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头孢噻肟钠对斑马鱼SOD活性、MDA含量及DNA损伤的影响 被引量：16
1
作者 沈洪艳 焦晓会 武彤 《环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期2626-2632,共7页
研究了不同浓度头孢噻肟钠溶液暴露15 d对斑马鱼肌肉组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)和磷酸化组蛋白H2AX(γ-H2AX)含量的影响.结果表明,低浓度组(1、5 mg·L-1)暴露时,斑马鱼肌肉组织SOD活性呈现不规则变化;随着暴露浓... 研究了不同浓度头孢噻肟钠溶液暴露15 d对斑马鱼肌肉组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)和磷酸化组蛋白H2AX(γ-H2AX)含量的影响.结果表明,低浓度组(1、5 mg·L-1)暴露时,斑马鱼肌肉组织SOD活性呈现不规则变化;随着暴露浓度增加(25 mg·L-1),SOD活性在实验初期(3 d)被抑制,后期逐渐被诱导,并在12 d达到峰值;高浓度(125 mg·L-1)头孢噻肟钠显著抑制了鱼体内SOD活性,6 d时活性达到最小值.进一步测定了斑马鱼肌肉组织中MDA含量的变化,发现其与SOD活性呈负相关性,且在1 mg·L-1和125 mg·L-1暴露时尤为明显.在所选暴露浓度,斑马鱼肌肉中γ-H2AX含量均呈现先升高后降低的变化趋势.1、5、25 mg·L-1浓度组在6 d时达到峰值,125 mg·L-1浓度组在9 d时达到峰值.随着暴露时间的增加,γ-H2AX含量均降至空白水平,表明鱼体对产生的DNA损伤有自我修复功能.本研究表明,斑马鱼对头孢噻肟钠的氧化胁迫反应可能是导致其DNA损伤的重要机制之一. 展开更多
关键词 斑马鱼 头孢噻肟钠 超氧化物歧化酶 丙二醛 磷酸化组蛋白h2ax DNA损伤
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γ-H2AX免疫荧光分析技术评估CT辐射损伤的临床研究 被引量：12
2
作者 朱静芬 滕跃 +3 位作者 王畅 姚飞荣 李勇刚 张妤 《放射学实践》 北大核心 2018年第8期876-880,共5页
目的:比较双源CT前瞻性心电门控大螺距扫描方式与回顾性心电门控小螺距扫描方式的辐射剂量及其电离辐射对人外周血淋巴细胞内DNA的损伤情况,并探索γ-H2AX作为低剂量X线电离辐射损伤生物剂量计的可行性及应用前景。方法:将40例拟行冠状... 目的:比较双源CT前瞻性心电门控大螺距扫描方式与回顾性心电门控小螺距扫描方式的辐射剂量及其电离辐射对人外周血淋巴细胞内DNA的损伤情况,并探索γ-H2AX作为低剂量X线电离辐射损伤生物剂量计的可行性及应用前景。方法:将40例拟行冠状动脉CTA的患者按扫描前的心率分为两组:大螺距组18例,心率<70次/分,螺距3.4,FLASH序列,前瞻性心电门控;小螺距组22例,心率≥70次/分,螺距0.20~0.33,回顾性心电门控。两组均采用智能CARE-kV结合CARE Dose4D调节技术自动选取最优管电压及管电流。于CT检查前及检查后30min每例患者抽取静脉血4mL,采用γ-H2AX免疫荧光分析法检测淋巴细胞DNA双链断裂(DSBs)情况(γ-H2AX荧光点与淋巴细胞计数的比值,记为R_(焦点/细胞))。采用两组独立样本t检验比较两组间BMI及CT检查前后R_(焦点/细胞)的差异,采用Mann-Whitney U检验比较两组间检查前后R_(焦点/细胞)差值(△R)和辐射剂量指标(CTDIvol、DLP、ED)的差异,采用Spearman等级相关法分析DLP与△R的相关性。结果:两组患者的年龄、性别构成比及体质指数(BMI)的差异无统计学意义(P>0.05)。大螺距组的CTDIvol、DLP和ED值分别为(12.29±1.68)mGy、(100.28±30.60)mGy·cm和(1.41±0.43)mSv,3个指标的均值明显低于小螺距组[分别为(39.11±10.75)mGy、(537.27±152.74)mGy·cm和(7.52±2.14)mSv],组间差异均有统计学意义(P<0.05)]。40例患者CT检查前、后的R_(焦点/细胞)分别为(0.137±0.036)和(0.244±0.072),CT检查后检查者淋巴细胞内DSBs数量明显增多(t=10.294,P=0.000)。大螺距组和小螺距组的△R分别为(0.058±0.034)和(0.148±0.058),小螺距组高于大螺距组(U=27.50,P=0.000)。仅小螺距组的DLP与△R之间存在等级线性相关关系(r=0.781,P=0.000)。结论:前瞻性心电门控大螺距FLASH扫描方式的辐射剂量及电离辐射引起的DSBs明显低于回顾性心电门控小螺距扫描方式,而两组图像质量均� 展开更多
关键词 冠状动脉 血管造影术 体层摄影术 X线计算机 辐射量 DNA损伤 γ-h2ax
