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植物表达载体pKC-3的构建及大分子DNA连接策略 被引量:7
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作者 范钦 邱国华 +1 位作者 许新萍 李宝健 《生物技术》 CAS CSCD 2000年第4期1-3,共3页
以根癌农杆菌双元载体pCAMBIA130 0为基础 ,先后连接含有马铃薯蛋白酶抑制剂 -Ⅱ基因 (PⅡ )、苏云金杆菌毒蛋白基因 (B .tcryI(A) )及雪花莲外源凝集素基因 (GNA)的完整表达片段 ,构建了抗多种稻田害虫的表达载体pKC - 3,将其导入根癌... 以根癌农杆菌双元载体pCAMBIA130 0为基础 ,先后连接含有马铃薯蛋白酶抑制剂 -Ⅱ基因 (PⅡ )、苏云金杆菌毒蛋白基因 (B .tcryI(A) )及雪花莲外源凝集素基因 (GNA)的完整表达片段 ,构建了抗多种稻田害虫的表达载体pKC - 3,将其导入根癌农杆菌LBA4 4 0 4 ,可进一步用于水稻抗虫基因转化的研究。载体构建过程采用多次的大分子DNA片段连接 ,总结出了一套适合大片段连接转化的可行策略。 展开更多
关键词 植物表达载体 pKC-3 构建 大分子D2A连接
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用基因枪法转化水稻获得转基因植株 被引量:14
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作者 许新萍 胡明 +1 位作者 卫剑文 李宝健 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 1997年第6期25-29,共5页
从水稻成熟胚诱导的愈伤组织经继代培养后可以产生大量胚性愈伤组织.将分别含有苏云金杆菌δ-内毒素基因[CryⅠA(b)]、潮霉素磷酸转移酶基因(hpt)的质粒混合包裹在金粉上轰击上述胚性愈伤组织.经过筛选和再生培养,得... 从水稻成熟胚诱导的愈伤组织经继代培养后可以产生大量胚性愈伤组织.将分别含有苏云金杆菌δ-内毒素基因[CryⅠA(b)]、潮霉素磷酸转移酶基因(hpt)的质粒混合包裹在金粉上轰击上述胚性愈伤组织.经过筛选和再生培养,得到92个系的潮霉素抗性再生植株.点杂交结果表明97.8%的抗性植株含有hpt基因,73.9%的植株同时含有CryⅠA(b)基因和hpt基因.Southernblot杂交分析进一步证实外源CryⅠA(b)基因已经整合到水稻基因组中. 展开更多
关键词 基因枪转化 转基因水稻植株 水稻
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抗虫转基因欧美杨的培育 被引量:64
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作者 王学聘 韩一凡 +2 位作者 戴莲韵 李玲 田颖川 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 1997年第1期69-74,共6页
以携带35S-Ω-B.t-Nos嵌合基因的双元载体农杆菌pB48.214和pB482.15(B.t基因片断长度分别为2.1kb和1.8kb),转化欧美杨叶片和茎段外植体,共获得225株转化再生植株。以舞毒蛾(Lyma... 以携带35S-Ω-B.t-Nos嵌合基因的双元载体农杆菌pB48.214和pB482.15(B.t基因片断长度分别为2.1kb和1.8kb),转化欧美杨叶片和茎段外植体,共获得225株转化再生植株。以舞毒蛾(LymantriadisparLinnaeus)幼虫进行生物测定后,获得杀虫率分别为55—80%的抗虫转基因植株共3株(R-135,R-123和R-140),经组培苗和苗圃移栽植株的PCR分析,苗圃移栽植株PCR产物杂交和Southernblot分析表明,B.t毒蛋白基因已整合到上述抗虫植株的细胞DNA中,并表达出杀虫活性。 展开更多
关键词 欧美杨 苏云金杆菌 毒蛋白基因 抗虫 转基因植株
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Transgenic Tobacco Plants by Cotransformation With Proteinase Inhibitor Ⅱ and δ-endotoxin Genes
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作者 华学军 陈晓邦 +1 位作者 马万超 范云六 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 1993年第18期1561-1566,共6页
In recent years, great progress has been made in. producing plants resistant to insect attack by genetic engineering of B. t δ-endotoxin gene or plant proteinase inhibitor genes, and how to avoid the emergence of the... In recent years, great progress has been made in. producing plants resistant to insect attack by genetic engineering of B. t δ-endotoxin gene or plant proteinase inhibitor genes, and how to avoid the emergence of the insect resistance to B. t δ-endotoxin produced by transgenic plants has been paid attention to. To combine one B. t δ-endotoxin gene with an incompatible B. t δ-endotoxin gene or with other genes such as proteinase inhibitor gene might alleviate the insect resistance problem. In this note, we study the 展开更多
关键词 PROTEINASE inhibitor gene b. t δ-endotoxin gene COTRANSFORMATION TRANSGENIC plants gene expression.
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