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新生大鼠脑缺氧缺血后迟发性细胞死亡的研究 被引量:66
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作者 周伟 吴圣楣 +1 位作者 陈惠金 陆良勇 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 2000年第4期256-259,共4页
目的 探讨新生动物脑缺氧缺血 (HI)后迟发性细胞死亡是否存在细胞凋亡 ;分析不同检测手段的敏感性与特异性。方法 在建立新生大鼠脑HI损伤标准动物模型基础上 ,采用脑组织病理学HE染色光镜观察、透射电镜、原位末端标记 (ISEL)及DNA... 目的 探讨新生动物脑缺氧缺血 (HI)后迟发性细胞死亡是否存在细胞凋亡 ;分析不同检测手段的敏感性与特异性。方法 在建立新生大鼠脑HI损伤标准动物模型基础上 ,采用脑组织病理学HE染色光镜观察、透射电镜、原位末端标记 (ISEL)及DNA电泳等分别对HI后不同时间点的实验侧脑皮质、海马回中凋亡细胞的形态、特点等进行观察和比较。结果 光镜、电镜下显示实验侧脑皮质及海马神经元皱缩、染色质凝集并出现凋亡小体 ,ISEL及DNA电泳证实有裂解DNA存在。且发现脑皮质及海马回凋亡性细胞死亡通常自HI后 6~ 12h开始 ,2 4h达高峰。结论 缺氧缺血可引起新生动物脑细胞凋亡。在脑HI迟发性损伤中不仅存在坏死 ,而且存在着复杂的细胞凋亡过程。不同的检测手段均具有一定的局限性 ,只有结合多种方法进行检测 ,才能正确判定凋亡细胞的存在。 展开更多
关键词 脑缺氧缺血 迟发性细胞死亡 细胞凋亡 新生儿
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新生大鼠肺出血动物模型的建立及对临床的启示 被引量:36
2
作者 陈克正 王卫 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 2002年第5期357-360,F003,共5页
目的 建立与临床病因相符的新生大鼠肺出血动物模型并探讨其发病机制。方法 采用出生 4~7d的Wistar新生大鼠 4 0只 ,随机分 4组。A组为正常对照组 ,置于 2 5℃恒温环境中。其余大鼠放入氧浓度为5 %~ 6 %的有机玻璃箱内 ,并将该箱放... 目的 建立与临床病因相符的新生大鼠肺出血动物模型并探讨其发病机制。方法 采用出生 4~7d的Wistar新生大鼠 4 0只 ,随机分 4组。A组为正常对照组 ,置于 2 5℃恒温环境中。其余大鼠放入氧浓度为5 %~ 6 %的有机玻璃箱内 ,并将该箱放入 (10± 1)℃冰箱中。按置放时间分为 :低温缺氧 1h组 (B组 ) ;低温缺氧2h组 (C组 ) ;低温缺氧 4h组 (D组 ) ,将此 3组新生大鼠分别于 1,2 ,4h后取出并迅速放入置于水浴箱中的有机玻璃箱内 ,维持箱温 37℃ ,供氧使箱内氧浓度达 99.5 %~ 10 0 % ,3组均持续 2h。断头法处死动物 ,肉眼观察肺出血情况 ,将结果分成 5级 :Ⅰ级正常肺 ;Ⅱ级肺水肿 ;Ⅲ级点状肺出血 ;Ⅳ级局灶性肺出血 ;Ⅴ级弥漫性肺出血。结果 ① 4组大鼠处理前 ,复温前及复温后的肛温差异无显著性 (P >0 .0 5 )。②肺部大体改变A组为Ⅰ级 ,B组为Ⅰ~Ⅲ级 ,C组为Ⅰ~Ⅴ级 ,D组为Ⅲ~Ⅴ级 ,经RIDIT分析 ,C组与A组 ,D组与A、B、C 3组间差异有显著性 (P<0 .0 5或 0 .0 1)。③光镜与电镜下肺大体病理改变为Ⅲ~Ⅴ级者 ,于肺泡内均可见从少量到大量的红细胞 ,Ⅳ及Ⅴ级尚可见毛细血管基底膜受损或断裂 ,其改变与新生儿肺出血病理改变相符。结论 采用出生 7d内新生大鼠 ,给予低温缺氧后再复温供氧 ,可成功制作与临? 展开更多
关键词 低温 缺氧 复温 高氧 肺出血 新生大鼠
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硫酸镁和川芎嗪对新生鼠缺氧缺血性脑损害的预防作用 被引量:31
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作者 王丹华 张宏 +3 位作者 赵时敏 魏珉 张慧信 黄玉玲 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期301-304,共4页
