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Structure and regulatory function of plant transcription factors 被引量:36
1
作者 LIU Qiang, ZHANG Guiyou & CHEN ShouyiDepartment of Biological Science and Biotechnology, Tsinghua Univorsity, Beijing 100084, China Department of Biological Science and Biotechnology, State Laboratory of Biomembrane and Membrane Biotechnology, Tsinghua University, Beijing 100084, China Institute of Genetics, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2001年第4期271-278,共8页
The expression of inducible genes in plants is regulated by specific transcription factors at the transcrip-tional level. A typical transcription factor usually contains a DNA-binding domain, a transcription regulatio... The expression of inducible genes in plants is regulated by specific transcription factors at the transcrip-tional level. A typical transcription factor usually contains a DNA-binding domain, a transcription regulation domain, a dimerization site and a nuclear localization domain. These functional domains define the characteristic, localization and regulatory role of a transcription factor. Transcription factors recognize and bind to specific cis-acting elements or interact with other proteins, and then activate or repress the transcription of target genes by their functional domains. In recent years, elucidation on the structure and function of transcription factors has become an important subject in plant molecular biology. 展开更多
关键词 TRANSCRIPTION factor DNA-BINDING domain cis-acting element.
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Regulatory role of DREB transcription factors in plant drought, salt and cold tolerance 被引量:34
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作者 K.Yamaguch-Shinozaki K.Shinozaki 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2000年第11期970-975,共6页
rd29A gene of Arabidopsis encodes a LEA-like hydrophilic protein, its expression is induced by drought, high-salt and cold stress. In the promoter region of rd29A gene, there are 2 ORE cis-acting elements involved in ... rd29A gene of Arabidopsis encodes a LEA-like hydrophilic protein, its expression is induced by drought, high-salt and cold stress. In the promoter region of rd29A gene, there are 2 ORE cis-acting elements involved in responses to these environmental stresses. 5 cDNAs (DREB1A-C and DREB2A-B) encoding DREB transcription factors, which specifically bind to ORE element and control the expression of reporter gene under drought, high-salt and stress, have been isolated by One-Hybrid screening method and with ORE element of rd29A promoter. DREB transcription factors and ORE element function in signal transduction of drought, high-salt and cold stress. One DREB transcription factor can control the expression of several target functional genes involved in plant tolerance to drought, high-salt and cold stress. Thus, it may be an effective strategy to achieve ideal, multiple and fundamental effect for improving plant stress-resistance by DREB gene transfer. 展开更多
