期刊文献+
共找到8,877篇文章
< 1 2 250 >
每页显示 20 50 100
牛卵泡液对牛卵母细胞体外成熟的影响 被引量:35
1
作者 石德顺 卢克焕 《广西农业大学学报》 CSCD 1994年第1期1-5,共5页
本研究系统探讨了牛卵泡液(BFF)对牛卵母细胞体外成熟的影响。在成熟培养液中添加10%的BFF,明显提高牛卵母细胞体外成熟后的囊胚发育率(45.1%比28.2%,P<0.05),虽然该处理对牛卵母细胞体外成熟后的受精... 本研究系统探讨了牛卵泡液(BFF)对牛卵母细胞体外成熟的影响。在成熟培养液中添加10%的BFF,明显提高牛卵母细胞体外成熟后的囊胚发育率(45.1%比28.2%,P<0.05),虽然该处理对牛卵母细胞体外成熟后的受精分裂率无明显影响(87.5%比87.5%)。然而,当BFF在成熟培养液中的浓度提高到40%时,卵母细胞体外成熟后的受精分裂率(68.6%)和囊胚发育率(16.6%)均明显下降(P<0.05)。来自不同大小卵泡(2~5mm,5.1~8mm和大于8mm)BFF的卵母细胞体外成熟培养效果无明显差异,只是来自大于8mm卵泡的BFF将卵母细胞粘在一起,明显地降低成熟培养后的可用卵母细胞数。在成熟培养液中加入激素(2.5×103iu/L促性腺激素(HCG),50iu/L促乳素,0.05mg/L胰岛素、睾酮和雌二醇)对BFF的卵母细胞成熟培养效果无影响。这些结果表明,在成熟培养液中添加一定浓度的BFF可促进牛卵母细胞获得胚胎发育能力,BFF的这一作用与其来源的卵泡大小和激素的存在与否无关。 展开更多
关键词 卵泡液 体外成熟 卵母细胞
原文传递
Get effective polyclonal antisera in one month 被引量:45
2
作者 YUAN XIN HU, Ju YUAN QUO, Lu SHEN, YAN CHEN, Zu CHUAN ZHANG, YONG LIAN ZHANGState Key Laboratory of Molecular Biology, Institute of Biochemistry and Cell Biology, Shanghai Institutes for Biological Sciences, Chinese Academy of Sciences, 320 Yue Yang Road, 《Cell Research》 SCIE CAS CSCD 2002年第2期157-160,共4页
According to the traditional immunization procedure, after the first injection of the sample A (emulsion of aimed antigen and Freund's complete adjuvant) to immunize rabbit, successive injections of the sample B (... According to the traditional immunization procedure, after the first injection of the sample A (emulsion of aimed antigen and Freund's complete adjuvant) to immunize rabbit, successive injections of the sample B (emulsion of aimed antigen and Freund's incomplete adjuvant) were followed every 2-4 weeks. In general,high titer of the corresponding polyclonal antisera will be observed after 4-5 injections of sample B in 3-4months. This report presents a simply modified procedure that was able to stimulate the antisera