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根际微生物研究进展 被引量:205
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作者 陆雅海 张福锁 《土壤》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期113-121,共9页
根际是土壤-植物生态系统物质交换的活跃界面。植物作为第一生产者同化大气CO2,将部分光合产物转运至地下,激发土壤微生物的生长和新陈代谢;土壤微生物则将有机态养分转化成无机形态,利于植物吸收利用。这个植物-微生物的互作关系维系... 根际是土壤-植物生态系统物质交换的活跃界面。植物作为第一生产者同化大气CO2,将部分光合产物转运至地下,激发土壤微生物的生长和新陈代谢;土壤微生物则将有机态养分转化成无机形态,利于植物吸收利用。这个植物-微生物的互作关系维系和主宰着陆地生态系统的功能。自从100年前德国科学家LorenzHiltner提出根际概念以来,根际研究方兴未艾,研究内容不断得以丰富和发展。近年来,随着分子生物技术在土壤环境领域的应用,根际微生物研究出现快速发展的趋势。本文根据2004年在慕尼黑召开的第一届国际根际大会交流内容、结合近年来国际上报道的研究动向,对根际微生物研究方法、根际微生物生物多样性和生态功能、转基因生物的环境安全和根际微生物生物修复技术等内容作一综述。期望我国的根际微生物研究能在基础和应用领域得到快速发展。 展开更多
关键词 根际 微生物生态 GMOS 根际生物修复 16Srrna 18Srrna
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广东与海南养殖罗非鱼无乳链球菌的分离、鉴定与特性分析 被引量:108
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作者 卢迈新 黎炯 +4 位作者 叶星 邓国成 江小燕 田园园 赖翠玲 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期766-774,共9页
从中国广东、海南罗非鱼主养区发生爆发性疾病的多个养殖场的罗非鱼病鱼体上,分离到多株致病菌株。人工感染试验显示分离菌株具有较强的致病力,有多株经腹部注射分离细菌浓度为1×106CFU/mL时可使100%的受感染鱼死亡,选择其中7株强... 从中国广东、海南罗非鱼主养区发生爆发性疾病的多个养殖场的罗非鱼病鱼体上,分离到多株致病菌株。人工感染试验显示分离菌株具有较强的致病力,有多株经腹部注射分离细菌浓度为1×106CFU/mL时可使100%的受感染鱼死亡,选择其中7株强毒株进行药物敏感性实验与鉴定。不同菌株对药物敏感性存在一定的差异但与菌株来源无相关性,29种抗生素中对13种敏感、7种不敏感、9种存在菌株的差异。各分离菌株均为革兰氏阳性菌,呈β溶血。采用链球菌快速鉴定系统ID32STREP、Lancefield分析及多项补充生理生化鉴定结果,初步判断为无乳链球菌Streptococcus agalactiae。PCR扩增16S rRNA基因和GBS-specific gene cfb(CAMP factor)基因的全长序列,BLAST分析显示所有菌株的16S rRNA基因与GenBank上登录的无乳链球菌的相应序列高度同源(>99.8%),各分离菌株间的16S rRNA基因序列也高度同源(≥99.9%?100%)。各菌株cfb基因序列高度同源(100%),BLAST显示与已知无乳链球菌的相应序列也具有高度同源性(≥99.0%)。综合上述实验结果,可判定广东与海南罗非鱼主养区2009年夏季发生的罗非鱼爆发性疾病的病原菌为无乳链球菌。 展开更多
关键词 罗非鱼 无乳链球菌 致病性 生理生化 16Srrna cfb基因 药物敏感性
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16S rRNA基因序列分析法鉴定病原细菌 被引量:91
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作者 朱飞舟 陈利玉 陈汉春 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1035-1041,共7页
目的:运用16S rRNA基因序列分析法鉴定14种细菌,为该方法的临床应用奠定基础。方法:提取细菌DNA,采用通用引物PCR扩增16S rRNA基因片段并测序。将测序结果用Blastn在线软件在Nucleotide数据库中进行序列同源性比对,根据序列同源性鉴定... 目的:运用16S rRNA基因序列分析法鉴定14种细菌,为该方法的临床应用奠定基础。方法:提取细菌DNA,采用通用引物PCR扩增16S rRNA基因片段并测序。将测序结果用Blastn在线软件在Nucleotide数据库中进行序列同源性比对,根据序列同源性鉴定病原细菌。结果:12种细菌可以鉴定到"种",2种细菌可以鉴定到"属"。结论:16SrRNA基因序列分析是一种有效的病原细菌鉴定方法。 展开更多
