mode was highly correlated with AsA levels. 展开更多
关键词 R. roxburghii Tratt L-galactono-1 4-lactone dehydrogenase (galldh) Ascorbic acid (AsA) Gene expression
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沙棘维生素C积累与相关酶活性关系研究 被引量:3
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作者 耿贵工 《湖北农业科学》 2016年第1期120-123,共4页
探讨沙棘(Hippophae rhamnoides Linn.)不同器官中抗坏血酸(As A)积累与相关代谢酶活性的关系。结果表明,As A在沙棘幼叶和果实中含量较高,在茎和花中含量较低。沙棘幼叶和果实中As A含量主要受L-半乳糖-1,4-内酯脱氢酶(Gal LDH)和脱氢... 探讨沙棘(Hippophae rhamnoides Linn.)不同器官中抗坏血酸(As A)积累与相关代谢酶活性的关系。结果表明,As A在沙棘幼叶和果实中含量较高,在茎和花中含量较低。沙棘幼叶和果实中As A含量主要受L-半乳糖-1,4-内酯脱氢酶(Gal LDH)和脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)活性调节,抗坏血酸氧化酶(AAO)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)对As A的积累也有调节作用。 展开更多
关键词 沙棘(Hippophae rhamnoides Linn.) 抗坏血酸(AsA) L-半乳糖-1 4-内酯脱氢酶(galldh) 抗坏血酸氧化酶(AAO) 抗坏血酸过氧化物酶(APX) 单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR) 脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)
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黄瓜L-半乳糖-1,4-内酯脱氢酶cDNA全长的克隆和遗传转化 被引量:3
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作者 苑志明 劳杉杉 +1 位作者 秦智伟 周秀艳 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期100-103,共4页
以黄瓜D08108果实为材料,根据GenBank中登录的甜瓜L-半乳糖-1,4-内酯脱氢酶(GalLDH)的序列设计引物,采用RT-PCR方法扩增出黄瓜GalLDH的cDNA全长,GenBank登录号为HQ446099。黄瓜GalLDH的cDNA序列全长1 880 bp,包含一个长为1 773 bp的完... 以黄瓜D08108果实为材料,根据GenBank中登录的甜瓜L-半乳糖-1,4-内酯脱氢酶(GalLDH)的序列设计引物,采用RT-PCR方法扩增出黄瓜GalLDH的cDNA全长,GenBank登录号为HQ446099。黄瓜GalLDH的cDNA序列全长1 880 bp,包含一个长为1 773 bp的完整开放阅读框,编码590个氨基酸。其核苷酸序列与已知其他植物核苷酸序列间的同源性达70%以上。共检测得到5棵转基因植株。 展开更多
关键词 黄瓜 L-半乳糖-1 4-内酯脱氢酶 抗坏血酸 克隆
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软枣猕猴桃L-半乳糖内酯脱氢酶基因的克隆及原核表达分析 被引量:2
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作者 张庆田 范书田 +1 位作者 艾军 秦红艳 《山东农业科学》 2019年第11期1-7,共7页
为更好了解L-半乳糖内酯脱氢酶及编码基因在软枣猕猴桃中的生理功能及作用,以‘魁绿’软枣猕猴桃果实cDNA为模板,用RT-PCR及RACE技术,获得L-半乳糖酸-1,4-内酯脱氢酶基因AaGalLDH(GenBank:KP145007.1)。序列分析表明该基因全长为2394 bp... 为更好了解L-半乳糖内酯脱氢酶及编码基因在软枣猕猴桃中的生理功能及作用,以‘魁绿’软枣猕猴桃果实cDNA为模板,用RT-PCR及RACE技术,获得L-半乳糖酸-1,4-内酯脱氢酶基因AaGalLDH(GenBank:KP145007.1)。序列分析表明该基因全长为2394 bp,开放阅读框为1833 bp,编码610个氨基酸,与其它植物GalLDH氨基酸序列具有78%~95%的同源性。编码的蛋白序列具有GalLDH蛋白家族典型的保守结构域。进一步将该基因连接到原核表达载体并转化大肠杆菌进行诱导表达,经Western Blotting验证,目的基因在pET-28a表达系统中有表达,但基本为不溶性表达。这为进一步研究该酶蛋白的体外表达和功能以及选育高品质软枣猕猴桃品种奠定了基础。 展开更多
关键词 软枣猕猴桃 L-半乳糖内酯脱氢酶(galldh) 维生素C 克隆 基因表达
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刺梨半乳糖内酯脱氢酶的序列特征和部分反应特性 被引量:2
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作者 安华明 黄伟 +2 位作者 樊卫国 刘庆林 陈力耕 《西南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期97-101,共5页
分析和研究了从刺梨中克隆的维生素C合成关键酶半乳糖内酯脱氢酶的氨基酸序列特征及其基本生化反应特性.结果表明,该基因含有一段线粒体靶信号肽序列、2个跨膜区、一个典型的FAD结合域以及1个天冬酰胺糖基化位点、8个蛋白激酶C磷酸化位... 分析和研究了从刺梨中克隆的维生素C合成关键酶半乳糖内酯脱氢酶的氨基酸序列特征及其基本生化反应特性.结果表明,该基因含有一段线粒体靶信号肽序列、2个跨膜区、一个典型的FAD结合域以及1个天冬酰胺糖基化位点、8个蛋白激酶C磷酸化位点、11个酪蛋白激酶2磷酸化位点、2个酪氨酸激酶磷酸化位点和4个N端十四(烷)酰化位点等潜在功能性或翻译后修饰位点.丫啶黄素显著抑制GalLDH活性,二价金属盐CuSO4和ZnSO4有部分抑制作用,而石蒜碱几乎没有作用. 展开更多
关键词 刺梨 半乳糖内酯脱氢酶 维生素C 序列特征 生化特性
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