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氯霉素免疫原的合成与鉴定 被引量：36
1
作者 王桂枝 石德时 +2 位作者 毕丁仁 殷斌烈 蔡立新 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期163-167,共5页
分别采用混合酸酐法和重氮化法合成氯霉素（ＣＡＰ）免疫原。混合酸酐法：将ＣＡＰ与琥珀酸酐反应生成氯霉素琥珀酸酯（ＣＡＰ－ＨＳ），接着进行混合酸酐反应，将ＣＡＰ－ＨＳ与牛血清白蛋白（ＢＳＡ）相连，得ＣＡＰ－ＨＳ－ＢＳＡ复... 分别采用混合酸酐法和重氮化法合成氯霉素（ＣＡＰ）免疫原。混合酸酐法：将ＣＡＰ与琥珀酸酐反应生成氯霉素琥珀酸酯（ＣＡＰ－ＨＳ），接着进行混合酸酐反应，将ＣＡＰ－ＨＳ与牛血清白蛋白（ＢＳＡ）相连，得ＣＡＰ－ＨＳ－ＢＳＡ复合物。重氮化法：将ＣＡＰ分子中的芳香硝基还原为芳香氨基，重氮化处理后，与ＢＳＡ连接。通过红外光谱和动物免疫试验鉴定合成的免疫原，结果表明ＣＡＰ－ＨＳ－ＢＳＡ合成成功。 展开更多
关键词 氯霉素 免疫原 合成 混合酸酐法 重氮化法
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食物不耐受的研究进展 被引量：40
2
作者 韩煦 常艳敏 《医学综述》 2012年第7期1043-1045,共3页
食物不耐受是临床上不同于食物过敏的另一种变态反应性疾病,它是机体的免疫系统针对某种或多种食物发生的过度保护性免疫反应,使机体产生特异性的IgG抗体,抗体与过敏原反应产生免疫复合物而引起机体的相关疾病。根据患者的病情制订科学... 食物不耐受是临床上不同于食物过敏的另一种变态反应性疾病,它是机体的免疫系统针对某种或多种食物发生的过度保护性免疫反应,使机体产生特异性的IgG抗体,抗体与过敏原反应产生免疫复合物而引起机体的相关疾病。根据患者的病情制订科学的饮食计划是治疗食物不耐受最佳且有效的方法。现就食物不耐受的发病机制、与相关疾病的关系及食物不耐受的检测方法等予以综述。 展开更多
关键词 食物不耐受 免疫原 IGG 食物过敏
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苦马豆素-BSA对家兔的免疫原性研究 被引量：23
3
作者 童德文 陈德坤 曹光荣 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2001年第5期11-14,共4页
用完全福氏佐剂对 14只家兔进行基础免疫 10 d后 ,将家兔随机分成 2组 ,每组 7只 ,1组为苦马豆素 - BSA免疫组 ,另 1组为对照。首免时免疫组每只兔四足掌共注射 0 .8m L,两侧大腿内侧肌肉各注射 0 .3m L,两侧颈部皮下各注射 0 .3m L,免... 用完全福氏佐剂对 14只家兔进行基础免疫 10 d后 ,将家兔随机分成 2组 ,每组 7只 ,1组为苦马豆素 - BSA免疫组 ,另 1组为对照。首免时免疫组每只兔四足掌共注射 0 .8m L,两侧大腿内侧肌肉各注射 0 .3m L,两侧颈部皮下各注射 0 .3m L,免疫总剂量为 2 m L/只 ,抗原含量 2 m g/ m L。 5周后第 1次加强免疫 ,免疫组每只兔两侧大腿内侧肌肉各注射 0 .5 m L,背部皮下 4点注射 ,每点 0 .2 5 m L,免疫总剂量为 2 m L/只 ,抗原含量 3mg/ m L。 1周后试血。 10 d后第 2次加强免疫 ,免疫途径与第 1次加强免疫相同 ,免疫总剂量为 2 m L/只 ,抗原含量 6 mg/ m L。1周后试血。结果表明 ,苦马豆素 - BSA第 1次加强免疫 1周后 ,1～ 7号兔都产生了抗体 ,间接血凝试验测定的抗体滴度分别为 2 1 ,2 1 ,2 2 ,2 1 ,2 1 ,2 2和 2 2 ,间接 EL ISA试验测定的抗体滴度分别为 2 2 ,2 2 ,2 3,2 2 ,2 2 ,2 3和 2 3。第 2次加强免疫 1周后试血 ,1～ 7号兔抗体滴度都明显升高 ,间接血凝试验测定的抗体滴度分别为 2 6 ,2 6 ,2 8,2 7,2 7,2 8和 2 8,间接 EL ISA试验测定的抗体滴度分别为 2 7,2 7,2 9,2 8,2 8,2 9和 2 9。 展开更多