建立新生鼠缺氧缺血性脑病(HIE)的模型,观察了大脑皮质超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、血清MDA和脑组织神经病理变化以及硫酸镁、川芎嗪对其影响。发现HIE组大脑皮质SOD、MDA和血清MDA升高明显,神经细胞变性显著。硫酸镁和... 建立新生鼠缺氧缺血性脑病(HIE)的模型,观察了大脑皮质超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、血清MDA和脑组织神经病理变化以及硫酸镁、川芎嗪对其影响。发现HIE组大脑皮质SOD、MDA和血清MDA升高明显,神经细胞变性显著。硫酸镁和川芎嗪能使大脑皮质SOD、MDA和血清MDA降低,神经细胞变性减轻。提示氧自由基在缺氧缺血性脑损害发病中的影响和硫酸镁、川芎嗪通过间接抗氧化作用对HIE的预防作用。 展开更多
关键词 缺氧缺血性脑病 硫酸镁 川芎嗪 预防 新生儿
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神经节苷脂对脑缺氧缺血后新生大鼠海马CA_1区N-甲基-D-天门冬氨酸受体表达的影响 被引量:29
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作者 曹艳华 王玲 +2 位作者 惠延平 王宝西 曹玉红 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期614-616,共3页
目的 研究新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后海马区N-甲基-D-天门冬氨酸受体(NMDAR)及NMDARmRNA表达的变化和神经节苷脂(GM1)对其的影响。方法 建立HIBD模型。用免疫组化及原位杂交方法检测缺氧缺血(HI)和GM1干预后不同时间点NMDA受体I... 目的 研究新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后海马区N-甲基-D-天门冬氨酸受体(NMDAR)及NMDARmRNA表达的变化和神经节苷脂(GM1)对其的影响。方法 建立HIBD模型。用免疫组化及原位杂交方法检测缺氧缺血(HI)和GM1干预后不同时间点NMDA受体I型亚单位(NR1)阳性细胞及NR1mRNA阳性细胞的表达。结果 HI后新生大鼠海马CA1区NR1及NR1mRNA表达增强,GM1可使其受体表达下调(P<0.05)。结论 GM1可使新生大鼠海马CA1区NR1及NR1mRNA表达下调,对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤具有保护作用。 展开更多
关键词 神经节苷脂 脑缺氧缺血 新生大鼠 海马 CA1区 N-甲基-D-天门冬氨酸受体
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新生SD大鼠心肌细胞培养方法的简化及改良 被引量:27
5
作者 王瑞华 兰晓莉 +2 位作者 曹国祥 安锐 张永学 《心脏杂志》 CAS 2008年第2期154-157,共4页
目的改良简化心肌细胞培养的条件和方法,培养纯度高、存活时间长的新生SD大鼠的心肌细胞。方法采用含牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)的Ⅱ型胶原酶单次消化心肌、差速贴壁1 h纯化心肌细胞进行培养,全过程在37℃条件下进行。于培... 目的改良简化心肌细胞培养的条件和方法,培养纯度高、存活时间长的新生SD大鼠的心肌细胞。方法采用含牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)的Ⅱ型胶原酶单次消化心肌、差速贴壁1 h纯化心肌细胞进行培养,全过程在37℃条件下进行。于培养5、10、15、20、25、30 d时,用台盼蓝染色法检测细胞的存活率,并在生物倒置显微镜下观察形态学变化。取培养48 h的细胞,用免疫组织化学染色的方法检测心肌细胞的纯度。结果心肌组织在6 h时基本消化完全。培养5、10、15、20、25、30 d时,用台盼蓝染色法检测心肌细胞的存活率均大于95%,培养30 d时仍为95.2%。在生物倒置显微镜下观察,培养24 h左右的细胞之间形成交联并有细胞搏动。培养48h的细胞经免疫组织化学染色法测定,心肌细胞的纯度为(97.1±1.9)%。结论应用改良并简化的心肌细胞培养方法和培养条件,可得到纯度和存活率均高能满足大多数科研要求的原代乳鼠心肌细胞。 展开更多
关键词 新生SD大鼠 心肌细胞 细胞培养
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新生鼠缺氧缺血性脑损伤S-100 NSE mRNA和蛋白水平变化 被引量:25
6
作者 王兴河 秦梅 +1 位作者 樊绍曾 曾纪骅 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 2000年第6期381-385,共5页