关键词 16S rrna 病原细菌 基因序列分析
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嗜盐碱古生菌新种的系统分类学研究 被引量:49
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作者 王振雄 徐毅 周培瑾 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期115-120,共6页
从内蒙古乌都淖咸性盐湖分离到嗜盐碱菌菌株Y21。其形态为杆状,能运动,红色菌落,通过生理生化、极性脂成分、基于16SrRNA序列的系统发育学分析和DNADNA杂交同源性比较,发现菌株Y21是Natrilba属中一个与其它成员不同的新种,命名为Natrilb... 从内蒙古乌都淖咸性盐湖分离到嗜盐碱菌菌株Y21。其形态为杆状,能运动,红色菌落,通过生理生化、极性脂成分、基于16SrRNA序列的系统发育学分析和DNADNA杂交同源性比较,发现菌株Y21是Natrilba属中一个与其它成员不同的新种,命名为Natrilbawudunaoensissp.nov.。 展开更多
关键词 嗜盐碱古生菌 极性脂 16SrDNA 系统发育树
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16S rRNA基因序列分析技术在细菌分类中应用的研究进展 被引量:73
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作者 杨霞 陈陆 王川庆 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2008年第2期55-60,共6页
由于16S rRNA基因序列的保守性和存在的普遍性,应用16S rRNA作为分子指标已逐渐成为微生物检测和分类鉴定的一种强有力工具。文章就该基因的特征、研究方法、检测方法及临床应用与研究的新进展等作以简要综述,同时对存在的问题进行了探讨。
关键词 16S rrna 分子指标 细菌分类鉴定
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斜带石斑鱼病原菌(哈维氏弧菌)的分离与鉴定 被引量:64
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作者 陈献稿 吴淑勤 +1 位作者 石存斌 李宁求 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期313-317,共5页
从患病斜带石斑鱼 (Epinepheluscoioides)肝脏组织分离到EcGY0 2 0 4 0 1菌株 ,经人工感染、回归感染实验证实为致病菌。通过API系统和菌体常规形态特征、培养特性和生理生化反应指标测定以及 16SrRNA测序分析等综合鉴定 ,Ec GY0 2 0 4 ... 从患病斜带石斑鱼 (Epinepheluscoioides)肝脏组织分离到EcGY0 2 0 4 0 1菌株 ,经人工感染、回归感染实验证实为致病菌。通过API系统和菌体常规形态特征、培养特性和生理生化反应指标测定以及 16SrRNA测序分析等综合鉴定 ,Ec GY0 2 0 4 0 1菌株为弧菌属哈维氏弧菌 (Vibrioharveyi) ,其半致死剂量LD50 为 2 .7× 10 6CFU/g鱼体重。药敏试验结果表明 ,EcGY0 2 0 4 0 1菌株对利福平、四环素。 展开更多
关键词 斜带石斑鱼 哈维氏弧菌 16S rrna
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16S rRNA基因在细菌菌种鉴定中的应用 被引量:55
7
作者 都立辉 刘芳 《乳业科学与技术》 2006年第5期207-209,共3页
本文综述了应用16SrRNA基因作为靶基因对细菌进行鉴定的各种分子生物学技术,并指出应用16SrRNA基因在乳酸菌鉴定方面的研究进展。
关键词 16S rrna 细菌 鉴定
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解磷菌株B25的筛选、鉴定及其解磷能力 被引量:62
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作者 贺梦醒 高毅 +3 位作者 胡正雪 徐瑶 龙瑞 孙庆业 《应用生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期235-239,共5页
