血清HBD2和PD-1表达水平在细菌感染性肺炎患者中意义及与免疫功能的相关性 被引量：7

1

作者 李光 朱汉东 《热带医学杂志》 CAS 2022年第6期859-862,共4页

目的探讨血清β防御素2(HBD2)、程序性死亡蛋白-1(PD⁃1)在细菌感染性肺炎患者中的意义及与免疫功能的相关性。方法选择2020年10月-2021年10月武汉市第七医院收治的80例细菌感染性肺炎患者作为研究对象,其中重症组31例、轻症组49例,并纳... 目的探讨血清β防御素2(HBD2)、程序性死亡蛋白-1(PD⁃1)在细菌感染性肺炎患者中的意义及与免疫功能的相关性。方法选择2020年10月-2021年10月武汉市第七医院收治的80例细菌感染性肺炎患者作为研究对象,其中重症组31例、轻症组49例,并纳入同期在本院接受体检的40名健康者作为对照组。比较三组受试者免疫指标CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)、自然杀伤(NK)细胞、免疫球蛋白(Ig)A、IgM、IgG及血清HBD2、PD⁃1的表达,并分析血清HBD2、PD⁃1与免疫功能的相关性。结果重症组CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)、NK细胞、IgA、IgM、IgG均明显低于轻症组和对照组,且轻症组CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)、NK细胞、IgA、IgM、IgG均明显低于对照组,差异均有统计学意义(F=140.339、170.285、66.726、179.743、88.832、104.364、83.897,P均<0.05)。重症组血清HBD2、PD⁃1为(143.12±11.70)、(57.01±5.73)pg/mL,均明显高于轻症组(110.78±11.56)、(44.88±3.39)pg/mL和对照组(95.75±6.76)、(34.74±4.35)pg/mL,且轻症组血清HBD2、PD⁃1明显高于对照组,差异均有统计学意义(F=190.744、22.900,P均<0.05)。经Pearson相关性分析显示,血清HBD2、PD⁃1与CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)、NK细胞、IgA、IgM、IgG之间均成负相关(r=-0.603、-0.671、-0.430、-0.593、-0.411、-0.592、-0.539,r=-0.650、-0.624、-0.344、-0.668、-0.410、-0.630、-0.561;P均<0.05)。结论血清HBD2、PD⁃1在细菌感染性肺炎患者中表达明显升高,且与免疫功能有明显相关性,临床上可予以密切关注。 展开更多

关键词 细菌感染性肺炎 β防御素2 程序性死亡蛋白-1 免疫功能

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健胃愈疡饮片对胃黏膜修复作用的机理研究 被引量：3

2

作者 潘国伟 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2015年第1期31-33,共3页

目的:观察健胃愈疡饮片对胃溃疡患者的治疗的临床效果,并分析它对胃黏膜白细胞介素表达的影响。方法:把经过胃镜手段确诊的90例胃溃疡患者(中医上辨证为肝郁脾虚)按随机原则进行分组,分为对照组和治疗组。对照组患者使用根除HP的三联用... 目的:观察健胃愈疡饮片对胃溃疡患者的治疗的临床效果,并分析它对胃黏膜白细胞介素表达的影响。方法:把经过胃镜手段确诊的90例胃溃疡患者(中医上辨证为肝郁脾虚)按随机原则进行分组,分为对照组和治疗组。对照组患者使用根除HP的三联用药治疗,治疗组患者加用健胃愈疡饮片进行治疗,1个疗程为4周。治疗的前、后都记录下患者的胃镜疗效、症状积分、H P清除率等;取胃黏膜进行活检,并检测NF-κB、IL-1β及β防御素-2蛋白的表达水平。结果:治疗组在治疗后症状积分显著高于对照组(P<0.05);对两组患者在胃镜下溃疡总体有效率的比较没有显著性差异(P>0.05);治疗组患者HP清除率高于对照组患者(P<0.05);免疫组化的结果显示,治疗后两组患者的NF-κB p65、IL-1βmRNA以及β防御素-2 mRNA表达有明显下降,与治疗前的比较差都具有统计学意义(P<0.05),但两组之间的比较差异没有统计学意义(P>0.05)。结论:健胃愈疡饮片能够有效缓解胃溃疡患者的临床表现,显著降低胃黏膜NF-κB p65、IL-1βmRNA以及β防御素-2 mRNA的表达水平,对溃疡黏膜修复有益。 展开更多