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辐射生物剂量计的研究现状及发展方向 被引量：11
3
作者 林仲武 王琪 王治东 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期799-804,共6页
辐射生物剂量学是放射医学的重要组成部分.近年来,辐射生物剂量研究取得一些新进展,为研发新一代剂量计奠定技术基础.以染色体畸变分析为代表的细胞遗传学方法作为辐射生物剂量估算的金标准方法,正向自动化、网络化分析发展,相关技术已... 辐射生物剂量学是放射医学的重要组成部分.近年来,辐射生物剂量研究取得一些新进展,为研发新一代剂量计奠定技术基础.以染色体畸变分析为代表的细胞遗传学方法作为辐射生物剂量估算的金标准方法,正向自动化、网络化分析发展,相关技术已通过国际和国家性的辐射生物剂量实验室网络辐射扩散.γ-H2AX作为DNA损伤的标志性分子,用于放射损伤剂量估算的研究进展较快,其作为放射损伤分子标志物逐步获得国内外的广泛共识.在蛋白分子和表达基因的基础上,代谢物和miRNA作为放射损伤标志物的研究有进一步的新进展.组学技术的发展,推动了利用多分子表达谱评估受照剂量的研究,亦已取得突破.本文从现有辐射生物剂量计的技术特点、国内外的主要发展趋势和今后发展方向展望等3个方面进行综述. 展开更多
关键词 辐射生物剂量计 细胞遗传学技术 γ-h2ax 分子标志物
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DNA损伤及其标志物γ-H2AX检测的研究进展 被引量：9
4
作者 王丽娜 罗志 张立 《分析试验室》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期1131-1136,共6页
DNA易受各种内源性和外源性作用的干扰而出现损伤,这些损伤会引起遗传信息载体产生不可修复性的变化,从而导致癌症等重大疾病的发生。当DNA发生损伤时,大量的γ-H2AX会聚集于损伤位点,释放生物信号并引导修复蛋白对DNA进行修复,因此,γ-... DNA易受各种内源性和外源性作用的干扰而出现损伤,这些损伤会引起遗传信息载体产生不可修复性的变化,从而导致癌症等重大疾病的发生。当DNA发生损伤时,大量的γ-H2AX会聚集于损伤位点,释放生物信号并引导修复蛋白对DNA进行修复,因此,γ-H2AX被认为是DNA损伤的重要标志物之一。本文结合国内外研究,对不同的DNA损伤类型进行了论述,同时对包括免疫荧光染色法、流式细胞术法、蛋白质印迹法和全细胞酶联免疫反应法在内的多种γ-H2AX检测方法进行了总结,为DNA损伤研究和γ-H2AX检测提供了借鉴与参考。 展开更多
关键词 DNA损伤 γ-h2ax 标志物 检测方法
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香烟烟雾提取物对人呼吸道上皮细胞DNA损伤和凋亡的影响 被引量：8
5
作者 付强 成静 +7 位作者 韩中博 李小兰 陈小燕 张鹏 肖徽 陶德定 胡俊波 龚建平 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第10期1191-1197,共7页
背景与目的:香烟烟雾可以致多种细胞发生DNA损伤已有报道证实。本研究旨在进一步阐明香烟烟雾提取物(cigarettesmokeextract,CSE)作用于正常人类支气管上皮细胞系(normalhumanbronchialepithelialcells,NHBE)和肺腺癌细胞系SPC-A1后引起... 背景与目的:香烟烟雾可以致多种细胞发生DNA损伤已有报道证实。本研究旨在进一步阐明香烟烟雾提取物(cigarettesmokeextract,CSE)作用于正常人类支气管上皮细胞系(normalhumanbronchialepithelialcells,NHBE)和肺腺癌细胞系SPC-A1后引起的DNA损伤和凋亡情况。方法:不同浓度的CSE作用于NHBE和SPC-A1细胞,用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测两种细胞活性。荧光标记的磷酸化H2AX组蛋白(γ-H2AX)抗体特异性标记细胞核内DNA双链断裂(DNAdouble-strandbreaks,DSBs)处的γ-H2AX,然后用流式细胞仪定量检测并分析DNA损伤。用免疫印迹检测γ-H2AX表达。同时,亚G1峰法(SubG1peak)和AnnexinⅤ-FITC/碘化丙啶双染色流式细胞术检测CSE诱导的细胞凋亡。用激光共聚焦显微镜观察细胞损伤和凋亡形态学变化。结果:MTT结果显示,随CSE浓度和作用时间增加,细胞活性均逐渐降低。CSE可引起细胞DNA双链断裂,γ-H2AX最大值在作用后4h左右,然后逐渐降低。DNA损伤后平均12h可以出现凋亡。另外,激光共聚焦显微镜观察到两种细胞内的γ-H2AX量在细胞受到CSE刺激后快速大量的积聚,呈现典型细胞损伤的形态学变化,较为明显的凋亡形态学特征4h后方可出现。结论:CSE能直接引起NHBE和SPC-A1细胞的DNA损伤和凋亡,且存在着浓度和时间依赖关系。 展开更多
