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中国人TTV部分基因的克隆及序列测定 被引量:106
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作者 周育森 何忠平 +1 位作者 董京芳 王海涛 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 1998年第2期81-83,共3页
目的:了解我国人群中是否存在TT病毒(TTV)感染,分析国内TT病毒株基因结构特点。方法:用PCR方法检测血清标本中TTVDNA,对TTVDNA阳性的标本进行序列测定。结果:10例临床诊断为非甲至非戊型肝炎病人血清标... 目的:了解我国人群中是否存在TT病毒(TTV)感染,分析国内TT病毒株基因结构特点。方法:用PCR方法检测血清标本中TTVDNA,对TTVDNA阳性的标本进行序列测定。结果:10例临床诊断为非甲至非戊型肝炎病人血清标本中,用PCR方法检测出5例为TTVDNA阳性。将其中的一株命名为TTVCH1(TTV中国株1)并进行序列测定,该序列与日本TTV部分基因(CLON22)相对应位置的核苷酸同源性为98%。用BLAST程序检索了GenBank+EMBL+PDB序列库的332949个序列数据,没有发现与之有明显同源性的序列;与已知的肝炎病毒(A至G)也没有明显的相关性,而只同日本报道的部分基因有很高的同源性。结论:该研究建立了检测TTV的PCR方法并测定了TTV中国株的部分基因序列,首次证实在我国人群中存在TTV的感染。 展开更多
关键词 TT病毒 聚合酶链反应 核苷酸 序列测定 肝炎病毒
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DNA分子标记技术及其在药用植物研究上的应用前景 被引量:54
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作者 傅荣昭 邵鹏柱 +1 位作者 高文远 孙勇如 《生物工程进展》 CSCD 1998年第4期14-18,共5页
DNA分子标记技术及其在药用植物研究上的应用前景傅荣昭1邵鹏柱2高文远3孙勇如11.中国科学院遗传研究所,北京1001012.香港中文大学生化系香港·新界·沙田3.中国医学科学院、中国协和医科大学药用植物研究... DNA分子标记技术及其在药用植物研究上的应用前景傅荣昭1邵鹏柱2高文远3孙勇如11.中国科学院遗传研究所,北京1001012.香港中文大学生化系香港·新界·沙田3.中国医学科学院、中国协和医科大学药用植物研究所北京100094DNA分子标记(DNAm... 展开更多
关键词 dna分子标记 药用植物 应用 分子标记技术
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广藿香的基因序列与挥发油化学型的相关性分析 被引量:66
3
作者 刘玉萍 罗集鹏 +2 位作者 冯毅凡 郭晓玲 曹晖 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期304-308,共5页
目的 探讨“南药”广藿香Pogostemoncablin (Blanco)Benth .不同产地间的叶绿体和核基因组的基因型与挥发油化学型的关系 ,为广藿香道地性品质评价、规范化种植提供分子依据。方法 用PCR直接测序技术对广藿香6个产地样本的叶绿体matK... 目的 探讨“南药”广藿香Pogostemoncablin (Blanco)Benth .不同产地间的叶绿体和核基因组的基因型与挥发油化学型的关系 ,为广藿香道地性品质评价、规范化种植提供分子依据。方法 用PCR直接测序技术对广藿香6个产地样本的叶绿体matK基因和核 18SrRNA基因核苷酸序列进行测序分析研究。结果 广藿香 6个样本的matK基因序列长均为 12 4 5bp ,编码 4 15个氨基酸成熟酶。 18SrRNA基因序列长为 180 3~ 180 5bp。根据排序比较 ,广藿香 6个样本间的matK基因序列存在 4 7个变异位点 ,18SrRNA基因存在 17个变异位点 ,非加权组平均法构建的系统分支树表明广藿香基因序列分化与其产地、所含挥发油化学变异类型呈良好的相关性。结论 结合挥发油分析数据 ,基因测序分析技术可作为广藿香道地性品质评价方法这一以及规范化种植过程关键技术“物种鉴定” 展开更多
关键词 广藿香 道地药材 dna测序 物种鉴定 基因序列 挥发油化学型
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栉孔扇贝16S rRNA基因片段序列的多态性研究 被引量:40
4
作者 刘亚军 喻子牛 +3 位作者 姜艳艳 张留所 孔晓瑜 宋林生 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期477-483,共7页
采用PCR技术扩增了栉孔扇贝 (Chlamysfarreri)线粒体DNA的 1 6SrRNA基因片段 ,PCR产物经T载体连接之后进行了克隆、测序 ,得到 634bp的核苷酸序列 ;分析了该片段的大连、烟台、青岛、朝鲜 4个自然群体 31个个体的核苷酸序列多态性 ,共... 采用PCR技术扩增了栉孔扇贝 (Chlamysfarreri)线粒体DNA的 1 6SrRNA基因片段 ,PCR产物经T载体连接之后进行了克隆、测序 ,得到 634bp的核苷酸序列 ;分析了该片段的大连、烟台、青岛、朝鲜 4个自然群体 31个个体的核苷酸序列多态性 ,共检测到 2 6个多态性核苷酸位点、1 8种单倍型。结果表明 ,4个群体中以朝鲜群体遗传多样性最高 ,其次为烟台、青岛群体 ,大连群体最低 ; 展开更多