关键词 苦马豆素 免疫原性 家兔 BSA 毒草
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绵羊肺炎支原体p113基因的序列分析及功能预测 被引量：24
4
作者 杨发龙 张焕容 +1 位作者 汤承 岳华 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期117-121,共5页
采用多种软件对p113基因的相似性、跨膜结构、重复序列、信号肽、抗原表位等进行预测,并与同源序列进行比较分析.结果表明,p113基因是猪肺炎支原体黏附素基因p97的直系同源基因,并具有与P97蛋白R2区类似的特征性重复序列.通过综合比较分... 采用多种软件对p113基因的相似性、跨膜结构、重复序列、信号肽、抗原表位等进行预测,并与同源序列进行比较分析.结果表明,p113基因是猪肺炎支原体黏附素基因p97的直系同源基因,并具有与P97蛋白R2区类似的特征性重复序列.通过综合比较分析,推测P113蛋白极可能是绵羊肺炎支原体的黏附素和膜表面免疫原. 展开更多
关键词 绵羊肺炎支原体 p113基因 黏附素 免疫原
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多杀性巴氏杆菌毒力因子、免疫原及重要基因研究进展 被引量：22
5
作者 王帅涛 宫强 秦翠丽 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第3期186-189,共4页
多杀性巴氏杆菌可引起禽霍乱、猪萎缩性鼻炎等多种动物疫病,是重要的动物病原微生物之一。其基因组编码的多种产物在该菌的致病性及诱导免疫应答方面具有重要作用,已成为研究的热点。作者就国内外多杀性巴氏杆菌荚膜、外膜蛋白、脂多糖... 多杀性巴氏杆菌可引起禽霍乱、猪萎缩性鼻炎等多种动物疫病,是重要的动物病原微生物之一。其基因组编码的多种产物在该菌的致病性及诱导免疫应答方面具有重要作用,已成为研究的热点。作者就国内外多杀性巴氏杆菌荚膜、外膜蛋白、脂多糖等毒力因子和免疫原及其相关基因的研究进展进行了简要概述。 展开更多
关键词 多杀性巴氏杆菌 毒力因子 免疫原 基因
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日本血吸虫不同免疫原对小鼠Th1/Th2免疫偏移的影响 被引量：13
6
作者 夏超明 骆伟 +4 位作者 龚唯 周卫芳 李允鹤 查锡良 熊思东 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第1期55-58,共4页
目的　观察单、双性日本血吸虫感染小鼠后Th1/Th2细胞因子水平的动态变化 ,探讨日本血吸虫不同免疫原对Th1/Th2免疫偏移的影响及与虫卵肉芽肿形成的相关性。方法　用ELISA夹心法检测单、双性日本血吸虫感染小鼠及单性感染 8w双性再感染 ... 目的　观察单、双性日本血吸虫感染小鼠后Th1/Th2细胞因子水平的动态变化 ,探讨日本血吸虫不同免疫原对Th1/Th2免疫偏移的影响及与虫卵肉芽肿形成的相关性。方法　用ELISA夹心法检测单、双性日本血吸虫感染小鼠及单性感染 8w双性再感染 0～ 12w ,小鼠脾淋巴细胞培养上清Th1细胞因子IL - 2、IFN -γ和Th2细胞因子IL - 4表达水平。