微生物酶法生产果糖低聚糖

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作者 唐军 储炬 李友荣 《华东理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 1999年第4期371-373,381,共4页

介绍了一种简便易行的制备蔗果三糖标准品的方法。研究得出曲霉６．２２２胞内、胞外酶均具有活性，最佳酶反应条件为：ｐＨ６．０，温度５０℃，时间６０ｍｉｎ。最佳初始蔗糖浓度为２５０ｇ／Ｌ。由曲霉６．２２２发酵制备的酶溶液稳... 介绍了一种简便易行的制备蔗果三糖标准品的方法。研究得出曲霉６．２２２胞内、胞外酶均具有活性，最佳酶反应条件为：ｐＨ６．０，温度５０℃，时间６０ｍｉｎ。最佳初始蔗糖浓度为２５０ｇ／Ｌ。由曲霉６．２２２发酵制备的酶溶液稳定性良好。 展开更多

关键词 蔗果三糖 果糖低聚糖 微生物酶法 制备

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在反应系统中影响蔗果三糖形成的因素 被引量：1

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作者 储炬 唐岚 郭远凯 《化学反应工程与工艺》 EI CAS CSCD 北大核心 2000年第1期72-76,81,共6页

研究结果表明 ,酶反应的最适条件为 :初始 p H 6 .0 ;反应温度 50℃、时间 1h;初始蔗糖浓度2 5%。在酶反应过程中添加果糖会促进蔗果三糖的生成 ,其最佳添加时间为反应进行了 30分钟 ,最佳添加浓度为 15% ,可使蔗果三糖的产量提高 50 %... 研究结果表明 ,酶反应的最适条件为 :初始 p H 6 .0 ;反应温度 50℃、时间 1h;初始蔗糖浓度2 5%。在酶反应过程中添加果糖会促进蔗果三糖的生成 ,其最佳添加时间为反应进行了 30分钟 ,最佳添加浓度为 15% ,可使蔗果三糖的产量提高 50 %。酶的热稳定性随处理温度的提高下降。 展开更多

关键词 蔗果三糖 甜味剂 果糖 低聚糖 发酵 酶反应

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巴戟天炮制前后寡糖类成分HPLC-CAD指纹图谱研究 被引量：26

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作者 景海漪 史辑 +1 位作者 崔妮 贾天柱 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1412-1417,共6页

目的采用HPLC-CAD法研究巴戟天Morindae Officinalis Radix炮制前后寡糖类成分的HPLC-CAD指纹图谱变化,为科学评价和控制其质量提供可靠依据。方法采用Shodex Asahipak NH2(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,乙腈和水为流动相,梯度洗脱,... 目的采用HPLC-CAD法研究巴戟天Morindae Officinalis Radix炮制前后寡糖类成分的HPLC-CAD指纹图谱变化,为科学评价和控制其质量提供可靠依据。方法采用Shodex Asahipak NH2(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,乙腈和水为流动相,梯度洗脱,柱温为25℃,进样量为10μL。CAD参数:气压241.36 kPa,量程100 pA。结果巴戟天不同炮制品的HPLC指纹图谱共有峰特征明显,不同炮制品指纹图谱有差异。炮制后峰面积显著升高,表明巴戟天经炮制后,寡糖的量明显增加,炮制品共确定了10个共有峰。结论建立了巴戟天寡糖类成分的HPLC特征图谱检测方法,可用于巴戟天及其炮制品的质量控制。 展开更多

关键词 炮制 巴戟天 寡糖 指纹图谱 HPLC—CAD 果糖 葡萄糖 蔗糖 蔗果三糖 耐斯糖 蔗果五糖

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亲水作用色谱-蒸发光散射检测器联用法同时测定巴戟天中5种低聚糖的含量 被引量：16

4

作者 邓少东 肖凤霞 +3 位作者 林励 张鹏 林靖然 张盛滨 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第22期3446-3450,共5页

