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一个NEK基因家族新成员的克隆和鉴定 被引量：3
1
作者 李梅章 褚嘉祐 +1 位作者 杨昭庆 余龙 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期97-102,共6页
结合PCR扩增和cDNA文库筛选方法，本文从人胎盘cDNA文库中分离到一个与细胞周期调节有关的NEK6基因（GenBank登录号：AF087909）。该基因的cDNA序列全长1590 bp，编码一种由312氨基酸组成的蛋白质。在催化功能区，NEK6与小鼠的NEK1具有3... 结合PCR扩增和cDNA文库筛选方法，本文从人胎盘cDNA文库中分离到一个与细胞周期调节有关的NEK6基因（GenBank登录号：AF087909）。该基因的cDNA序列全长1590 bp，编码一种由312氨基酸组成的蛋白质。在催化功能区，NEK6与小鼠的NEK1具有39.32%的同源性。Northern 印迹证实在人体大多数组织中，NEK6基因均能表达1.6kb、3.0kb和9.5kb 3种mRNA转录物，其中1.6kb的表达产物可能是NEK6基因的实际表达产物，并且其在卵巢中的表达量明显高于睾丸组织。通过Radiation hybrid分析，NEK6基因进一步被定位于人9号染色体。结果初步显示，NEK6基因是哺乳动物NEK基因家族中的重要新成员，并可能在细胞分裂中发挥调节作用。 展开更多
关键词 细胞周期调节 NEK基因家族 radiation hybrid定位
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人类GABARAPL1基因的染色体定位 被引量：1
2
作者 陈政 辛玉蓉 +2 位作者 蒋滢 王尉平 蒋菊香 《苏州医学院学报》 2001年第1期16-18,22,共4页
目的　确定人类GABAA 受体相关蛋白相似蛋白 1基因在染色体上的位置。方法　根据该基因cDNA的 3′非翻译区序列设计一对RH定位引物 ,以人 /鼠体细胞辐射杂种板Genebridge 4(GB4) panel试剂盒中的杂种细胞株基因组DNA为模板 ,进行PCR扩... 目的　确定人类GABAA 受体相关蛋白相似蛋白 1基因在染色体上的位置。方法　根据该基因cDNA的 3′非翻译区序列设计一对RH定位引物 ,以人 /鼠体细胞辐射杂种板Genebridge 4(GB4) panel试剂盒中的杂种细胞株基因组DNA为模板 ,进行PCR扩增 ,经琼脂糖凝胶电泳检测后 ,按Sanger网站的RH定位分析系统进行统计学分析。结果　PCR法在一些杂种细胞株中扩增出特异的目的片段 ,经测序验证了该序列的准确性。通过Sanger网站统计分析表明 ,该基因与 12号染色体上的AFM 0 2 6tb5 (D12S77) ,AFM32 0xb5 (D12S35 8) ,AFM 2 0 5xg3(D12S310 ) ,AFM2 17xa7(D12S99) ,AFM 2 34wb6 (D12S16 6 4)位标紧密连锁 ,且LOD值均大于 3。经该染色体区带的物理图、遗传图及细胞图谱整合分析 ,将该基因定位在染色体 12 p12 .3区带的D12S77和D12S35 8位标之间。 结论　放射杂交定位法是一种新颖便捷的基因定位方法 ,通过此法成功地进行了人类GABAA 受体相关蛋白相似蛋白 1基因的染色体定位。 展开更多
关键词 放射杂交作图 GABARAPL1基因 PCR 染色体位标
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利用辐射杂种板(GB4)精细定位人类新基因H-RalGDS于染色体9q34.1
3
作者 郑其平 余龙 +5 位作者 赵勇 孙喜元 戴方彦 胡培蓉 付强 庚镇城 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期1-5,共5页
目的　HRalGDS基因是我们新近分离与克隆的人类新的Ras相关基因,是鼠Ral鸟嘌呤核苷酸解离刺激因子(RalGDS)在人类的同源基因。利用辐射杂种板(radiationhybrid,RH)制图法进行该基因的精细定位。方法　根据HRalGDS基因cDNA的3′不翻译区... 目的　HRalGDS基因是我们新近分离与克隆的人类新的Ras相关基因,是鼠Ral鸟嘌呤核苷酸解离刺激因子(RalGDS)在人类的同源基因。利用辐射杂种板(radiationhybrid,RH)制图法进行该基因的精细定位。方法　根据HRalGDS基因cDNA的3′不翻译区设计正反向引物,PCR扩增人鼠辐射体细胞杂种板(radiationhybridGenebridge4panel),并将杂种板每一细胞株的PCR结果按一定方式统计后输入WIMITRadiationHybridMapper的相关网址,进行HRalGDS基因的RH制图和整合分析。结果RH制图将HRalGDS基因定位在9号染色体的骨架图上。定位附近的Marker顺序为9pter——WI6083——HRalGDSWI1405——9qter,经文献检索及进一步与物理图、遗传连锁图及细胞学图谱的整合分析,将其精细定位于染色体9q34.1区带的基因位标SURF5与RPL7A之间。结论　HRalGDS基因的定位不仅有助于人染色体9q34区带的精细基因图与细胞遗传图的构建,而且也表明用RH制图法定位于人类新基因既简便、易行、可靠,又可为丰富染色体上的基因定位提供新的信息。 展开更多
关键词 H-RalGDS 基因 辐射杂种板制图 染色体9q34.1
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人类GABARAPL2基因的染色体定位
4
作者 陈政 蒋滢 +2 位作者 王尉平 蒋菊香 辛玉蓉 《生物学杂志》 CAS CSCD 2001年第3期19-21,18,共4页
为了确定人类GABAA 受体相关蛋白相似蛋白 2基因在染色体上的位置 ,根据该基因cDNA的 3′非翻译区序列设计一对RH定位引物 ,以人 /鼠体细胞辐射杂种板Genebridge4(GB4) panel和G3 panel试剂盒中的杂种细胞株基因组DNA为模板 ,在一定的... 为了确定人类GABAA 受体相关蛋白相似蛋白 2基因在染色体上的位置 ,根据该基因cDNA的 3′非翻译区序列设计一对RH定位引物 ,以人 /鼠体细胞辐射杂种板Genebridge4(GB4) panel和G3 panel试剂盒中的杂种细胞株基因组DNA为模板 ,在一定的条件下进行PCR扩增 ,琼脂糖凝胶电泳结果分别输入Sanger和Stanford网站的RH定位分析系统进行统计学分析。结果PCR法在一些杂种细胞株中扩增出特异的目的片段 ,并经测序验证了其准确性。凝胶电泳结果在Sanger网站统计分析表明该基因与 16号染色体上的AFM 3 4 0 ye5 ,AFM 2 92xh5 ,AFM 3 2 0wf1,AFMa0 66xd5 ,AFM 2 49xc5位标紧密连锁 ;在Stanford网站统计分析表明该基因与 16号染色体上的SHGC— 14 5 7,SHGC— 5 3 4 15 ,SHGC— 6782 ,SHGC— 2 2 2 8,SHGC— 14 62 9位标紧密连锁 ,LOD值均大于 3。整合分析该染色体区带的物理图、遗传图及细胞图谱后 ,最终将基因定位在染色体 16q2 2 .3区带的D16s3 0 16和D16s5 15位标之间。结论放射杂交定位法是一种新颖便捷的基因定位的方法 ,通过此法成功地进行了人类GABAA 受体相关蛋白相似蛋白 2基因的定位。 展开更多
关键词 放射杂交作图 GABARAPL2基因 PCR 染色体位标 基因定位
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