关键词 肺肿瘤/化学诱导 香烟烟雾提取物/毒性 γ-h2ax DNA损伤 凋亡 流式细胞术
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碘对比剂对CT检查辐射生物学效应的影响 被引量：9
6
作者 李强 汪玲 +4 位作者 俞明明 王希明 姚飞荣 李盛 胡春洪 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期816-820,共5页
目的 评估碘对比剂对CT检查辐射效应的影响。方法 60例怀疑泌尿道系统疾病而准备行CT泌尿道造影（CTU）的患者，采用随机数表法分为对照组和试验组。对照组使用常规法CTU检查（平扫、皮质期、髓质期和排泄期），第1次仅腹部CT平扫，3 d... 目的 评估碘对比剂对CT检查辐射效应的影响。方法 60例怀疑泌尿道系统疾病而准备行CT泌尿道造影（CTU）的患者，采用随机数表法分为对照组和试验组。对照组使用常规法CTU检查（平扫、皮质期、髓质期和排泄期），第1次仅腹部CT平扫，3 d后补充其他3期增强扫描；试验组使用分次注射法CTU检查（平扫、实质-排泄期），第1次行分次注射增强扫描（实质-排泄期），3 d后补充平扫。两组患者第1次CT扫描前后10 min内各抽取外周静脉血2 ml，分离淋巴细胞，使用免疫荧光法计数外周静脉血内淋巴细胞核的γ-H2AX焦点数目。对照分析两组患者第1次扫描的辐射剂量和扫描前后外周静脉血内淋巴细胞核内γ-H2AX焦点数目的差异。结果 共50例患者顺利完成CT扫描和免疫荧光法γ-H2AX焦点数测定（对照组24例，试验组26例），对照组和试验组患者第1次CT扫描所接受的辐射剂量分别为（4.83±1.88）和（4.55±1.66） mSv，差异无统计学意义（P〉0.05）。扫描前后两组患者外周静脉血内淋巴细胞内平均γ-H2AX焦点数分别为对照组（0.06±0.02）和（1.06±0.27）个，试验组（0.06±0.03）和（1.42±0.50）个，差值为（0.97±0.23）和（1.34±0.41）个，差异有统计学意义（t=-3.25，P〈0.05），试验组焦点增多量较对照组高38.14%。试验组和对照组扫描前后不受性别影响，但受年龄（≤ 50岁和〉50岁）影响，差异有统计学意义（t=-4.76、-8.16，P〈0.05）。但两组患者的γ-H2AX焦点变化受性别影响差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 碘对比剂可在一定程度上增加CT辐射引起的外周血淋巴细胞DNA损伤，建议临床工作中应尽可能降低碘对比剂使用的浓度和总碘量，以降低机体的损伤。 展开更多
关键词 计算机断层 X射线摄影 碘对比剂 辐射损伤 γ-h2ax
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吉非替尼对肺癌细胞株H358放疗敏感性的影响及其机制 被引量：8
7
作者 邓洁 庄亮 陈元 《中国肺癌杂志》 CAS 2011年第11期841-847,共7页
背景与目的表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)是决定放疗效应的重要因素,它的过表达或激活常与包括非小细胞肺癌在内的肿瘤放疗抵抗相关,因而阻断EGFR的信号通路是增强放疗敏感性很有潜力的治疗策略。本研究旨... 背景与目的表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)是决定放疗效应的重要因素,它的过表达或激活常与包括非小细胞肺癌在内的肿瘤放疗抵抗相关,因而阻断EGFR的信号通路是增强放疗敏感性很有潜力的治疗策略。本研究旨在观察小分子EGFR酪氨酸激酶抑制剂吉非替尼与放疗联合是否有提高非小细胞肺癌细胞株H358放疗敏感性的作用以及探索其分子机制。方法将非小细胞肺癌细胞株H358分为X线组和X线+吉非替尼组,前者采用单纯X线照射,后者经1mol/L吉非替尼作用24h后再行X线照射。克隆形成实验比较两组细胞放射敏感性,免疫荧光激光共聚焦显微镜观察X线照射后各时间点细胞核中磷酸化γ-H2AX及EGFR焦点在细胞中的定位情况,Westernblot法检测放疗后核蛋白中EGFR的表达。结果克隆形成实验中X线+吉非替尼组各个剂量点的细胞存活率均少于X线组,可见X线+吉非替尼组对放疗更敏感。免疫荧光激光共聚焦显示,X线+吉非替尼组比X线组各时段细胞核内γ-H2AX焦点数增加,持续的时间也更长。EGFR免疫荧光及Westernblot结果显示,X线组EGFR在放疗后1h内入核,而X线+吉非替尼组EGFR不在核内表达,仍位于细胞浆内。对Westernblot结果用SPSS13.0进行统计学分析,其差异有统计学意义(P=0.042)。结论吉非替尼可能是通过抑制EGFR放疗后入核进行损伤后DNA双链断裂修复,而起到对NSCLC细胞株H358放疗增敏的作用。 展开更多