目的:采用亲水作用色谱-蒸发光散射检测器联用法同时测定巴戟天中蔗糖、蔗果三糖、耐斯糖、1F-果呋喃糖基耐斯糖、巴戟甲素5种低聚糖的含量。方法:采用Waters XBridgeTMAmide(4.6 mm×150 mm,3.5μm)亲水性作用色谱柱;以乙腈(A)-0.2... 目的:采用亲水作用色谱-蒸发光散射检测器联用法同时测定巴戟天中蔗糖、蔗果三糖、耐斯糖、1F-果呋喃糖基耐斯糖、巴戟甲素5种低聚糖的含量。方法:采用Waters XBridgeTMAmide(4.6 mm×150 mm,3.5μm)亲水性作用色谱柱;以乙腈(A)-0.2%三乙胺溶液(B)为流动相,梯度洗脱;流速0.8 mL·min-1;柱温40℃;以Waters 2424 ELSD检测,漂移管温度90℃,气压275.79 kPa。结果:5种低聚糖分别在2.128～21.28μg(r=0.999 3),1.864～18.64μg(r=0.999 6),1.92～19.2μg(r=0.999 8),1.912～19.12μg(r=0.999 5),2.368～23.68μg(r=0.999 4)线性关系良好,其回收率在92.81%～102.8%(n=6)。结论:该方法简单、准确,具有良好的重复性,为有效评价巴戟天药材的质量提供了分析方法。 展开更多

关键词 巴戟天 亲水作用色谱 蒸发光散射检测器 蔗糖 蔗果三糖 耐斯糖 1F-果呋喃糖基耐斯糖 巴戟甲素

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大蒜蔗糖:蔗糖1-果糖基转移酶(1-SST)的酶学特征 被引量：8

5

作者 文明 卜利伟 +3 位作者 罗紫韵 王佳伟 董芬 黄雪松 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期334-342,共9页

【目的】研究大蒜(Allium sativum L.)中蔗糖﹕蔗糖1-果糖基转移酶(1-SST)的酶学特征,为大蒜保鲜、加工和品质改良提供依据。【方法】采用饱和度10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%和100%的硫酸铵分级沉淀1-SST,以确定其所在... 【目的】研究大蒜(Allium sativum L.)中蔗糖﹕蔗糖1-果糖基转移酶(1-SST)的酶学特征,为大蒜保鲜、加工和品质改良提供依据。【方法】采用饱和度10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%和100%的硫酸铵分级沉淀1-SST,以确定其所在的硫酸铵部位。分别取1-SST活力最高的硫酸铵部分与底物蔗糖反应,研究其在不同的温度、p H、离子强度、底物质量浓度等条件下合成高果聚糖的能力,即采用高效液相色谱-蒸发光散射(HPLC-ELSD),测定1-SST反应前后的1-蔗果三糖的含量,进而计算出1-SST活力大小并总结出其在不同的温度、p H、离子强度、底物质量浓度等条件下合成高果聚糖反应的规律;采用的色谱柱为Prevail Carbohydrate ES柱(250 mm×4.6 mm,5μm),色谱柱柱温箱温度为40℃,流动相最大限压20 MP,流动相为乙腈和水,其流速为1.0 m L·min-1,ELSD撞击器关闭状态,漂移管温度90℃,载气流量2.5 L·min-1(空气)。其梯度洗脱方式为:0 min,75%乙腈﹕25%水;15 min,65%乙腈﹕35%水;30 min,50%乙腈﹕50%水;35 min,75%乙腈﹕25%水;40 min,75%乙腈﹕25%水。【结果】在上述测定条件下,果糖、葡萄糖、蔗糖、1-蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖6种糖完全分离,出峰时间仅为20 min,测定方法可靠、灵敏度高,满足了测定1-SST活性的要求。以50%(w/w)蔗糖为底物时,仅产生1-蔗果三糖,无其它高果聚糖的产生,证实了在所试条件下,大蒜中1-SST反应具有专一性。大蒜1-SST主要存在于30%—40%硫酸铵饱和度部分,其中0—30%,40%—70%有轻微活力,未发现70%—100%硫酸铵组分有1-SST的活力。取30%—40%的硫酸铵饱和度部分作为样品研究1-SST酶学特征发现其最适反应温度为35℃,当温度到达40℃以上时,酶的活力下降的很快,说明1-SST具有热不稳定性,因此在研究大蒜1-SST时,要尽量避免高温,以免影响后续研究;其最适反应p H为5.0,与大麦(Hordeum vulgare)、菊苣(Cichorium int 展开更多