结果　单性感染小鼠 6～ 12w在脾淋巴细胞培养上清中可测出一定量的IL - 2和IFN -γ ,但无明显动态变化 ,而IL - 4未能测出 ;双性感染小鼠IL - 2和IFN -γ在感染后 4～ 6w开始上升 ,8w达高峰 ,随后下降 ,IL - 4则在感染后 8w时迅速上升且随着感染时间延长而明显升高 ,单性感染 8w双性再感染 4w时 ,小鼠脾淋巴细胞培养上清IL - 2、IFN -γ和IL - 4表达水平即迅速升高且在双性再感染 8～ 12w逐渐增强。结论　日本血吸虫不同免疫原对Th1/Th2免疫偏移的影响作用不同 ,Th1优势应答可能主要由虫体抗原诱导 ,Th2优势应答可能主要由虫卵抗原 (SEA)所诱导 。 展开更多
关键词 日本血吸虫 免疫原 TH1/TH2细胞因子
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鲤对不同免疫原的免疫应答的比较研究 被引量：8
7
作者 陈昌福 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第5期493-498,共6页
用柱状嗜纤维菌制备的福尔马林灭活菌苗（ＦＫＣ）和提取的菌体脂多糖（ＬＰＳ）作为免疫原，注射接种鲤后，检测了供试鱼血清中凝集抗体效价和血液中白细胞吞噬活性以及采用直接荧光抗体法测定了受免鲤血液中各种淋巴细胞数量的变化。... 用柱状嗜纤维菌制备的福尔马林灭活菌苗（ＦＫＣ）和提取的菌体脂多糖（ＬＰＳ）作为免疫原，注射接种鲤后，检测了供试鱼血清中凝集抗体效价和血液中白细胞吞噬活性以及采用直接荧光抗体法测定了受免鲤血液中各种淋巴细胞数量的变化。结果表明，经ＦＫＣ和ＬＰＳ免疫后，鲤血清中凝集抗体效价分别在第４周和第３周达到峰值，血液中吞噬细胞的吞噬活性均在第２周达到峰值，而血液中Ｔ、Ｂ淋巴细胞样细胞的比率均在第２周最高，并且随免疫时间的延长而逐渐下降。 展开更多
关键词 淋巴细胞 免疫原 鲤鱼
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食品中残留19-去甲睾酮免疫原的合成与鉴定 被引量：6
8
作者 余德河 胥传来 +3 位作者 彭池方 王武康 郭金花 金征宇 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第5期195-198,共4页
19-去甲睾酮(19-nortestosteroneNT),属于半抗原生物小分子,具有免疫反应性,但不具有免疫原性。本文中19-去甲睾酮经羧甲基羟胺肟化,质谱(MS)检验后,采用混合酸酐法将肟化产物与牛血清蛋白(bovineserumalbuminBSA)偶联,紫外分光光度法... 19-去甲睾酮(19-nortestosteroneNT),属于半抗原生物小分子,具有免疫反应性,但不具有免疫原性。本文中19-去甲睾酮经羧甲基羟胺肟化,质谱(MS)检验后,采用混合酸酐法将肟化产物与牛血清蛋白(bovineserumalbuminBSA)偶联,紫外分光光度法测定其交联率为24。用此合成产物进行动物体免疫,获得了NT的多克隆抗体。经间接酶联免疫测定,其抗血清的稀释度可以达到1:102400,证明诺龙免疫原的合成成功,为诺龙酶联免疫试剂盒的研究奠定基础。 展开更多
关键词 19-去甲睾酮(NT) 混合酸酐法 多克隆抗体 间接酶联免疫 免疫原
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海豚链球菌3种免疫原对牙鲆血细胞吞噬及SOD、POD和ACP活力的影响 被引量：11
9
作者 赵娜 唐小千 +1 位作者 绳秀珍 战文斌 《中国海洋大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期33-40,共8页