formation in one month and achieve enough avidity to satisfy either Western blot or immunohistochemistry analysis.It just applied an additional injection of the sample A to the rabbit at the 3rd day after the primary immunization injection. You could gain the high titer of the antisera right after the first sample B injection in one month. This method has produced the desired results in three different recombinant antigens with different molecular weight (5.9 KD-55 KD) expressed from prokaryotic or eukaryotic cells. 展开更多
关键词 Antibody Formation Immunologic Techniques Animals Blotting Western Emulsions Freund's Adjuvant Immune Sera Immunohistochemistry MICE Mice Inbred BALB C Rabbits Rats Research Support Non-U.S. Gov't Serum Albumin bovine Specific Pathogen-Free Organisms Time Factors
下载PDF
牛胚胎性别鉴定与取样胚胎移植应用技术的研究 被引量:42
3
作者 胡明信 吴学清 +6 位作者 曾溢滔 黄英 陈美珏 高建明 谢富强 张美兰 任兆瑞 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第6期487-495,共9页
本研究应用PCR技术扩增牛SRY序列进行奶牛胚胎性别鉴定。经109枚鲜、冻胚的移植,获鲜胚移值妊娠率58.6%(34/58),常规冷冻胚胎移植妊娠率44.4%(12/27),一步细管冷冻解冻胚胎移值妊娠率16.7%(... 本研究应用PCR技术扩增牛SRY序列进行奶牛胚胎性别鉴定。经109枚鲜、冻胚的移植,获鲜胚移值妊娠率58.6%(34/58),常规冷冻胚胎移植妊娠率44.4%(12/27),一步细管冷冻解冻胚胎移值妊娠率16.7%(4/24)。犊牛性别验证与SRY鉴定结果均相符合。实验中对胚胎发育时期的划分,胚胎质量评定和胚龄的确定,胚龄与受体发情时间在移植中的关系,胚胎的切割取样,取样胚胎的冷冻进行了研究。 展开更多
关键词 胚胎 SRY 性别鉴定 移植
下载PDF
OPS法玻璃化冷冻牛卵母细胞的研究 被引量:33
4
作者 朱士恩 曾申明 +3 位作者 吴通义 孟庆刚 张忠诚 陈永福 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期700-704,T005,共6页
用自己现用现配的玻璃化溶液 (EFS4 0、EFS5 0和EDFS30、EDFS4 0 )对二步平衡后的牛体外培养的卵母细胞进行OPS(openpulledstraw)法冷冻保存研究。体外分别培养 6h或 2 2h的牛卵母细胞冷冻解冻后再经 18h或2h培养后 ,经体外受精 ,最高... 用自己现用现配的玻璃化溶液 (EFS4 0、EFS5 0和EDFS30、EDFS4 0 )对二步平衡后的牛体外培养的卵母细胞进行OPS(openpulledstraw)法冷冻保存研究。体外分别培养 6h或 2 2h的牛卵母细胞冷冻解冻后再经 18h或2h培养后 ,经体外受精 ,最高囊胚发育率分别达到 12 %和 17% ;经化学孤雌激活后 ,最高囊胚发育率分别达到2 2 %和 2 4 % ,与对照组 (33% )差异不显著 (P >0 .0 5 )。 展开更多