关键词 栉孔扇贝 线粒体dna 16SRRNA基因 dna序列测定 PCR技术 克隆 核苷酸序列 多态性
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中国耐利福平结核分支杆菌rpoB基因突变特点 被引量:44
5
作者 黄海荣 金奇 +3 位作者 马玙 陈曦 李惠文 庄玉辉 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期231-235,共5页
目的 为了阐明中国结核分支杆菌耐利福平株rpoB基因突变特点。方法 对 2 42株结核分支杆菌临床分离株包括rpoB基因核心区域 81个碱基在内的 5 88个碱基进行序列测定 ,其中耐利福平株 193株 ,利福平敏感株 46株 ,人工诱导的耐利福平株 ... 目的 为了阐明中国结核分支杆菌耐利福平株rpoB基因突变特点。方法 对 2 42株结核分支杆菌临床分离株包括rpoB基因核心区域 81个碱基在内的 5 88个碱基进行序列测定 ,其中耐利福平株 193株 ,利福平敏感株 46株 ,人工诱导的耐利福平株 3株。结果  89 1% (172 / 193)的临床分离耐药株存在rpoB基因突变 ,而 46株敏感株无突变。 5 31位氨基酸突变率为 46 1% ;5 2 6位氨基酸突变率为 17 1% ;联合突变发生率为 12 4% ;还有 4株细菌发生同义突变 ;未检测到发生缺失或插入突变的菌株。高耐药组 (耐 2 5 0 μg/ml利福平 ) 5 31位氨基酸的突变率显著高于低耐药组 (耐 5 0 μg/ml利福平 ) ,P <0 0 5。结论 中国结核分支杆菌耐利福平株的rpoB基因突变的发生率约为 90 % ,其中最常见的突变位点是 5 31位丝氨酸和 5 2 6位组氨酸 ,两者突变率之和约为 6 3 % ;利福平高耐药组 5 31位氨基酸发生突变的几率高于低耐药组 ;受试菌株未发现插入或缺失突变 ; 展开更多
关键词 结核分支杆菌 利福利 药物耐受性 ropB基因 dna序列分析
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三七及其伪品的DNA测序鉴别 被引量:38
6
作者 曹晖 刘玉萍 +1 位作者 伏见裕利 小松かつ子 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期398-402,共5页
目的:分析三七Panax notoginseng及其伪品竹节参P.japonicus、蓬莪术Curcuma phaeocaulis、温莪术C.wenyujin、桂莪术C.kwangsiensis的核基因和叶绿体基因序列,为三七的正品药材基原鉴定提供分子依据。方法:采用PCR直接测序技术测定三... 目的:分析三七Panax notoginseng及其伪品竹节参P.japonicus、蓬莪术Curcuma phaeocaulis、温莪术C.wenyujin、桂莪术C.kwangsiensis的核基因和叶绿体基因序列,为三七的正品药材基原鉴定提供分子依据。方法:采用PCR直接测序技术测定三七及其4种伪品的18S rRNA基因和matK基因核苷酸序列并作序列变异分析。结果:三七和竹节参的18S rRNA基因序列长度相同,均为1809 bp;matK基因长度亦相同,为1259 bp。蓬莪术、温莪术和桂莪术18S rRNA基因长度均为1811 bp、matK均为1548bp。根据排序比较,三七与4种伪品间的DNA序列存在很大差别。结论:通过序列差异比较分析,DNA测序技术可成为三七正品基原鉴定的准确、有效手段。 展开更多
关键词 三七 莪术 伪品 MATK基因 基原 RRNA基因 正品 竹节参 核基因 技术测定
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16S rDNA扩增及测序在细菌鉴定与分类中的应用 被引量:43
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作者 朱诗应 戚中田 《微生物与感染》 2013年第2期104-109,共6页
16SrDNA扩增及测序技术在细菌的鉴定与分类研究中发挥着越来越重要的作用。本文就16SrDNA结构、可变区和保守区部分序列或全序列在临床上细菌鉴定和新细菌识别等方面的研究进展进行综述,并对其在临床实验室中的应用进行展望。
关键词 16S Rdna 聚合酶链反应 dna测序 鉴定
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基因测序技术在中药质量研究中的应用(Ⅰ)——山东郓城猴头半夏基原的DNA测序鉴别 被引量:28
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作者 刘玉萍 曹晖 王孝涛 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期423-427,共5页
