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肌醇磷脂信号途径参与胞外钙调素启动花粉萌发和花粉管伸长 被引量:25
1
作者 马力耕 徐小冬 +1 位作者 崔素娟 孙大业 《植物生理学报(0257-4829)》 CSCD 1998年第2期196-200,共5页
In our previous reports, wehave verified the involvement of G protein, Ca2+ channel in plasma memband CDPK in extracellular calmodulin(CaM) signal transduction chain for theinitiatory effects of extracellular CaM onpo... In our previous reports, wehave verified the involvement of G protein, Ca2+ channel in plasma memband CDPK in extracellular calmodulin(CaM) signal transduction chain for theinitiatory effects of extracellular CaM onpollen germination and pollen tubegrowth . In this paper, both normal andexogenous CaM-enhanced pollen germination and tube growth were completelyinhibited by the phospholipase C inhibitor U-73122 (Fig. 1 ). The enhancement of pollen germination and tubegrowth by the G protein agonist choleratoxin were also completely inhibited byU-73122 (Fig. 2), whereas the inhibition of pollen germination and tubegrowth by the G protein antagonist pertussis toxin was reversed by IP3 (Fig. 2).Heparin, an antagonist Of IP3 receptor,inhibited pollen germination and tubegrowth (Fig. 3 ), while thapsigargin increased cytosolic Ca2+ by inhibiting theIP3-specific Ca2+ pump in endoplasmicreticulum, and thereby increased pollengermination and tube growth (Fig. 4).The above results suggest that phosphoinositide signaling pathway might be involved in the extracellular CaM signaltransduction chain in the initiatory effectsof extracellular CaM on pollen germination and tube growth. 展开更多
关键词 细胞外钙调素 花粉萌发 G蛋白 磷脂酶
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磷酯酶C抗血小板功能的研究Ⅰ——对血小板聚集率和粘附率的作用 被引量:20
2
作者 陈涛 宋建华 +3 位作者 陈明锴 王歆 王常高 孙松柏 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第10期1107-1111,共5页