目的研究缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后血和脑脊液中S-100蛋白(S—100)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平的变化及其与脑细胞死亡数的相关性,并探讨这些蛋白质水平变化的机制。方法采用 7 d龄 SD大鼠HIBD模... 目的研究缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后血和脑脊液中S-100蛋白(S—100)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平的变化及其与脑细胞死亡数的相关性,并探讨这些蛋白质水平变化的机制。方法采用 7 d龄 SD大鼠HIBD模型,应用放射免疫方法动态观察HIBD血液和脑脊液中S—100,NSE水平的变化,用RT-PCR的技术和免疫组织化学的方法动态观察 HIBD后不同时间点脑组织中 S— 100,NSE mRNA和蛋白水平表达的变化。结果 HI后血液中 24 h,48 h S- 100分别为(1. 205± 0 183)μg/L和( 1. 235± 0.097)μg/L, NSE分别为(3.97 ±0.228)ηg/ml和(3.76±0.234)ηg/ml,对照组S-100和NSE分别为(0.645±0.05)μg/L和(3.15±0.164)ηg/ml。脑脊液中 24 h,48 h S- 100分别为(1. 28± 0. 031)μg/L,(1. 32± 0. 097)μg/L,NSE分别为(7. 15± 0. 717)ηg/ml,(4. 29± 0.144)ηg/ml,对照组 S- 100和 NSE分别为(0. 68± 0.059) μg/L和(3. 4? 展开更多
关键词 缺氧缺血性脑损伤 S-100蛋白 新生儿 NSE
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芍药苷对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑组织丙二醛、超氧化物歧化酶的影响 被引量:21
7
作者 陈广斌 陈华萍 +3 位作者 吴铁 林坚涛 崔燎 沈非沉 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第16期1272-1273,1279,共3页
目的探讨芍药苷(PF)对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠脑组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的影响及其脑保护作用机制。方法7日龄SD新生大鼠78只,随机分为5组:假手术组(n=6),HIBD模型组(n=18),PF低剂量组(n=18),PF中剂量组(n=18),P... 目的探讨芍药苷(PF)对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠脑组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的影响及其脑保护作用机制。方法7日龄SD新生大鼠78只,随机分为5组:假手术组(n=6),HIBD模型组(n=18),PF低剂量组(n=18),PF中剂量组(n=18),PF高剂量组(n=18)。通过结扎左颈总动脉和吸入80mL/L氧气和920mL/L氮气2h制备HIBD动物模型。假手术组不进行缺氧缺血处理。各PF治疗组按低、中、高剂量分别于造模0、24h按5、10、20mg/kgPF,计算每只新生鼠用药量后,吸取医用无菌9g/L盐水溶解配制成1g/L的PF注射液,加9g/L盐水稀释至0.5mL,腹腔注射。HIBD模型组及假手术组于相应时点腹腔注射9g/L盐水0.5mL。假手术组分离左颈总动脉后6h,HIBD模型组与各PF组于缺氧缺血后6、24、48h断头取脑,测定其脑组织匀浆SOD、MDA水平。结果缺氧缺血新生大鼠脑组织MDA水平较假手术组升高,且随着时间延长进一步升高;而应用PF治疗后其水平较HIBD组回降,且呈一定的剂量效应,差异有统计学意义(Pa<0.05)。大脑组织SOD活性较假手术组降低,随着时间延长而进一步降低;应用PF治疗后其活性较HIBD组回升,呈一定的剂量效应,差异有统计学意义(Pa<0.05)。结论PF能减轻新生大鼠HIBD缺血再灌注时氧自由基引起的氧化损伤作用,从而发挥脑保护作用。 展开更多
关键词 缺氧缺血性脑损伤 芍药苷 超氧化物歧化酶 丙二醛 大鼠 新生
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失神经支配肌肉提取液对创伤性运动神经元胞体死亡的保护作用 被引量:14
8
作者 孔吉明 钟世镇 +1 位作者 胡耀民 李忠华 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1994年第4期279-283,共5页