本文制备海豚链球菌(Streptococcus iniae)强毒株NUF849的福尔马林灭活全菌(FKC)、胞外产物(ECPs)以及全菌与胞外产物的混合物(FKC+ECPs)3种免疫原,以其免疫牙鲆(Paralichthys olivaceus),并在免疫牙鲆后第42天分别以海豚链球菌NUF849和... 本文制备海豚链球菌(Streptococcus iniae)强毒株NUF849的福尔马林灭活全菌(FKC)、胞外产物(ECPs)以及全菌与胞外产物的混合物(FKC+ECPs)3种免疫原,以其免疫牙鲆(Paralichthys olivaceus),并在免疫牙鲆后第42天分别以海豚链球菌NUF849和NUF812攻毒。在免疫牙鲆后第7、14、21、28、35、42天及攻毒后第7天分别取样,测定血细胞吞噬能力及血清中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和酸性磷酸酶(ACP)的活力,以比较3种免疫原对这些免疫指标的影响。结果显示,免疫后尤其攻毒后,红细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜中性粒细胞等的吞噬率与吞噬指数均上升,FKC+ECPs组显著高于其他组(P<0.05);各免疫组SOD活力随时间延长而下降并趋于稳定,攻毒后各组数值有不同程度的升高,但FKC+ECPs组数值最低;免疫组POD活力先升高,第28天起下降,攻毒后各组均下降,FKC+ECPs组始终高于其他免疫组(P<0.05);免疫组ACP活力也在免疫后第28天达到峰值,以某株NUF849攻毒后FKC+ECPs组水平上升(相对于免疫后第42天),其他组显著下降;FKC、ECPs、FKC+ECPs对菌株NUF849的相对免疫保护率分别为50%、40%和90%,对NUF812的相对免疫保护率分别为60%、30%和80%,FKC+ECPs组显著高于其他组(P<0.05)。以上研究表明,各免疫组均诱导了牙鲆的非特异性免疫应答,具有一定的免疫保护效果,其中FKC+ECPs组效果最佳。 展开更多
关键词 海豚链球菌 免疫原 非特异性免疫 牙鲆
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盐酸克伦特罗的酶联免疫分析试剂盒的研制—Ⅰ克伦特罗人工抗原及抗体的制备 被引量：5
10
作者 李利东 宓晓黎 +1 位作者 袁建兴 潘荣生 《中国卫生检验杂志》 CAS 2004年第1期124-126,共3页
〔目的〕酶联免疫分析试剂盒中的关键试剂是制备CBL人工抗原和抗体。〔方法〕通过重氮偶联法制备克伦特罗人工抗原 ,不同摩尔比的克伦特罗 -牛血清白蛋白结合物免疫家兔。〔结果〕经SephadexG -75柱纯化 ,用薄层层析和紫外光谱确证 ,获... 〔目的〕酶联免疫分析试剂盒中的关键试剂是制备CBL人工抗原和抗体。〔方法〕通过重氮偶联法制备克伦特罗人工抗原 ,不同摩尔比的克伦特罗 -牛血清白蛋白结合物免疫家兔。〔结果〕经SephadexG -75柱纯化 ,用薄层层析和紫外光谱确证 ,获克伦特罗 -牛血清白蛋白结合物 ,间接酶联免疫分析法测试其效价N P >1:40 960 0。〔结论〕重氮偶联法成功制备CBL -BSA ,并获得高效价的抗血清。 展开更多
关键词 盐酸克伦特罗 酶联免疫分析试剂盒 Ⅰ克伦特罗人工抗原 抗体制备 CBL 偶合反应
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用于检测氯霉素的免疫原和包被原的制备 被引量：8
11
作者 杨小姣 张建新 高志贤 《解放军预防医学杂志》 CAS 北大核心 2007年第2期87-90,共4页