目的:分析半夏Pinellia ternata(Thunb.)Breit.及其伪品虎掌南星Pinellia pedatisecta Schott的核基因组序列,为半夏正品基原鉴别提供分子依据。方法:采用PCR直接测序技术测定半夏及其伪品的18S rRNA基因核苷酸序列并作序列变异和... 目的:分析半夏Pinellia ternata(Thunb.)Breit.及其伪品虎掌南星Pinellia pedatisecta Schott的核基因组序列,为半夏正品基原鉴别提供分子依据。方法:采用PCR直接测序技术测定半夏及其伪品的18S rRNA基因核苷酸序列并作序列变异和选择性内切酶谱(PCR-SR)分析。结果:半夏和伪品的18SrRNA序列;天度均为 1805bp,根据排序比较,半夏原植物与商品药材间的序列完全相同,虎掌南星亦如此。而半夏与其伪品虎掌南星间则存在序列差异(有4个变异位点)。在半夏18S rRNA序列中有一个限制性内切酶Ase识别位点,通过PCR-SR图谱显示800bp和900bp2个酶切片断,而虎掌南星则无此位点,PCR-SR图谱显示1个未消化的1800bp片断;;结论:通过核基因组序列和PCR-SR图谱差异,DNA测序技术可成为半夏正品某原鉴别准确而有效的分子方法。 展开更多
关键词 猴头 半夏 dna测序 基因测序技术 中药质量研究 基原鉴别
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基因测序技术在中药质量研究中的应用(Ⅱ)——山药基原的DNA测序鉴别 被引量:27
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作者 刘玉萍 何报作 曹晖 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2001年第11期1026-1030,共5页
目的 分析正品山药 Dioscorea polystachya Turcz.与地方习用品广山药 D.persimilis Prain et Burkill、土山药 D. japaonica Thunb.和方山药 D.alata L .的核基因组 18S r RNA基因序列 ,为山药基原鉴别及品质评价提供分子依据。方法... 目的 分析正品山药 Dioscorea polystachya Turcz.与地方习用品广山药 D.persimilis Prain et Burkill、土山药 D. japaonica Thunb.和方山药 D.alata L .的核基因组 18S r RNA基因序列 ,为山药基原鉴别及品质评价提供分子依据。方法 采用 PCR直接测序技术测定山药及其地方习用品的 18S r RNA基因核苷酸序列并作序列同源性分析。结果 山药、广山药和土山药的 18S r RNA序列长度均为 1810 bp,而方山药为 180 7bp。根据排序比较 ,广山药与正品山药的 18S r RNA序列完全相同 ,而与土山药和方山药的序列同源性分别为 99.89%和 97.5 1%。结论  展开更多
关键词 山药 18SrRNA基因 dna测序 基原鉴别 中药
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基因芯片及其在医学研究中的意义 被引量:26
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作者 张天宝 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期91-94,98,共5页
关键词 基因芯片 基因表达 dna 测序
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养殖牙鲆淋巴囊肿病病原的研究 被引量:28
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作者 徐洪涛 朴春爱 +1 位作者 姜忠良 王文兴 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期223-226,共4页
近几年我国海水养殖鱼类发生病毒性传染病 ,病鱼鳍、鳃及体表皮肤出现乳头瘤样赘生物。将发病牙鲆(Paralichthysolivaceus) 表皮瘤组织进行超薄切片 ,电镜下在病变组织明显肥大的细胞胞浆内发现大量球状病毒 ,呈二十面体对称 ,具包膜 ,... 近几年我国海水养殖鱼类发生病毒性传染病 ,病鱼鳍、鳃及体表皮肤出现乳头瘤样赘生物。将发病牙鲆(Paralichthysolivaceus) 表皮瘤组织进行超薄切片 ,电镜下在病变组织明显肥大的细胞胞浆内发现大量球状病毒 ,呈二十面体对称 ,具包膜 ,直径约 2 10nm。根据虹彩病毒主要衣壳蛋白 (majorcapsidprotein ,MCP)基因中间保守区序列设计简并引物 ,应用PCR方法从病变组织中扩增出长 6 36bp的片段。经DNA序列测定及同源性分析表明 ,该段核苷酸序列与欧洲分离的淋巴囊肿病病毒 1型 (lymphocysticdiseasevirustype 1,LCDV - 1)MCP基因相应序列有 77%的同源性 ,表明该病毒属虹彩病毒科 (Iridoviridae)淋巴囊肿病毒属 (Lymphocystivirus) ,但与欧洲分离株有一定差异。将该病毒暂命名为淋巴囊肿病病毒中国分离株 (lymphocystisdiseasevirus-Chineseisolate ,LCDV -cn)。 展开更多