关键词 果聚糖 蔗糖﹕蔗糖果糖基转移酶 酶学特征 大蒜 1-蔗果三糖

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聚丙烯酰胺凝胶柱分离制备低聚果糖单组分 被引量：6

6

作者 王涛 黄广君 +1 位作者 魏远安 姚评佳 《广西大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期502-507,共6页

利用聚丙烯酰胺凝胶(Bio-Gel P-2)柱分离高纯度低聚果糖制备单一组分,结果表明,在1.6 cm×100 cm的玻璃柱上最佳的层析条件是洗脱速度0.2 mL/min、上样量0.5 mL(样液质量浓度0.4 g/mL)、柱温40℃。以Megazlaae公司的标准品为对照,经... 利用聚丙烯酰胺凝胶(Bio-Gel P-2)柱分离高纯度低聚果糖制备单一组分,结果表明,在1.6 cm×100 cm的玻璃柱上最佳的层析条件是洗脱速度0.2 mL/min、上样量0.5 mL(样液质量浓度0.4 g/mL)、柱温40℃。以Megazlaae公司的标准品为对照,经HPLC和MS分析,证明层析分离所得组分峰4、峰3和峰2分别是蔗果三糖、蔗果四糖和蔗果五糖。而且经HPLC面积归一化法定量分析,证明分离产品蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖蔗和果六糖的含量分别为99.91%、99.94%、99.33%和97.89%,表明其纯度很高,可以作为低聚果糖定量分析的标准品使用。 展开更多

关键词 聚丙烯酰胺凝胶 分离 低聚果糖 蔗果三糖 蔗果四糖 蔗果五糖

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黄精炮制品多糖多元指纹图谱的建立及化学模式识别

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作者 刁卓 胡冲 +1 位作者 杨青山 张亚中 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期1124-1132,共9页

目的构建黄精炮制品多糖的酶水解产物指纹图谱,结合化学计量学方法评价不同蒸晒次数黄精炮制品多糖的差异。方法采用糖苷酶水解,结合高效薄层色谱(high thin-layer chromatography,HPTLC)、亲水作用色谱-高效液相色谱-蒸发光检测器(hydr... 目的构建黄精炮制品多糖的酶水解产物指纹图谱,结合化学计量学方法评价不同蒸晒次数黄精炮制品多糖的差异。方法采用糖苷酶水解,结合高效薄层色谱(high thin-layer chromatography,HPTLC)、亲水作用色谱-高效液相色谱-蒸发光检测器(hydrophilic interaction liquid chromatography-high performance liquid chromatography-evaporative light scattering detector,HILIC-HPLC-ELSD)和超高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱(ultra high pressure liquid chromatographyquadrupole time of flight tandem mass spectrometry,UHPLC-QTOF/MS)对相应的酶解产物进行高效分离和检测。由此产生的自下而上的指纹图谱反映了黄精炮制品多糖的变化,通过相似度和偏最小二乘-判别分析(partial least squares-discriminant analysis,PLS-DA)对指纹图谱进行综合评价。结果HPTLC分析发现,果糖随着蒸晒次数的增加逐渐降低,结合色谱分析发现,六蒸六晒和十二蒸十二晒为黄精炮制过程中的转折点。同时根据酶水解中寡糖的变化,利用相似度和PLS-DA对不同蒸晒次数的黄精炮制品进行了清晰的聚类。结合UHPLC-QTOF/MS分析表明,不同蒸晒次数黄精炮制品中含有蔗糖、蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖、蔗果六糖、蔗果七糖及蔗果八糖。结论基于酶解法分析不同蒸晒次数样品的质量动态变化,结合所建立的多元指纹图谱,进一步阐释了不同蒸晒次数黄精炮制品的科学内涵。 展开更多