关键词 健胃愈疡饮片 胃溃疡 核因子ΚB 白细胞介素-1β β防御素-2蛋白

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人防御素2和酸性成纤维因子1融合蛋白hBD2-haFGF1的构建、表达及生物信息学分析 被引量：1

3

作者 刘文彬 吴立蓉 +2 位作者 汪洁 李小波 植奇升 《广东药科大学学报》 CAS 2019年第1期126-131,共6页

目的为开发新型抗痤疮药物,构建具有杀菌和促进愈合的人防御素2和酸性成纤维因子1融合蛋白。方法以人肝癌细胞HepG2 cDNA为模板,分别扩增hBD-2基因和haFGF-1基因。采用SOE-PCR方法构建hBD2-haFGF1融合基因。构建hBD2-haFGF1/pET21b原核... 目的为开发新型抗痤疮药物,构建具有杀菌和促进愈合的人防御素2和酸性成纤维因子1融合蛋白。方法以人肝癌细胞HepG2 cDNA为模板,分别扩增hBD-2基因和haFGF-1基因。采用SOE-PCR方法构建hBD2-haFGF1融合基因。构建hBD2-haFGF1/pET21b原核表达载体,并转化入E.coli BL(21)进行诱导表达。通过生物信息学方法对融合蛋白的理化性质进行预测和分析。结果 RT-PCR分别获得123 bp的hBD-2基因和420 bp的haFGF-1基因,SOE-PCR获得了588 bp的hBD2-haFGF1融合基因,成功构建原核表达载体hBD2-haFGF1/pET21b,经过IPTG诱导,hBD2-haFGF1融合蛋白可在E.coli BL(21)中有效表达,相对分子量为23 800。生物信息学显示hBD2-haFGF1蛋白适合在大肠杆菌中表达,是一个不稳定的亲水性蛋白,具有较好的热稳定性。hBD2-haFGF1融合蛋白主要由延伸链、β转角和随机卷曲组成,结构中保留了β防御素保守结构域和FGF超家族保守结构域。结论构建了hBD2-haFGF1融合基因,并在体外诱导表达了hBD2-haFGF1融合蛋白,通过生物信息学分析对融合蛋白的理化性质进行了预测和分析,上述研究为进一步的纯化和活性分析奠定了研究基础。 展开更多

关键词 人β防卫素-2 酸性成纤维细胞生长因子 融合蛋白 原核表达

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支气管肺发育不良患儿重组人β防御素-2、血管新生相关基因对血管生成的调控机制及与肺发育标志物相关性 被引量：6