从安徽省铜陵市铜官山尾矿库木贼根际分离筛选出多株解磷细菌,经过多次筛选纯化获得一株解磷能力较好的菌株B25.采用透射电镜观察和DNA分子技术,确定此菌株属于芽孢杆菌属.研究了解磷菌株B25在培养168h内的解磷能力、溶液pH值以及菌株... 从安徽省铜陵市铜官山尾矿库木贼根际分离筛选出多株解磷细菌,经过多次筛选纯化获得一株解磷能力较好的菌株B25.采用透射电镜观察和DNA分子技术,确定此菌株属于芽孢杆菌属.研究了解磷菌株B25在培养168h内的解磷能力、溶液pH值以及菌株生长量的变化情况,并比较了B25在不同条件下的解磷能力.结果表明:解磷菌株B25的解磷能力与溶液pH值之间存在微弱的相关性,在碳源为葡萄糖、初始pH值为7.0、培养温度为30℃时解磷效果较好. 展开更多
关键词 解磷菌 解磷能力 16S rrna
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浓香型和芝麻香型白酒酒醅中微生物菌群的研究 被引量:58
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作者 王海燕 张晓君 +1 位作者 徐岩 赵立平 《酿酒科技》 北大核心 2008年第2期86-89,91,共5页
对白酒窖池发酵的全程跟踪取样,借助于PCR-变性梯度凝胶电泳(DGGE)和16SrRNA基因文库两种方法,对比研究了江苏地区浓香型和芝麻香型白酒酒醅在发酵过程中的微生物菌群结构。DGGE图谱分析显示,随着发酵时间的延长,酒醅中的微生物多样性... 对白酒窖池发酵的全程跟踪取样,借助于PCR-变性梯度凝胶电泳(DGGE)和16SrRNA基因文库两种方法,对比研究了江苏地区浓香型和芝麻香型白酒酒醅在发酵过程中的微生物菌群结构。DGGE图谱分析显示,随着发酵时间的延长,酒醅中的微生物多样性不断降低;发酵结束时Lactobacillus manihotivorans成为最主要的优势菌种。16SrRNA克隆文库的测序结果在数据库中进行比对后表明,浓香型和芝麻香型酒醅中的微生物种属存在巨大差异,仅有Weissella、Bacillus、Acetobacter和Lactobacillus4个属的微生物在两个文库中均能检测到,发现并鉴定出在白酒曲药和酒醅的研究中尚未报道的细菌属。 展开更多
关键词 微生物 酒醅 16 S rrna 克隆文库 DGGE
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16S rRNA测序在细菌鉴定中的应用 被引量:46
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作者 龙雯 陈存社 《北京工商大学学报(自然科学版)》 CAS 2006年第5期10-12,共3页
对分离获得的一株细菌P29,经聚合酶链式反应扩增后测定该菌株的16S rRNA基因序列,由16S rRNA基因序列比较可知,菌株P29与肠杆菌属和泛菌属亲缘关系最为接近,16S rRNA基因相似性达到99%.结合生理生化实验结果综合分析后,将其鉴定为泛菌... 对分离获得的一株细菌P29,经聚合酶链式反应扩增后测定该菌株的16S rRNA基因序列,由16S rRNA基因序列比较可知,菌株P29与肠杆菌属和泛菌属亲缘关系最为接近,16S rRNA基因相似性达到99%.结合生理生化实验结果综合分析后,将其鉴定为泛菌属的成团泛菌. 展开更多
关键词 16S rrna 细菌鉴定 成团泛菌
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从湖羊肺脏中分离绵羊肺炎支原体的鉴定 被引量:49
11
作者 李媛 陶岳 +6 位作者 阿依吐拉.肉孜 高玉龙 尹训南 李新萍 张孝恩 王砚范 辛九庆 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期375-379,共5页
从新疆湖羊肺脏病料中分离出一株支原体XJ-3f,用其培养物人工感染80日龄健康绵羊,28d后剖杀,剖检可见肺表面肉粉色实变,显微病理变化为大灶性融合性肺炎。参考国际已知支原体16SrRNA序列,设计一对扩增700bp片段的通用引物,直接提取肺脏... 从新疆湖羊肺脏病料中分离出一株支原体XJ-3f,用其培养物人工感染80日龄健康绵羊,28d后剖杀,剖检可见肺表面肉粉色实变,显微病理变化为大灶性融合性肺炎。参考国际已知支原体16SrRNA序列,设计一对扩增700bp片段的通用引物,直接提取肺脏组织DNA进行PCR扩增并克隆、测序。将该序列与GenBank中33种支原体序列比较,结果证明该序列与绵羊肺炎支原体(M.ovipneumonia)标准株Y-98同源性为99.9%,而与山羊支原体山羊亚种(M.capricolumsubsp.capricolum,Mcc)、丝状支原体山羊亚种(M.mycoidessubsp.Capri,Mmc)、丝状支原体丝状亚种LC型(M.mycoidessubsp.mycoidesLC,M.mmLC)等同源率为81%。以感染羊血清和Y-98与从发病羊肺脏中分离出的三株支原体菌体蛋白进行Westernblot,证明均与感染羊血清有特异性反应,且与Y-98相比无明显差异,故确定分离株为绵羊肺炎支原体(M.ovipneumonia)。 展开更多