目的 通过研究PLC对家兔血小板粘附率和聚集率的作用 ,以探讨PLC对血小板功能的影响。方法 家兔麻醉后 ,经十二指肠给予阴性对照辅料 ,阳性对照ASA和 6种剂量的PLC ,于给药前及给药后 1、2、4h颈动脉取血测定以ADP、AA、Collagen为诱... 目的 通过研究PLC对家兔血小板粘附率和聚集率的作用 ,以探讨PLC对血小板功能的影响。方法 家兔麻醉后 ,经十二指肠给予阴性对照辅料 ,阳性对照ASA和 6种剂量的PLC ,于给药前及给药后 1、2、4h颈动脉取血测定以ADP、AA、Collagen为诱导剂时的血小板聚集率 ,同时用玻球法测定血小板的粘附率。结果 PLC 10 0、 2 0 0IU·kg-1对家兔血小板粘附率无明显影响。PLC 4 0 0~ 10 0 0IU·kg-1可显著地降低血小板粘附率 ,并呈现一定的剂量效应依赖关系。同一剂量PLC组给药后 1、2、4h时相比P <0 0 5。PLC10 0~ 10 0 0IU·kg-16种剂量组在用ADP、AA、Collagen诱导时 ,均可显著地抑制血小板聚集 ;与阴性对照辅料组相比P <0 0 5 ,与阳性对照组相比 ,在ADP诱导时 ,10 0IU·kg-1组的抑制较弱 (P <0 0 5 ) ,而 80 0、10 0 0IU·kg-1组的抑制较强 (P <0 0 5 ) ,并呈一定的剂量效应和时间效应关系 ;而在AA诱导时 ,PLC各组在给药后 2、4h时的抑制率与ASA的相当 ,无明显剂量效应依赖关系 ,而有一定的时间效应关系 ;在Collagen诱导时 ,PLC各组的抑制作用均弱于ASA(P<0 0 5 ) ,无明显的剂量效应依赖关系 ,而有一定的时间效应关系。结论 ①PLC经十二指肠给药 ,10 0、2 0 0IU·kg-1对家兔血小板粘附性无明显影响 ,而 展开更多
关键词 磷酯酶c 血小板 聚集率 粘附率
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蛋白激酶C研究的最新进展 被引量:12
3
作者 于秉治 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1994年第4期308-312,共5页
作为能使蛋白激酶C(PKC)活化的第二信使甘油二酯(DAG)不仅可由磷脂酰肌醇(PtdIns)水解产生,大量实验表明还可从磷脂酰胆碱(PC)水解而来,其中磷脂酶C(PLC)及磷脂酶D(PLD)参与了这一过程,磷脂酶A... 作为能使蛋白激酶C(PKC)活化的第二信使甘油二酯(DAG)不仅可由磷脂酰肌醇(PtdIns)水解产生,大量实验表明还可从磷脂酰胆碱(PC)水解而来,其中磷脂酶C(PLC)及磷脂酶D(PLD)参与了这一过程,磷脂酶A_2(PLA_2)的作用产物脂肪酸(FA)也能激活PKC.PKC至少有10种亚型,依据其活化方式可分三大类:典型PKC,新PKC和非典型PKC.PKC参与了基因表达的调控. 展开更多
关键词 蛋白激酶c 甘油二酯 磷脂酶
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黄芪总皂苷对心力衰竭大鼠钙转运的影响及机制探讨 被引量:18
4
作者 姬艳苏 李亮 +2 位作者 赵榕慧 陈晓锐 朱铁梁 《现代中西医结合杂志》 CAS 2018年第1期13-18,共6页
目的探讨黄芪总皂苷对心肌梗死后心力衰竭大鼠心肌细胞内钙离子浓度及心肌血管紧张素Ⅱ受体1(AT1)和磷脂酶C(PLC)的影响。方法取健康Wistar大鼠50只,从中随机选取8只作为假手术组,其余大鼠采用结扎左冠状动脉前降支方法复制心肌梗死后... 目的探讨黄芪总皂苷对心肌梗死后心力衰竭大鼠心肌细胞内钙离子浓度及心肌血管紧张素Ⅱ受体1(AT1)和磷脂酶C(PLC)的影响。方法取健康Wistar大鼠50只,从中随机选取8只作为假手术组,其余大鼠采用结扎左冠状动脉前降支方法复制心肌梗死后慢性心力衰竭大鼠模型。将造模成功的32只大鼠随机分为模型组、黄芪总皂苷10 mg/kg组、黄芪总皂苷20 mg/kg组和卡托普利50 mg/kg组,每组8只,各给药组分别给予相应剂量药物灌胃4周。分别于灌胃前和灌胃2周、4周取血检测血清心肌肌钙蛋白T(c Tn T)水平;灌胃4周后取各组大鼠心肌组织,采用免疫荧光技术观察心肌细胞内钙荧光强度以评价细胞内钙离子浓度,采用Western-Blot技术检测心肌组织中AT1和PLC蛋白表达水平,应用酶水解同位素底物法检测心肌组织中膜蛋白PLC的活性,采用PCR法检测心肌组织中AT1 mRNA表达水平。结果灌胃2周后,黄芪总皂苷20 mg/kg组和卡托普利50 mg/kg组大鼠血清心肌c Tn T水平均明显低于模型组(P均<0.05);灌胃4周后,各给药组大鼠血清心肌cTnT水平均明显低于模型组(P均<0.05),大鼠舒张期心肌细胞内Ca2+荧光强度明显弱于模型组。灌胃4周后,各给药组AT1mRNA表达水平及黄芪总皂苷20 mg/kg组、卡托普利50 mg/kg组AT1蛋白表达水平和PLC活性均明显低于模型组(P均<0.05),各组大鼠心肌组织中PLC蛋白表达水平比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论黄芪总皂苷可降低心肌梗死后慢性心力衰竭大鼠血清c Tn T水平和心肌细胞内钙离子浓度,下调心肌组织中AT1蛋白和mRNA表达水平,降低心肌PLC的活性,其机制可能是通过调节AT1-PLC通路,减轻钙超载对细胞的损伤,从而改善心肌缺氧缺血。 展开更多