周围神经损伤后的功能恢复常不尽如人意,原因之一是周围神经损伤会导致一定数量的神经元胞体死亡。对于感觉神经元胞体的退变死亡,于损伤局部连续施用神经生长因子即可取得较好的保护效应,但对于运动神经元胞体的损伤性死亡,目前尚... 周围神经损伤后的功能恢复常不尽如人意,原因之一是周围神经损伤会导致一定数量的神经元胞体死亡。对于感觉神经元胞体的退变死亡,于损伤局部连续施用神经生长因子即可取得较好的保护效应,但对于运动神经元胞体的损伤性死亡,目前尚无一种有效的保护因子。作者从失神经支配肌肉能诱导其邻近的正常运动神经纤维发芽生长这一现象受到启发,研究了失神经支配肌肉提取液(DME)对周围神经损伤所导致的运动神经无胞体死亡的保护作用。结果表明,用失去神经支配后5d的骨骼肌制成的提取液最具运动神经元营养活性。经乳鼠坐骨神经损伤实验模型检测,这种自制的DME能保护87.6%的脊髓腰段前角运动神经元在坐骨神经损伤后一个月继续存活,而正常骨骼肌提取液的保护率仅为37.3%。如不加以保护,则神经元胞体的存活率仅为8%。本研究结果提示骨骼肌的失神经支配可能会引起肌肉的某些代谢的改变,从而合成和分泌一些靶源性运动神经营养因子。 展开更多
关键词 周围神经损伤 运动神经元 死亡 DME 保护
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新生大鼠神经干细胞的分离培养 被引量:13
9
作者 贾延劼 杨于嘉 +3 位作者 宋建辉 刘丽旭 刘杰波 郑湘榕 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 2002年第2期81-83,F003,共4页
目的 探讨新生大鼠神经干细胞的分离培养方法及其外源报告基因在神经干细胞中的表达情况。方法 采用无血清细胞培养技术,间接免疫细胞化学染色法及其绿色荧光蛋白转导技术。结果 从新生大鼠脑组织分离的细胞具有连续克隆能力,表达神... 目的 探讨新生大鼠神经干细胞的分离培养方法及其外源报告基因在神经干细胞中的表达情况。方法 采用无血清细胞培养技术,间接免疫细胞化学染色法及其绿色荧光蛋白转导技术。结果 从新生大鼠脑组织分离的细胞具有连续克隆能力,表达神经上皮干细胞蛋白,诱导分化后的细胞表达成熟神经细胞和星形胶质细胞特异性的蛋白。绿色荧光蛋白报告基因转导神经干细胞后能够有效表达。结论 该方法分离培养的神经干细胞保持了干细胞的未分化属性,具有自我更新、增殖能力和多分化潜能,而且外源报告基因在神经干细胞中能够有效表达。 展开更多
关键词 神经干细胞 无血清细胞培养 新生大鼠 神经系统疾病 基因治疗
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MMP-9和TIMP-1在高氧致CLD新生大鼠肺组织的动态变化及其对Ⅳ型胶原的影响(英文) 被引量:15
10
作者 刘雪雁 徐刚 薛辛东 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第16期2278-2282,2286,共6页
目的探讨MMP-9(基质金属蛋白酶-9)和TIMP-1(基质金属蛋白酶抑制物-1)在高氧致CLD新生大鼠肺组织中的动态变化和在Ⅳ型胶原重塑中的作用。方法足月新生大鼠在生后12h内分别持续吸入浓度为0.90~0.95的高氧和空气,于1,3,7,14和21d,应用免... 目的探讨MMP-9(基质金属蛋白酶-9)和TIMP-1(基质金属蛋白酶抑制物-1)在高氧致CLD新生大鼠肺组织中的动态变化和在Ⅳ型胶原重塑中的作用。方法足月新生大鼠在生后12h内分别持续吸入浓度为0.90~0.95的高氧和空气,于1,3,7,14和21d,应用免疫组化的方法分别检测肺组织MMP-9和TIMP-1蛋白表达的动态变化,同时采用ELISA法动态检测肺组织中Ⅳ型胶原蛋白含量。结果MMP-9在高氧3d时的表达较空气组增强,蛋白平均灰度值为:(126.23±6.95)vs(130.38±7.36),P<0.05,其余时间点两组比较差异无显著性;TIMP-1在3d后高氧组肺组织的表达均高于空气组,3d和7d时平均灰度值为:(126.22±6.49)vs(129.49±4.75),(119.70±7.33)vs(124.99±6.83)(P<0.05),14d和21d差异有显著性,值为(112.35±10.29)vs(120.08±7.77),(109.19±10.56)vs(118.22±6.32)(P<0.01);高氧组ColⅣ含量在14d[(24.78±5.42)vs(14.90±2.44),P<0.05]和21d[(40.27±1.94)vs(26.13±1.94),P<0.01]均高于空气组。结论新生大鼠随着吸入高氧时间的延长,MMP-9/TIMP-1的平衡状态遭到破坏,Ⅳ型胶原降解失衡,促进了早期基膜损伤的加重和晚期伴有Ⅳ型胶原沉积的肺纤维化。 展开更多