4

作者 惠晓君 齐玉敏 +2 位作者 王品 陈克云 王岩 《中国儿童保健杂志》 CAS CSCD 2022年第3期325-329,共5页

目的探究支气管肺发育不良(BPD)患儿重组人β防御素-2(hBD2)、血管新生相关基因(ARGs)对血管生成的调控机制及与肺发育标志物相关性,以指导临床采取相应干预措施,改善疾病预后。方法选取南阳市中心医院2018年1月-2020年11月BPD患儿56例... 目的探究支气管肺发育不良(BPD)患儿重组人β防御素-2(hBD2)、血管新生相关基因(ARGs)对血管生成的调控机制及与肺发育标志物相关性,以指导临床采取相应干预措施,改善疾病预后。方法选取南阳市中心医院2018年1月-2020年11月BPD患儿56例作为观察组,另根据年龄、性别按照1∶1匹配原则选取同期健康体检小儿56例作为对照组。比较两组血清hBD2、ARGs[凝血酶敏感蛋白-1(THBS-1)、转化生长因子β1(TGF-β1)]水平,不同血清hBD2、ARGs水平患儿血管生成指标[血管内皮生长因子(VEGF)、血管生成素(Ang-1)]水平、肺发育标志物[Ⅱ型肺泡细胞表面抗原6(KL-6)、血清Clara细胞分泌蛋白(CC16)]水平,分析血清hBD2、THBS-1、TGF-β1与VEGF、Ang-1、KL-6、CC16的关系,并评价血清hBD2、ARGs对BPD诊断价值。结果观察组血清hBD2低于对照组,THBS-1、TGF-β1高于对照组(t=6.888、9.505、9.065,P<0.05);血清hBD2低水平患儿VEGF、Ang-1、CC16低于高水平患儿,KL-6高于高水平患儿(t=6.596、4.389、4.635、4.248,P<0.05);血清THBS-1、TGF-β低水平患儿VEGF、Ang-1、CC16高于高水平患儿,KL-6低于高水平患儿(THBS-1:t=5.671、3.683、4.193、3.296,P<0.05;TGF-β:t=6.200、3.721、3.970、3.808,P<0.05);血清hBD2与VEGF、Ang-1、CC16呈正相关,与KL-6呈负相关,THBS-1、TGF-β1分别与VEGF、Ang-1、CC16呈负相关,与KL-6呈正相关(P<0.05);血清hBD2、THBS-1、TGF-β1单独诊断BPD的AUC依次为0.788、0.857、0.805,联合诊断BPD的AUC为0.931,敏感度为94.64%,特异度为87.50%。结论 hBD2、ARGs参与BPD患儿血管生成过程,与肺发育标志物具有一定相关性,监测hBD2、ARGs基因可对BPD患儿血管生成、肺发育程度提供评估依据,。 展开更多

关键词 支气管肺发育不良 重组人β防御素-2 血管新生相关基因 转化生长因子β1 肺发育标志物 凝血酶敏感蛋白-1 血管生成指标

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输尿管镜碎石术后发热性尿路感染危险因素及血清β防御素2高迁移率族蛋白B1 Toll样受体4早期预测价值

5

作者 周恩谱 钱余 +2 位作者 黄进宝 曾俊斌 陆航晨 《山西医药杂志》 CAS 2024年第3期190-193,共4页

目的 探讨泌尿结石疾病采取输尿管镜碎石术治疗术后发生发热性尿路感染的相关危险因素,观察血清β防御素2、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)以及Toll样受体4(TLR4)对早期预测尿路感染的价值。方法 回顾性分析122例行输尿管镜碎石术治疗者的临... 目的 探讨泌尿结石疾病采取输尿管镜碎石术治疗术后发生发热性尿路感染的相关危险因素,观察血清β防御素2、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)以及Toll样受体4(TLR4)对早期预测尿路感染的价值。方法 回顾性分析122例行输尿管镜碎石术治疗者的临床资料,根据术后是否发生发热性尿路感染分成感染组与未感染组,记录患者资料,分析危险因素,此外采集2组血液分离血清,测定血清β防御素2、HMGB1、TLR4水平。结果 术后35例(28.7%)发生发热性尿路感染,多因素分析显示年龄≥60岁、手术时间≥60 min、泌尿道手术史、合并糖尿病、导尿管留置时间≥72 h、住院时间≥7 d均是输尿管镜碎石术患者术后发热性尿路感染独立危险因素(P=0.023、0.014、0.016、0.019、0.008、0.011,OR值=2.154、3.021、2.451、2.331、2.025、2.415);感染组血清β防御素2、HMGB1、TLR4检测水平高于未感染组(t=10.48、28.47、22.86,P<0.05)。结论 输尿管镜碎石术,年龄、手术时间、泌尿手术室、合并糖尿管、导尿管留置与住院时间为术后发热性尿路感染的相关危险因素,需加强防范,术后通过检测血清β防御素2、HMGB1、TLR4水平对早期预测感染价值突出,值得推广。 展开更多

关键词 输尿管镜碎石术 发热性尿路感染 危险因素 β防御素2 高迁移率族蛋白B1 TOLL样受体4

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人hBD-2-haFGF融合基因原核表达的响应面优化

6

作者 刘文彬 吴丽蓉 +2 位作者 汪洁 李小波 植奇升 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期3681-3687,共7页