关键词 表皮生长因子受体 吉非替尼 肺肿瘤 h358细胞 γ-h2ax
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吴茱萸汤对化疗性异食癖恶心呕吐模型大鼠干预效果与作用机制的初步研究 被引量：7
8
作者 李甜 陈飞 +2 位作者 吴叶晨 王晓婷 张卫红 《上海中医药杂志》 2022年第2期61-66,共6页
目的研究不同剂量吴茱萸汤对顺铂诱导的大鼠化疗相关呕吐及肠道黏膜炎症的药效并初步探讨其作用机制。方法灌胃复方(吴茱萸汤)使用飞行时间高分辨质谱法对其活性成分进行定性。48只SD大鼠随机分为对照组、模型组、不同剂量吴茱萸汤组(5... 目的研究不同剂量吴茱萸汤对顺铂诱导的大鼠化疗相关呕吐及肠道黏膜炎症的药效并初步探讨其作用机制。方法灌胃复方(吴茱萸汤)使用飞行时间高分辨质谱法对其活性成分进行定性。48只SD大鼠随机分为对照组、模型组、不同剂量吴茱萸汤组(5、10、20 mL/kg)以及阳性对照组(托烷司琼),每组8只。观察造模后1、3、5、7 d大鼠异嗜高岭土情况;液质联用方法定量检测各组大鼠血清中5-羟色胺(5-HT)的浓度;HE染色和免疫荧光观察大鼠结肠组织变化以及磷酸化组蛋白H2AX(γ-H2AX)、白细胞共同抗原(CD45)的表达。结果吴茱萸碱、吴茱萸次碱为吴茱萸汤的主要成分。治疗后,与模型组比较,吴茱萸汤高、中剂量组大鼠异嗜高岭土的量明显减少、血清5-HT浓度显著降低(P<0.01);病理形态学观察可见,吴茱萸汤高、中剂量组对大鼠结肠黏膜具有保护作用,并降低了γ-H2AX及CD45的表达(P<0.01)。结论吴茱萸汤能治疗顺铂诱导的大鼠化疗后呕吐,并能减轻其肠道炎症反应,其作用机制可能与降低血清中5-HT的浓度,抑制肠道γ-H2AX及CD45的表达有关。 展开更多
关键词 吴茱萸汤 化疗相关恶心呕吐 5-羟色胺 磷酸化组蛋白h2ax 白细胞共同抗原 模型大鼠 中药研究
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γ-H2AX与DNA双链断裂关系的研究进展 被引量：7
9
作者 宾萍 郑玉新 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期520-522,共3页
H2AX是组蛋白的一个种类,普遍存在于整个基因组中。据报道,DNA双链断裂后可诱导位于丝氨酸-139位C-端保守区域内的H2AX磷酸化形成γ-H2AX,在荧光显微镜下形成可见的γ-H2AX焦点。用特异性抗体的免疫荧光法检测γ-H2AX已成为测定DSB的金... H2AX是组蛋白的一个种类,普遍存在于整个基因组中。据报道,DNA双链断裂后可诱导位于丝氨酸-139位C-端保守区域内的H2AX磷酸化形成γ-H2AX,在荧光显微镜下形成可见的γ-H2AX焦点。用特异性抗体的免疫荧光法检测γ-H2AX已成为测定DSB的金标准。目前,多种物理性、化学性和生物性的因素都能诱导形成γ-H2AX焦点。本文综述了不同因素诱导形成γ-H2AX的机制及其与DNA双链断裂之间的关系的研究进展。 展开更多
关键词 DNA损伤 γ-h2ax DNA双链断裂
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氧氟沙星对锦鲤抗氧化系统和DNA损伤的影响 被引量：7
10
作者 沈洪艳 王冰 +2 位作者 赵月 曹志会 武彤 《环境科学与技术》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期59-66,共8页
由于抗生素对人体健康和生态环境潜在的威胁,其大量使用已引起人们广泛关注。该研究通过毒性暴露试验,研究了氟喹诺酮类抗生素氧氟沙星(OFLX)对锦鲤抗氧化酶活性和DNA损伤的影响。结果表明,随着暴露浓度和时间的增加,OFLX对锦鲤鱼肝SOD... 由于抗生素对人体健康和生态环境潜在的威胁,其大量使用已引起人们广泛关注。该研究通过毒性暴露试验,研究了氟喹诺酮类抗生素氧氟沙星(OFLX)对锦鲤抗氧化酶活性和DNA损伤的影响。结果表明,随着暴露浓度和时间的增加,OFLX对锦鲤鱼肝SOD活性、MDA和GST含量呈现显著的诱导效应。当OFLX浓度200 mg/L,暴露13 d时,锦鲤肝脏各项抗氧化酶活性指标均出现显著降低,表明OFLX对锦鲤的抗氧化系统的累积毒性超出了鱼体的自身调节能力,导致鱼体的抗氧化系统的损伤。鱼鳃组蛋白H2AX(γ-H2AX)磷酸化结果表明,OFLX可造成鱼体DNA损伤,诱导鱼鳃γ-H2AX产生和簇集,且呈现明显的剂量-效应关系。OFLX浓度200 mg/L,暴露4 d时鱼鳃γ-H2AX浓度达到最大值(110.49 ng/L)。随着暴露时间继续增加,各浓度组γ-H2AX含量均有所下降,表明OFLX可能导致造成DNA双链的断裂,导致γ-H2AX浓度下降。该结果为评估OFLX对锦鲤的抗氧化系统和DNA毒性影响提供了较为可靠的依据。 展开更多
关键词 氧氟沙星 毒性效应 锦鲤鱼 氧化损伤 DNA双键断裂 γ-h2ax