关键词 黄芪总皂苷 慢性心力衰竭 钙离子浓度 血管紧张素Ⅱ受体1 磷脂酶c
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PLC-IP_3信号途径参与花粉管伸长调控的显微注射实验 被引量:8
5
作者 王昕 崔素娟 +1 位作者 马力耕 孙大业 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2000年第7期697-702,共6页
以百合 (LiliumdavidiiDuch .)花粉为材料 ,通过显微注射肌醇磷脂信使系统中重要组成成分或其抗体 ,研究该信使系统对花粉管伸长的影响。发现显微注射动物来源磷脂酶C(PLC) β1-3 抗体显著抑制花粉管的伸长生长 ,而注射PLCβ4 抗体对花... 以百合 (LiliumdavidiiDuch .)花粉为材料 ,通过显微注射肌醇磷脂信使系统中重要组成成分或其抗体 ,研究该信使系统对花粉管伸长的影响。发现显微注射动物来源磷脂酶C(PLC) β1-3 抗体显著抑制花粉管的伸长生长 ,而注射PLCβ4 抗体对花粉管伸长无影响 ;显微注射三磷酸肌醇 (IP3 ) ,可显著促进花粉管伸长生长 ;显微注射动物来源的IP3 R2 、IP3 R3 抗体可显著抑制花粉管伸长生长 ,而注射IP3 R1抗体对花粉管伸长无影响。上述结果表明肌醇磷脂信号系统可能参与花粉管伸长生长过程。 展开更多
关键词 花粉管伸长 显微注射 肌醇磷信号系统 调控
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磷酯酶C对实验性血栓形成和纤溶功能的影响 被引量:15
6
作者 陈明锴 陈蔚 +2 位作者 宋建华 童骁 陈涛 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期477-479,共3页
关键词 磷酯酶c 血栓形成 纤溶功能 实验研究
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磷脂酶C在酶法脱胶中的研究进展 被引量:16
7
作者 余榛榛 常明 +3 位作者 刘睿杰 金青哲 刘元法 王兴国 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期19-22,共4页
磷脂酶C(PLC)是一种作用于甘油磷脂C3位上甘油磷酸酯键的脂类水解酶,水解产物为甘油二酯及有机磷酸酯(磷酸胆碱、磷酸乙醇胺或磷酸肌醇等)。应用PLC进行酶法脱胶因具有显著提高毛油精炼率的优点而得到越来越广泛的关注。主要介绍了PLC... 磷脂酶C(PLC)是一种作用于甘油磷脂C3位上甘油磷酸酯键的脂类水解酶,水解产物为甘油二酯及有机磷酸酯(磷酸胆碱、磷酸乙醇胺或磷酸肌醇等)。应用PLC进行酶法脱胶因具有显著提高毛油精炼率的优点而得到越来越广泛的关注。主要介绍了PLC酶法脱胶的原理、研究进展及PLC酶法脱胶中存在的问题,以期推动PLC酶法脱胶在我国的研究及应用。 展开更多
关键词 磷脂酶c 植物油 酶法脱胶
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磷脂酶C水解大豆油磷脂提高油脂精炼率的研究 被引量:15
8
作者 孟庆飞 温其标 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期36-38,共3页
大豆毛油中磷脂含量约为2%,采用正己烷为溶剂,用磷脂酶C水解大豆毛油中的磷脂,生成甘油二酯,可以减少毛油的炼耗,提高精炼率。磷脂酶C水解大豆毛油中丙酮不溶物(AI)的速度和底物浓度、温度、搅拌速度在一定范围内成正相关;在毛油浓度高... 大豆毛油中磷脂含量约为2%,采用正己烷为溶剂,用磷脂酶C水解大豆毛油中的磷脂,生成甘油二酯,可以减少毛油的炼耗,提高精炼率。磷脂酶C水解大豆毛油中丙酮不溶物(AI)的速度和底物浓度、温度、搅拌速度在一定范围内成正相关;在毛油浓度高时,扩散成为限速步骤;最佳水解条件为:搅拌速度100 r/min,反应温度40℃,毛油浓度75%,酶的加入量0.02%,反应6 h丙酮不溶物的水解率为85.7%,毛油的精炼率提高3.08%。 展开更多
关键词 起豆油 磷脂酶c 丙酮不溶物(AI) 磷脂