目的制备用于氯霉素快速免疫分析的免疫原和包被原,为氯霉素胶体金免疫层析试纸条的制备提供基础。方法分别采用活性酯法和重氮化法,将半抗原氯霉素与载体牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)偶联,用紫外光谱、红外光谱鉴定偶联结果并... 目的制备用于氯霉素快速免疫分析的免疫原和包被原,为氯霉素胶体金免疫层析试纸条的制备提供基础。方法分别采用活性酯法和重氮化法,将半抗原氯霉素与载体牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)偶联,用紫外光谱、红外光谱鉴定偶联结果并计算结合比。结果上述两种方法与BSA,OVA的偶联物摩尔消光系数分别为164523、49402;372723、44601,显著大于半抗原和载体蛋白。红外光谱分析进一步证实偶联成功。结论全抗原偶联成功,活性酯法和重氮化法使氯霉素半抗原与BSA,OVA的偶联比值分别为12,2;30,1。 展开更多
关键词 氯霉素 免疫原 包被原 抗原
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食品中镉离子胶体金免疫层析快速检测方法的建立及应用 被引量：9
12
作者 王亚楠 王晓斐 +3 位作者 牛琳琳 雷壮 张海棠 王自良 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第18期152-158,共7页
目的:建立更加灵敏、特异的食品镉离子胶体金免疫层析快速检测方法。方法:用1-(4-异硫氰苄基)乙烯基二胺-N,N,N’,N’-四乙酸(1-(4-isothiocyanobenzyl)ethylenediamine-N,N,N’,N’-tetraacetic acid,iEDTA)鳌合镉离子合成Cd^(2+)-iEDT... 目的:建立更加灵敏、特异的食品镉离子胶体金免疫层析快速检测方法。方法:用1-(4-异硫氰苄基)乙烯基二胺-N,N,N’,N’-四乙酸(1-(4-isothiocyanobenzyl)ethylenediamine-N,N,N’,N’-tetraacetic acid,iEDTA)鳌合镉离子合成Cd^(2+)-iEDTA半抗原,异硫氰酯法制备免疫原Cd^(2+)-iEDTA-牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)和包被原Cd^(2+)-iEDTA-鸡卵清蛋白(ovalbumin,OVA),电感耦合等离子体发射光谱法和聚丙烯酰胺凝胶法进行鉴定;用Cd^(2+)-iEDTA-BSA免疫Balb/C小鼠,细胞融合技术筛选Cd^(2+)-EDTA单克隆抗体(mAb)杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备Cd^(2+)-EDTA mAb;应用Cd^(2+)-EDTA mAb建立Cd^(2+)残留胶体金免疫层析快速检测方法 (Cd^(2+)-Strip),并测定其性能。结果:免疫原偶联成功,Cd^(2+)-iEDTA-BSA中BSA与Cd^(2+)的含量分别为7.1 mg/mL和191.7μg/mL;筛选出1A3C11、2B7D8、2E10G9、4F3E7共4株杂交瘤细胞,经9次传代分泌抗体稳定,亲和力最高的2E10G9株亲和常数(Ka)为7.58×10~8 L/mol,对Cd^(2+)-iEDTA的半数抑制浓度为16.3μg/L,与Hg^(2+)-EDTA的交叉反应(cross-reaction,CR)率为18.6%,与其他重金属离子无CR;Cd^(2+)-Strip的检测时间为10 min,检出限为5μg/L,其检测结果与竞争ELISA试剂盒(Cd^(2+)ELISA-Kit)、电感耦合等离子体发射光谱法符合率为100%。结论:制备出了亲和力高、特异性强的Cd^(2+)mAb,建立了灵敏、特异、快速、简便的食品镉离子胶体金免疫层析快速检测方法。 展开更多