HBD-2-haFGF是一种具有痤疮治疗作用的新型融合蛋白。为提高重组大肠埃希菌Escherichia coli BL21(DE3)/pET-21b-hBD-2-haFGF中hBD-2-haFGF基因的表达水平,本研究尝试优化其诱导表达条件。分别选取IPTG浓度、诱导温度、培养基pH和诱导... HBD-2-haFGF是一种具有痤疮治疗作用的新型融合蛋白。为提高重组大肠埃希菌Escherichia coli BL21(DE3)/pET-21b-hBD-2-haFGF中hBD-2-haFGF基因的表达水平,本研究尝试优化其诱导表达条件。分别选取IPTG浓度、诱导温度、培养基pH和诱导时间进行单因素试验,在此基础上设计4因素3水平响应面实验,以蛋白表达量作为考察指标。经过响应面分析,响应面二次回归方程为y=55.33-1.59A+0.754B+0.26C+6.33D-0.56AB+5.42AC+9.66AD-2.12BC-0.93BD-2.84CD-4.73A^2-8.11B^2-1.74C^2-4.33D^2。BL21(DE3)/pET-21b-hBD-2-haFGF的最优表达条件为:诱导温度39.52℃,IPTG浓度0.60 mmol/L,pH值7.95,时间3 h,预期灰度值为62.893。通过本研究可为进一步大量诱导制备、纯化hBD-2-haFGF蛋白提供技术支持。 展开更多

关键词 人防御素-2-酸性成纤维因子融合蛋白 响应面分析 原核表达

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重组融合蛋白白细胞介素-17F/His对肺炎链球菌感染小鼠免疫相关炎性因子表达的影响 被引量：11

7

作者 陈凌 郭盛 +2 位作者 郝春莉 吴良霞 张建华 《中华实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期255-260,共6页

目的 通过动物实验观察重组融合蛋白白细胞介素（IL）-17F/His对肺炎链球菌（SP）感染小鼠β-防御素-2（Defb2）、巨噬细胞炎性蛋白（MIP）及IL-4、IFN-γ等免疫相关炎性因子表达的影响,探讨重组融合蛋白IL-17F/His在体内防御SP感染的机... 目的 通过动物实验观察重组融合蛋白白细胞介素（IL）-17F/His对肺炎链球菌（SP）感染小鼠β-防御素-2（Defb2）、巨噬细胞炎性蛋白（MIP）及IL-4、IFN-γ等免疫相关炎性因子表达的影响,探讨重组融合蛋白IL-17F/His在体内防御SP感染的机制.方法 SPF级BALB/c小鼠随机分为SP感染组、重组融合蛋白干预组和正常对照组,以鼻腔黏膜接种方式建立SP感染模型,以鼻腔黏膜免疫方式进行重组蛋白免疫干预.采用实时荧光定量PCR法检测小鼠肺组织Defb2、MIP-1α和MIP-2β mRNA表达,酶联免疫吸附法测定小鼠肺泡灌洗液（BALF）、脾细胞和纵隔淋巴结细胞培养上清中MIP-1 α、MIP-2β、IL-4及IFN-γ水平,计数BALF中白细胞总数及分类,涂板培养行菌落计数,并对小鼠肺组织行免疫组织化学分析.结果 1.SP感染组小鼠BALF中白细胞总数158.50 ±22.27,中性粒细胞[（5.25±0.42）×106/L]、巨噬细胞[（149.00 ±21.09）×106/L]、淋巴细胞[（3.33±1.77）×106/L]计数均明显高于正常对照组[113.33±15.93、（2.33±0.82） ×106/L、（109.00 ±16.10）×106/L、（2.00 ±0.89）×106/L]（U/F=38.097、28.854、32.942、27.810,P均＜0.05）.与SP感染组比较,重组融合蛋白干预组小鼠BALF中SP的定植密度[2.75（1.15～3.09）×103/L]明显降低（P=0.002）,白细胞总数（209.00±18.23）及中性粒细胞[（8.67 ±2.16）×106/L]、巨噬细胞[（193.50±16.50）×106/L]、淋巴细胞[（6.83±1.17） ×106/L]计数均明显升高（U/F=38.097、28.854、32.942、27.810,P均＜0.05）.2.与SP感染组比较,重组融合蛋白干预组小鼠肺组织中Defb2 mRNA表达水平（31.64±4.97）和MIP-1α mRNA表达水平（5.81±1.09）均明显升高,MIP-2β mRNA表达水平（6.69 ±2.05）明显降低（t=4.889、2.306、3.536,P均＜0.05）.3.SP感染后小鼠BALF中MIP-1α、MIP-2β、IL-4、IFN-γ水平[（109.99±22.71）ng/L、（228.23 ±29.08）ng/L、（80.55±5.67） ng/L、（93.36 ±8.88） ng/L]均升� 展开更多

