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富集低丰度蛋白的人类精子全蛋白二维电泳整合图的建立 被引量：5
1
作者 孙波澜 范立青 +2 位作者 李凌伟 朱文兵 卢光琇 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2006年第4期295-299,共5页
目的:运用二维电泳(2-DE)技术分离人类正常精子低丰度蛋白并建立全精子蛋白的2-DE整合图。方法:30例精子标本混匀后一次性进行蛋白提取,分别使用0.8、0.6、0.5、0.3 mg的蛋白上样量进行2-DE。运用MALD I-TOF法对确定2个恒定蛋白点的等位... 目的:运用二维电泳(2-DE)技术分离人类正常精子低丰度蛋白并建立全精子蛋白的2-DE整合图。方法:30例精子标本混匀后一次性进行蛋白提取,分别使用0.8、0.6、0.5、0.3 mg的蛋白上样量进行2-DE。运用MALD I-TOF法对确定2个恒定蛋白点的等位点(PI)和相对分子质量(Mr)作为图像的内参照点,对不同上样量的2-DE图进行比较分析,最后合成1张富集低丰度蛋白的整合图。结果:在0.5 mg图中分离出(1 080±23)个蛋白点,并合成具889个匹配点的整合图A。在上样量为0.8、0.6及0.3 mg的2-DE图中,分别新检测到381、50、32个在0.5 mg图中未检测到的蛋白点。最后合成具1 352个蛋白点的整合图B。结论:通过改变上样量的方法促进低丰度蛋白分离并合成具1 352个蛋白点富集低丰度蛋白的2-DE整合图。 展开更多
关键词 全精子蛋白 上样量 低丰度蛋白 二维电泳 整合图
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平肝潜阳药物对高血压病肝阳上亢证患者淋巴细胞蛋白质表达的影响 被引量：3
2
作者 钟广伟 李炜 +5 位作者 罗艳红 陈国林 易振佳 陈泽奇 张臣 彭川曼 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1005-1011,共7页
目的:观察平肝潜阳药物对高血压病肝阳上亢证患者的临床疗效和血淋巴细胞蛋白质表达的影响,为识别鉴定平肝潜阳药物治疗高血压病肝阳上亢证相关蛋白质奠定基础。方法:26例高血压病肝阳上亢证患者采用平肝潜阳药物中药复方治疗。2个疗程... 目的:观察平肝潜阳药物对高血压病肝阳上亢证患者的临床疗效和血淋巴细胞蛋白质表达的影响,为识别鉴定平肝潜阳药物治疗高血压病肝阳上亢证相关蛋白质奠定基础。方法:26例高血压病肝阳上亢证患者采用平肝潜阳药物中药复方治疗。2个疗程结束后观察患者治疗前后的中医症状记分、血压,利用固相pH梯度双向凝胶电泳分离正常人及高血压病肝阳上亢证患者治疗前后淋巴细胞总蛋白质,用ImageMaster 2DE软件分析双向电泳图谱,以识别差异表达的蛋白质。结果:平肝潜阳药物中药复方治疗总有效率为88.5%;改善高血压病肝阳上亢证患者症状,如头痛、眩晕、口干和烦躁易怒等;平肝潜阳药物中药复方有降低血压的作用,治疗前后比较差异有统计学意义(P<0.05)。正常人、高血压病肝阳上亢证患者治疗前、治疗后3种淋巴细胞凝胶蛋白质点数依次为527±41,559±62和543±59。高血压病肝阳上亢证患者与正常人比较,有15个蛋白质表达下调,10个蛋白质表达上调;高血压病肝阳上亢证治疗前后比较,表达下调15个蛋白质中有12个表达增强,而表达上调10个蛋白质中有6个表达降低。结论:平肝潜阳药物中药复方有缓和的降压作用,有较好的改善中医症状的作用;平肝潜阳药物治疗高血压病肝阳上亢证可能是通过调节血淋巴细胞蛋白质的表达而实现的。 展开更多
关键词 平肝潜阳药物 肝阳上亢证 2-de图谱 高血压病 淋巴细胞
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适用于小麦叶片总蛋白分析的双向电泳技术 被引量：2