关键词 PROMOTER cis-acting element TRANSCRIPTION factor signal TRANSDUCTION gene expression.
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茉莉花香气相关基因JsDXS及其启动子的克隆与表达分析 被引量:28
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作者 孙君 陈桂信 +4 位作者 叶乃兴 吕恃衡 刘志钦 黄玮 林志达 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1236-1244,共9页
以双瓣茉莉花瓣为材料,采用RT-PCR和RACE技术相结合的方法,获得茉莉花香气形成限速酶即5–磷酸脱氧木酮糖合成酶(Deoxyoxylulose-5-phosphate synthase,DXS)基因(命名为JsDXS);采用染色体步移技术获得该基因的启动子序列;采用实时荧光定... 以双瓣茉莉花瓣为材料,采用RT-PCR和RACE技术相结合的方法,获得茉莉花香气形成限速酶即5–磷酸脱氧木酮糖合成酶(Deoxyoxylulose-5-phosphate synthase,DXS)基因(命名为JsDXS);采用染色体步移技术获得该基因的启动子序列;采用实时荧光定量PCR技术检测该基因在花瓣发育过程中的表达动态。结果表明,JsDXS全长cDNA为2 505 bp,其中ORF(Open Reading Frame)为2 145 bp,编码714个氨基酸,含有TPP-DXS、TPP-PYR-DXS-TK-like和Transketolase C等保守功能结构域;分离得到JsDXS基因上游调控序列745 bp,其含启动子核心元件TATA-box及T/GBOXATPIN2(茉莉酮酸酯相关元件)、CIACADIANLELHC(生物钟相关元件)、MYCCONSENSUSAT(低温相关元件)等与花香形成相关的重要顺式作用元件;荧光定量PCR分析表明,该基因在18:00时表达量较低,随着时间的推移逐渐上调,到夜间22:00时表达量达到最高,逐渐又出现下调的趋势,直至凌晨2:00时表达量降到最低,说明该基因的表达受生物钟的控制。 展开更多
关键词 茉莉花 香气 5–磷酸脱氧木酮糖合成酶 启动子 顺式作用元件 表达分析
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植物Dof基因家族功能研究进展 被引量:25
4
作者 蔡晓锋 张余洋 +2 位作者 张俊红 李汉霞 叶志彪 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期1-12,共12页
Dof(DNA-binding with one finger)蛋白是植物特有的一类转录因子,在植物生长发育过程中起着重要的作用。在其N-末端有一个52氨基酸残基组成的高度保守的C2-C2单锌指结构,称为Dof保守域,能够特异性的识别植物启动子序列中的AAAG/CTTT作... Dof(DNA-binding with one finger)蛋白是植物特有的一类转录因子,在植物生长发育过程中起着重要的作用。在其N-末端有一个52氨基酸残基组成的高度保守的C2-C2单锌指结构,称为Dof保守域,能够特异性的识别植物启动子序列中的AAAG/CTTT作用元件,从而激活或抑制植物基因的表达;其C-末端的转录调控结构域,氨基酸序列较为多变,不具有保守性,是Dof蛋白在植物中功能多样性的基础;同时Dof蛋白也具有和蛋白相互作用的功能。在过去的十几年里,大量的Dof基因被克隆鉴定或从基因组数据库中预测出来,Dof蛋白在植物生长发育中的作用也受到更多关注。本文就Dof转录因子的特点,各物种中已经报道的Dof转录因子的数目、系统进化关系和分类及其生物学功能的进展进行了综述。 展开更多
关键词 DOF 转录因子 植物 锌指结构 顺式元件 基因组
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报告基因及其应用研究进展 被引量:22
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作者 杨宇 李江江 +1 位作者 王项 邱冠周 《生命科学研究》 CAS CSCD 2011年第3期277-282,共6页
报告基因是现代分子生物学研究领域中用于分析结构基因旁侧区域潜在的顺式元件(如启动子、增强子和沉默子等)和反式作用因子相互作用关系的一种重要工具,在解析基因时空表达调控的内在规律中发挥着重要作用,它具有便捷、可靠、灵敏度高... 报告基因是现代分子生物学研究领域中用于分析结构基因旁侧区域潜在的顺式元件(如启动子、增强子和沉默子等)和反式作用因子相互作用关系的一种重要工具,在解析基因时空表达调控的内在规律中发挥着重要作用,它具有便捷、可靠、灵敏度高和适用于大规模检测等优点.对目前已发展的多种报告基因(氯霉素转乙酰酶、β-半乳糖苷酶、荧光素酶以及荧光蛋白等)在动物、植物、微生物以及医学等领域的应用情况进行综述,为该技术的进一步拓展应用提供新线索和新思路. 展开更多