关键词 牙鲆 虹彩病毒 淋巴囊肿病 dna序列测定
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利用DNA池和测序技术快速筛查SNPs及估算基因频率 被引量:32
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作者 崔建勋 杜红丽 张细权 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第4期372-377,共6页
选取产蛋性能具有明显差异的 4个鸡品种(莱航鸡、阳山鸡、丝羽乌骨鸡和隐性白洛克鸡 )构建品种DNA池,采用测序的方法研究鸡催乳素基因 5′侧翼调控区远端序列 (1 028bp)的多态性,快速筛查到 8个可能与产蛋性能相关的SNPs(C 2402T、T 21... 选取产蛋性能具有明显差异的 4个鸡品种(莱航鸡、阳山鸡、丝羽乌骨鸡和隐性白洛克鸡 )构建品种DNA池,采用测序的方法研究鸡催乳素基因 5′侧翼调控区远端序列 (1 028bp)的多态性,快速筛查到 8个可能与产蛋性能相关的SNPs(C 2402T、T 2192C、C 2161G、C 2134G、C 2062G、G 2040A、A 1944G和C 1884A)。进一步利用测序图中SNP等位基因峰高的比值估算各鸡品种等位基因的频率,其中C 2402T、C 2161G、C 1884A和C 2062G、G 2040A位点等位基因频率的估算结果分别被PCR RFLP、PCR SSCP所验证,说明测序峰高比值估算等位基因频率的方法具有一定的可行性。 展开更多
关键词 dna 测序 单核苷酸多态性(SNPs) 基因频率
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高通量测序技术的研究进展 被引量:32
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作者 李妍 徐兴祥 《中国医学工程》 2019年第3期32-37,共6页
高通量测序技术又称二代测序技术(NGS),与被认为是第一代测序技术的传统Sanger毛细管电泳测序方法相比,二代测序技术以更低的成本提供更高通量的数据,并实现大规模的基因组研究,单次运行数据量大,可以同时对数百万个DNA分子实施测序。... 高通量测序技术又称二代测序技术(NGS),与被认为是第一代测序技术的传统Sanger毛细管电泳测序方法相比,二代测序技术以更低的成本提供更高通量的数据,并实现大规模的基因组研究,单次运行数据量大,可以同时对数百万个DNA分子实施测序。随着当代科学技术的进步,二代测序平台已逐渐被引入包括肿瘤学在内的众多领域中,如临床诊断,农业基因组学和法医学等。尽管NGS目前已广泛用于目的性研究,但由于该方法的新颖性,在临床实践中的应用尚未完全指南式化,大多数临床医生对NGS认知及解读能力参差不齐。该文就NGS方法、原理及其优劣性进行综述,旨在帮助临床医生利用NGS技术对疾病进行更全方位的诊疗提供参考。 展开更多
关键词 高通量测序技术 454焦磷酸测序 Solexa测序 SOLiD测序 dna测序 RNA测序
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重组人蛋白激酶CK2β亚基cDNA的克隆与测序 被引量:33
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作者 刘新光 梁念慈 +1 位作者 马涧泉 刘文 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第2期228-231,共4页
蛋白激酶CK2是一种存在的信使非依赖性丝/苏氨酸蛋白激酶.它是由两个催化亚基(α或α′)和两个调节亚基(β)组成的不均一四聚体.用反转录PCR从HL-60细胞中获得了人蛋白激酶CK2β亚基编码区cDNA,将NdeⅠ/... 蛋白激酶CK2是一种存在的信使非依赖性丝/苏氨酸蛋白激酶.它是由两个催化亚基(α或α′)和两个调节亚基(β)组成的不均一四聚体.用反转录PCR从HL-60细胞中获得了人蛋白激酶CK2β亚基编码区cDNA,将NdeⅠ/HindⅢ双酶切PCR产物连接到表达载体pT7-7的NdeⅠ/HindⅢ双酶切位点中.转化感受态细菌DH5α获得转化子,阳性筛选率为72%.限制性酶切分析结果表明,插入片段和重组质粒的大小与理论推测值相符.随机挑选4个阳性质粒测定其插入片段DNA序列,结果显示有2个含有正确插入的人蛋白激酶CK2βcDNA,命名为pTCKB.其余2个克隆分别存在1个和2个点突变,即在其编码区condon148的TCA→TTA,结果Ser→Leu;另一个则在Condon143GTG→ATG,Val→Met;Condon170GTG→GCG,Val→Ala.重组质粒(pTCKB)克隆的成功,将为在原核细胞中表达蛋白激酶CK2β亚基以及利用CK2βcDNA作为探针进行深入研究打下基础. 展开更多
关键词 人蛋白激酶CK2 Β亚基 dna测序 重组 Cdna