关键词 绵羊肺炎支原体 16 S rrna 鉴定
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海洋细菌的分子鉴定分类 被引量:36
12
作者 戴欣 陈月琴 +2 位作者 周惠 周世宁 屈良鹄 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期68-71,共4页
从南海海底沉积物中分离到一批细菌,克隆了其中产抗菌活性物且培养形态多变的细菌ZS110的16SrDNA,通过测定和比较16SrDNA的部分序列,对ZS110进行了分子鉴定,结果表明它是一株适应了海洋环境的芽孢杆菌属(Bacillus)的枯草芽孢杆菌种(Baci... 从南海海底沉积物中分离到一批细菌,克隆了其中产抗菌活性物且培养形态多变的细菌ZS110的16SrDNA,通过测定和比较16SrDNA的部分序列,对ZS110进行了分子鉴定,结果表明它是一株适应了海洋环境的芽孢杆菌属(Bacillus)的枯草芽孢杆菌种(Bacillussubtilis). 展开更多
关键词 海洋细菌 分子分类鉴定 海洋微生物 海底沉积物
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16S rRNA测序技术在肠道微生物中的应用研究进展 被引量:54
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作者 李东萍 郭明璋 许文涛 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期71-77,共7页
16S rRNA测序是高通量测序依赖的肠道微生物研究方法之一,该方法可以对肠道微生物中的所有菌种进行精确定量,因此正逐渐成为研究肠道微生物菌种丰度变化的主流。肠道微生物16S rRNA测序的应用过程中有两个问题至关重要,一是如何根据需... 16S rRNA测序是高通量测序依赖的肠道微生物研究方法之一,该方法可以对肠道微生物中的所有菌种进行精确定量,因此正逐渐成为研究肠道微生物菌种丰度变化的主流。肠道微生物16S rRNA测序的应用过程中有两个问题至关重要,一是如何根据需要选择测序方案;二是面对高通量测序得到的海量数据,如何进行生物信息学分析,以得到具有生物学意义的结果。从测序平台、测序片段、测序数据量的选择3个方面讨论了如何选择测序方案,并从序列聚类与注释、群落结构分析、关键分类单位的筛选与功能分析等方面对目前常用的生物信息学分析手段进行综述。 展开更多
关键词 肠道微生物 16Srrna 高通量测序
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16 S rRNA在细菌分类鉴定研究中的应用 被引量:46
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作者 刘文强 贾玉萍 赵宏坤 《动物医学进展》 CSCD 2006年第11期15-18,共4页
细菌的16 S核糖体RNA(ribosomeRNA,rRNA)以其在进化上的特征性序列,现已被广泛用于细菌分类和鉴定的分子指标。其具体操作是,以聚合酶链式反应(PCR)分离细菌样本中的16 S rRNA的基因片段,通过克隆、测序或酶切、探针杂交获得其序列信息... 细菌的16 S核糖体RNA(ribosomeRNA,rRNA)以其在进化上的特征性序列,现已被广泛用于细菌分类和鉴定的分子指标。其具体操作是,以聚合酶链式反应(PCR)分离细菌样本中的16 S rRNA的基因片段,通过克隆、测序或酶切、探针杂交获得其序列信息,再与16 S rRNA数据库中的序列数据进行比较,确定其在进化中的位置,从而鉴定样本中可能存在的微生物种类。文章综述了16 S rRNA作为微生物系统分子分类鉴定的理论基础和方法,以及在细菌分类鉴定中的应用。 展开更多
关键词 16 S rrna 细菌 鉴定 分类
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黄海北部不同站位海洋细菌群落分布特征 被引量:47
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作者 白洁 李海艳 赵阳国 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期343-350,共8页