关键词 OPS法 玻璃化冷冻 牛卵母细胞
下载PDF
北京地区奶牛乳房炎阳性率及发生规律的研究 被引量:35
5
作者 吴国娟 张中文 +1 位作者 沈红 孔刚 《北京农学院学报》 2001年第3期43-46,共4页
本次试验采用体细胞计数法,4 %苛性钠法,CMT法对北京地区 4个奶牛场的奶牛进行了乳房炎的检测。结果表明奶年场奶牛隐性乳房炎头数阳性率为 4 7 2 2 %,临床型乳房炎头数阳性率为 4 86%,乳区阳性率为 4 4 4 4 %
关键词 奶牛 乳房炎 阳性率
下载PDF
牛乳腺上皮细胞的分离培养 被引量:31
6
作者 李震 王英 +1 位作者 刘惠莉 张德福 《上海农业学报》 CSCD 2000年第3期25-28,共4页
比较了几种乳腺细胞分离培养方法的特点。实验证明 :胶原酶消化法和组织块种植法均可用于培养牛原代乳腺细胞。其中 ,胶原酶消化法容易得到均匀的乳腺细胞 ,且上皮细胞所占比例也比较高 ;组织块培养法不容易丢失、损伤上皮细胞 ,但上皮... 比较了几种乳腺细胞分离培养方法的特点。实验证明 :胶原酶消化法和组织块种植法均可用于培养牛原代乳腺细胞。其中 ,胶原酶消化法容易得到均匀的乳腺细胞 ,且上皮细胞所占比例也比较高 ;组织块培养法不容易丢失、损伤上皮细胞 ,但上皮细胞长出较晚 ,且占比例较低 ,然而 ,用于培养小动物乳腺组织具有优势 ,并且可结合组织块转移、胰蛋白酶消化纯化上皮细胞 ,用此方法本实验获得了牛乳腺上皮细胞富集的细胞系 ;同时讨论了乳腺上皮细胞增殖与分化的关系 。 展开更多
关键词 牛乳腺上皮细胞 分离培养 胶原酶消化法 组织块种植法 细胞增殖 细胞分化
下载PDF
牛FSHR基因第10外显子单核苷酸多态性及其与双胎性状的关系 被引量:32
7
作者 雷雪芹 陈宏 +3 位作者 袁志发 徐廷生 雷初朝 孙维斌 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期34-37,共4页
以秦川牛和荷斯坦奶牛的双胎母牛和单胎母牛为实验材料 ,以牛的FSHR基因的第 10个外显子作为标记牛双胎性状的候选基因 ,用SNP法进行了多态检测 .结果发现 ,在秦川牛的双胎母牛中突变率 6 0 % (6 10 ) ,而在单胎母牛中突变率为 2 0 % (... 以秦川牛和荷斯坦奶牛的双胎母牛和单胎母牛为实验材料 ,以牛的FSHR基因的第 10个外显子作为标记牛双胎性状的候选基因 ,用SNP法进行了多态检测 .结果发现 ,在秦川牛的双胎母牛中突变率 6 0 % (6 10 ) ,而在单胎母牛中突变率为 2 0 % (2 10 ) ;在荷斯坦奶牛中 ,双胎母牛突变率为31 2 5 % (5 16 ) ,单胎母牛突变率为 6 6 7% (1 15 ) ;由此可见双胎牛和单胎牛二者之间FSHR基因的第 10个外显子的突变率差异明显 .这表明 ,选择FSHR基因的第 10个外显子有可能作为双胎性状的候选基因 .序列分析发现 ,在FSHR基因的第 15 0 6位碱基发生了突变 (T→C) ,但氨基酸没有发生变化 . 展开更多
关键词 FSHR基因 第10外显子 单核苷酸多态性 双胎性状
下载PDF
多重实时荧光PCR检测牛、山羊和绵羊源性成分 被引量:43
8
作者 曾少灵 秦智锋 +9 位作者 阮周曦 花群义 卢体康 吕建强 陈书琨 曹琛福 张彩虹 孙洁 陈兵 吴绍精 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期139-146,共8页
根据牛、山羊和绵羊线粒体细胞色素b基因序列,设计特异性引物和以不同荧光素标记的Taqman探针。通过对PCR反应体系和反应条件的优化筛选,建立能同时鉴别牛、山羊和绵羊源性成分的多重实时荧光PCR方法。采用本文方法与国标GB/T20190-200... 根据牛、山羊和绵羊线粒体细胞色素b基因序列,设计特异性引物和以不同荧光素标记的Taqman探针。通过对PCR反应体系和反应条件的优化筛选,建立能同时鉴别牛、山羊和绵羊源性成分的多重实时荧光PCR方法。采用本文方法与国标GB/T20190-2006方法分别对17种不同源性动物DNA和200份不同来源样品DNA进行牛羊源性成分检测,数据显示两者检测结果符合率达100%,特异性相当。与国标方法相比,本试验方法不需电泳、酶切和测序,即可在一个PCR反应中同时鉴别检测牛、山羊和绵羊3种源性成分,检测效率提高近3倍;灵敏度更高,比国标方法灵敏10倍;适用性更广,除了饲料,还适用于肉品、奶品、生皮和动物油脂等动物产品的牛羊源性成分检测。 展开更多