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Next-generation sequencing technology:A technology review and future perspective 被引量:29
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作者 ZHOU XiaoGuang1,REN LuFeng1,LI YunTao2,ZHANG Meng1,YU YuDe2 & YU Jun1 1 Key Laboratory of Genome Sciences and Information,Beijing Institute of Genomics,Chinese Academy of Sciences,Beijing 100029,China 2 Institute of Semiconductors,Chinese Academy of Sciences,Beijing 100083,China 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 2010年第1期44-57,共14页
As one of the most powerful tools in biomedical research,DNA sequencing not only has been improving its productivity at an exponential growth rate but has also been evolving into a new layout of technological territor... As one of the most powerful tools in biomedical research,DNA sequencing not only has been improving its productivity at an exponential growth rate but has also been evolving into a new layout of technological territories toward engineering and physical disciplines over the past three decades.In this technical review,we look into technical characteristics of the next-generation sequencers and provide insights into their future development and applications.We envisage that some of the emerging platforms are capable of supporting the USD1000 genome and USD100 genome goals if given a few years for technical maturation.We also suggest that scientists from China should play an active role in this campaign that will have a profound impact on both scientific research and societal healthcare systems. 展开更多
关键词 GENOMICS dna sequencing NEXT generation sequencing TECHNOLOGIES sequencer
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新疆维吾尔族妇女宫颈癌组织中乳头瘤病毒16型E6基因的克隆和序列分析 被引量:24
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作者 马正海 钱东 +5 位作者 马纪 林仁勇 闻明 钟哲 张富春 张秋云 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第3期400-404,共5页
为了分析新疆南部地区维吾尔族妇女宫颈癌组织中HPV16型E6基因结构特点 ,从中国新疆南部地区维吾尔族妇女宫颈癌活检组织标本中提取DNA ,以宫颈癌活检组织标本DNA为模板进行PCR扩增 ,获得HPV16E6基因 ,将其克隆到pUCm T载体上 ,并对其... 为了分析新疆南部地区维吾尔族妇女宫颈癌组织中HPV16型E6基因结构特点 ,从中国新疆南部地区维吾尔族妇女宫颈癌活检组织标本中提取DNA ,以宫颈癌活检组织标本DNA为模板进行PCR扩增 ,获得HPV16E6基因 ,将其克隆到pUCm T载体上 ,并对其进行基因全序列分析 .PCR检测结果显示宫颈癌组织中HPV16E6阳性率为 82 35 % (14/17) ;测序结果显示 ,新疆株HPV16E6基因全长 45 6bp ,大小与德国标准株一致 .E6基因的第 2 47位碱基发生T→G突变 ,并由此引起所编码的氨基酸亦发生改变 .上述结果表明 ,中国新疆南部地区维吾尔族妇女宫颈癌患者组织中HPV16E6的基因结构与德国标准株HPV16E6基因之间存在差异 . 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒16型 宫颈癌 E6基因 核苷酸序列分析新疆 维族妇女