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基于γ-H2AX生物标志物DNA遗传毒性检测方法的研究进展 被引量：7
11
作者 黄鹏程 周长慧 常艳 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期418-424,共7页
DNA双链断裂(DNA double strand breaks,DSBs)是细胞DNA损伤类型中最严重的一种。DSBs可以激活细胞的DNA损伤应答(DNA damage response,DDR)机制,从而使组蛋白H2AX迅速磷酸化(磷酸化的H2AX组蛋白被称为γ-H2AX)。随后,γ-H2AX聚集在双... DNA双链断裂(DNA double strand breaks,DSBs)是细胞DNA损伤类型中最严重的一种。DSBs可以激活细胞的DNA损伤应答(DNA damage response,DDR)机制,从而使组蛋白H2AX迅速磷酸化(磷酸化的H2AX组蛋白被称为γ-H2AX)。随后,γ-H2AX聚集在双链断裂处,形成由大量γ-H2AX聚集成的灶点(foci)。检测细胞中的γ-H2AX灶点数目就可以用于评价DNA双链断裂情况,进而可以用来评价遗传毒性因子的致突变能力。目前,国内外有多种对γ-H2AX灶点的检测方法,包括蛋白质印迹法(Western blotting)、免疫荧光染色显微镜检测法、全细胞酶联免疫反应(Whole-cell ELISA)检测法和流式细胞术检测法等,每种方法各有优缺点。本文将重点阐述近几年国内外γ-H2AX检测方法的新进展,并总结对比不同方法之间的操作步骤、统计参数及优缺点,分析γ-H2AX检测方法在遗传毒理方面的应用前景。 展开更多
关键词 γ-h2ax DSBs 生物标志物 遗传毒理
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用流式细胞术检测γ射线诱发淋巴细胞γ-H2AX与照射剂量的关系 被引量：6
12
作者 胡海亮 王治东 +3 位作者 张学清 陈茂胜 薛绍礼 陈英 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 2012年第2期120-124,共5页
本研究使用流式细胞术检测了外周血淋巴细胞γ-H2AX表达水平,探讨了该方法用于辐射生物剂量估算的可能性。采集健康人外周血,进行体外60Coγ射线照射,利用γ-H2AX特异性抗体对淋巴细胞进行间接免疫荧光标记,采用流式细胞仪分析淋巴细胞... 本研究使用流式细胞术检测了外周血淋巴细胞γ-H2AX表达水平,探讨了该方法用于辐射生物剂量估算的可能性。采集健康人外周血,进行体外60Coγ射线照射,利用γ-H2AX特异性抗体对淋巴细胞进行间接免疫荧光标记,采用流式细胞仪分析淋巴细胞中γ-H2AX的几何平均荧光强度值,并计算出相对荧光强度;比较了仪器类型和参数设定对上述两项指标的影响,以上述两项指标分别建立照射后30 min的剂量-效应曲线并进行对比。结果显示:参数设定和仪器类型均明显影响60Coγ射线照射后γ-H2AX几何平均荧光强度,而对相对荧光强度无显著影响。因此,用流式细胞仪分析γ-H2AX的相对荧光强度,较好地解决了实验的稳定性和重复性问题,有望成为一种估算辐射生物剂量的新方法。 展开更多
关键词 流式细胞术 γ射线 γ-h2ax 剂量效应关系
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五子衍宗方对环磷酰胺致小鼠睾丸细胞DNA损伤的影响 被引量：6
13
作者 赵海霞 黄威峰 +3 位作者 宋来新 刘静 彭奔 张长城 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期466-470,共5页
目的探讨五子衍宗方(枸杞子、菟丝子、覆盆子、车前子、五味子)对环磷酰胺致成年雄性小鼠睾丸细胞DNA损伤的影响。方法将50只成年雄性Balb/C小鼠中40只腹腔注射环磷酰胺后随机均分为模型对照组(生理盐水)以及五子衍宗方低、中、高剂量组... 目的探讨五子衍宗方(枸杞子、菟丝子、覆盆子、车前子、五味子)对环磷酰胺致成年雄性小鼠睾丸细胞DNA损伤的影响。方法将50只成年雄性Balb/C小鼠中40只腹腔注射环磷酰胺后随机均分为模型对照组(生理盐水)以及五子衍宗方低、中、高剂量组(100、200、400 mg/kg),10只另设正常对照组(生理盐水),乙醚麻醉小鼠后颈椎脱臼处死。检测小鼠精子数量、精子活率及精子畸形率,酶联免疫吸附测定法(ELISA)法检测血清中8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)的含有量,单细胞凝胶电泳技术检测睾丸细胞DNA损伤程度,Western blot检测睾丸组织中磷酸化的肿瘤抑制蛋白53(p-P53)、γ位磷酸化的组蛋白(γ-H2AX)蛋白表达。结果相较于模型对照组,五子衍宗方各组可显著升高小鼠精子数量、精子活率,显著降低精子畸形率、血清8-OHdG水平,显著降低睾丸组织中p-P53与γ-H2AX蛋白表达。结论五子衍宗方能通过下调p-P53、γ-H2AX蛋白表达来显著减轻环磷酰胺致小鼠睾丸细胞DNA损伤。 展开更多