关键词 新生大鼠 高氧 Ⅳ型胶原 MMP-9 TIMP-1
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益气健胃化痰方联合兰索拉唑肠溶胶囊治疗慢性胃炎患者的疗效及对免疫功能和炎性反应递质的影响 被引量:15
11
作者 高东 邵喜风 张永刚 《世界中医药》 CAS 2018年第11期2725-2728,共4页
目的:探讨益气健胃化痰方联合兰索拉唑肠溶胶囊治疗慢性胃炎患者的疗效及对免疫功能和炎性反应递质的影响。方法:选取2016年6月至2017年6月榆林市中医医院收治的慢性胃炎患者106例,按照随机数字表法随机分为对照组和观察组,每组53例。... 目的:探讨益气健胃化痰方联合兰索拉唑肠溶胶囊治疗慢性胃炎患者的疗效及对免疫功能和炎性反应递质的影响。方法:选取2016年6月至2017年6月榆林市中医医院收治的慢性胃炎患者106例,按照随机数字表法随机分为对照组和观察组,每组53例。对照组采用兰索拉唑肠溶胶囊治疗,观察组在对照组基础上联合益气健胃化痰方治疗。2组疗程均为4周。比较2组的疗效,治疗前后Hp阳性情况、主要症状积分、免疫功能和炎性反应递质水平变化。结果:观察组总有效率(92. 45%)高于对照组(71. 69%),差异有统计学意义(P <0. 05)。2组治疗后Hp阳性率降低,差异有统计学意义(P <0. 05);观察组治疗后Hp阳性率低于对照组,差异有统计学意义(P <0. 05)。2组治疗后胃脘胀满、胃脘疼痛、食后饱胀积分降低,差异有统计学意义(P <0. 05);观察组治疗后胃脘胀满、胃脘疼痛、食后饱胀积分低于对照组,差异有统计学意义(P <0. 05)。2组治疗后CD3+、CD4+和CD4+/CD8+升高,差异有统计学意义(P <0. 05);观察组治疗后CD3+、CD4+和CD4+/CD8+高于对照组,差异有统计学意义(P <0. 05)。2组治疗后白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-17(IL-17)和转化生长因子-β1(TGF-β1)下降,差异有统计学意义(P <0. 05);观察组治疗后IL-6、IL-17和TGF-β1低于对照组,差异有统计学意义(P <0. 05)。结论:益气健胃化痰方联合兰索拉唑肠溶胶囊治疗慢性胃炎患者疗效显著,可增强患者细胞免疫功能及减轻细胞炎性反应。 展开更多
关键词 益气健胃化痰方 兰索拉唑肠溶胶囊 慢性胃炎 疗效 免疫功能 白细胞介素-6 白细胞介素-17 转化生长因子-Β1
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美金胺对脑缺氧缺血新生大鼠热休克蛋白70基因表达的影响 被引量:13
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作者 陈惠金 蒋明华 +3 位作者 钱龙华 周建德 周泽汉 周伟 《中国神经科学杂志》 CSCD 2001年第1期72-76,83,共6页
近来报道非竞争性NMDA受体拮抗剂美金胺 (Memantine)对缺氧缺血损伤 (HI)具有脑保护作用。在对HI新生大鼠先行进行了HSP70基因表达的研究基础上 ,对新生大鼠在HI前后对照应用美金胺 ,通过观察HSP70基因表达的变化 ,进一步从分子水平评... 近来报道非竞争性NMDA受体拮抗剂美金胺 (Memantine)对缺氧缺血损伤 (HI)具有脑保护作用。在对HI新生大鼠先行进行了HSP70基因表达的研究基础上 ,对新生大鼠在HI前后对照应用美金胺 ,通过观察HSP70基因表达的变化 ,进一步从分子水平评估美金胺的脑保护效果。结果显示 ,HSP70mRNA在正常情况下仅有极微弱表达 ,HI后可引起其表达明显增加。应用美金胺后 ,其HSP70基因表达虽较正常对照组增高 ,但显著弱于HI组 ,提示美金胺的应用具有一定的脑保护作用 ,可能减轻了HI的脑损伤 ,因而使作为一种敏感的脑缺氧缺血标志的HSP70基因的表达降低。数据显示美金胺在HI前应用较之HI后应用似有更明显的脑保护效果 ,尽管统计显示其差异无显著性意义。结合已完成的脑病理研究和病理量化评分 ,初步证实美金胺作为较安全有效的NMDA受体离子通道非竞争性拮抗剂 。 展开更多
关键词 美金胺 热休克蛋白70基因 新生大鼠 缺氧缺血性脑病
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氦氖激光穴位照射对缺血缺氧新生大鼠脑神经元尼氏体与BDNF表达的影响 被引量:10
13
作者 刘伟 吴爱群 +3 位作者 李宛青 高艳 侯晓强 汤善均 《解剖学研究》 CAS 2003年第4期270-272,276,I001,共5页