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白介素-2对心肌细胞[Ca^(2+)]_i的作用及其信号转导途径 被引量:14
9
作者 曹春梅 夏强 +1 位作者 叶治国 张雄 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期425-430,共6页
为研究白介素 2 (interleukin 2 ,IL 2 )对心肌细胞内钙浓度 ([Ca2 + ]i)的影响及其信号转导途径 ,实验采用酶解法分离成年大鼠心室肌细胞 ,以Fura 2 /AM为钙探针 ,用细胞内双波长钙荧光系统检测细胞 [Ca2 + ]i 的变化。结果发现 :(1)IL... 为研究白介素 2 (interleukin 2 ,IL 2 )对心肌细胞内钙浓度 ([Ca2 + ]i)的影响及其信号转导途径 ,实验采用酶解法分离成年大鼠心室肌细胞 ,以Fura 2 /AM为钙探针 ,用细胞内双波长钙荧光系统检测细胞 [Ca2 + ]i 的变化。结果发现 :(1)IL 2 (0 5~ 2 0 0U/ml)浓度依赖性地降低单个心室肌细胞内钙瞬态 ,IL 2 (2 0 0U/ml)对咖啡因诱导的肌浆网内储钙的释放无影响 ;(2 )纳洛酮 (naloxone ,Nal) (10 -8mol/L)和nor binaltorphimine (nor BNI,10 -8mol/L)可阻断IL 2对心肌细胞钙瞬态的作用 ,而纳曲吲哚 (naltrindole ,NTI) (10 -6mol/L)不能阻断此作用 ;(3)κ阿片受体激动剂U5 0 488H (10 -6mol/L)降低心肌细胞钙瞬态 ,nor BNI (10 -8mol/L)可阻断此作用 ;(4 ) 5mg/L百日咳毒素 (PTX)预处理可取消IL 2降低心肌细胞钙瞬态的作用 ,而酪氨酸激酶抑制剂genistein (10 -4 mol/L)不能取消IL 2的作用 ;(5 )U7312 2预处理可阻断IL 2的作用。研究结果表明 ,IL 2降低心肌细胞钙瞬态的作用 ,是通过心肌细胞上κ阿片受体介导的 ,其下游途径包括PTX敏感的G蛋白和磷脂酶C。 展开更多
关键词 白介素-2 阿片受体 细胞内cA^2+ G蛋白 磷脂酶c 心肌细胞 信号转导
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磷脂酶C用于大豆油脱胶的工艺优化 被引量:13
10
作者 杨娇 金青哲 王兴国 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期14-17,共4页
用磷脂酶C对大豆毛油进行实验室模拟脱胶。研究了pH、反应温度、加水量、加酶量、反应时间、搅拌速度对大豆毛油脱胶效果的影响,采用正交试验对脱胶工艺条件进行优化。结果表明,大豆毛油脱胶最佳工艺条件为:加酶量30 mg/kg,反应温度50℃... 用磷脂酶C对大豆毛油进行实验室模拟脱胶。研究了pH、反应温度、加水量、加酶量、反应时间、搅拌速度对大豆毛油脱胶效果的影响,采用正交试验对脱胶工艺条件进行优化。结果表明,大豆毛油脱胶最佳工艺条件为:加酶量30 mg/kg,反应温度50℃,反应时间1 h,pH 5.0,加水量2%,搅拌速度200 r/min。在此条件下得到的脱胶大豆油磷含量为17.8 mg/kg,为大豆油酶法脱胶开辟了新途径。 展开更多
关键词 磷脂酶c 脱胶 大豆毛油
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四株高产磷脂酶C新菌株的鉴定和分类 被引量:10
11
作者 王常高 高林 +5 位作者 宋冬林 陈明锴 张勇 孙春来 杨芳 陈涛 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2004年第3期189-193,共5页
在前面研究高产磷脂酶C(PLC)菌株筛选及其抗血小板功能的基础上 ,对新筛选的四株高产PLC的75 4 1、779、970和 110 7菌株进行了鉴定和分类。通过形态特征、培养特征、生理生化特征以及 16SrRNA序列测定及其同源性分析 ,证实 75 4 1菌... 在前面研究高产磷脂酶C(PLC)菌株筛选及其抗血小板功能的基础上 ,对新筛选的四株高产PLC的75 4 1、779、970和 110 7菌株进行了鉴定和分类。通过形态特征、培养特征、生理生化特征以及 16SrRNA序列测定及其同源性分析 ,证实 75 4 1菌株与Bacilluscereus基本一致 ,因此将 75 4 1菌株分类属于蜡状芽孢杆菌 ,命名为蜡状芽孢杆菌深圳株 75 4 1,B cereusshenzhen 75 4 1strain。而 779、970和 110 7三株菌则与Bacillusmycoides基本一致 ,因而将这三株菌分类属于蕈状芽孢杆菌 ,分别命名为蕈状芽孢杆菌深圳株 779,B mycoidesshenzhen 779strain ,蕈状芽孢杆菌深圳株 970 ,B mycoidesshenzhen 970strain ,和蕈状芽孢杆菌深圳株 110 7,B mycoidesshenzhen 110 7strain。这将为进一步利用这些菌株及其PLC打下坚实的基础。 展开更多