关键词 白细胞介素-17F 肺炎球菌感染 β-防御素-2 巨噬细胞炎性蛋白

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人β-防御素2在大肠杆菌中的高效表达和纯化 被引量：5

8

作者 钟志霞 阮红 +3 位作者 范立梅 彭力 方向明 徐志南 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2006年第6期585-589,共5页

目的:研究具有生物学活性的人防御素2(HBD 2)多肽在大肠杆菌中的原核高效表达的可行性及融合表达蛋白的分离纯化技术。方法:PCR扩增不含前导序列的HBD 2成熟肽的编码框全长的cDNA片段(smHBD 2-cDNA),利用B g lⅡ和B amHⅠ同尾酶构建多... 目的:研究具有生物学活性的人防御素2(HBD 2)多肽在大肠杆菌中的原核高效表达的可行性及融合表达蛋白的分离纯化技术。方法:PCR扩增不含前导序列的HBD 2成熟肽的编码框全长的cDNA片段(smHBD 2-cDNA),利用B g lⅡ和B amHⅠ同尾酶构建多拷贝串联的nsmHBD 2-cDNA的克隆载体,利用N colⅠ和H indⅢ限制性内切酶构建融合表达载体pET 32-nsmHBD 2-cDNA,在大肠杆菌中BL 21(DE 3)中诱导表达含HBD 2的融合蛋白,SDS-PAGE分析产量。可溶蛋白经亲和层析、肠激酶酶切、离子交换层析等方法分离、纯化HBD 2多肽。采用液体培养法,测定重组人β防御素2对大肠杆菌的抑菌活性。结果:构建了n为1、2、4或8倍的多拷贝串联nsmHBD 2-cDNA表达载体,1、2和4倍smHBD 2-cDNA的可溶蛋白比例分别为52%、48%和31%;而8倍HBD 2-cDNA几乎不含可溶蛋白,目标蛋白以包含体形式表达,集中在不可溶部分。重组HBD 2对E.coli K 12 D 31有较强的抑制作用,在终浓度约为0.4至0.5μg/m l时,90%细胞的生长被抑制。结论:采用融合表达、多拷贝串联表达方式,可增加产物长度以弱化蛋白酶的降解作用,也减弱了目标蛋白产物对宿主的毒性;适当的多拷贝串联基因可以提高HBD 2的产量,但拷贝数过高会影响重组蛋白表达产量,且易形成不溶蛋白;在大肠杆菌中可达到具有生物学活性的HBD 2多肽的原核高效表达。 展开更多

关键词 防御素类/遗传学 大肠杆菌/遗传学 基因表达 β-防御素 抗菌肽 原核表达 亲和层析 融合蛋白

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猪防御素基因pBD-2在大肠杆菌中的重组和融合表达 被引量：5

9

作者 徐海涛 马立保 +2 位作者 何启盖 廖冰麟 任芬芬 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第5期101-104,共4页

哺乳动物防御素是动物机体在抵御病原微生物的防御反应中产生的一类重要的抗菌肽物质,具有十分广泛的抗菌谱,在先天免疫上起重要作用。本研究根据已报道的pBD-2基因cDNA序列,合成了3条基因片段(1、2、3)。片段1、2和片段2、3各有15个碱... 哺乳动物防御素是动物机体在抵御病原微生物的防御反应中产生的一类重要的抗菌肽物质,具有十分广泛的抗菌谱,在先天免疫上起重要作用。本研究根据已报道的pBD-2基因cDNA序列,合成了3条基因片段(1、2、3)。片段1、2和片段2、3各有15个碱基互补配对,PCR扩增延伸得到pBD-2基因,将pBD-2基因克隆至原核表达载体pGEX-KG,成功地在大肠杆菌BL21(DE3)中表达出pBD-2融合蛋白。pBD-2基因的成功表达为进一步研究其抗菌活性打下了基础。 展开更多