目的 探讨氦氖激光穴位照射对新生鼠缺血缺氧性脑损伤的作用及其可能机制。方法  4 2只 7d龄Wistar大鼠 ,随机分为 3组 :假手术对照组、缺血缺氧组、缺血缺氧后氦氖激光穴位照射组 ,常规饲养 2 2d后 ,取出左侧脑组织进行常规石蜡包埋... 目的 探讨氦氖激光穴位照射对新生鼠缺血缺氧性脑损伤的作用及其可能机制。方法  4 2只 7d龄Wistar大鼠 ,随机分为 3组 :假手术对照组、缺血缺氧组、缺血缺氧后氦氖激光穴位照射组 ,常规饲养 2 2d后 ,取出左侧脑组织进行常规石蜡包埋、切片、尼氏染色和BDNF免疫组织化学染色。结果 氦氖激光穴位照射可明显改善缺血缺氧后脑神经元内尼氏体的脱失现象 ,增加缺血缺氧后脑神经元内和BDNF的表达。结论 氦氖激光穴位照射对缺血缺氧后脑组织具有神经保护效应 。 展开更多
关键词 氦氖激光 穴位照射 新生儿缺血缺氧性脑损伤 新生大鼠 脑神经元尼氏体 BDNF 免疫组织化学
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七氟醚和缺氧预适应诱导乳鼠心肌细胞HSP_(70)表达的改变 被引量:8
14
作者 唐英 王泉云 《湖南医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期129-132,共4页
目的 :探讨七氟醚预适应和缺氧预适应对乳鼠心肌细胞热休克蛋白 70表达的影响。方法 :第 2代培养心肌细胞随机分为正常对照组 (C组 )、缺氧 /复氧组 (A/R组 )、缺氧预适应组 (IP组 )和七氟醚预适应组 (S组 ) ,每组均缺氧 2h ,复氧 48h... 目的 :探讨七氟醚预适应和缺氧预适应对乳鼠心肌细胞热休克蛋白 70表达的影响。方法 :第 2代培养心肌细胞随机分为正常对照组 (C组 )、缺氧 /复氧组 (A/R组 )、缺氧预适应组 (IP组 )和七氟醚预适应组 (S组 ) ,每组均缺氧 2h ,复氧 48h。分别取复氧 0 ,1,12 ,2 4,36和 48h的细胞 ,用免疫组化染色检测HSP70 表达并进行图象分析。结果 :在各个时间点 ,S组和IP组间的HSP70 表达均显著高于A/R组和C组 (P <0 .0 1) ,A/R组的HSP70 表达略高于C组 ,S组和IP组间的HSP70 表达差异无显著性 (P >0 .0 5 )。随着复氧时间的延长 ,S组和IP组间的HSP70 表达从 1h开始增加 ,2 4h表达最强 ,与 1h相比差异具有显著性 (P <0 .0 5 )。结论 :七氟醚预处理和缺氧预处理均可诱导乳鼠心肌细胞HSP70 在延迟相呈高表达 ,提示HSP70 参与了七氟醚预适应和缺氧预适应的延迟保护相。 展开更多
关键词 缺氧预适应 诱导 乳鼠 心肌细胞 HSP-70 表达 七氟醚预适应
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新生大鼠心肌细胞原代培养方法的改良 被引量:10
15
作者 王佳南 张晓刚 +1 位作者 汤为学 郑丽娜 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期600-603,共4页
目的:探讨更为简便的新生大鼠心肌细胞原代培养的方法,使分离的心肌细胞达到理想的数量、存活率和纯度。方法:用胰蛋白酶和Ⅱ型胶原酶联合消化,分离新生大鼠心肌细胞,进行体外培养,观察心肌细胞形态学变化,并以细胞免疫荧光进行心肌细... 目的:探讨更为简便的新生大鼠心肌细胞原代培养的方法,使分离的心肌细胞达到理想的数量、存活率和纯度。方法:用胰蛋白酶和Ⅱ型胶原酶联合消化,分离新生大鼠心肌细胞,进行体外培养,观察心肌细胞形态学变化,并以细胞免疫荧光进行心肌细胞纯度鉴定。结果:心肌细胞分离良好,收获细胞数量及存活率高,可贴壁搏动生长,免疫荧光显示培养的心肌细胞纯度达95%以上。结论:改良的细胞培养技术可获得生长状态良好的心肌细胞。 展开更多
关键词 心肌细胞 原代培养 新生大鼠
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促红细胞生成素对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑组织存活素表达及神经细胞凋亡的影响 被引量:13
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作者 陈晓晴 许华 +1 位作者 罗小平 黎萍 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期91-93,共3页