3
作者 齐婷婷 段江燕 《山西师范大学学报（自然科学版）》 2012年第4期50-55,共6页
双向电泳技术越来越成为植物蛋白质组研究中的关键技术,样品制备、固相预制胶条水化、等电聚焦及SDS-PAGE都是影响双向电泳结果的重要步骤,本研究以晋麦47号小麦叶片为研究材料,在样品除盐、预制胶条水化方式、第二向SDS-PAGE电压选择... 双向电泳技术越来越成为植物蛋白质组研究中的关键技术,样品制备、固相预制胶条水化、等电聚焦及SDS-PAGE都是影响双向电泳结果的重要步骤,本研究以晋麦47号小麦叶片为研究材料,在样品除盐、预制胶条水化方式、第二向SDS-PAGE电压选择方面进行了探索与优化,通过比较双向电泳图谱,建立适用于小麦叶片总蛋白质分析的双向电泳技术体系.结果表明:样品经多步除盐并加长除盐时间后进行双向电泳,蛋白能较好地被分离,2-DE图谱蛋白点较多,分辨率较高;IPG胶条先后经被动水化与主动水化比仅主动水化的2-DE图谱蛋白点损失少;第二向SDS-PAGE中电压选择120 V较200 V的2-DE图谱蛋白点拖尾少,纹理现象少. 展开更多
关键词 双向电泳 小麦叶片 2-de图谱
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营养缺乏胁迫下水稻籽粒蛋白质组图谱分析 被引量：2
4
作者 唐秀英 邵彩虹 谢金水 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期217-221,共5页
从蛋白质组学角度对营养缺乏胁迫下水稻籽粒蛋白质组变化进行研究,以揭示营养缺乏胁迫下水稻籽粒蛋白质组的表达差异。水稻生育后期设清水及常规营养液培养2种处理,待水稻成熟时提取籽粒蛋白质,经双向电泳分离得到电泳图谱2张,应用Image... 从蛋白质组学角度对营养缺乏胁迫下水稻籽粒蛋白质组变化进行研究,以揭示营养缺乏胁迫下水稻籽粒蛋白质组的表达差异。水稻生育后期设清水及常规营养液培养2种处理,待水稻成熟时提取籽粒蛋白质,经双向电泳分离得到电泳图谱2张,应用Imagemaster 2D Elite5.0软件对其进行蛋白质差异表达分析,共得到10个发生差异表达蛋白质点。蛋白质是细胞功能的执行者,受细胞功能或细胞环境变化的影响。因此,上述蛋白质发生变化的原因应与水稻在营养缺乏胁迫下籽粒生长发育特性有关。 展开更多
关键词 水稻籽粒 蛋白质组学 2D图谱
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小麦穗突变体Sda1与其野生型叶片总蛋白双向电泳体系的建立 被引量：1
5
作者 周丽敏 马文洁 +3 位作者 武炳瑾 张德强 杨智全 孙道杰 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1623-1628,共6页
为探索适合小麦穗突变体Sda1叶片蛋白的双向电泳体系,寻找Sda1与其野生型叶片的差异蛋白,以Sda1与其野生型的抽穗期叶片为材料,从蛋白质提取、双向电泳条件等方面对适合Sda1及其野生型叶片蛋白的双向电泳体系进行探索。分析试验得到的... 为探索适合小麦穗突变体Sda1叶片蛋白的双向电泳体系,寻找Sda1与其野生型叶片的差异蛋白,以Sda1与其野生型的抽穗期叶片为材料,从蛋白质提取、双向电泳条件等方面对适合Sda1及其野生型叶片蛋白的双向电泳体系进行探索。分析试验得到的双向电泳图谱,发现利用TCA/丙酮提取叶片总蛋白,用pH 4~7的17cm线性胶条,采用13%浓度的分离胶,上样量为900μg,利用改良的等电聚焦程序,能够得到背景清晰、分辨率高的电泳图谱;电泳图谱在低分子区蛋白点分布均匀,并且重复性好。利用PDQuest 8.0.1软件分析图谱,得到27个差异点蛋白,相比于野生型植株,Sda1突变体表现为蛋白表达量下调与缺失,发现6个缺失蛋白,21个表达下调蛋白。 展开更多
关键词 小麦 穗突变体 叶片 双向电泳 2-de图谱