【目的】为揭示北黄海不同海域中真细菌群落分布的差异,【方法】采用16SrRNA基因文库和变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术,对远海和近海两个站位的沉积物和水体中细菌群落特征进行了解析和评价。【结果】文库分析揭示海水及沉积物中微生物种... 【目的】为揭示北黄海不同海域中真细菌群落分布的差异,【方法】采用16SrRNA基因文库和变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术,对远海和近海两个站位的沉积物和水体中细菌群落特征进行了解析和评价。【结果】文库分析揭示海水及沉积物中微生物种类丰富,存在大量未被认知的类群。各站位中主要为变形菌门(Proteobacteria),沉积物中γ-Proteobacteria和δ-Proteobacteria亚门占优势,水中则以α-Proteobacteria亚门占优势,但各亚门微生物在两个站位中存在明显系统发育学分歧。DGGE图谱聚类分析显示,近海沉积物和海水中细菌群落优势类群相似性很高,而远海沉积物和海水中则相似性很低。【结论】研究结果表明,微生物种类在不同地理位置和生存介质中存在明显差异,环境因素对微生物的分布起主导作用。 展开更多
关键词 北黄海 16S rrna 变性梯度凝胶电泳(DGGE) 变形菌门
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一株高效纤维素降解菌株的分离鉴定及其酶学性质 被引量:50
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作者 钱林 郑巧利 +3 位作者 付瑾 王慧萍 郑春丽 柳建设 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期524-528,共5页
从黄浦江淀山湖的水底沉积物中筛选分离得到一株产纤维素酶的菌株。经细菌形态观察,生理生化实验并结合16SrRNA序列分析,鉴定该菌为蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus),同时发现其在系统发育树中处于一个独立的分支,推测该菌为Bacillus属中... 从黄浦江淀山湖的水底沉积物中筛选分离得到一株产纤维素酶的菌株。经细菌形态观察,生理生化实验并结合16SrRNA序列分析,鉴定该菌为蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus),同时发现其在系统发育树中处于一个独立的分支,推测该菌为Bacillus属中一个新的亚种。对该菌株产酶及酶活特性进行了初步研究,发现纤维素酶的产生与细菌的生长密切相关。该菌株在37°C,pH7.0的条件下,发酵66h后纤维素酶活达到最高值4.58U/mL。 展开更多
关键词 纤维素酶 降解 16S rrna 蜡状芽孢杆菌
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一株溶藻菌的分离、鉴定及其溶藻物质的研究 被引量:41
17
作者 汪辉 刘兆普 +2 位作者 魏微 赵耕毛 刘兴国 《中国环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第5期461-465,共5页
从青岛市黄岛边的某富营养化池塘中分离得到1株具有溶藻能力的细菌,命名为YZ.通过生理生化及16SrRNA序列对比分析鉴定,YZ菌株属于无色杆菌属(Achromobacter).该株细菌能够有效地溶解铜绿微囊藻、小球藻和栅藻.YZ的菌体过滤液经高温灭菌... 从青岛市黄岛边的某富营养化池塘中分离得到1株具有溶藻能力的细菌,命名为YZ.通过生理生化及16SrRNA序列对比分析鉴定,YZ菌株属于无色杆菌属(Achromobacter).该株细菌能够有效地溶解铜绿微囊藻、小球藻和栅藻.YZ的菌体过滤液经高温灭菌以及蛋白酶K处理后,能强烈抑制铜绿微囊藻的生长.而YZ菌体悬液对微囊藻无溶解作用,因此可推断YZ菌株的溶藻因子,是一种菌体胞外分泌的非蛋白类、具有热稳定性的物质.YZ处理过的铜绿微囊藻溶液中的丙二醛含量有较大提高,说明藻发生了膜脂过氧化. 展开更多
关键词 溶藻细菌YZ 溶藻特性 微囊藻 16S rrna
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海南养殖罗非鱼(Oreochromis niloticus)致病链球菌的分离、鉴定及其药敏试验 被引量:47
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作者 祝璟琳 杨弘 +2 位作者 邹芝英 李大宇 肖炜 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期590-596,共7页