关键词 细胞色素B基因 多重实时荧光PCR 山羊和绵羊源性成分
原文传递
牛血清免疫球蛋白的盐析法提取与纯化 被引量:32
9
作者 岳喜庆 冯巧萍 +2 位作者 张和平 刘长江 孟宪文 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2005年第3期16-21,共6页
选取饱和硫酸铵、辛酸-硫酸铵、饱和硫酸钠三种盐析方法,对牛血清中的免疫球蛋白进行分离提取,得到免疫球蛋白的粗提物。通过比较三种方法的提取得率和产品回收率确定采用饱和硫酸铵沉淀法提取效果最佳。其提取得率为9.06g/L,产品回收率... 选取饱和硫酸铵、辛酸-硫酸铵、饱和硫酸钠三种盐析方法,对牛血清中的免疫球蛋白进行分离提取,得到免疫球蛋白的粗提物。通过比较三种方法的提取得率和产品回收率确定采用饱和硫酸铵沉淀法提取效果最佳。其提取得率为9.06g/L,产品回收率为91%,是最适合对血清中免疫球蛋白进行粗提的盐析方法。 展开更多
关键词 血清 免疫球蛋白 提取
下载PDF
牛卵母细胞体外成熟及体外受精的研究 被引量:25
10
作者 崔亚利 桑润滋 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期67-70,共4页
本研究分析了卵巢不同性周期阶段(卵泡期、黄体期)、外源激素(FSH、LH、雌激素)和不同卵泡液浓度(10%,20%,30%)对卵母细胞体外成熟的影响。结果表明,卵巢的不同性周期阶段对卵母细胞体外成熟的影响不大(63... 本研究分析了卵巢不同性周期阶段(卵泡期、黄体期)、外源激素(FSH、LH、雌激素)和不同卵泡液浓度(10%,20%,30%)对卵母细胞体外成熟的影响。结果表明,卵巢的不同性周期阶段对卵母细胞体外成熟的影响不大(639%和587%);成熟培养基中添加FSH(10mg/L),LH(5mg/L)和同时添加LH、雌二醇(1mg/L),可以促进卵母细胞的体外成熟,成熟率分别为630%,640%,691%;卵泡液(10%,20%,30%)代替血清,其成熟率分别为507%,576%,519%,20%bFF效果最好。本研究对精子的两种处理方法进行了比较,发现在相同精子密度条件下(1×106~2×106个/mL),Percol液处理精子的受精率(471%)显著低于上浮法处理精子的受精率(571%)(P<005)。 展开更多
关键词 卵母细胞 体外成熟 体外受精
下载PDF
牛TLR4基因的遗传多态性与乳房炎的关联分析 被引量:36
11
作者 王兴平 许尚忠 +3 位作者 马腾壑 高雪 任红艳 陈金宝 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期120-124,共5页
TLR4通过识别病原体而激活免疫细胞,在先天免疫和适应性免疫防御中起着重要作用。以中国荷斯坦奶牛、三河牛和中国西门塔尔牛共397头为研究对象,利用创造酶切位点PCR法扩增243 bp的目的片段,通过限制性内切酶HinfⅠ酶切来检测TLR4第3外... TLR4通过识别病原体而激活免疫细胞,在先天免疫和适应性免疫防御中起着重要作用。以中国荷斯坦奶牛、三河牛和中国西门塔尔牛共397头为研究对象,利用创造酶切位点PCR法扩增243 bp的目的片段,通过限制性内切酶HinfⅠ酶切来检测TLR4第3外显子的多态性,结果发现扩增产物的27 bp处C到T的突变使得多态位点产生,编码的氨基酸由苏氨酸变为异亮氨酸。A、B 2个等位基因在3个群体中均有分布,A等位基因占优势(大于78%),经χ2适合性检验,三河牛在该位点未达到Hardy-Weinberg平衡状态(P<0.05)。运用SAS 8.2软件采用最小二乘法拟合线性模型,将该基因座不同基因型与奶牛乳房炎进行了关联分析,结果表明:AA基因型为乳房炎抗性基因型(P<0.05),A等位基因为乳房炎抗性的有利基因。 展开更多