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猪附红细胞体吉林感染株二维电泳图谱分析 被引量：1
6
作者 丛艳昭 倪婷婷 +2 位作者 伍生军 齐楷 薛书江 《延边大学农学学报》 2017年第1期61-65,共5页
为获得猪附红细胞体吉林感染株2-DE图谱,并筛选猪附红细胞体吉林感染株免疫原性蛋白,本试验采用2-D电泳分析猪附红细胞体蛋白表达谱,利用感染血清与二维电泳凝胶进行免疫印迹。结果表明:二维电泳共检测到(60±5)个蛋白质点,蛋白主... 为获得猪附红细胞体吉林感染株2-DE图谱,并筛选猪附红细胞体吉林感染株免疫原性蛋白,本试验采用2-D电泳分析猪附红细胞体蛋白表达谱,利用感染血清与二维电泳凝胶进行免疫印迹。结果表明:二维电泳共检测到(60±5)个蛋白质点,蛋白主要集中在pH值6~9和分子量45~25ku。二维电泳中的9个蛋白点被猪附红细胞体感染血清所识别。本研究将为进一步开展猪附红细胞体病的疫苗和诊断候选分子研究奠定基础。 展开更多
关键词 猪附红细胞体 吉林感染株 蛋白组学 2-de图谱
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弱精不育患者与正常生育能力者精浆蛋白质的双向电泳图谱分析 被引量：3
7
作者 彭咏波 马永平 +2 位作者 唐伟 夏永鹏 邱宗荫 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期764-767,771,共5页
目的:探讨2-DE技术在人类正常与弱精不育者精浆全蛋白中筛选差异蛋白的应用。方法:先用IPG-DALT技术对12例弱精不育与5例正常精浆蛋白进行分离,银染后,经PDQUest2D比较二者间差异蛋白点。结果:在不育精浆中高丰度存在而正常精浆中低表... 目的:探讨2-DE技术在人类正常与弱精不育者精浆全蛋白中筛选差异蛋白的应用。方法:先用IPG-DALT技术对12例弱精不育与5例正常精浆蛋白进行分离,银染后,经PDQUest2D比较二者间差异蛋白点。结果:在不育精浆中高丰度存在而正常精浆中低表达的有55个蛋白斑点(3个在正常缺失),在正常精浆中存在而在不育精浆中低表达的有43个(3个在不育缺失)。结论:成功建立了正常与弱精不育精浆蛋白的2-DE图谱并分析表达差异蛋白,为弱精症精浆差异表达蛋白的质谱鉴定奠定了基础。 展开更多
关键词 精浆蛋白质 双向电泳 图谱分析
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几种不同提取方法对小麦叶片总蛋白双向电泳的影响 被引量：10
8
作者 金艳 许海霞 +2 位作者 徐圆圆 尚晓丽 崔党群 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期1083-1087,共5页
为探索小麦叶片蛋白质提取的最优方法,以普通小麦品种石4185的叶片为材料,研究了三氯乙酸/丙酮法、裂解液法、尿素/硫脲法、KCl-醋酸铵甲醇法等四种不同蛋白质提取方法对小麦叶片蛋白双向电泳图谱的影响。结果表明,三氯乙酸/丙酮法获得... 为探索小麦叶片蛋白质提取的最优方法,以普通小麦品种石4185的叶片为材料,研究了三氯乙酸/丙酮法、裂解液法、尿素/硫脲法、KCl-醋酸铵甲醇法等四种不同蛋白质提取方法对小麦叶片蛋白双向电泳图谱的影响。结果表明,三氯乙酸/丙酮法获得的蛋白点形状规则、清晰,且重复性好;裂解液法拖尾现象较轻,但蛋白点数少且欠清晰,重复性也不如前者;尿素/硫脲法的蛋白点数很少,也较为弥散,且有明显的拖尾现象;KCl-醋酸铵甲醇法使大量蛋白丢失,蛋白点数非常少,且上部竖纹干扰较重。因此,三氯乙酸/丙酮法是提取小麦叶片蛋白的较优方法。 展开更多
关键词 小麦 叶片蛋白质 提取方法 双向电泳图谱
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