关键词 猪β-防御素-2 原核表达 融合蛋白

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大疱性类天疱疮患者疱液中HBD-2、CXCR5及ECP的表达水平及意义

10

作者 李丙南 刘桂丽 +2 位作者 曹娜 张海祥 赵子申 《川北医学院学报》 CAS 2024年第10期1338-1342,共5页

目的:探究大疱性类天疱疮(BP)患者疱液中人类β防御素2(HBD-2)、趋化因子受体5(CXCR5)、嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)的表达水平及意义。方法:选取80例BP患者为BP组;50例非BP患者为非BP组,根据BP活动性皮损面积(A)和活动性皮损数目(B)... 目的:探究大疱性类天疱疮(BP)患者疱液中人类β防御素2(HBD-2)、趋化因子受体5(CXCR5)、嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)的表达水平及意义。方法:选取80例BP患者为BP组;50例非BP患者为非BP组,根据BP活动性皮损面积(A)和活动性皮损数目(B)将BP组分为重度组、中度组及轻度组;随访6个月,根据疾病复发及并发症发生情况将BP组患者分为预后不良组及预后较好组,采用ELISA法检测BP患者及非BP患者、不同病情程度BP患者及不同预后结果BP患者之间HBD-2、CXCR5、ECP水平差异,并分析HBD-2、CXCR5、ECP水平与BP严重程度及患者预后的相关性。结果:BP组HBD-2、CXCR5、ECP水平均高于非BP组(P<0.05)。不同病情程度BP患者疱液HBD-2、CXCR5、ECP水平比较:重度组>中度组>轻度组(P<0.05)。相关性分析显示,BP患者疱液HBD-2、CXCR5、ECP水平与病情严重程度均呈正相关关系(P<0.05)。疱液HBD-2、CXCR5、ECP水平联合检测评估BP严重程度的曲线下面积(AUC)大于各指标单独检测(P<0.05)。预后不良组HBD-2、CXCR5、ECP水平均高于预后较好组(P<0.05)。疱液HBD-2、CXCR5、ECP水平联合检测预测BP患者预后的AUC大于各指标单独检测(P<0.05)。结论:大疱性类天疱疮患者疱液中HBD-2、CXCR5、ECP水平异常升高与疾病严重程度相关,且各指标联合检测对BP严重程度及患者预后具有预测价值。 展开更多

关键词 大疱性类天疱疮 疱液 人类β防御素2 趋化因子受体5 嗜酸性粒细胞阳离子蛋白

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猪β-防御素-2基因在大肠杆菌中的融合表达及抑菌活性检测 被引量：4

11

作者 谢飞 吴雅琨 +3 位作者 冯秋月 陈慧鑫 王安如 彭子欣 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第2期6-9,共4页

将猪β-防御素-2基因(pBD-2)片段正确连接到pET32a载体上,从而得到稳定表达pBD-2的大肠杆菌表达株。根据已报道的pBD-2基因序列,按大肠杆菌密码子优化原则合成了5条pBD-2基因片段,通过重叠延伸PCR(SOE PCR)方法将这5段延伸成完整的pBD-... 将猪β-防御素-2基因(pBD-2)片段正确连接到pET32a载体上,从而得到稳定表达pBD-2的大肠杆菌表达株。根据已报道的pBD-2基因序列,按大肠杆菌密码子优化原则合成了5条pBD-2基因片段,通过重叠延伸PCR(SOE PCR)方法将这5段延伸成完整的pBD-2基因序列,将该基因定向插入原核表达质粒pET32a的多克隆位点上,成功地在大肠杆菌BL21(DE3)中表达出TrxA-pBD2融合蛋白。结果显示,表达的融合蛋白用肠激酶切掉TrxA后做琼脂孔穴扩散法检测,pBD-2对金黄色葡萄球菌有较好的抑菌活性,表明试验获得表达pBD-2的大肠杆菌菌株。 展开更多

关键词 猪β-防御素-2 原核表达 融合蛋白 抗菌活性

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血清β防御素-2对早产儿晚发型败血症病情的评估价值 被引量：3

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作者 林群 贾雁平 +1 位作者 刘玉凤 孙虹 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期1775-1780,共6页