关键词 磷脂酶c 菌株 鉴定 蜡状芽孢杆菌 蕈状芽孢杆菌
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白介素-2通过阿片κ受体抑制心肌细胞的收缩作用 被引量:8
12
作者 曹春梅 夏强 +2 位作者 沈岳良 陈莹莹 徐万红 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期266-271,共6页
本文采用酶解分离大鼠心室肌细胞 ,用视频跟踪系统测定单个心室肌细胞收缩 ,以研究白介素 2(IL 2 )对心肌细胞的作用及其机理 .结果发现 :①IL 2 (0 .5~ 2 0 0kU·L- 1)浓度依赖性地抑制成年鼠单个心室肌细胞的收缩 ;②纳洛酮 (10... 本文采用酶解分离大鼠心室肌细胞 ,用视频跟踪系统测定单个心室肌细胞收缩 ,以研究白介素 2(IL 2 )对心肌细胞的作用及其机理 .结果发现 :①IL 2 (0 .5~ 2 0 0kU·L- 1)浓度依赖性地抑制成年鼠单个心室肌细胞的收缩 ;②纳洛酮 (10nmol·L- 1)和nor binaltorphimine(nor BNI,10nmol·L- 1)可阻断IL 2的收缩抑制作用 ;③百日咳毒素 (PTX ,5mg·L- 1)预处理后 ,取消了IL 2对心肌细胞收缩的抑制作用 ;④U7312 2预处理可阻断IL 2的收缩抑制作用 .结果表明 ,IL 2对酶解分离心室肌细胞收缩的抑制作用 ,是通过心肌细胞上κ阿片受体介导的 。 展开更多
关键词 白细胞介素2 阿片受体 心肌细胞 收缩作用 G蛋白 磷脂酶c
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磷酯酶C抗血小板功能的研究Ⅱ——对血小板释放和代谢的作用 被引量:11
13
作者 陈明锴 宋建华 +3 位作者 王歆 王常高 孙松柏 陈涛 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第12期1340-1344,共5页
目的 通过检测PLC对家兔血小板释放产物血栓素A2 (TXA2 )、代谢产物前列环素 (PGI2 )以及出血时间的影响 ,以探讨PLC抗血小板聚集的作用。方法 运用放射免疫方法测定以ADP、AA、collagen为诱导剂时 ,PLC对血小板TXB2 、6 Keto PGF1α... 目的 通过检测PLC对家兔血小板释放产物血栓素A2 (TXA2 )、代谢产物前列环素 (PGI2 )以及出血时间的影响 ,以探讨PLC抗血小板聚集的作用。方法 运用放射免疫方法测定以ADP、AA、collagen为诱导剂时 ,PLC对血小板TXB2 、6 Keto PGF1α生成量的影响。常规方法测定PLC对家兔出血时间 (BT)的影响。结果  6种剂量PLC均能延长出血时间 ,但在给PLC 4h时 ,BT恢复至给药前水平 (P >0 0 5)。以ADP、AA、Collagen为诱导剂时 ,6种剂量的PLC能显著降低TXB2 的生成 (P <0 .0 5) ;以AA为诱导剂时 ,PLC 10 0U·kg- 1及以collagen为诱导剂时PLC 10 0U·kg- 1和PLC 2 0 0U·kg- 1其对TXB2 的生成的抑制作用较ASA组弱 (P <0 0 5) ;以ADP为诱导剂时PLC 10 0~ 40 0U·kg- 1,以AA为诱导剂时PLC 2 0 0~ 60 0U·kg- 1和以collagen为诱导剂时PLC 40 0~ 80 0U·kg- 1其对TXB2 的生成的抑制作用与ASA组相当 (P >0 0 5) ;以ADP为诱导剂时PLC 60 0~ 10 0 0U·kg- 1、以AA为诱导剂时PLC 80 0~ 10 0 0U·kg- 1和以collagen为诱导剂时PLC10 0 0U·kg- 1其对TXB2生成的抑制作用强于ASA组 (P <0 0 5)。 6种剂量的PLC组均明显增加 6 酮 PGF1α的生成量 (P <0 0 5) ,其作用强于ASA组 (P <0 0 5) ,并存在剂量效应关系和时间效? 展开更多
