目的一氧化氮 NO 已被认为是生理和病理状态下一种重要生物分子.以氧化砷(As_2O_3)诱导食管癌细胞(SHEEC1)凋亡过程中检测细胞 NO,NO 合成酶(NOS)和一氧化氮合成酶mRNA(NOSmRNA),探索 NO 和细胞凋亡的关系.方法用 As_2O_3(5 μmol·...目的一氧化氮 NO 已被认为是生理和病理状态下一种重要生物分子.以氧化砷(As_2O_3)诱导食管癌细胞(SHEEC1)凋亡过程中检测细胞 NO,NO 合成酶(NOS)和一氧化氮合成酶mRNA(NOSmRNA),探索 NO 和细胞凋亡的关系.方法用 As_2O_3(5 μmol·L^(-1)和10μmol·L^(-1))诱导 SHEEC1凋亡,在加药后2,4,8,16,24h 取样检查,用分光光密度法检测细胞培养液的 NO 含量;用免疫组化检测诱导型 NO 合成酶(NOSⅡ);分子原位杂交(ISH)检测 NOSmRNA;实验终点细胞作透射电镜(TEM)检查细胞凋亡.结果在 As_2O_3诱导下,SHEEC1从 NO 基础量(0.68×10^(-2)μmol·L^(-1))逐渐增加,至加药后16h 达最高(2.38×10^(-2)μmol·L^(-1));NOSⅡ在加药后4h～16h 呈阳性反应;NOSmRNA 杂交信号位于胞质,4h 杂交点小而少,以后增加明显.24h,TEM可见 SHEEC1出现细胞凋亡.结论 As_2O_3 可诱导 SHEEC1释放 NO 和细胞凋亡,实验开始至16h NO 量不断增加.NOSⅡ表达和 NOSmRNA 转录上调.提出 NO 可能是 As_2O_3诱导细胞凋亡的介导和作用因子.展开更多
文摘目的一氧化氮 NO 已被认为是生理和病理状态下一种重要生物分子.以氧化砷(As_2O_3)诱导食管癌细胞(SHEEC1)凋亡过程中检测细胞 NO,NO 合成酶(NOS)和一氧化氮合成酶mRNA(NOSmRNA),探索 NO 和细胞凋亡的关系.方法用 As_2O_3(5 μmol·L^(-1)和10μmol·L^(-1))诱导 SHEEC1凋亡,在加药后2,4,8,16,24h 取样检查,用分光光密度法检测细胞培养液的 NO 含量;用免疫组化检测诱导型 NO 合成酶(NOSⅡ);分子原位杂交(ISH)检测 NOSmRNA;实验终点细胞作透射电镜(TEM)检查细胞凋亡.结果在 As_2O_3诱导下,SHEEC1从 NO 基础量(0.68×10^(-2)μmol·L^(-1))逐渐增加,至加药后16h 达最高(2.38×10^(-2)μmol·L^(-1));NOSⅡ在加药后4h～16h 呈阳性反应;NOSmRNA 杂交信号位于胞质,4h 杂交点小而少,以后增加明显.24h,TEM可见 SHEEC1出现细胞凋亡.结论 As_2O_3 可诱导 SHEEC1释放 NO 和细胞凋亡,实验开始至16h NO 量不断增加.NOSⅡ表达和 NOSmRNA 转录上调.提出 NO 可能是 As_2O_3诱导细胞凋亡的介导和作用因子.