关键词 五子衍宗方 环磷酰胺 8-OhDG DNA损伤 γ-h2ax
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组蛋白H2AX与DNA损伤的分子感应 被引量：7
14
作者 王会平 周平坤 《癌变．畸变．突变》 CAS CSCD 2006年第4期334-336,共3页
DNA双链断裂是电离辐射对DNA的重要损伤类型,与细胞死亡、基因突变甚至细胞恶性转化有密切联系。DNA发生双链断裂后最早反应之一是位于断裂点附近的组蛋白H2AX的C末端丝氨酸残基发生磷酸化,形成γ-H2AX。磷酸化的γ-H2AX快速转导DNA损... DNA双链断裂是电离辐射对DNA的重要损伤类型,与细胞死亡、基因突变甚至细胞恶性转化有密切联系。DNA发生双链断裂后最早反应之一是位于断裂点附近的组蛋白H2AX的C末端丝氨酸残基发生磷酸化,形成γ-H2AX。磷酸化的γ-H2AX快速转导DNA损伤信号,导致下游分子磷酸化的激活,引发一系列的生物级联反应和和细胞学反应。γ-H2AX是迄今所研究的最重要的DNA损伤感应分子。 展开更多
关键词 DNA双链断裂 γ-h2ax 信号转导 电离辐射
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五子衍宗方对环磷酰胺致成年雄性小鼠睾丸生殖细胞DNA损伤及P53通路的影响 被引量：6
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作者 刘静 张长城 +3 位作者 宋来新 黄威峰 袁丁 赵海霞 《中药材》 CAS 北大核心 2017年第1期183-187,共5页
目的:探讨五子衍宗方对环磷酰胺(Cyclophosphamide,CTX)致成年雄性小鼠睾丸生殖细胞DNA损伤及P53通路的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:将雄性BALB/c小鼠随机分为正常对照组、模型组及五子衍宗方低、高剂量组,五子衍宗方低、高剂量... 目的:探讨五子衍宗方对环磷酰胺(Cyclophosphamide,CTX)致成年雄性小鼠睾丸生殖细胞DNA损伤及P53通路的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:将雄性BALB/c小鼠随机分为正常对照组、模型组及五子衍宗方低、高剂量组,五子衍宗方低、高剂量组分别提前灌胃给予五子衍宗方140、280 mg/kg,其余各组灌胃给予生理盐水。从第3天开始,除正常对照组腹腔注射生理盐水外,其余各组注射CTX 50 mg/kg,隔2 d注射1次,连续10次。参照精液分析方法检测小鼠精子浓度、精子形态正常率、精子活率;单细胞凝胶电泳观察小鼠睾丸细胞DNA损伤的变化;免疫组化检测小鼠睾丸DNA损伤蛋白γ-H2AX的定位与表达变化;Western blot检测小鼠睾丸生殖细胞内DNA损伤相关蛋白γ-H2AX、Ku70及DNA损伤修复相关蛋白p-P53、P21核内表达水平。结果:与模型组比较,五子衍宗方低、高剂量均可显著升高模型组小鼠精子浓度、精子形态正常率及精子活率,显著降低彗星尾长、尾距、Olive尾矩和尾部DNA百分率及睾丸组织中γ-H2AX的阳性点数。Western blot结果表明,与模型组比较,五子衍宗方可显著降低睾丸生殖细胞核内DNA损伤相关蛋白γ-H2AX、Ku70及DNA损伤修复相关蛋白p-P53、P21的表达。结论:五子衍宗方能显著减轻CTX致小鼠睾丸生殖细胞DNA损伤,其机制可能与调控P53信号通路有关。 展开更多
关键词 五子衍宗方 环磷酰胺 DNA损伤 γ-h2ax P53
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吉非替尼对肺癌细胞株A549和H1975放射敏感度的影响及其机制 被引量：5
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作者 曹喆 庄亮 陈元 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期324-330,共7页