关键词 报告基因 顺式元件 反式作用因子 基因时空表达调控
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真鲷脂蛋白脂肪酶基因顺式元件PPRE及在肝脏活体调控作用 被引量:16
6
作者 梁旭方 李月琴 +4 位作者 李贵生 白俊杰 劳海华 Hiromi Oku Hiroshi Y.Ogata 《热带海洋学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期49-55,共7页
从血液提取总DNA并构建基因组文库,克隆海水鱼真鲷(Pagrosomusmajor)脂蛋白脂肪酶(LPL)基因5′侧翼区序列,再通过竞争性聚合酶链式反应(PCR)方法,定量研究饲料中添加不同饱和度脂肪酸对其肝脏LPL基因mRNA表达水平的影响。结果表明,真鲷... 从血液提取总DNA并构建基因组文库,克隆海水鱼真鲷(Pagrosomusmajor)脂蛋白脂肪酶(LPL)基因5′侧翼区序列,再通过竞争性聚合酶链式反应(PCR)方法,定量研究饲料中添加不同饱和度脂肪酸对其肝脏LPL基因mRNA表达水平的影响。结果表明,真鲷LPL基因5′侧翼区序列中存在顺式元件过氧化物酶体增殖物反应元件,其序列为TGAAGA TGACAT,与TATA(CATAA)盒序列相隔211bp;与喂饲料对照组比较,添加10%油酸可增加真鲷肝脏LPL基因表达水平,但差异并不显著(p>0.05)。用亚油酸或n 3高不饱和脂肪酸混合物取代添加油酸的一半(占饲料添加量的5%)后,导致真鲷肝脏LPL基因表达水平升高并出现显著性变化(p<0.05)。对真鲷肝脏LPL基因诱导表达随饲料中的脂肪酸不饱和度增加而增加,表明在活体条件下脂肪酸对真鲷肝脏LPL基因表达的诱导作用可能与脂肪酸的氧化代谢有关。n 3高不饱和脂肪酸通过过氧化物酶体增殖物激活受体诱导真鲷肝脏LPL基因表达,使真鲷食物脂质供应水平与其肝脏脂肪酸氧化代谢强度调控偶联起来,可能是真鲷对高脂食物(特别是富含n 3高不饱和脂肪酸食物)的一种适应。 展开更多
关键词 真鲷(Pngrosomus major) 脂蛋白脂肪酶基因 顺式元件 转录调控 高不饱和脂肪酸 肝脏
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水稻蜡质基因5'上游区缺失对基因表达的影响 被引量:9
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作者 姚彩萍 王宗阳 +3 位作者 蔡秀玲 张栋 张景六 洪孟民 《植物生理学报(0257-4829)》 CSCD 1996年第4期431-436,共6页
为研究水稻蜡质基因(waxy)5'上游调控区中存在的顺式作用元件,我们将水稻waxy基因翻译起始声、(ATG)5'上游3.4kb(-2118~+1291bP)片段经外切核酸酶ExoⅢ部分酶解,得到一系列5'端缺失的片... 为研究水稻蜡质基因(waxy)5'上游调控区中存在的顺式作用元件,我们将水稻waxy基因翻译起始声、(ATG)5'上游3.4kb(-2118~+1291bP)片段经外切核酸酶ExoⅢ部分酶解,得到一系列5'端缺失的片段。将这些缺失片段分别与gus基因编码区连接,构建成融合质粒,经PEG介导引入水稻原生质体,26℃培养48h后,定量测定GUS酶活力,并以同时导入的由35S启动子指导的荧光素酶(LUC)基因表达的酶活力作为内对照。结果表明,GUS酶活性随5’上游调控区长度的减少而逐渐减弱。由─861bp缺失至─640bP时,gus基因表达水平有较明显的降低,推测在该区域中可能存在一个顺式作用元件区。 展开更多
关键词 水稻 蜡质基因 (ATG)5'上游区 基因表达
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Isolation and analysis of a TIR-specific promoter from poplar 被引量:12
8
作者 Zheng Hui-quan Lin Shan-zhi Zhang Qian Zhang Zhen-zhen Zhang Zhi-yi Lei Yang Hou Lu 《Forestry Studies in China》 CAS 2007年第2期95-106,共12页
A 5' flanking region of the well-conserved Toll/interleukin-1 receptor domain (TIR)-encoding sequence was isolated from the genomic DNA ofMelampsora magnusiana Wagner resistant clones of hybrid triploid poplars [(... A 5' flanking region of the well-conserved Toll/interleukin-1 receptor domain (TIR)-encoding sequence was isolated from the genomic DNA ofMelampsora magnusiana Wagner resistant clones of hybrid triploid poplars [(Populus tomentosa × P. bolleana) × P. tomentosa]. Sequencing results and alignment analysis show that the obtained TIR-specific promoter (named as PtTIRp01) was 1,732 bp in length; moreover 3' region of the PtTIRp01 contains a responds to the 5' composition of TIR-NBS type gene PtDRG02, of 747 bp long 5' region of TIR-NBS type gene