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RNA干扰在猪内皮细胞抵御补体介导的细胞毒中的作用 被引量:4
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作者 朱珉 夏振雄 +6 位作者 王树森 曹荣华 祁洪刚 陈栋 刘斌 张伟杰 陈实 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第16期1133-1136,共4页
目的 评价RNA干扰(RNAi)是否能有效抵御补体介导的对猪内皮细胞的细胞毒作用。方法 将小分子干扰RNA(SiRNA)转染猪内皮细胞系PED,检测PED转染前后α1,3 半乳糖转移酶(α1,3 GT)mRNA及α- 半乳糖糖链(αGal)抗原表位的表达,并评价RNAi... 目的 评价RNA干扰(RNAi)是否能有效抵御补体介导的对猪内皮细胞的细胞毒作用。方法 将小分子干扰RNA(SiRNA)转染猪内皮细胞系PED,检测PED转染前后α1,3 半乳糖转移酶(α1,3 GT)mRNA及α- 半乳糖糖链(αGal)抗原表位的表达,并评价RNAi对补体介导的细胞毒的影响。结果 SiRNA 1/PED的α1,3 GT基因异构体(isoform)表达量与空转组(Mock)相比减少了70%(isoform1,69%;isoform2,72%)(P<0 05),但SiRNA 2/PED的α1,3 GT表达量与错配组及空转组相比差异无统计学意义(P>0. 05),流式细胞学检查显示,SiRNA 1/PED的αGal平均荧光强度(52 9)明显小于错配组(493 9,P<0 01)及空转组(505 7,P<0. 01)。标准4h51Cr释放实验中SiRNA 1/PED的细胞溶解率较空转组分别减少了70%(20%正常人血清组)和60%(40%正常人血清组)(P<0. 05)。结论 PED在转染SiRNA- 1后发生了基因沉默,猪内皮细胞可以成为RNAi作用的靶细胞。本研究为更深层次探讨RNAi在异种移植中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 RNA干扰 补体介导 流式细胞学检查 半乳糖转移酶 RNAi 平均荧光强度 PED 细胞毒作用 内皮细胞系 SiRNA 抗原表位 GT基因 释放实验 基因沉默 异种移植 表达量 人血清 转染 小分子 异构体 统计学 Gal 溶解率 靶细胞 相比
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