目的本研究旨在探讨小分子表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)酪氨酸激酶抑制剂吉非替尼是否能增加肺癌细胞株A549和H1975的放疗敏感度及其机制。方法选取两种非小细胞肺癌细胞株A549和H1975,分为单纯X线组和X线... 目的本研究旨在探讨小分子表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)酪氨酸激酶抑制剂吉非替尼是否能增加肺癌细胞株A549和H1975的放疗敏感度及其机制。方法选取两种非小细胞肺癌细胞株A549和H1975,分为单纯X线组和X线+吉非替尼组。单纯X线组采用单纯X线照射,X线+吉非替尼组经10μmol/L吉非替尼作用24 h后行X线照射。两株细胞不同分组细胞,采用克隆形成实验检测放射敏感度,免疫荧光激光共聚焦显微镜观察X线照射后不同时间点细胞核中磷酸化H2AX(γ-H2AX)亮点在细胞中的定位情况,Western blot法检测放疗后胞质胞核蛋白中EGFR的表达。结果克隆形成实验中,A549细胞X线+吉非替尼组在各放疗剂量点的SF2值(0.3475)低于单纯X线组(0.4833);H1975细胞X线+吉非替尼组与单纯X线组在各放疗剂量点的SF2值分别为0.3094和0.3207,无明显差异。免疫荧光结果显示,照射4 Gy后各时间点X线+吉非替尼组A549细胞核中γ-H2AX亮点相比单纯X线多;单纯X线组和X线+吉非替尼组H1975细胞γ-H2AX亮点在各时间点无明显差异;Western blot结果显示,A549细胞经4Gy照射后EGFR有入核现象,而预先经吉非替尼处理再接受4Gy照射,EGFR蛋白绝大部分位于细胞质内;H1975细胞,单纯X线组和X线+吉非替尼组EGFR蛋白均在细胞质中表达,胞核中几乎没有,且两组无明显差异。结论吉非替尼能增加肺癌细胞株A549的放射敏感度,可能与阻止放疗后EGFR入核进行双链断裂(double strand break,DSB)修复有关;对H1975细胞无影响,与其放疗后EGFR不入核相关。 展开更多
关键词 表皮生长因子受体 吉非替尼 肺肿瘤 A549细胞 h1975细胞 γ-h2ax
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冠状动脉CT成像不同管电压对外周血淋巴细胞DNA双链断裂影响的研究 被引量：5
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作者 林竹潇 张龙江 +4 位作者 周长圣 周帆 顾海峰 鲍雪芹 卢光明 《放射学实践》 北大核心 2018年第5期454-458,共5页
目的:利用流式细胞仪评价冠状动脉CT成像(CCTA)不同管电压对外周血淋巴细胞DNA双链断裂(DSBs)水平的影响。方法:将120例行CCTA检查的患者随机分为A、B、C、D四组,分别接受管电压为120kV、100kV、80kV、70kV的CCTA扫描。在CCTA检查前及... 目的:利用流式细胞仪评价冠状动脉CT成像(CCTA)不同管电压对外周血淋巴细胞DNA双链断裂(DSBs)水平的影响。方法:将120例行CCTA检查的患者随机分为A、B、C、D四组,分别接受管电压为120kV、100kV、80kV、70kV的CCTA扫描。在CCTA检查前及检查后20min分别抽取外周静脉血2mL,符合标准的血样经过淋巴细胞分离及抗γ-H2AX蛋白和抗ATM蛋白抗体孵育后,利用流式细胞仪分析T淋巴细胞内DNA双链断裂水平。对CCTA检查前、后DNA双链断裂的改变情况及不同管电压组间DNA的损伤情况进行统计学分析。结果:四组CCTA扫描后γ-H2AX和ATM的阳性细胞百分比均有不同程度增加(P<0.05)。管电压由120kV降低至80kV,γ-H2AX阳性细胞百分比的差值逐渐减小;管电压降低至70kV,γ-H2AX阳性细胞百分比的差值增高;组间比较发现,除A组与C组(P=0.007)、B组与C组之间(P=0.003)差异有统计学意义外,其余组间差异均无统计学意义(P值均>0.05)。随着管电压的降低,四组间ATM阳性细胞百分比差值的差异无统计学意义(P=0.381)。结论:经流式细胞仪检测发现,CCTA管电压降低至80kV能够有效减少DNA双链断裂。 展开更多
关键词 冠状动脉CT成像 DNA双链断裂 γ-h2ax 共济失调毛细血管扩张突变
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流式细胞仪检测电离辐射与γ-H2AX剂量效应关系的方法研究 被引量：3
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作者 孙志娟 范亚光 +3 位作者 石大伟 田丽丽 赵永成 王继先 《中国工业医学杂志》 CAS 北大核心 2008年第6期364-367,共4页
目的比较3种不同的固定和标记方法在流式细胞仪检测电离辐射与磷酸化H2AX(γ-H2AX)的剂量反应关系上的差异。方法用137Cs源分5个剂量点(0、1、2、4、8Gy)照射人乳腺癌细胞(MCF-7),分别用70%乙醇双标、70%乙醇单标和2%多聚甲醛单标MCF-7... 目的比较3种不同的固定和标记方法在流式细胞仪检测电离辐射与磷酸化H2AX(γ-H2AX)的剂量反应关系上的差异。方法用137Cs源分5个剂量点(0、1、2、4、8Gy)照射人乳腺癌细胞(MCF-7),分别用70%乙醇双标、70%乙醇单标和2%多聚甲醛单标MCF-7细胞,应用流式细胞仪检测电离辐射与γ-H2AX剂量效应关系。结果3种方法均发现电离辐射与γ-H2AX水平存在剂量反应关系,即γ-H2AX水平随着电离辐射剂量的增加而增加。拟合剂量反应曲线符合直线方程。乙醇固定双标法的决定系数最大,为0.87。结论应用流式细胞仪乙醇固定双标法检测MCF-7细胞电离辐射与γ-H2AX剂量效应关系,优于乙醇或多聚甲醛单标法。 展开更多