PtDRG02 and its 398 bp complete TIR-encoding sequence, which significantly corindicating that the obtained TIR-specific promoter region consists upstream region of promoter (985 bp). It was found that the 5' region of TIR-NBS type gene PtDRG02 was characterized in the downstream region of the transcriptional start, named as 5'-untranslated region (5' UTR), consisting of one 93 bp 5'-untranslation exon, one 213 bp intron and one 441 bp TIR-encoding open reading frame (ORF). In addition, several putative cis-acting motifs were present in the obtained TIR-specific promoter of PtDRG02, including one TATA box, one GC-rich, one AT-rich, one P-box, one 3-AF1 binding site, two CAAT boxes, two GT-1 motifs, three typical W-boxes, four I-boxes, and one multi-cis-acting fragment (MCF). The latter contains five types of regulatory elements (E4, G-box, ABRE motif, box 1 and HVA 1 s), most of which were homologous to the cis-acting regulatory elements involved in the activation of defense genes in plants. Thus, it can be suggested that TIR-specific promoter might be a pathogen-inducible promoter and be necessary for the inducible expression of defense-related genes. Key words Toll/interleukin- 1 receptor domain, promoter, Cis-acting element, poplar 展开更多
关键词 Toll/interleukin- 1 receptor domain PROMOTER cis-acting element POPLAR
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WRKY转录因子在植物逆境响应中的作用 被引量:13
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作者 张桐 李智强 伍国强 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期203-215,共13页
WRKY转录因子(transcription factors,TFs)是植物中最重要的转录因子家族之一。其含有由60个氨基酸组成的保守WRKY结构域,该结构域的核心序列WRKYGQK可以与启动子区W-box[(T)(T)TGAC(C/T)]特异结合,从而调节启动子中含W-box元件的调节... WRKY转录因子(transcription factors,TFs)是植物中最重要的转录因子家族之一。其含有由60个氨基酸组成的保守WRKY结构域,该结构域的核心序列WRKYGQK可以与启动子区W-box[(T)(T)TGAC(C/T)]特异结合,从而调节启动子中含W-box元件的调节基因或功能基因的表达。当植物遭受逆境胁迫时,WRKY转录因子参与相关的转录重编程的调控过程,在植物生长发育、物质代谢及环境适应中具有重要作用。本文就WRKY转录因子的发现、结构特点、分类、调控、表达模式及近年来在植物响应非生物(干旱、高温、低温、高盐碱、营养缺失等)和生物(病、虫)胁迫中的作用研究进展进行综述,并对未来研究方向加以展望。 展开更多
关键词 WRKY转录因子 生物胁迫 非生物胁迫 顺式作用元件 W-box
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Genome-wide Characterization of cis-acting Elements in the Promoters of Key Carotenoid Pathway Genes from the Main Species of Genus Citrus 被引量:12
10
作者 Kaijie Zhu Qingjiang Wu +3 位作者 Yue Huang Junli Ye Qiang Xu Xiuxin Deng 《Horticultural Plant Journal》 SCIE 2020年第6期385-395,共11页