关键词 黄精 炮制品 多糖 酶解法 指纹图谱 质量控制 化学模式识别 HPTLC HILIC-HPLC-ELSD UHPLC-QTOF/MS 偏最小二乘-判别分析 寡糖 蔗糖 蔗果三糖 蔗果四糖 蔗果五糖 蔗果六糖 蔗果七糖 蔗果八糖

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高效阴离子交换色谱-脉冲安培法测定蔬菜及食品中的1-蔗果三糖和蔗果四糖 被引量：5

8

作者 李建文 王竹 杨月欣 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期359-361,371,共4页

目的应用高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测器联用（HPAEC-PAD）技术，建立蔬菜、食品中低聚果糖（蔗果三糖和蔗果四糖）检测方法。方法以NaOH和乙酸钠为淋洗液梯度淋洗，在CarboPac PAl色谱柱上阴离子交换分离了蔗果三糖和蔗果四糖，用... 目的应用高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测器联用（HPAEC-PAD）技术，建立蔬菜、食品中低聚果糖（蔗果三糖和蔗果四糖）检测方法。方法以NaOH和乙酸钠为淋洗液梯度淋洗，在CarboPac PAl色谱柱上阴离子交换分离了蔗果三糖和蔗果四糖，用脉冲安培检测器（金电极）进行了检测。结果二者的线性范围分别为1．22～15．20μg／g和1．64～18．30μg／g，检出限分别为0．085μg／g和0．089μg／g。对浓度为6．08和7．32μg／g的蔗果三糖和蔗果四糖混合标准连续进样，其相对标准偏差（RSD）分别为2.80％和1．28％（n=6）。应用本方法分析了菊苣、朝鲜蓟和通力爽口服液等蔬菜和食品中蔗果三糖和蔗果四糖的含量。蔗果三糖和蔗果四糖含量最高的蔬菜组织为菊苣根，分别为6．61g／100g干重和6．51g／100g干重。低聚果糖粉中蔗果三糖和蔗果四糖含量最高，分别为34．13g／100g和32．12g／100g。样品加标回收率蔗果三糖和蔗果四糖分别为93．97％和97．14％。结论该方法简单、方便、灵敏度高，适于蔬菜及食品中蔗果三糖和蔗果四糖的测定。 展开更多

关键词 低聚果糖 1-蔗果三糖蔗果四糖 高效阴离子交换色谱 脉冲安培检测 食品检测

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大蒜果聚糖∶果聚糖1-果糖基转移酶的酶学特性 被引量：3

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作者 喻嘉鑫 段翰英 +1 位作者 文明 黄雪松 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期158-162,共5页