关键词 TLR4基因 CRS-PCR PCR-RFLP 乳房炎 体细胞数 体细胞评分
下载PDF
牛颈静脉带瓣管道结构特性及流体动力学的实验研究 被引量:29
12
作者 吴忠仕 张竟超 +3 位作者 程端 杨晓涵 陈金兰 胡建国 《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第3期298-300,共3页
目的 :探讨牛颈静脉带瓣管道结构形态及其流体动力学特性。方法 :取新鲜牛颈静脉带瓣管道 ,应用自制的流量测定装置 ,在相同压力下测定其在一定时间内顺行和逆行灌注量 ,根据逆行与顺行流量的百分比将瓣膜功能分级。重复测量以 0 .6 2 ... 目的 :探讨牛颈静脉带瓣管道结构形态及其流体动力学特性。方法 :取新鲜牛颈静脉带瓣管道 ,应用自制的流量测定装置 ,在相同压力下测定其在一定时间内顺行和逆行灌注量 ,根据逆行与顺行流量的百分比将瓣膜功能分级。重复测量以 0 .6 2 5 %戊二醛液固定的牛颈静脉管道的顺逆行灌注流量 ,观察静脉瓣膜解剖结构。结果 :牛颈静脉管道常有 2~ 3组瓣膜 ,瓣叶菲薄、透明。每组瓣可为三叶或两叶 ,少数为四叶。各组瓣叶发育程度不一 ,发育良好的组瓣呈散在分布。瓣膜抗返流功能和瓣膜与瓣窦高度之比值呈正相关 (r =0 .70 9,P <0 .0 0 1 ) ;瓣膜抗返流功能与瓣叶数和管径之间不相关 (P >0 .0 5 )。固定前后其逆行与顺行灌注流量百分比差异有显著性 (P<0 .0 5 )。结论 :部分牛颈静脉具有发育良好的瓣膜 ,抗返流特性好。 展开更多
关键词 牛颈静脉带瓣管道 结构特性 流体动力学 实验研究
下载PDF
电激活对完全体外化牛细胞核移植的影响 被引量:20
13
作者 李雪峰 谭丽玲 +1 位作者 石德顺 谭世俭 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第6期495-500,共6页
牛卵母细胞在体外成熟23~24h时去核,去核卵用80V/mm40μs两次电脉冲激活(Ⅰ组)或不激活(Ⅱ组),然后将体外受精、发育的8~32细胞期胚胎的单个卵裂球注入卵周隙,用80V/mm40μs两次电脉冲诱导卵裂球与... 牛卵母细胞在体外成熟23~24h时去核,去核卵用80V/mm40μs两次电脉冲激活(Ⅰ组)或不激活(Ⅱ组),然后将体外受精、发育的8~32细胞期胚胎的单个卵裂球注入卵周隙,用80V/mm40μs两次电脉冲诱导卵裂球与去核卵母细胞融合。Ⅰ组操作后存活率和融合率(88.4%和55.0%)显著低于Ⅱ组(95.9%和65.1%,P<0.05)。融合卵体外培养24h和5~8d后,Ⅰ组核移植胚胎的卵裂率和桑椹/囊胚发育率(63.0%和15.2%)与Ⅱ组(50.5%和7.8%)无显著差异,但Ⅰ组结果均好于Ⅱ组。将来自两组的25枚桑椹和囊胚移植到16头同期受体,在已检查过的8头受体中2头受体妊娠,其中1头于妊娠后4个多月流产,1头于妊娠期满后产出一雄性牛犊。研究结果表明:去核卵母细胞的电激活尽管对重组卵的存活与融合不利,但可改善核移植胚的卵裂和发育。本研究在我国首次获得牛细胞核移植的成功,证明用IVM卵母细胞和IVF胚胎进行完全体外化的牛细胞核移植是可行的。 展开更多
关键词 电激活 体外成熟 体外受精 细胞核移植
下载PDF
牛皮肤成纤维细胞的体外培养与冻存 被引量:27
14
作者 任芳丽 李煜 张涌 《黄牛杂志》 2002年第1期8-10,共3页
利用牛皮肤组织块直接培养法 ,得到牛皮肤细胞的原代培养物 ,再用酶消化法和反复贴壁法处理 ,能够纯化成纤维细胞。成纤维细胞的冻存是通过选用 6种分别含有二甲基亚砜( DMSO)、甘油 ( GL)及乙二醇 ( EG)的保护液 ;以相同的冻前处理方... 利用牛皮肤组织块直接培养法 ,得到牛皮肤细胞的原代培养物 ,再用酶消化法和反复贴壁法处理 ,能够纯化成纤维细胞。成纤维细胞的冻存是通过选用 6种分别含有二甲基亚砜( DMSO)、甘油 ( GL)及乙二醇 ( EG)的保护液 ;以相同的冻前处理方法 ,对牛皮肤成纤维细胞进行缓慢冷冻 ,冰箱预冷平衡 1~ 2 h,逐步投入液氮 ( - 1 96℃ )中保存 ,再经 37℃水浴解冻 ,Hanks液脱保护剂 ,以贴壁率评价冻存效果。结果表明 ,2 0 % DMSO保护液对牛皮肤成纤维细胞表现出较好且稳定的冷冻保护效果 ,其平均贴壁率达 87.9%。 展开更多