Carotenoids are indispensable for both human health and plant survival.Citrus,is one of the fruit crops richest in carotenoid compounds,with approximately 115 kinds of carotenoids;tremendous diversity in carotenoids c... Carotenoids are indispensable for both human health and plant survival.Citrus,is one of the fruit crops richest in carotenoid compounds,with approximately 115 kinds of carotenoids;tremendous diversity in carotenoids composition and concentration exists among various species,showing different colors from nearly white to crimson.The carotenoid biosynthetic pathway and the key carotenogenic genes have been identified in citrus;however,the underlying regulatory mechanisms remain unclear.In this study,among the main species of genus Citrus(primitive,wild,and cultivated),we detected carotenoids in flavedo using High-Performance Liquid Chromatography,and analyzed variations in cis-acting elements in the promoters of key carotenoid pathway genes.Intriguingly,both carotenoid composition and content were generally increased during the evolution of citrus,and the corresponding variations in the promoters were identified,including the gain or loss of critical environmental stress-responsive elements and hormone-responsive elements,which are closely associated with carotenoid enhancement.In addition,pummelo has the most heat-responsive elements,but the Mangshan mandarin does not have this element in the promoters of PSY,which is highly related to their geographical origin and indicate that temperature is a critical environmental signal influencing carotenoid accumulation.Moreover,the abscisic acid-responsive motif was rich in almost all the seven species,but the ethylene-responsive motif was deficient,which demystified the unique phytohormone regulation mechanism of carotenoid accumulation in citrus.Overall,our study provides new insights into the molecular regulatory mechanism of carotenoid enhancement in the evolution of citrus,which can facilitate breeding and cultivation efforts to improve the nutritional quality and esthetic value in citrus and hopefully other fruit crops. 展开更多
关键词 CITRUS CAROTENOID PROMOTER Evolution cis-acting element
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植物抗逆相关ERF转录因子研究综述 被引量:8
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作者 刘武 戴良英 《中国农学通报》 CSCD 2007年第4期78-81,共4页
植物在它的生命周期中要经历各种逆境胁迫。植物许多胁迫相关基因的表达主要受特定转录因子在转录水平的调控。ERF转录因子家族参与植物的生物胁迫和非生物胁迫的应答,是同植物抗逆应答密切相关的一类转录因子大家族。它们通过识别不同... 植物在它的生命周期中要经历各种逆境胁迫。植物许多胁迫相关基因的表达主要受特定转录因子在转录水平的调控。ERF转录因子家族参与植物的生物胁迫和非生物胁迫的应答,是同植物抗逆应答密切相关的一类转录因子大家族。它们通过识别不同的顺式元件,调节多种功能基因的表达,调节植物抗性应答。综述简要介绍ERF转录因子及其相关顺式作用元件。阐述植物ERF转录因子家族在植物抗逆应答中的功能。 展开更多
关键词 ERF转录因子 逆境应答 顺式作用元件
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水稻OsGRAS1启动子的克隆及多样性分析 被引量:11
12
作者 丁雪峰 刘鸿艳 罗利军 《上海农业学报》 CSCD 北大核心 2010年第4期8-14,共7页