关键词 镉离子 免疫原 单克隆抗体 胶体金免疫层析 快速检测
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莱克多巴胺的抗原合成鉴定及其抗体的制备纯化 被引量：8
13
作者 许文涛 黄昆仑 +1 位作者 邓爱科 罗云波 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第12期29-33,共5页
莱克多巴胺属于β-兴奋剂类药物中的苯乙醇类衍生物,具有显著改善动物饲料利用效率,显著提高胴体瘦肉率的生产性能,因为其具有严重的副作用所以目前该类药物在我国和其他国家是被禁用的。本试验通过连接剂butane-1,4-dioldiglyciydylet... 莱克多巴胺属于β-兴奋剂类药物中的苯乙醇类衍生物,具有显著改善动物饲料利用效率,显著提高胴体瘦肉率的生产性能,因为其具有严重的副作用所以目前该类药物在我国和其他国家是被禁用的。本试验通过连接剂butane-1,4-dioldiglyciydylether把莱克多巴胺和载体蛋白BSA和OVA偶联成免疫抗原和包被抗原,并采用紫外全波长扫描和SDS-聚丙烯酰胺凝胶的方法对合成的抗原进行了鉴定。通过免疫兔子获得了RCT的多克隆抗体,然后又通过饱和硫铵沉淀和proteinA-Sepharose4B的方法对抗体进行了纯化。纯化的抗体表现出对RCT较高的特异性和灵敏性。 展开更多
关键词 莱克多巴胺 免疫抗原 包被抗原 多克隆抗体 酶联免疫检测技术
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藻毒素免疫抗原的制备及鉴定 被引量：7
14
作者 赵晓联 孙蔚榕 +1 位作者 孙秀兰 汤坚 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期726-729,共4页
目的为建立藻毒素(MCLR)免疫学检测方法,制备具免疫功能的MCLR完全抗原。方法根据MCLR分子中的羧基和蛋白质分子中的氨基,利用“活泼酯法”和“碳二亚胺法”分别制备MCLRKLH(匙孔血蓝蛋白)免疫抗原和MCLRBSA(牛血清白蛋白)检测抗原。结... 目的为建立藻毒素(MCLR)免疫学检测方法,制备具免疫功能的MCLR完全抗原。方法根据MCLR分子中的羧基和蛋白质分子中的氨基,利用“活泼酯法”和“碳二亚胺法”分别制备MCLRKLH(匙孔血蓝蛋白)免疫抗原和MCLRBSA(牛血清白蛋白)检测抗原。结果用紫外光谱法(UV)和Bradford蛋白含量测定法鉴定,结合物中MCLR与KLH、BSA的结合摩尔比为9.1∶1和9.4∶1。采用“皮下注射法”用MCLRKLH免疫新西兰大白兔15周,取血清,用“间接酶联免疫吸附法”(id-ELISA)鉴定抗MCLR多克隆抗体效价,最高达1∶25600。结论证明制备的MCLRKLH具有免疫性。 展开更多
关键词 藻毒素 免疫抗原 制备
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氯霉素人工免疫原的合成与鉴定 被引量：6
15
作者 熊清明 杨先乐 王民权 《上海水产大学学报》 CSCD 2004年第3期279-282,共4页
关键词 氯霉素 琥珀酸酐法 人工免疫原
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原因不明复发性流产主动免疫治疗中三种免疫原的疗效比较 被引量：7
16
作者 徐亮 邱丽华 +4 位作者 林其德 汪希鹏 赵爱民 丁传伟 吕彩君 《中国实用妇科与产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期757-759,共3页