关键词 皮肤成纤维细胞 体外培养 冷冻保存液 细胞核移植技术 胚胎工程
下载PDF
人参皂甙Rg_1抗OxLDL诱导内皮细胞凋亡及分子机制 被引量:18
15
作者 李志刚 蓝荣芳 +1 位作者 关丽 刘正湘 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2002年第3期248-252,353,共6页
目的 探讨人参皂甙Rg1抑制氧化低密度脂蛋白 (oxidizedlow densitylipoprotein ,OxLDL)诱导血管内皮细胞凋亡的作用及其相关分子机制。方法以体外培养的牛主动脉内皮细胞为模型 ,分别加入OxLDL2 0 0 μg/ml (OxLDL组 )和OxLDL 2 0 0 μ... 目的 探讨人参皂甙Rg1抑制氧化低密度脂蛋白 (oxidizedlow densitylipoprotein ,OxLDL)诱导血管内皮细胞凋亡的作用及其相关分子机制。方法以体外培养的牛主动脉内皮细胞为模型 ,分别加入OxLDL2 0 0 μg/ml (OxLDL组 )和OxLDL 2 0 0 μg/ml+Rg140 μg/ml (Rg1组 ) ,对照组不加任何诱导物 ,培养 2 4小时后观察细胞形态变化 ,DNA电泳、TUNEL染色检测细胞有无凋亡及凋亡的程度 ,Westernblot分析各组内皮细胞型一氧化氮合酶 (endothelialNitricOxideSynthase,eNOS)的表达水平。结果①对照组和OxLDL组血管内皮细胞凋亡比例分别为 8%和 4 1 35 % ;②Rg1组血管内皮细胞凋亡比例为 13 2 9% ;③OxLDL抑制牛主动脉内皮细胞的eNOS表达水平 ,此抑制作用具有剂量依赖性。人参皂甙Rg1可使被OxLDL抑制的eNOS表达水平回升。结论①OxLDL能诱导血管内皮细胞凋亡 ;②人参皂甙Rg1能抑制OxLDL诱导的血管内皮细胞凋亡 ;③此作用可能与上调内皮细胞的eNOS水平。 展开更多
关键词 人参皂甙Rg1 分子机制 氧化低密度脂蛋白 内皮细胞凋亡 抗凋亡 内皮细胞型一氧化氮合酶 抗损伤作用 动脉粥样硬化
下载PDF
牛羊布鲁氏菌病四种血清学检测方法对比分析 被引量:35
16
作者 齐景文 依颖新 +3 位作者 周艳红 雷蕾 杨蕴力 李祺 《中国动物检疫》 CAS 2015年第4期57-59,共3页
[目的 ]对布鲁氏菌病的几种检测方法进行比对分析,为国家标准修订提供参考。[方法 ]对收集到的669份血清样本用虎红平板凝集试验(RBT)、试管凝集试验(SAT)、补体结合试验(CFT)和酶联免疫吸附试验(ELISA)方法进行检测,比较四种检测方法... [目的 ]对布鲁氏菌病的几种检测方法进行比对分析,为国家标准修订提供参考。[方法 ]对收集到的669份血清样本用虎红平板凝集试验(RBT)、试管凝集试验(SAT)、补体结合试验(CFT)和酶联免疫吸附试验(ELISA)方法进行检测,比较四种检测方法的一致性、敏感性与特异性。[结果 ]RBT、SAT、CFT、ELISA四种牛羊布鲁菌病的血清学检测方法一致率较高,Kappa值均大于或等于0.75。RBT敏感性较高,CFT特异性好,而SAT有一定的假阳性和假阴性,ELISA的敏感性和特异性都比较理想。[结论 ]用RBT初筛,用CFT和ELISA联合诊断结果较为理想。 展开更多
关键词 布鲁氏菌病 RBT SAT CFT ELISA
下载PDF
微卫星标记及其在牛遗传育种中的应用 被引量:17
17
作者 张吉清 赵宗胜 +1 位作者 李大全 徐杰 《黄牛杂志》 2001年第3期1-5,9,共6页
微卫星标记技术是目前在动物遗传标记研究中运用较广泛的一种分子标记技术。本文介绍了微卫星标记技术的基础理论及分析方法 ,并对其在牛遗传育种研究中的应用进行阐述。
关键词 微卫星标记 遗传育种 结构 统计量
下载PDF
影响精液质量的几个冷冻技术因素 被引量:27
18
作者 渊锡藩 张一玲 邢小军 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第3期225-230,共6页