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PCR-SSCP-DNA sequencing method in detecting PTEN gene mutation and its signifi cance in human gastric cancer 被引量:26
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作者 Chuan-Yong Guo Xuan-Fu Xu Jian-Ye Wu Shu-Fang Liu 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2008年第24期3804-3811,共8页
AIM: To discuss the possible effect of PTEN gene mutations on occurrence and development of gastric cancer. METHODS: Fifty-three gastric cancer specimens were selected to probe PTEN gene mutations in genome of gastric... AIM: To discuss the possible effect of PTEN gene mutations on occurrence and development of gastric cancer. METHODS: Fifty-three gastric cancer specimens were selected to probe PTEN gene mutations in genome of gastric cancer and paracancerous tissues using PCR-SSCP-DNA sequencing method based on microdissection and to observe the protein expression by immunohistochemistry technique. RESULTS: PCR-SSCP-DNA sequencing indicated that 4 kinds of mutation sites were found in 5 of 53 gastric cancer specimens. One kind of mutation was found in exons. AA-TCC mutation was located at 40bp upstream of 3’ lateral exon 7 (115946 AA-TCC). Such mutations led to terminator formation in the 297th codon of the PTEN gene. The other 3 kinds of mutation were found in introns,including a G-C point mutation at 91 bp upstream of 5’ lateral exon 5(90896 G-C),a T-G point mutation at 24 bp upstream of 5’ lateral exon 5 (90963 T-G),and a single base A mutation at 7 bp upstream of 5’ lateral exon 5 (90980 A del). The PTEN protein expression in gastric cancer and paracancerous tissues detected using immunohistochemistry technique indicated that the total positive rate of PTEN protein expression was 66% in gastric cancer tissue,which was significantly lower than that (100%) in paracancerous tissues (P < 0.005). CONCLUSION: PTEN gene mutation and expression may play an important role in the occurrence and development of gastric cancer. 展开更多
关键词 Gastric cancer PTEN gene PCR-SSCP dna sequencing MUTATION
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cisAB亚型第6、7外显子及侧翼内含子序列分析 被引量:27