目的探讨促红细胞生成素(EPO)对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠缺血侧脑组织存活素表达的影响及神经保护机制。方法健康7日龄SD新生大鼠72只,随机分为假手术组(n=24)、对照组(n=24)及EPO治疗组(n=24)。采用结扎左侧颈总动脉并吸入80mL.... 目的探讨促红细胞生成素(EPO)对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠缺血侧脑组织存活素表达的影响及神经保护机制。方法健康7日龄SD新生大鼠72只,随机分为假手术组(n=24)、对照组(n=24)及EPO治疗组(n=24)。采用结扎左侧颈总动脉并吸入80mL.L-1氧气2h制作新生大鼠HIBD动物模型,造模后1d、3d、7d和14d取其脑组织标本,应用免疫组织化学法及脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的原位末端标记法分别对存活素的表达和细胞凋亡指数(AI)进行检测。结果与假手术组相比,对照组1d、3d、7d和14d缺血侧脑皮质存活素表达的吸光度值[(1.43±0.68)vs(0.13±0.03);(3.68±1.04)vs(1.69±0.19);(4.29±1.50)vs(0.36±0.05);(3.70±1.16)vs(0.98±0.26),Pa<0.01]及细胞AI值[(14.2±2.7)%vs(8.4±1.6)%;(16.5±3.5)%vs(1.4±1.1)%;(18.8±4.7)%vs(1.6±0.8)%;(8.2±3.1)%vs(2.2±1.7)%,Pa<0.01]均明显升高;与对照组相比,EPO治疗组1d、3d的存活素表达明显升高[(3.38±1.30)vs(1.43±0.68);(7.52±1.94)vs(3.68±1.04),Pa<0.05],细胞AI值1d、3d、7d明显降低[(9.8±2.1)%vs(14.2±2.7)%;(9.6±2.9)%vs(16.5±3.5)%;(10.6±2.8)%vs(18.8±4.7)%,Pa<0.05]。结论 EPO可通过促进抗凋亡因子存活素的表达而减少HIBD后的细胞凋亡,发挥其神经保护作用。 展开更多
关键词 促红细胞生成素 缺氧缺血性脑损伤 存活素 凋亡 大鼠 新生
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缺氧缺血性脑损伤新生大鼠皮质脑组织硫化氢的动态变化 被引量:10
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作者 任彩丽 赵红岗 +5 位作者 刘磊 甄万里 王湜卿 尹晓峰 侯志慧 李东亮 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期930-931,共2页
目的探讨缺氧缺血性脑损伤(HIBD)病理过程中不同时间点新生大鼠皮质脑组织硫化氢(H2S)水平动态变化。方法SD新生大鼠56只随机分成7组:正常组,假手术组,HIBD12h组、24h组、48h组、72h组及7d组,每组各8只。HIBD各组大鼠乙醚麻醉后,颈部正... 目的探讨缺氧缺血性脑损伤(HIBD)病理过程中不同时间点新生大鼠皮质脑组织硫化氢(H2S)水平动态变化。方法SD新生大鼠56只随机分成7组:正常组,假手术组,HIBD12h组、24h组、48h组、72h组及7d组,每组各8只。HIBD各组大鼠乙醚麻醉后,颈部正中切口,分离左侧颈总动脉,两端结扎中间凝断,消毒后缝合切口,2~4h置常压缺氧舱中,以1.5L/min的速度通入80mL/L氧气和920mL/L氮气的氮氧混合气体2h制成HIBD模型,观察动物行为学变化以确定建模是否成功,舱温控制在37℃左右,湿度为(70±5)%,而后放回原饲养环境继续母乳喂养。正常组不做任何处理。假手术组仅切开颈正中皮肤和分离左侧颈总动脉,不结扎,不吸入氮氧混合气体。HIBD组新生大鼠分别在建模后12、24、48、72h及7d时间点快速断头取脑,分离出左侧大脑皮质,用生化反应方法测定不同时间点新生大鼠皮质脑组织内源性H2S水平。结果与假手术组相比,HIBD12h组新生大鼠大脑皮质中H2S水平升高,是假手术组的1.5倍(P<0.01);之后开始降低,HIBD48h时,大脑皮质中H2S水平降至最低,与假手术组比较差异非常显著(P<0.01)。HIBD72h组、7d组新生大鼠皮质脑组织H2S水平与假手术组比较无显著差异。结论在HIBD过程中新生大鼠皮层脑组织H2S水平呈动态变化,H2S可能参与HIBD新生大鼠的发生发展过程。 展开更多
关键词 大鼠 新生 缺氧缺血性脑损伤 硫化氢
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建立新生鼠缺氧缺血性脑病模型的一种简单可靠的方法 被引量:10
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作者 尹晓娟 巨容 封志纯 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期744-746,i0001,共4页