通过克隆水稻抗旱QTL区段内抗旱相关基因OsGRAS1上游1 332 bp的调控元件启动子序列,并对其进行顺式作用元件分析发现:该序列具有典型的真核生物核心启动子结构,并且包含多个与干旱胁迫相关和激素应答的调控元件;根据该序列在93-11和日... 通过克隆水稻抗旱QTL区段内抗旱相关基因OsGRAS1上游1 332 bp的调控元件启动子序列,并对其进行顺式作用元件分析发现:该序列具有典型的真核生物核心启动子结构,并且包含多个与干旱胁迫相关和激素应答的调控元件;根据该序列在93-11和日本晴的同源序列间存在的插入缺失位点设计引物,在120份稻种资源中对OsGRAS1启动子片段进行序列多样性分析发现,存在4种不同类型的启动子序列,其中Ⅳ型OsGRAS1启动子比其他3种类型多了3个顺式作用元件:MYB1LEPR,GT1CORE,NTBBF1ARROLB。每种序列类型选取1份材料,进行冷、盐、外源ABA和PEG胁迫处理,分析其下游基因OsGRAS1的表达水平。结果表明:Ⅳ型材料的启动子对ABA和PEG处理较其他3种类型更敏感。 展开更多
关键词 水稻 OsGRAS1启动子 顺式作用元件 胁迫
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金针菇L-赖氨酸合成通路基因鉴定及对不同光质的响应表达 被引量:10
13
作者 陶永新 段静怡 +6 位作者 李依宁 李自燕 宋寒冰 张祺锶 黄嘉华 高玲玲 谢宝贵 《食用菌学报》 CSCD 北大核心 2018年第4期1-8,共8页
为了从分子水平探究提高金针菇赖氨酸含量的环境因子(温度、光照、湿度、CO_2)及其作用机理,本研究首先在金针菇(Flammulina filiformis)单核体L11基因组中鉴定L-赖氨酸合成通路基因,并预测其启动子区顺式元件。根据预测结果,采用红、... 为了从分子水平探究提高金针菇赖氨酸含量的环境因子(温度、光照、湿度、CO_2)及其作用机理,本研究首先在金针菇(Flammulina filiformis)单核体L11基因组中鉴定L-赖氨酸合成通路基因,并预测其启动子区顺式元件。根据预测结果,采用红、绿、蓝、红绿蓝复合4种光处理金针菇子实体,并分别用HPLC和定量PCR测定赖氨酸含量变化及其合成通路基因的响应表达。结果表明:金针菇赖氨酸由氨基己二酸(α-Aminoadipate,AAA)途径合成,通路中8步催化酶的编码基因及其序列在L11中全部得到鉴定。关键限速酶基因HCS、HAC1和SHD基因的启动子区存在G-box等光照响应元件。定量PCR表明,总体上看赖氨酸合成通路前7步的酶编码基因对4种光质均有响应表达。进一步比较本试验中4种不同光质的处理效果,发现蓝光照射后的金针菇子实体中,共有7个赖氨酸合成通路基因(HCS、HAC1、HAH、HDH、AAT、AAR和SR)表达量上调,同时赖氨酸含量最高。推测蓝光可能通过激活赖氨酸合成通路基因启动子区的G-box等顺式元件,诱导通路基因上调表达,进而提高了金针菇子实体中赖氨酸含量。 展开更多
关键词 食用真菌 赖氨酸生物合成 光照处理 顺式作用元件
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Trametessp.AH28-2漆酶A的诱导合成及其基因5′-端调控区的克隆与分析 被引量:6
14
作者 洪宇植 肖亚中 +4 位作者 房伟 张书祥 查向东 李剑凤 周宏敏 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期547-552,共6页
Trametessp.AH28_2漆酶同工酶的合成需要铜离子的存在,较高浓度的Cu2+有利于漆酶合成。在以葡萄糖为碳源补加0·5mmol/LCu2+的培养基中生长时,发酵液漆酶活性为44·3u/L,同时补加4·0mmol/L邻甲苯胺时,漆酶酶活提高到71... Trametessp.AH28_2漆酶同工酶的合成需要铜离子的存在,较高浓度的Cu2+有利于漆酶合成。在以葡萄糖为碳源补加0·5mmol/LCu2+的培养基中生长时,发酵液漆酶活性为44·3u/L,同时补加4·0mmol/L邻甲苯胺时,漆酶酶活提高到71·0u/L;而在补加Cu2+和邻甲苯胺的纤维二糖培养基中,酶活上升至2584u/L,为葡萄糖培养基的36·4倍。邻甲苯胺和铜离子诱导产生的漆酶同工酶组分,均为漆酶A(LacA)。竞争性RT_PCR分析表明,漆酶A基因(lacA)转录本的累积伴随有发酵液漆酶活性的增加,邻甲苯胺对lacA的调控发生在转录水平。lacA结构基因长2110bp,含有10个内含子;lacA的cDNA序列为1560bp,编码520aa的漆酶蛋白,其氨基酸序列与其它真菌漆酶具有较高的相似性。采用改进的反向PCR技术,扩增得到的lacA5′_端调控区长1881bp,分析表明,该区域上分布有1个TATA框、7个CAAT框和多个潜在的顺式作用元件序列位点,包括5个MRE元件、9个CreA结合位点、4个XRE元件、2个STRE元件和7个氮因子调控位点等。这些序列位点的存在部分地对应了菌株摇瓶发酵条件下lacA的表达规律。 展开更多
关键词 真菌漆酶 定量RT-PCR 长距离反向PCR 顺式作用元件
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绿豆WRKY基因家族的全基因组鉴定及生物信息学分析 被引量:4
15
作者 郝青婷 高伟 +5 位作者 闫虎斌 张泽燕 朱慧珺 王茜 赵雪英 张耀文 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2023年第5期59-71,81,共14页