目的探讨采用不同免疫原的淋巴细胞进行主动免疫治疗原因不明复发性流产(unexplained RSA,URSA)的安全性和有效性。方法选择1995年1月至2006年12月在上海交通大学医学院附属仁济医院就诊260例URSA患者进行主动免疫治疗,免疫原根据临床... 目的探讨采用不同免疫原的淋巴细胞进行主动免疫治疗原因不明复发性流产(unexplained RSA,URSA)的安全性和有效性。方法选择1995年1月至2006年12月在上海交通大学医学院附属仁济医院就诊260例URSA患者进行主动免疫治疗,免疫原根据临床情况采用三种:丈夫的淋巴细胞、男性或女性无关第三个体的淋巴细胞。结果除外胚胎绒毛染色体异常的病例(10例)所得纠正妊娠成功率:接受丈夫的淋巴细胞成功率为87.28%(151/173);接受男性无关第三个体淋巴细胞为75.81%(47/62);接受女性无关第三个体淋巴细胞为86.67%(13/15)。三者比较差异无统计学意义(P>0.05)。总成功率为84.40%(211/250),同时采用三种免疫原免疫均未见明显副反应。结论对URSA患者采用不同免疫原的淋巴细胞进行主动免疫,具有相似的疗效和安全性。 展开更多
关键词 主动免疫 原因不明复发性流产 免疫原
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氯霉素全抗原的合成及鉴定 被引量：6
17
作者 王雪 黄飚 +1 位作者 金坚 屠蔷 《生物技术通报》 CAS CSCD 2008年第1期177-180,共4页
为建立氯霉素的免疫分析方法,采用混合酸酐法和重氮化法,将半抗原氯霉素(CAP)与载体牛血清白蛋白(BSA)及卵清蛋白(OVA)偶联制备免疫抗原CAP-BSA和包被抗原CAP-OVA。以紫外扫描确定偶联率,并用酶联免疫(ELISA)的方法鉴定,确定偶联成功。... 为建立氯霉素的免疫分析方法,采用混合酸酐法和重氮化法,将半抗原氯霉素(CAP)与载体牛血清白蛋白(BSA)及卵清蛋白(OVA)偶联制备免疫抗原CAP-BSA和包被抗原CAP-OVA。以紫外扫描确定偶联率,并用酶联免疫(ELISA)的方法鉴定,确定偶联成功。经过比较,混合酸酐法优于重氮化法。 展开更多
关键词 氯霉素 免疫原 合成 混合酸酐法 重氮化法
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环孢菌素A人工抗原的制备 被引量：2
18
作者 刘一超 戴晓雁 +3 位作者 黄文才 范昕建 陈米娜 冯萍 《四川大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期407-411,共5页
在紫外光激发下使环孢菌素A(CsA)与 4 苯甲酰苯甲酸 (BBa)反应 ,生成含活泼羧基的CsA BBa轭合物 ,再在 1 乙基 3 (3 二甲氨基丙基 )碳二亚胺 (EDCI)作用下 ,使之与聚L 赖氨酸 (PL)偶联 ,从而制得了一种新颖的CsA人工抗原 .用UV ,IR和1H... 在紫外光激发下使环孢菌素A(CsA)与 4 苯甲酰苯甲酸 (BBa)反应 ,生成含活泼羧基的CsA BBa轭合物 ,再在 1 乙基 3 (3 二甲氨基丙基 )碳二亚胺 (EDCI)作用下 ,使之与聚L 赖氨酸 (PL)偶联 ,从而制得了一种新颖的CsA人工抗原 .用UV ,IR和1HNMR谱证实了CsA BBa轭合物的结构 ,偶联效率达平均分子量为 40 0 0 0的PL分子上 13 1～ 17 4个CsA分子 . 展开更多
关键词 环孢菌素A 人工抗原 4-苯甲酰苯甲酸 聚L-赖氨酸 免疫抑制剂
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乙脑病毒PrM/E基因在杆状病毒表达系统中的表达 被引量：3