关键词 γ-h2ax 电离辐射 剂量效应关系
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电离辐射生物标志物γ-H2AX的检测技术研究进展 被引量：4
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作者 刘樱 熊忠华 +1 位作者 夏斌元 陈珊 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2022年第10期1927-1934,共8页
电离辐射可导致DNA双链断裂,从而使组蛋白H2AX迅速在双链断裂处磷酸化为γ-H2AX。检测细胞中γ-H2AX聚集处形成的焦点数目可用于评价DNA双链断裂情况,且与辐射剂量相关。因此,γ-H2AX可作为电离辐射的生物标志物,用来评价电离辐射的致... 电离辐射可导致DNA双链断裂,从而使组蛋白H2AX迅速在双链断裂处磷酸化为γ-H2AX。检测细胞中γ-H2AX聚集处形成的焦点数目可用于评价DNA双链断裂情况,且与辐射剂量相关。因此,γ-H2AX可作为电离辐射的生物标志物,用来评价电离辐射的致突变能力,亦可作为电离辐射生物剂量计,用于估算个体受照剂量。γ-H2AX检测技术在辐射生物学研究、辐射分子流行病学调查,以及辐射事故应急响应与医学处置等方面具有重要应用价值。本文将重点阐述近十年来国内外基于电离辐射生物标志物γ-H2AX的检测方法研究进展和应用前景。 展开更多
关键词 电离辐射 γ-h2ax 生物标志物 生物剂量计
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绿茶多酚表没食子儿茶素没食子酸酯对高脂高糖饮食诱导肥胖小鼠伤口愈合的影响 被引量：1
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作者 宁永玲 沃达 +5 位作者 袁志莹 何嘉 马恩 彭军 朱伟东 任丹妮 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期337-344,共8页
目的评估绿茶多酚表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)全身性给药对高脂高糖饮食(HFFD)诱导的肥胖小鼠伤口愈合障碍的干预效果。方法7~8周龄雄性C57BL/6J小鼠经60 kcal%高脂饲料和20%果糖水持续饲养10周后成为肥胖小鼠,周龄及相关条件具有... 目的评估绿茶多酚表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)全身性给药对高脂高糖饮食(HFFD)诱导的肥胖小鼠伤口愈合障碍的干预效果。方法7~8周龄雄性C57BL/6J小鼠经60 kcal%高脂饲料和20%果糖水持续饲养10周后成为肥胖小鼠,周龄及相关条件具有可比性的正常饮食组小鼠为对照。在小鼠尾部进行全层切除伤口造模后,每天腹腔注射EGCG进行干预,连续给药21天。在第0、3、7、14、21天时测量小鼠体重,并对伤口部位进行拍照记录。干预完成后,采用苏木素-伊红(HE)染色法观察小鼠伤口新生皮肤组织形态学;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测小鼠皮肤组织中DNA双链断裂(DSB)特异性生物标志物磷酸化组蛋白H2AX(γ-H2AX)的表达水平。结果与正常饮食组小鼠比较,HFFD肥胖小鼠体重增重>30%(P<0.01),皮肤组织中γ-H2AX表达上调(P<0.05),14天时,模型组伤口面积为正常饮食组的1.97倍;21天时,模型组伤口面积为正常饮食组的4.49倍,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。正常饮食小鼠伤口部位新生皮肤可以重新形成完整的表皮细胞层,肥胖小鼠则表皮细胞过度增殖,基底层细胞和颗粒层细胞分布不典型,角质层变薄。腹腔注射EGCG可使肥胖小鼠皮肤组织中γ-H2AX表达下调(P<0.05)。与模型组小鼠比较,肥胖小鼠经EGCG5.0、10.0mg/kg干预后,21天时,中剂量组伤口面积为模型组的0.32倍;高剂量组伤口面积为模型组的0.13倍,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);伤口新生皮肤表皮细胞层结构与正常饮食小鼠相似。结论EGCG可降低高脂高糖饮食诱导的肥胖小鼠体内DNA损伤,促进伤口愈合及皮肤组织结构重塑,但机制还有待深入研究。 展开更多
关键词 表没食子儿茶素没食子酸酯 肥胖小鼠 伤口愈合 高脂高糖饮食 磷酸化组蛋白h2ax
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