【目的】对绿豆WRKY转录因子在全基因组上进行鉴定及生物信息学分析,为绿豆WRKY基因功能的研究以及高抗绿豆品种培育奠定理论基础。【方法】利用Hmmer软件同源搜索,并通过在线工具SMART、NCBI-CDD和Pfam数据库进行结构域再确认获得79个... 【目的】对绿豆WRKY转录因子在全基因组上进行鉴定及生物信息学分析,为绿豆WRKY基因功能的研究以及高抗绿豆品种培育奠定理论基础。【方法】利用Hmmer软件同源搜索,并通过在线工具SMART、NCBI-CDD和Pfam数据库进行结构域再确认获得79个绿豆WRKY基因,然后通过在线软件ProtParam、ProtScale、SWISS-MODEL分析绿豆WRKY家族蛋白的理化性质、亲疏水性并构建3D立体模型,使用MEGA X、McScanX软件构建进化树和绘制共线性图,利用MEME、PlantCARE在线工具分析WRKY转录因子的保守基序并预测基因上游的顺式作用元件。【结果】鉴定得到的79个VrWRKY蛋白的氨基酸数量为64~746,分子量为7.42~80.93 ku,等电点为4.49~10.41,大多数成员为亲水性不稳定蛋白。系统进化树分析表明,绿豆WRKY基因家族的79个成员可分为Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ3组,其成员数量分别为16,51和12,Ⅱ组进一步划分为Ⅱ-a、Ⅱ-b、Ⅱ-c、Ⅱ-d和Ⅱ-e 5个亚组,其成员数量依次为2,17,17,7和8,其中Ⅱ-a、Ⅱ-b、Ⅱ-d和Ⅱ-e亲缘关系更近,而Ⅱ-c在进化树上的分布整体更靠近Ⅲ组。基因结构及保守基序分析显示,该家族基因均为间隔基因,且都含有保守基序WRKYGQK。基因染色体定位分析表明,所有成员在11条染色体上均有分布。顺式作用元件分析表明,绿豆WRKY基因启动子区存在丰富的激素及胁迫响应相关的元件。基因组间共线性分析结果表明,绿豆WRKY基因与拟南芥WRKY基因之间存在同源关系。基因复制结果表明,绿豆基因组有1对串联重复基因,15对大片段复制基因,片段复制在绿豆WRKY基因家族扩张中起主要作用。绿豆WRKY蛋白3D结构模拟表明,所有成员具有相似的两种蛋白结构,其中一种立体结构中心含有1个Zn^(2+)。【结论】鉴定得到79个含典型WRKY保守结构域的绿豆WRKY蛋白,其生物信息学分析丰富了绿豆WRKY转录因子的分子生物学理论。 展开更多
关键词 绿豆 WRKY基因家族 顺式作用元件 基因结构 共线性分析
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茉莉花JsPAL基因及其启动子克隆与表达分析 被引量:7
16
作者 孙君 陈雪津 +3 位作者 陈笛 王鹏杰 陈桂信 叶乃兴 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期949-956,共8页
苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonia-lyase,PAL)为茉莉花(Jasminum sambac)花香物质苯丙烷类合成的限速酶。为了解茉莉花花香形成的分子机理,以双瓣茉莉花瓣为材料,采用RT-PCR和RACE技术相结合的方法,克隆获得茉莉花苯丙氨酸解氨酶... 苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonia-lyase,PAL)为茉莉花(Jasminum sambac)花香物质苯丙烷类合成的限速酶。为了解茉莉花花香形成的分子机理,以双瓣茉莉花瓣为材料,采用RT-PCR和RACE技术相结合的方法,克隆获得茉莉花苯丙氨酸解氨酶基因的全长cDNA(GenBank:KM406501.1),命名为JsPAL,其全长cDNA为2220 bp,开放阅读框(ORF)为2140 bp,编码712个氨基酸,含有lyase_I_like超家族蛋白保守域、活性位点及多肽结合位点。采用染色体步移技术,获得该基因的启动子序列。JsPAL基因上游调控序列为1201 bp,其含有开花相关元件(CCAATBOX1)、PAL相关元件(BOXLCOREDCPAL、PALBOXPPC、PALBOXLPC、TATABOXOSPAL)以及花特异苯丙烷类相关元件(MYBPLANT)等与花香形成相关的重要顺式作用元件。实时荧光定量PCR检测结果表明,在不同组织和花瓣发育过程中,JsPAL基因在茉莉花的花蕾、花瓣中表达量较高,并且在花瓣开放过程中的22:00前表达量较高,而后呈下调趋势。 展开更多
关键词 茉莉花 苯丙氨酸解氨酶(PAL) 启动子 顺式作用元件 表达分析
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大豆GmWRI1a基因启动子克隆及其功能分析 被引量:7
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作者 邵宇鹏 杨明明 +4 位作者 包格格 孙英楠 杨强 李文滨 王志坤 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期517-523,共7页
为了探究大豆种子油脂合成与储存基因GmWRI1a的调节,分析其启动子功能,从大豆品种东农50基因组中扩增获得GmWRI1a基因转录起始位点上游1669bp的启动子序列,转化拟南芥。GUS染色确定了启动子的有效性,继而根据顺式作用元件的分布,分别扩... 为了探究大豆种子油脂合成与储存基因GmWRI1a的调节,分析其启动子功能,从大豆品种东农50基因组中扩增获得GmWRI1a基因转录起始位点上游1669bp的启动子序列,转化拟南芥。GUS染色确定了启动子的有效性,继而根据顺式作用元件的分布,分别扩增得到4个启动子5'端缺失片段1138bp,1087bp,690bp和437bp。4个启动子缺失片段分别转化拟南芥后,通过GUS组织染色结果发现,这些启动子片段能够驱动下游GUS基因表达。GUS酶活表明,启动子存在乙烯、茉莉酸、赤霉素3种激素响应元件,其中乙烯、茉莉酸和赤霉素的响应元件分别分布在-1138^-1087bp、-1087^-690bp和-690^-437bp。 展开更多
关键词 大豆 GmWRI1a启动子 顺式作用元件 激素响应 GUS酶活性分析
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香蕉WAT1基因的鉴定及表达分析 被引量:7
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作者 刘嘉鹏 屈蒙蒙 +4 位作者 孙雪丽 伍俊为 刘范 田娜 程春振 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期645-658,共14页