目的探讨建立新生鼠缺氧缺血性脑病(HIE)动物模型快速可靠的方法。方法新生7 d SD乳鼠21只随机分为正常对照组、单纯缺氧组及缺氧缺血组。每组7只。每组又根据处死时间点随机分成3,6 h,1,3,7,14,21 d时7个小组。缺氧缺血组:结扎新生7 d... 目的探讨建立新生鼠缺氧缺血性脑病(HIE)动物模型快速可靠的方法。方法新生7 d SD乳鼠21只随机分为正常对照组、单纯缺氧组及缺氧缺血组。每组7只。每组又根据处死时间点随机分成3,6 h,1,3,7,14,21 d时7个小组。缺氧缺血组:结扎新生7 d SD大鼠左颈总动脉,置于8%浓度的低氧环境中2.5 h。单纯缺氧组缺氧2.5 h。采用HE染色及光镜技术观察3组SD大鼠脑组织结构改变。结果缺氧缺血组3 h出现轻度脑损伤,d1病变最严重,d3出现胶质细胞增生,142、1 d出现神经元大量丢失,皮层、纹状体、海马丘脑等部位形成胶质瘢痕,病灶中心仍可见大量固缩核和核碎片,7 d病灶中心仅见少量固缩核,周围增生的星形胶质细胞较3 d时增多。结论左颈总动脉结扎后置8%浓度低氧环境是简单、快速、可靠制备HIE模型的方法,且重复性好。 展开更多
关键词 大鼠 脑部缺氧缺血 动物模型
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乳鼠心肌细胞的体外培养 被引量:10
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作者 柳梅 张刚成 +1 位作者 姚艺 李珊珊 《临床和实验医学杂志》 2009年第1期3-4,共2页
目的研究乳鼠心肌细胞的体外培养并进行形态学观察。方法取日龄1~3d Wistar大鼠,胰蛋白酶和Ⅱ型胶原分离消化心肌组织,差速贴壁法纯化心肌细胞,培养于达氏改良伊格尔(DMEM)培养基,显微镜下观察心肌细胞形态及纯度。结果心肌细胞存活率9... 目的研究乳鼠心肌细胞的体外培养并进行形态学观察。方法取日龄1~3d Wistar大鼠,胰蛋白酶和Ⅱ型胶原分离消化心肌组织,差速贴壁法纯化心肌细胞,培养于达氏改良伊格尔(DMEM)培养基,显微镜下观察心肌细胞形态及纯度。结果心肌细胞存活率95%,纯度82%,并出现同步搏动。结论胰蛋白酶和胶原酶混合使用可以分离出数量较多、状态良好的心肌细胞。 展开更多
关键词 体外培养 新生鼠 心肌细胞 存活率 纯度
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香青兰提取物对体外培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用 被引量:12
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作者 赵杰 薛文华 梁淑红 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2010年第3期485-487,共3页
目的:研究香青兰提取物对心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的保护作用及机制。方法:提取香青兰的有效成分,用原代培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞建立H/R的损伤模型,实验分6组:正常对照组、H/R组、总提取物组、氯仿组、乙酸乙酯组及正丁醇组。采用... 目的:研究香青兰提取物对心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的保护作用及机制。方法:提取香青兰的有效成分,用原代培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞建立H/R的损伤模型,实验分6组:正常对照组、H/R组、总提取物组、氯仿组、乙酸乙酯组及正丁醇组。采用MTT法测定细胞的存活率,乳酸脱氢酶试剂盒(LDH)测定培养液中LDH的含量,黄嘌呤氧化酶法测定细胞内超氧化物歧化酶(SOD)的活性以及硫代巴比妥酸显色法测定活细胞丙二醛(MDA)的含量。结果:各组细胞活力、吸光度值以及LDH、MDA和SOD含量间比较,差异均有统计学意义(F=102.312、51.007、24.136、70.281和14.335,P<0.05)。与正常对照组比较,模型组LDH、MDA的含量及细胞活力明显升高,SOD活性降低(P<0.05);与模型组比较,香青兰提取物各组的细胞活力降低,LDH和MDA含量增加;氯仿和乙酸乙酯组的吸光度值升高;氯仿、乙酸乙酯和正丁醇组的SOD含量增加(P均<0.05)。结论:香青兰提取物对H/R心肌细胞的损伤具有保护作用,此作用可能与抑制脂质过氧化和减少心肌细胞的凋亡有关。 展开更多
关键词 香青兰 缺氧/复氧 心肌细胞 乳鼠
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