目的探讨血清β防御素-2(HBD-2)结合传统感染性指标[C-反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)、白细胞计数(WBC)]对早产儿晚发型败血症病情的评估价值。方法选取海口市妇幼保健院2018年1月-2020年1月收治的102例早产儿晚发型败血症患儿,依照新... 目的探讨血清β防御素-2(HBD-2)结合传统感染性指标[C-反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)、白细胞计数(WBC)]对早产儿晚发型败血症病情的评估价值。方法选取海口市妇幼保健院2018年1月-2020年1月收治的102例早产儿晚发型败血症患儿,依照新生儿危重病例评分(NCIS)结果将感染组患儿分为非危重组(n=29例)、危重组(n=33例)、极危重组(n=40);根据败血症患儿治疗7 d后是否死亡,分为死亡组(16例)和生存组(86例),分别于治疗前、治疗后第3天采集患儿外周静脉血检测,检测患儿HBD-2及感染性指标CRP、PCT、WBC水平,通过受试者工作特征(ROC)曲线评价血清HBD-2结合传统感染性指标对疾病严重程度及预后的评估价值。结果102例早产儿晚发型败血症患儿共培养分离病原菌112株,其中革兰阳性菌56株占50.00%,革兰阴性菌53株占47.32%、真菌3株占2.68%;极危重组血清HBD-2、CRP、PCT水平高于危重组,危重组高于非危重组(P<0.05);血清HBD-2与PCT、CRP水平联合检测评估非危重组与危重组、危重组与极危重组ROC曲线下面积分别为0.889、0.916高于各项指标单独检测ROC曲线面积为0.760、0.713、0.792、0.823、0.761、0.820(P<0.05);死亡组治疗前后血清HBD-2、PCT、CRP水平均高于生存组(P<0.05);治疗前、治疗后3 d血清HBD-2与PCT、CRP水平联合预测患者预后ROC曲线下面积分别为0.791、0.899。结论血清HBD-2、CRP、PCT水平三者结合可作为患儿疾病病情评估的生物标志物,动态观察其水平变化可提高患儿预后评估的准确性。 展开更多

关键词 早产儿晚发型败血症 血清β防御素-2 C-反应蛋白 降钙素原 白细胞计数 受试者工作特征曲线 病情评估

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重组鸡β-防御素2蛋白的表达与生物学活性鉴定 被引量：2

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作者 马得莹 张婷婷 +5 位作者 徐杨 高梦莹 王秋玲 徐倩倩 韩宗玺 刘胜旺 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期56-60,108,共6页

为探讨鸡β-防御素2(Av BD2)的生物学特性,研究将Av BD2基因克隆到原核表达载体p Pro EX HTa的Eco RⅠ和XhoⅠ双酶切位点上,构建重组表达质粒p Pro EX-Av BD2,将重组质粒转化大肠杆菌Rosetta感受态细胞,用IPTG对其菌液进行诱导表达。Tri... 为探讨鸡β-防御素2(Av BD2)的生物学特性,研究将Av BD2基因克隆到原核表达载体p Pro EX HTa的Eco RⅠ和XhoⅠ双酶切位点上,构建重组表达质粒p Pro EX-Av BD2,将重组质粒转化大肠杆菌Rosetta感受态细胞,用IPTG对其菌液进行诱导表达。Tricine-SDS-PAGE电泳结果表明,His-Av BD2重组蛋白分子质量约12 ku,与预期一致。将该重组蛋白纯化后,通过菌落计数法测定其体外抗肠炎沙门氏菌、四联球菌、大肠杆菌和枯草芽孢杆菌等抑菌活性,盐离子浓度对其抗菌活性的影响及其溶血活性。结果显示,Av BD2重组蛋白对所测定的4株细菌有显著抗菌活性,高盐浓度显著降低其抗菌活性。该重组蛋白溶血活性极低。 展开更多

关键词 鸡 AvBD2 重组蛋白 抗菌活性

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信号肽重组hβD2在A549细胞中表达纯化及抗菌活性测定

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作者 张青 杜剑平 陈正堂 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期298-301,共4页