关键词 磷酯酶c 血小板血栓素A2(血小板血栓素岛B2) 6-酮-前列腺素F1a(6-酮-PGFla) 出血时间
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磷脂酶A1和磷脂酶C对沙棘果油脱胶的影响 被引量:10
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作者 胡旭东 蔡永国 +6 位作者 周勇 罗丽蓉 刘哲 阿依多斯·奴尔开勒得 孙静瑶 程欣 杨海燕 《新疆农业大学学报》 CAS 2019年第6期431-437,共7页
为探究使用不同磷脂酶对沙棘果油去除磷脂的影响,选用两种酶对沙棘果油进行脱胶处理。以脱胶后油中的磷脂含量为评价指标,选取反应时间、水浴加热温度、溶液pH值、去离子水添加量和磷脂酶A1或磷脂酶C添加量5个因素对沙棘果油脱胶效果进... 为探究使用不同磷脂酶对沙棘果油去除磷脂的影响,选用两种酶对沙棘果油进行脱胶处理。以脱胶后油中的磷脂含量为评价指标,选取反应时间、水浴加热温度、溶液pH值、去离子水添加量和磷脂酶A1或磷脂酶C添加量5个因素对沙棘果油脱胶效果进行分析。以单因素试验为基础,通过正交试验优化沙棘果油酶法脱胶工艺的最优条件。结果表明,虽然磷脂酶C的脱胶速率较快,脱胶后油的回收率比磷脂酶A1略好,但脱胶不彻底,反而磷脂酶A1的脱胶效果更好,利用磷脂酶A1对沙棘果油脱胶的最优工艺条件是pH值为5.0、温度为35℃、时间为120 min、酶添加量6%、去离子水添加量为1.5%。脱胶后沙棘果油中的磷脂含量为13.3 mg/kg,油的回收率为94.4%,酸价为2.31 mg/g。 展开更多
关键词 磷脂酶A1 磷脂酶c 沙棘果油 酶法脱胶
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高产磷酯酶C菌株筛选及其抗血小板功能的研究 被引量:9
15
作者 王常高 陈明锴 +3 位作者 高林 宋建华 孙松柏 陈涛 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2003年第4期345-348,共4页
在湖北省、湖南省、江苏省、山东省、广东省 15 6个点采土样 12 6 8份 ,利用卵黄琼脂的LB培养基初筛获得产生乳白色晕圈的菌株 6 48株 ;再用卵黄琼脂滤纸圆片检测获得产生乳白色晕圈和透明圈菌株 2 6 6株 ;这些菌株用卵黄琼脂杯蝶法筛... 在湖北省、湖南省、江苏省、山东省、广东省 15 6个点采土样 12 6 8份 ,利用卵黄琼脂的LB培养基初筛获得产生乳白色晕圈的菌株 6 48株 ;再用卵黄琼脂滤纸圆片检测获得产生乳白色晕圈和透明圈菌株 2 6 6株 ;这些菌株用卵黄琼脂杯蝶法筛选出产生大于 13 0mm乳白色晕圈及少量透明圈共 73株 ,经过菌生物量、卵黄杯碟法和抗兔血小板聚集率的测定 ,从 73株菌中筛选出 15株 ,菌号为 :183,198,2 47,42 4,5 87,5 96 ,6 92 ,744 ,75 4 1,791 2 ,779,970 ,998,110 7,1182 ;将此 15菌株经菌生物量、卵黄琼脂杯碟法、NPPC法和抗人血小板聚集率的测定 ,从中选出 75 4 1,779,970 ,110 7四株菌进行分类鉴定和已知菌CW W 90 3菌对照比较的研究。 展开更多
关键词 磷酯酶c 菌株筛选 抗血小板功能 杯蝶法
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缺锌对大鼠脑肌醇磷脂信号转导系统的影响 被引量:7
16
作者 刘烈刚 严红 +2 位作者 周丽玲 朱清华 黄莲珍 《营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期201-204,共4页
目的 探讨缺锌对大鼠脑肌醇磷脂信号转导系统的影响。方法  2 4只 Wistar大鼠 ,雌雄各半 ,按体重随机分为 A(缺锌组 ) ,B(自由进食组 ) ,C(配对饲养组 )三组 ,每组 8只 ,实验期 40天 ,测定脑锌和血锌含量 ,并观察缺锌对大鼠脑组织内... 目的 探讨缺锌对大鼠脑肌醇磷脂信号转导系统的影响。方法  2 4只 Wistar大鼠 ,雌雄各半 ,按体重随机分为 A(缺锌组 ) ,B(自由进食组 ) ,C(配对饲养组 )三组 ,每组 8只 ,实验期 40天 ,测定脑锌和血锌含量 ,并观察缺锌对大鼠脑组织内磷脂酶 C(PLC)活性 ,蛋白激酶 C(PKC)活性 ,钙调蛋白 (Ca M)含量 ,及钙依赖性蛋白激酶 (Ca MK )活性的影响。结果  A组大鼠血清和脑锌含量明显降低 ,同时 A组大鼠大脑皮层和海马中 PLC,PKC,Ca MK 活性亦明显低于 B组和 C组。A组大鼠脑组织 Ca M含量明显低于 B组 ,与 C组无显著性差异。 展开更多