本文提出冷冻精液生产工艺的技术关键是由冷冻温度和降温速度所构成的精液冷冻温度曲线。通过对国内15个省、市级牛冷冻精液生产单位的生产工艺程序进行监测,对细管型及颗粒型精液冷冻温度曲线的类型。存在的问题及其影响因素进行了... 本文提出冷冻精液生产工艺的技术关键是由冷冻温度和降温速度所构成的精液冷冻温度曲线。通过对国内15个省、市级牛冷冻精液生产单位的生产工艺程序进行监测,对细管型及颗粒型精液冷冻温度曲线的类型。存在的问题及其影响因素进行了分析研究,提出了提高牛冷冻精液质量的建议。 展开更多
关键词 冷冻精液 温度曲线 液氮
下载PDF
奶牛γ-干扰素基因克隆及其在大肠杆菌中表达 被引量:19
19
作者 许金俊 秦爱建 +2 位作者 刘岳龙 金文杰 李瑞芳 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 2003年第1期5-9,共5页
根据奶牛γ干扰素 ( Bov IFN-γ)基因的 c DNA序列设计 1对引物 ,应用一步法逆转录聚合酶链式反应 ( RT-PCR)技术从奶牛脾淋巴细胞的总 RNA中扩增出特异性片段。将 RT-PCR产物克隆到 Pucm-T载体中 ,经过限制性酶切分析、测序证实扩增得... 根据奶牛γ干扰素 ( Bov IFN-γ)基因的 c DNA序列设计 1对引物 ,应用一步法逆转录聚合酶链式反应 ( RT-PCR)技术从奶牛脾淋巴细胞的总 RNA中扩增出特异性片段。将 RT-PCR产物克隆到 Pucm-T载体中 ,经过限制性酶切分析、测序证实扩增得到的 Bov IFN-γ基因序列正确。将该基因片段切下并克隆到大肠杆菌表达载体 PGEX-6P-1谷光甘肽 S 转移酶基因的下游 ,经 IPTG诱导后 ,表达出 42 ku的融合蛋白 ,薄层扫描测定可溶性融合蛋白表达量约占菌体可溶性总蛋白的 2 5 %。通过细胞病变抑制试验证实 ,融合蛋白具有较好的生物学活性 ,在牛肾细胞上抑制水泡性口炎病毒的活性可达到 1 63 84U· mg- 1 ,有望成为预防和控制奶牛疾病的新产品。 展开更多
关键词 奶牛 基因克隆 大肠杆菌 基因表达 Γ-干扰素基因
下载PDF
OPS法玻璃化冷冻牛卵母细胞和囊胚 被引量:19
20
作者 谭世俭 Henrik Callesen 《广西农业生物科学》 CAS CSCD 2002年第1期3-7,共5页
本文报道了利用拉细开口型细管 (Open Pulled Straw,OPS)方法进行玻璃化冷冻保存体外成熟(IVM)的牛卵母细胞及体外生产 (IVP)的牛囊胚的实验结果。实验 1的牛卵母细胞冷冻处理分 2组 ,组 1(G1 )是将卵母细胞在 IVM2 1 h时去除部分卵丘... 本文报道了利用拉细开口型细管 (Open Pulled Straw,OPS)方法进行玻璃化冷冻保存体外成熟(IVM)的牛卵母细胞及体外生产 (IVP)的牛囊胚的实验结果。实验 1的牛卵母细胞冷冻处理分 2组 ,组 1(G1 )是将卵母细胞在 IVM2 1 h时去除部分卵丘细胞后马上进行冷冻处理。组 2 (G2 )卵母细胞在 IVM6h时去除部分卵丘细胞 ,然后继续培养至 2 2 h冷冻 ;冷冻后的卵母细胞在液氮中保存 0 .5~ 2 h后解冻再继续 IVM1 h后与正常 IVM2 4h的对照组卵母细胞一起进行体外受精 (IVF)处理。实验 2则冷冻了来自IVP的 6、 7日龄的牛囊胚。结果显示 ,G1的卵母细胞 IVF后 8d的囊胚率 (2 2 .8% ,2 6/1 1 4)和孵化囊胚率 (1 4.9% ,1 7/1 1 4)都极显著地高于 G2 (分别为 2 .9% ,5 /1 71和 0 .5 % ,1 /1 71 ,P<0 .0 0 1 ) ;但两处理组的受精卵裂率差别不大 (分别为 48.2 %和 41 .5 % ,P>0 .3 )。冷冻第 6d和第 7d的体外囊胚 ,其冻后存活率和囊胚孵化率分别为 92 .7%、 89.2 %和 83 .6%、 66.7%。结果表明 ,利用 展开更多
关键词 卵母细胞 囊胚 OPS法 玻璃化冷冻
下载PDF
上一页 1 2 250 下一页 到第
使用帮助 返回顶部