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作者 许先国 洪小珍 +2 位作者 朱发明 陈宗梵 严力行 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期69-71,共3页
目的 研究汉族ABO血型系统cisAB亚型的分子遗传基础。方法 在标准血清学鉴定和PCR SSP基因分型的基础上 ,对汉族cisAB亚型进行第 6、7外显子及侧翼内含子DNA扩增 ,PCR产物经割胶纯化后直接序列分析。结果 血清学鉴定表明2例标本分别... 目的 研究汉族ABO血型系统cisAB亚型的分子遗传基础。方法 在标准血清学鉴定和PCR SSP基因分型的基础上 ,对汉族cisAB亚型进行第 6、7外显子及侧翼内含子DNA扩增 ,PCR产物经割胶纯化后直接序列分析。结果 血清学鉴定表明2例标本分别为A2 B3 和A3 B ,先证者的PCR SSP基因分型肯定了其中的B和O1基因。DNA序列分析表明 ,其第 6外显子有2 6 1G缺失 /不缺失杂合 ;第 7外显子与A1基因相比 ,有T4 6 7C杂合和C80 3G杂合 ,796位为正常C ,表明其血型为罕见的cisAB亚型。结论  4 6 7T、796C和 80 3C三处核苷酸的独特性决定了cisAB亚型的分子遗传基础。 展开更多
关键词 侧翼内含子 cisAB亚型 序列分析 ABO血型系统 分子遗传基础
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产ESBLs肠杆菌科细菌对氨基糖苷类抗生素耐药机制研究 被引量:23
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作者 段建春 吕晓菊 +5 位作者 赵燕 冯萍 俞汝佳 宗志勇 高燕渝 熊亚莉 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期555-558,共4页
目的研究产超广谱β-内酰胺酶(ex tended spectrum beta-lactam ases,ESBL s)肠杆菌科细菌对氨基糖苷类抗生素的耐药分子机制。方法采用PCR方法对耐氨基糖苷类抗生素的产ESBL s菌株进行氨基糖苷类耐药机制研究,并同时对钝化酶基因DNA测... 目的研究产超广谱β-内酰胺酶(ex tended spectrum beta-lactam ases,ESBL s)肠杆菌科细菌对氨基糖苷类抗生素的耐药分子机制。方法采用PCR方法对耐氨基糖苷类抗生素的产ESBL s菌株进行氨基糖苷类耐药机制研究,并同时对钝化酶基因DNA测序,进行网上基因相似性检索。结果20株耐氨基糖苷类的产ESBL s肠杆菌科细菌中存在氨基糖苷钝化酶基因,分别有aac(3)-I、aac(3)-II、aac(6′)-I、aac(6′)-II、ant(2")-I和aph(3)′-V I,以aac(3)-I、aac(3)-II和aac(6′)-I为主。部分菌株同时可含有多种钝化酶基因。DNA测序分析结果与国外报道已知相应氨基糖苷钝化酶DNA测序结果一致。结论产ESBL s肠杆菌科细菌中普遍存在氨基糖苷钝化酶,四川大学华西医院分离得到的氨基糖苷类耐药的产ESBL s肠杆菌科细菌的钝化酶基因型主要是aac(6′)-I、aac(3)-II、aac(3)-I和ant(2")-I。 展开更多
关键词 肠杆菌科细菌 超广谱Β-内酰胺酶 氨基糖苷类钝化酶 PCR 序列测定
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PBMC中HBV cccDNA与HBV宫内感染关系的研究 被引量:21
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作者 冯永亮 王素萍 +2 位作者 史晓红 王效军 李铁钢 《现代预防医学》 CAS 北大核心 2005年第3期192-194,共3页
目的 :对外周血单个核细胞 (peripheralbloodmononuclearcells,PBMC)中乙型肝炎病毒 (HBV)共价闭合环状DNA (covalentlyclosedcircularDNA ,cccDNA)进行扩增 ,并对其产物直接测序鉴定 ,以证实PBMC为HBV肝外复制的场所 ,从而进一步证实P... 目的 :对外周血单个核细胞 (peripheralbloodmononuclearcells,PBMC)中乙型肝炎病毒 (HBV)共价闭合环状DNA (covalentlyclosedcircularDNA ,cccDNA)进行扩增 ,并对其产物直接测序鉴定 ,以证实PBMC为HBV肝外复制的场所 ,从而进一步证实PBMC感染为乙型肝炎宫内感染的途径之一。方法 :选择性PCR扩增PBMC中HBVcccDNA ,并对 1例阳性产物直接测序鉴定 ,测序结果与GeneBank中已知序列进行同源性比较。结果 :HBsAg阳性孕妇PBMCHBVcccDNA的检出率为 9 .93% ,新生儿PBMCHBVcccDNA的检出率为 4 . 5 8% ,PBMCHBVcccDNA与公布的已知序列的同源性为 10 0 %。结论 :PBMC为HBV肝外复制的场所 ,PBMC感染很可能是乙肝宫内感染的传播机制之一。 展开更多
关键词 PBMC HBV dna 宫内感染 肝外 检出率 直接测序 序列 产物 PCR扩增
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