大蒜中主要干物质为多糖,其中主要糖类为果聚糖,具有多种保健作用。本文研究了大蒜中果聚糖∶果聚糖1-果糖基转移酶(Fructan∶fructan 1-fructosyltransferase,1-FFT)的酶学特性,为阐明大蒜在采后贮藏、保鲜及深加工过程中果聚糖含量的... 大蒜中主要干物质为多糖,其中主要糖类为果聚糖,具有多种保健作用。本文研究了大蒜中果聚糖∶果聚糖1-果糖基转移酶(Fructan∶fructan 1-fructosyltransferase,1-FFT)的酶学特性,为阐明大蒜在采后贮藏、保鲜及深加工过程中果聚糖含量的变化提供依据。结果表明:当以1-蔗果三糖为底物时,1-FFT仅催化生成蔗果四糖,且无其它结构的四糖生成;大蒜1-FFT主要存在于40%~50%硫酸铵部分;其最适p H为6.0,在p H 5.5~6.5条件下1 h内保持稳定;最适温度为25℃,在15~25℃条件下1 h内可保持稳定;低浓度Mn^(2+)、Mg^(2+)、Fe^(3+)促进1-FFT活力,Cu^(2+)、Zn^(2+)、Ag^+抑制1-FFT活力;1-FFT活力随底物浓度升高而增大,其米氏常数Km=0.6977 mol/L,最大反应速率Vmax=116.23μg/h。大蒜1-FFT活力受p H、温度、不同金属离子及底物浓度影响,调节以上因素有助于调控大蒜果聚糖代谢、保持大蒜品质及延长大蒜贮藏期。 展开更多

关键词 大蒜 果聚糖 1-蔗果三糖 果聚糖:果聚糖1-果糖基转移酶 酶学特性

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HPLC法测定奶粉中蔗果三糖、蔗果四糖和蔗果五糖的含量 被引量：3

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作者 陈小英 庄波阳 《海峡药学》 2013年第12期90-92,共3页

目的 采用HPLC法建立同时测定奶粉中蔗果三糖、蔗果四糖和蔗果五糖的方法.方法 色谱柱Aglient NH2柱（250mm×4.6mm,5μm）,流动相为乙腈-水（70：30）,示差折光检测器.结果 蔗果三糖浓度在0.3050～6.100mg·mL-1范围内与峰面... 目的 采用HPLC法建立同时测定奶粉中蔗果三糖、蔗果四糖和蔗果五糖的方法.方法 色谱柱Aglient NH2柱（250mm×4.6mm,5μm）,流动相为乙腈-水（70：30）,示差折光检测器.结果 蔗果三糖浓度在0.3050～6.100mg·mL-1范围内与峰面积呈良好的线性关系,r为0.9999;蔗果四糖浓度在0.4054～8.108mg·mL-1范围内与峰面积呈良好的线性关系,r为0.9999;蔗果五糖浓度在0.2457～4.914mg·mL-1范围内与峰面积呈良好的线性关系,r为0.9996;蔗果三糖加样回收率的平均值为96.1%,RSD=1.5%;蔗果四糖加样回收率的平均值为100.3%,RSD=2.9%;蔗果五糖加样回收率的平均值为100.0%,RSD=3.3%.结论 本方法简便、准确可靠,适用于奶粉中蔗果三糖、蔗果四糖和蔗果五糖三个主要有效成分的测定. 展开更多

关键词 奶粉 高效液相色谱法 蔗果三糖 蔗果四糖 蔗果五糖

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蔗糖:蔗糖-1-果糖基转移酶的表面展示及酶学性质分析(英文) 被引量：2

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作者 李慧娟 邵先祥 +5 位作者 孙云鹏 高军 丁瑞 张碧凝 张治山 池振明 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期2191-2197,共7页