采用常规的形态及生理生化特性检验、API20strep快速鉴定及分子生物学等方法,对引起2009年海南罗非鱼大规模死亡的病原菌进行了致病性、表型生物学,分子生物学及药敏试验的系统研究。结果表明,2株分离菌均为无乳链球菌,对罗非鱼具有很... 采用常规的形态及生理生化特性检验、API20strep快速鉴定及分子生物学等方法,对引起2009年海南罗非鱼大规模死亡的病原菌进行了致病性、表型生物学,分子生物学及药敏试验的系统研究。结果表明,2株分离菌均为无乳链球菌,对罗非鱼具有很强的致病性。分离菌16SrRNA基因序列(GenBank登录存取号分别为GU363869和GU363870)与其它链球菌的16SrRNA基因同源性相似性在96.5%—100%之间,所测2株病原菌16SrRNA基因之间的同源性为100%。16SrRNA基因构建的系统进化树表明,2株病原菌均与无乳链球菌聚类。药敏试验结果表明,分离菌株对头孢类药物、阿莫西林、强力霉素等27种试验药物较敏感,对复方新诺明、卡那霉素等11种试验药物不敏感,对庆大霉素的敏感性不同。 展开更多
关键词 罗非鱼 无乳链球菌 16Srrna 药敏试验
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两株高产纤维素酶细菌的筛选、鉴定及酶学特性 被引量:46
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作者 陈丽燕 张光祥 +4 位作者 黄春萍 熊艳 李敏 常丽梅 张晓喻 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期531-538,共8页
从腐烂枯叶及附近土壤筛选分离得到2株产纤维素酶的菌株。经细菌形态观察、生理生化实验并结合16S rRNA序列分析,将其初步鉴定为地衣芽孢杆菌CT1(Bacillus licheniformis CT1)和枯草芽孢杆菌CM2(Bacillus subtilis CM2)。经摇瓶发酵,测... 从腐烂枯叶及附近土壤筛选分离得到2株产纤维素酶的菌株。经细菌形态观察、生理生化实验并结合16S rRNA序列分析,将其初步鉴定为地衣芽孢杆菌CT1(Bacillus licheniformis CT1)和枯草芽孢杆菌CM2(Bacillus subtilis CM2)。经摇瓶发酵,测定其CMCase、FPA酶活力,结果表明CT1和CM2在液体摇瓶培养4 d后的CMC酶活最大,分别可达163.3 U/mL和167.17 U/mL;CT1摇瓶培养2 d后,FPA酶活达到了211.17 U/mL,CM2摇瓶培养3 d后,FPA酶活为207.83 U/mL。进行不同碳源对菌株产酶能力影响的试验,并通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染后初步分析纤维素酶谱条带,发现菌株对不同来源纤维素的降解能力及产纤维素酶的种类均有所不同。 展开更多
关键词 纤维素-降解菌 筛选 纤维素酶 SDS-PAGE凝胶电泳 16Srrna
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草鱼出血病混合感染的嗜水气单胞菌的分离、鉴定与理化特性 被引量:46
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作者 邓国成 江小燕 +5 位作者 叶星 刘明智 许淑英 刘礼辉 白岳强 罗霞 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期1170-1177,共8页
从患出血病草鱼的肝脏病灶中分离筛选出2株致病菌。取病鱼样品组织过滤液接种CIK细胞、培养,电镜下观察到细胞质中含有草鱼呼肠孤病毒样颗粒和包涵体,病毒颗粒大小65nm~70nm,包涵体0.46μm~1.81μm。人工回归感染实验显示分离的菌株... 从患出血病草鱼的肝脏病灶中分离筛选出2株致病菌。取病鱼样品组织过滤液接种CIK细胞、培养,电镜下观察到细胞质中含有草鱼呼肠孤病毒样颗粒和包涵体,病毒颗粒大小65nm~70nm,包涵体0.46μm~1.81μm。人工回归感染实验显示分离的菌株及细胞毒悬液均能使草鱼致病死亡。对分离菌株进行细胞形态学、理化特性分析及药敏试验,初步判定所分离的2株菌均为嗜水气单胞菌。进一步对菌株进行DNA分子鉴定,结果显示2株菌的16SrRNA基因、促旋酶亚单位蛋白(gryB)基因均与GenBank上的嗜水气单胞菌相应的基因具有较高的同源性。在根据已知序列分别构建的2个基因的分子系统进化树中2株菌均与嗜水气单胞菌聚类。同时2个菌株均可扩增到气溶素基因(aerA)和丝氨酸蛋白酶基因(ahpA),提示它们均可能为嗜水气单胞菌强毒株。综合人工回归感染实验与毒力基因鉴定结果可认为所分析的草鱼出血病病例存在着病毒与嗜水气单胞菌的混合感染。 展开更多
关键词 草鱼 出血病 嗜水气单胞菌 混合感染 16S核糖体基因 促旋酶B亚单位蛋白基因 气溶素基因 丝氨酸蛋白酶基因
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