【目的】基于香蕉基因组数据筛选Walls are thin 1(WAT1)基因,分析它们的序列及表达特性。【方法】以拟南芥WAT1为参考序列,通过本地Blast筛选获得香蕉WAT1基因,分析其核苷酸、启动子及编码蛋白特性,并利用实时定量PCR技术研究其在不同... 【目的】基于香蕉基因组数据筛选Walls are thin 1(WAT1)基因,分析它们的序列及表达特性。【方法】以拟南芥WAT1为参考序列,通过本地Blast筛选获得香蕉WAT1基因,分析其核苷酸、启动子及编码蛋白特性,并利用实时定量PCR技术研究其在不同组织部位、不同激素和逆境胁迫处理下的表达情况。【结果】筛选获得5个香蕉WAT1基因(命名为MaWAT1-1~5)。蛋白亚细胞定位预测结果显示,MaWAT1-1、MaWAT1-2、MaWAT1-4主要定位在液泡和细胞膜上,MaWAT1-3主要定位在细胞质和细胞膜,MaWAT1-5定位在细胞膜和叶绿体。基因结构分析和系统进化树分析均将MaWAT1s分为两组,MaWAT1-1、MaWAT1-2、MaWAT1-4聚为一组(含6个外显子和5个内含子),MaWAT1-3和MaWAT1-5归为一组(含7个外显子和6个内含子)。启动子顺式作用元件分析结果显示:MaWAT1s启动子含有大量激素和胁迫响应相关元件。实时定量PCR结果显示,MaWAT1-4在叶片中表达量最高,MaWAT1-1在根和假茎中表达量最高,其余均在根中表达量最高;大多数MaWAT1s的表达受GA3、SA、盐胁迫和干旱等显著诱导,受高温显著抑制,同时部分成员的表达受IAA、ABA、JA、低温、机械损伤和枯萎病影响显著。【结论】MaWAT1s的表达受多种激素和逆境影响显著,可能在香蕉生长发育和抗逆防御反应中发挥着重要作用。 展开更多
关键词 香蕉 MaWAT1 基因结构 顺式作用元件 基因表达
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大豆GmNARK基因家族鉴定及分析 被引量:3
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作者 朱子坤 马超 +2 位作者 王锦辉 陈庆山 辛大伟 《大豆科技》 2023年第2期10-20,共11页
GmNARK(Nodule autoregulation receptor kinase)对植物发育及植物与微生物间相互交流具有重要调控作用,是结瘤自动调节(Nodulation,AON)过程中最重要的调节因子之一。文章通过GmNARK蛋白三级结构及其定位信息预测,对GmNARK基因家族进... GmNARK(Nodule autoregulation receptor kinase)对植物发育及植物与微生物间相互交流具有重要调控作用,是结瘤自动调节(Nodulation,AON)过程中最重要的调节因子之一。文章通过GmNARK蛋白三级结构及其定位信息预测,对GmNARK基因家族进行鉴定及功能预测。结果表明,GmNARK主要定位于细胞质中,其三级结构存在多处α-螺旋和β-折叠区域。家族成员分别分布在10条染色体上,同时有两个相同结构域(Malectin和Pkinase_Tyr)及相似基序分布。共线性分析表明该家族基因发生8次复制事件。通过启动子顺式作用元件和基因表达模式对NARK基因家族成员功能进行预测表明其对光反应具有调控作用,对植物激素和植物生长存在潜在调节机制,不同亚族成员表达模式不同。 展开更多
关键词 大豆 GmNARK 生物信息学分析 共生结瘤 顺式作用元件
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小麦蛋白磷酸酶2A基因TaPP2AbB″-α启动子的克隆及表达分析 被引量:6
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作者 扆珩 李昂 +1 位作者 刘惠民 景蕊莲 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1282-1290,共9页
植物蛋白磷酸酶2A(protein phosphatase 2A,PP2A)由结构亚基A、调节亚基B和催化亚基C组成,在应答逆境胁迫途径中发挥着重要作用。小麦基因Ta PP2Ab B″-α是调节亚基亚家族B″的成员,过量表达该基因可以促进拟南芥的根系生长及侧根发育... 植物蛋白磷酸酶2A(protein phosphatase 2A,PP2A)由结构亚基A、调节亚基B和催化亚基C组成,在应答逆境胁迫途径中发挥着重要作用。小麦基因Ta PP2Ab B″-α是调节亚基亚家族B″的成员,过量表达该基因可以促进拟南芥的根系生长及侧根发育,在盐胁迫和渗透胁迫条件下的作用更显著。本研究从小麦(Triticum aestivum L.)抗旱品种"旱选10号"基因组中克隆了Ta PP2Ab B″-α基因的启动子PB″α,序列长度为1899 bp,含有TATA-box和CAAT-box,以及响应干旱和渗透胁迫的顺式作用元件EECCRCAH1(?1058 bp至?1052 bp)、GCCCORE(?1073 bp至?1068 bp)和MYCCONSE(?1179 bp至?1174 bp)。将启动子PB″α和5种5′端缺失启动子片段与报告基因GUS(β-glucuronidase)连接后转化拟南芥,组织化学染色结果显示PB″α在植株的叶片和根中均有表达。5′端缺失分析表明缺失片段PB″α-1545和PB″α-1389具有启动子活性,活性区域位于?1389 bp和?946 bp之间。GUS定量分析结果显示,在盐和渗透胁迫条件下,PB″α、PB″α-1545和PB″α-1389的活性显著上升。本研究表明PB″α具有较强的启动子基本活性,并且在盐胁迫及渗透胁迫条件下活性显著上升,该结果为合理选用启动子改良作物提供了依据。 展开更多
关键词 小麦 蛋白磷酸酶2A 启动子 顺式作用元件 GUS组织化学染色 GUS定量分析
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