目的　通过构建在A5 49细胞中高表达人防卫素hβD2的表达体系 ,获得人源化hβD2。 方法　构建pLNCX2 CEA信号肽 hβD2成熟肽逆转录病毒表达载体 ,经逆转录包装细胞PT67包装后获得含融合基因的侵袭性病毒 ,该病毒感染宿主细胞A5 49后... 目的　通过构建在A5 49细胞中高表达人防卫素hβD2的表达体系 ,获得人源化hβD2。 方法　构建pLNCX2 CEA信号肽 hβD2成熟肽逆转录病毒表达载体 ,经逆转录包装细胞PT67包装后获得含融合基因的侵袭性病毒 ,该病毒感染宿主细胞A5 49后将融合基因整合入宿主基因组中 ,收集培养基上清 ,分离纯化获得目的蛋白hβD2 ,测定目的蛋白的抗菌活性。结果　收集转染有融合基因的A5 49细胞培养基上清 ,经WesternBlot和质谱仪分析 ,纯化后的目的蛋白为hβD2 ,具有较强的抗菌活性。结论　将CEA信号肽重组hβD2基因转染A5 49细胞后 ,细胞具有表达分泌型hβD2的功能。 展开更多

关键词 A549细胞 融合基因 表达 抗菌活性 蛋白 CEA 纯化 信号肽 宿主基因组 防卫

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pBD-2对热应激致小鼠小肠形态结构损伤及紧密连接蛋白表达的修复作用

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作者 汤雨晴 张曼 +5 位作者 齐振昌 李庆豪 李艺雷 董涵方 孙娟 金鑫 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2024年第14期118-123,128,129,共8页

为了研究猪β-防御素-2(porcinβ-defensin2,pBD-2)对热应激致小鼠小肠形态结构损伤及紧密连接蛋白表达的修复作用,试验将36只1月龄昆明小鼠随机分为空白对照组、热应激组和热应激+pBD-2组,每组12只。空白对照组和热应激组每天每只小鼠... 为了研究猪β-防御素-2(porcinβ-defensin2,pBD-2)对热应激致小鼠小肠形态结构损伤及紧密连接蛋白表达的修复作用,试验将36只1月龄昆明小鼠随机分为空白对照组、热应激组和热应激+pBD-2组,每组12只。空白对照组和热应激组每天每只小鼠按体重10μL/g以灌胃的方式给予生理盐水,热应激+pBD-2组每天每只小鼠按体重0.01μg/g以灌胃的方式给予pBD-2。灌胃后将热应激组和热应激+pBD-2组放入40℃温箱热应激处理1 h,取出后与空白对照组一起放置于室温下进行饲养。按照相同的方式共处理28 d,并于第28天处理后断颈处死。每天灌胃前观察各组的行为,记录采食量并称重,试验结束后计算各组平均日采食量和平均日增重,并对小鼠进行剖检,分别取十二指肠、空肠、回肠组织进行石蜡切片制作和H.E.染色,比较各组肠绒毛高度与隐窝深度比值和单位面积内杯状细胞数目,并采用免疫组织化学技术对紧密连接蛋白ZO-1、Claudin-3和Occludin进行检测与相对表达量分析。结果表明:试验期间,空白对照组无异样行为;热应激组探索行为增加,焦虑好动;热应激+pBD-2组比热应激组安静。热应激组平均日采食量显著高于热应激+pBD-2组和空白对照组(P<0.05),而热应激+pBD-2组和空白对照组间差异不显著(P>0.05)。空白对照组和热应激+pBD-2组平均日增重显著高于热应激组(P<0.05),空白对照组和热应激+pBD-2组平均日增重差异不显著(P>0.05)。空白对照组肠道健康、无红肿,肠道内容物适中;热应激组肠道表面充血、红肿,肠道内容物较多;热应激+pBD-2组肠道无红肿现象,肠道内容物较少。热应激组十二指肠、空肠、回肠绒毛高度与隐窝深度比值均显著低于空白对照组和热应激+pBD-2组(P<0.05),空白对照组和热应激+pBD-2组间差异不显著(P>0.05)。热应激+pBD-2组十二指肠和空肠单位面积内杯状细胞数量显著高于空白对照组� 展开更多

关键词 猪β-防御素-2(pBD-2) 热应激 小肠 形态结构 紧密连接蛋白

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