关键词 PLc PKc caMKⅡ 肌醇磷脂信号转导系统
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蜡状芽孢杆菌磷脂酶C基因在大肠杆菌中的异源表达 被引量:8
17
作者 刘菲菲 张梁 +2 位作者 顾正华 丁重阳 石贵阳 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第11期182-187,共6页
利用磷脂酶C能够分解卵黄中的卵磷脂而在卵黄LB琼脂平板上产生乳白色晕圈,从本实验室微生物菌种库600株细菌中筛选出一株高产磷脂酶C(PLC)蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus 12,以其染色体为模板扩增得到磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C(PC-PLC)编... 利用磷脂酶C能够分解卵黄中的卵磷脂而在卵黄LB琼脂平板上产生乳白色晕圈,从本实验室微生物菌种库600株细菌中筛选出一株高产磷脂酶C(PLC)蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus 12,以其染色体为模板扩增得到磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C(PC-PLC)编码基因pcplc1,构建重组表达质粒pET28a(+)-pcplc1,并将重组质粒转入受体菌E.coli BL21(DE3)中,用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达。SDS-PAGE分析显示:重组蛋白以可溶性蛋白的形式存在于细胞破碎上清,分子质量约33kD,与预期蛋白大小一致。重组蛋白在硼砂卵黄平板上显现明显的乳白色晕圈,证明重组蛋白具有磷脂酶C活性,重组大肠杆菌构建成功。通过改变培养温度、IPTG诱导剂浓度及诱导时间等单因素试验初步优化得到摇瓶培养最佳诱导表达条件为:转接量4%、最佳诱导时机1.5h、最佳IPTG终浓度为0.2mmol/L,25℃诱导培养4h,最佳诱导条件下重组蛋白全部以可溶性蛋白形式存在,破碎上清酶活力达到(30.24±0.18)U/mL。 展开更多
关键词 磷脂酶c 克隆表达 IPTG 优化
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磷酯酶C对人血小板细胞质游离钙离子浓度的影响 被引量:7
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作者 杨芳 王常高 +3 位作者 干信 陈明锴 王近芬 陈涛 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期37-40,共4页
目的 测定磷酯酶C(phospholipaseC ,简称PLC ,下同 )对静息状态和激活状态下人血小板胞质游离钙离子浓度的影响 ,从而进一步阐明PLC抗血小板聚集作用的机制。方法 将健康成人的洗涤血小板用荧光指示剂Fura 2 /AM进行负载 ,分别用生理... 目的 测定磷酯酶C(phospholipaseC ,简称PLC ,下同 )对静息状态和激活状态下人血小板胞质游离钙离子浓度的影响 ,从而进一步阐明PLC抗血小板聚集作用的机制。方法 将健康成人的洗涤血小板用荧光指示剂Fura 2 /AM进行负载 ,分别用生理盐水、ASA和不同剂量的PLC处理荧光负载后的血小板 ,采用双波长荧光分光光度法分别测定经过不同处理后的血小板在静息状态和以ADP为诱导剂时的激活状态下的胞质游离钙离子浓度 [Ca2 + ]i。结果 以健康成人血为样品时 ,经生理盐水、ASA 334μmol·L-1、2 5、3 75、5、10和 2 0UPLC·ml-1处理后的血小板 ,在静息状态下测得的胞质游离 [Ca2 + ]i 浓度 (nmol·L-1)分别为15 2 5 5± 15 0 7,131 6 3± 15 5 8,14 0 2 7± 12 0 3,139 4 8± 1 73,12 1 11± 9 5 8,116 6 2± 15 96和 10 7 2 0± 17 0 7,而以ADP为诱导剂激活血小板后测得的胞质游离 [Ca2 + ]i(nmol·L-1)分别为 90 2 6 2± 94 74 ,6 87 99± 6 2 86 ,810 99± 72 37,70 1 73± 2 1 37,4 2 9 6 7± 71 5 9,342 82± 4 4 86和 2 6 3 2 7± 2 5 4 6。以生理盐水作为对照 ,ASA 334μmol·L-1、2 5、3 75、5、10和 2 0UPLC·ml-1剂量组对激活状态下血小板胞质 [Ca2 + ]i 的抑制率I(% )分别为 2 5 展开更多