【目的】蔗糖:蔗糖-1-果糖基转移酶催化1分子蔗糖上的果糖基转移到另一个蔗糖分子上,形成1-蔗果三糖和葡萄糖。在低聚果糖中,1-蔗果三糖益生素活性最高。本研究将该酶展示在酵母菌细胞表面上,并用于1-蔗果三糖的制备。【方法】将来自莴... 【目的】蔗糖:蔗糖-1-果糖基转移酶催化1分子蔗糖上的果糖基转移到另一个蔗糖分子上,形成1-蔗果三糖和葡萄糖。在低聚果糖中,1-蔗果三糖益生素活性最高。本研究将该酶展示在酵母菌细胞表面上,并用于1-蔗果三糖的制备。【方法】将来自莴苣的蔗糖:蔗糖-1-果糖基转移酶基因克隆到用于酵母细胞表面展示的表达载体上,并在解脂亚罗酵母菌中进行异源表达,表达的酶展示在该细胞表面上,然后以蔗糖为底物,研究表面展示的蔗糖:蔗糖-1-果糖基转移酶的性质。【结果】免疫荧光实验结果表明蔗糖:蔗糖-1-果糖基转移酶已展示在酵母菌的细胞表面上,高效液相色谱结果表明酵母表面展示的该酶具有转移酶的催化活性。该酶的最适作用温度、最适作用p H分别为45°C和7.5;该酶的催化活性受Zn2+和Cu2+的抑制,受Ca2+激活;该酶重复使用7次后,酶活下降50%。表面展示的蔗糖:蔗糖-1-果糖基转移酶和3%蔗糖混合后在40°C条件下孵育30 min后,所产1-蔗果三糖含量最高为20.8 mmol/L。【结论】蔗糖:蔗糖-1-果糖基转移酶在解脂亚罗酵母菌中得到成功表达,并展示在其细胞表面上,生化研究表明该重组蛋白具有果糖基转移酶活性,且催化蔗果三糖的生成。表面展示的蔗糖:蔗糖-1-果糖基转移酶作为一种全细胞催化剂能够用于1-蔗果三糖的制备。 展开更多

关键词 蔗糖:蔗糖-1-果糖基转移酶 表面展示 解脂亚罗酵母菌 1-蔗果三糖 酶学性质

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益生元对HCT-8细胞炎症和树突状细胞成熟的影响

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作者 颜毛毛 徐笑非 +3 位作者 彭思敏 吴少辉 郝占西 魏远安 《食品科学技术学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第5期43-50,81,共9页

由于对于不同益生元的功效差异所知甚少,不同益生元往往被当作类似物应用于食品添加及临床干预。通过鉴定市场上常见的6种益生元(蔗果三糖、2′-岩藻糖基乳糖、低聚果糖、低聚半乳糖、低聚甘露糖、菊粉)在调节人体炎症免疫功能上的差异... 由于对于不同益生元的功效差异所知甚少,不同益生元往往被当作类似物应用于食品添加及临床干预。通过鉴定市场上常见的6种益生元(蔗果三糖、2′-岩藻糖基乳糖、低聚果糖、低聚半乳糖、低聚甘露糖、菊粉)在调节人体炎症免疫功能上的差异,为益生元的精准化应用提供指导方向和实验依据。用出血性大肠杆菌(enterohemorrhagic Escherichia coli O157:H7,EHEC)刺激人肠上皮细胞系HCT-8细胞构建肠上皮细胞炎症模型,检测6种益生元处理后NF-κB信号通路激活及下游细胞因子TNF-α和IL-6表达情况以确定其对于细胞炎症的影响;从30名志愿者血液中通过密度梯度离心法分离单个核细胞,并于体外诱导产生树突状细胞以构建免疫细胞成熟分化模型,在诱导分化的过程中分别加入6种益生元,通过流式细胞术分析益生元处理后树突状细胞的成熟比例以确定不同益生元对于免疫细胞成熟分化的影响。研究发现:6种益生元只有2′-岩藻糖基乳糖、低聚半乳糖及蔗果三糖抑制人肠上皮细胞炎症响应,其余无明显影响;2′-岩藻糖基乳糖、蔗果三糖及菊粉促进树突状细胞成熟(促进成熟的志愿者比例分别为73.3%、57.1%、63.3%),而低聚半乳糖抑制树突状细胞成熟(抑制成熟的志愿者比例为73.3%)。这些结果表明不同益生元在调节人体炎症免疫方面具有不同的功能,益生元的添加需要根据人群身体情况特征精准化设计。 展开更多

关键词 益生元 2′-岩藻糖基乳糖 蔗果三糖 细胞炎症 树突状细胞成熟 特异性免疫

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