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作者 刘金华 郭玉璞 +3 位作者 陈永福 史为民 杨汉春 高福 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第6期546-552,共7页
本试验将乙型脑炎病毒（ＪＥＶ）的ＰｒＭ／Ｅ基因的ＨｉｎｄⅢ－ＢｇｌⅡ片段（２．１ｋｂ）插入到杆状病毒载体ｐＡｃＵＷ３１的ＢａｍＨＩ位点，使外源基因置于多角体蛋白启动子下游，构建成转移载体ｐＡｃＵＷ３１ＪＥ。以Ｌｉｐｏ... 本试验将乙型脑炎病毒（ＪＥＶ）的ＰｒＭ／Ｅ基因的ＨｉｎｄⅢ－ＢｇｌⅡ片段（２．１ｋｂ）插入到杆状病毒载体ｐＡｃＵＷ３１的ＢａｍＨＩ位点，使外源基因置于多角体蛋白启动子下游，构建成转移载体ｐＡｃＵＷ３１ＪＥ。以Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ作为共转染试剂，将纯化的ｐＡｃＵＷ３１ＪＥ与Ｂｓｕ３６Ⅰ线性化的杆状病毒ＡｃＭＮＰＶ·ＬａｃＺＤＮＡ共转染昆虫细胞ｓｆ９，经病毒蚀斑纯化技术和Ｘ－ｇａｌ与中性红双重染色技术，随机挑取了５个白斑并进一步纯化，用间接荧光抗体技术对挑取的５个白斑感染的ｓｆ９细胞染色，３个克隆在细胞核和细胞浆内呈现特异荧光，２个无特异性荧光。用地高辛标记ＰｒＭ／ＥｃＤＮＡ的ＨｉｎｄⅢ－ＢｇｌⅡ片段，制备了核酸探针，用该探针通过斑点杂交技术对５个白斑进行检测。结果发现，３个为重组的阳性克隆，２个为假阳性，该结果与荧光抗体染色的结果相一致。间接荧光抗体染色的结果也说明ｓｆ９细胞表达了所期望的产物，进而也说明了基因片段的正确性。ｐＡｃＵＷＪＥ转移载体的构建，为ｐＡｃＵＷＪＥ－ＰＰＶ的构建奠定了基础，为ＪＥＶ和ＰＰＶ二价重组苗的研究提供了保障。 展开更多
关键词 乙型脑炎病毒 杆状病毒 PrM/E基因 猪病
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鸡白痢沙门菌ipaJ基因的克隆与鉴定 被引量：6
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作者 李求春 徐耀辉 +1 位作者 黄金林 焦新安 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1545-1549,共5页
【目的】从鸡白痢沙门菌C79-13中克隆ipaJ基因,体外表达该蛋白后进行免疫原性分析。【方法】鸡白痢沙门菌C79-13与肠炎沙门菌50041进行抑制差减杂交后获得的片段PEA2、PE31和PE44与猪霍乱沙门菌C500疫苗株pSFD10质粒上ipaJ基因高度同源... 【目的】从鸡白痢沙门菌C79-13中克隆ipaJ基因,体外表达该蛋白后进行免疫原性分析。【方法】鸡白痢沙门菌C79-13与肠炎沙门菌50041进行抑制差减杂交后获得的片段PEA2、PE31和PE44与猪霍乱沙门菌C500疫苗株pSFD10质粒上ipaJ基因高度同源,拼接后获得了鸡白痢沙门菌完整的ipaJ基因序列。从鸡白痢沙门菌中克隆出ipaJ基因并将其构建到原核表达载体pET-30a(+)上,Western-blot检测体外表达蛋白的免疫原性,同时检测了该基因在鸡白痢沙门菌分离株中的分布。【结果】从鸡白痢沙门菌中克隆了大小为840bp的ipaJ基因序列,并获得了体外原核表达的大小为37kDa融合蛋白。该蛋白可与鸡白痢沙门菌阳性血清反应。PCR结果显示该基因广泛存在于鸡白痢沙门菌菌株中。【结论】本文首次报道和克隆了鸡白痢沙门菌ipaJ基因,并证明了IpaJ蛋白具有免疫原性。 展开更多
关键词 鸡白痢沙门菌 ipaJ 克隆 免疫原
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