关键词 磷酯酶c 人血小板 胞质游离钙 荧光测定
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急性心肌缺血大鼠心肌α辅肌动蛋白含量变化及其与心功能的关系 被引量:8
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作者 陈唐葶 周翔 +1 位作者 王立群 金春华 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期970-974,共5页
目的观察大鼠心肌缺血及再灌注过程中心肌细胞骨架蛋白α辅肌动蛋白(α-actinin)含量的变化及其与心功能的关系。方法 Wistar大鼠随机分为假手术组(sham),缺血30min组(I30min),缺血1h组(I1h),缺血1h再灌注2h组(IR),每组各8只。通过结扎... 目的观察大鼠心肌缺血及再灌注过程中心肌细胞骨架蛋白α辅肌动蛋白(α-actinin)含量的变化及其与心功能的关系。方法 Wistar大鼠随机分为假手术组(sham),缺血30min组(I30min),缺血1h组(I1h),缺血1h再灌注2h组(IR),每组各8只。通过结扎大鼠冠状动脉左前降支建立急性心肌缺血及再灌注模型,记录左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末压(LVEDP)、左室内压上升最大速度(+dp/dtmax)、左室内压下降最大速度(-dp/dtmax)。采用免疫组化方法检测各组心肌中α-actinin含量和分布。ELISA法定量检测各组心肌组织磷酸肌醇3激酶(PI3K)和磷脂酶C(PLC)含量。急性分离大鼠心肌细胞,并用PI3K抑制剂(LY-29400)和PLC抑制剂(U-73122)处理细胞,观察其对心肌细胞收缩舒张能力及对α-actinin含量的影响。结果 (1)随缺血时间延长,大鼠LVSP、+dp/dtmax、-dp/dtmax下降,LVEDP升高;再灌注后LVSP、+dp/dtmax、-dp/dtmax回升,LVEDP回落,但不能恢复到缺血前水平。(2)免疫组化染色观察到随缺血时间延长,α-actinin出现点状、片状缺失,含量下降。(3)急性缺血过程中PI3K和PLC含量逐渐增加(P<0.05)。(4)应用LY-294002及U-73122后单个心肌细胞收缩幅度较缺血组明显增加(P<0.05)。(5)应用LY-294002及U-73122后心肌细胞α-actinin免疫荧光强度较缺血组增加(P<0.001)。结论心肌缺血时心肌细胞骨架蛋白α-actinin的含量减少可能与缺血后PI3K和PLC含量增加有关,并且α-actinin结构与含量变化可能是导致心肌功能障碍的原因之一。 展开更多
关键词 缺血再灌注 α辅肌动蛋白 磷酸肌醇3激酶 磷脂酶c
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具有抗炎、抗过敏活性磷脂酶抑制剂的研究进展 被引量:3
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作者 王寅 朱再明 刘彦 《化学进展》 SCIE CAS CSCD 1998年第3期296-304,共9页
磷脂酶参与细胞跨膜信息传递,磷脂酶A2还是机体炎症、过敏介质产生的关键酶。因此,磷脂酶抑制剂的合成研究对研究细胞表达某种功能的信息传递机制及与磷脂酶A2激活相关的疾病治疗机制和药物研究具有重要意义。本文主要综述了近期... 磷脂酶参与细胞跨膜信息传递,磷脂酶A2还是机体炎症、过敏介质产生的关键酶。因此,磷脂酶抑制剂的合成研究对研究细胞表达某种功能的信息传递机制及与磷脂酶A2激活相关的疾病治疗机制和药物研究具有重要意义。本文主要综述了近期有关磷脂酶A2抑制剂的合成、结构、抑效性能、构效关系及应用前景等,对磷脂酶C和磷脂酶D的抑制剂作了简要介绍。 展开更多
关键词 磷脂酶A2 磷脂酶c 磷脂酶D 抑制剂 抗炎 抗过敏
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