期刊导航
期刊开放获取
cqvip
退出
期刊文献
+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
检索
高级检索
期刊导航
共找到
3
篇文章
<
1
>
每页显示
20
50
100
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
文摘
详细
列表
相关度排序
被引量排序
时效性排序
hCuZn-SOD基因的克隆、表达及其产物的初步纯化和表征
被引量：
11
1
作者
陈春
陈躬瑞
+2 位作者
刘树滔
卢菀华
饶平凡
《福州大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
2004年第6期763-768,共6页
为获得hCuZn-SOD基因,根据GenBank中人铜锌超氧化物歧化酶(hCuZn-SOD)基因碱基序列,设计扩增引物,用RT-PCR方法从人的肝细胞中克隆出hCuZn-SODcDNA序列,并将它插入pUCm-T载体中,经过DNA序列测定证实,该片段序列的一个碱基发生突变(与报...
为获得hCuZn-SOD基因,根据GenBank中人铜锌超氧化物歧化酶(hCuZn-SOD)基因碱基序列,设计扩增引物,用RT-PCR方法从人的肝细胞中克隆出hCuZn-SODcDNA序列,并将它插入pUCm-T载体中,经过DNA序列测定证实,该片段序列的一个碱基发生突变(与报道基因相比),引起其编码第116个氨基酸由G变为D.采用定向克隆的方法将hCu Zn-SOD的cDNA片段克隆到表达载体pGEX-2T上,构建表达质粒pGEX-SOD,并转化大肠杆菌BL21(DE3).SDS-PAGE分析证实,经IPTG诱导,融合蛋白GST-SOD获得高效表达.破碎菌体、上清经谷胱甘肽亲和层析初步纯化后,得到纯度达90%的目的蛋白.活性实验表明,GST-SOD具有生物活性.
展开更多
关键词
人铜/锌超氧化物歧化酶
克隆
RT-PCR
表达
融合蛋白
亲和层析
原文传递
阿尔采末病Aβ多肽基因的高效表达及纯化研究
2
作者
杜洪震
赵雪梅
+2 位作者
潘杨杏
张冀民
梁平
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第6期644-647,共4页
目的 通过对Aβ多肽基因进行重组克隆 ,构建质粒和高效表达的菌株 ,并研究表达产物快速高效的纯化回收方法。方法 采用IMPACT TWIN表达系统构建Intein Aβ重组基因表达质粒 ,将该质粒转化至BL2 1(DE3) ,筛选高效表达菌株 ;表达产物经C...
目的 通过对Aβ多肽基因进行重组克隆 ,构建质粒和高效表达的菌株 ,并研究表达产物快速高效的纯化回收方法。方法 采用IMPACT TWIN表达系统构建Intein Aβ重组基因表达质粒 ,将该质粒转化至BL2 1(DE3) ,筛选高效表达菌株 ;表达产物经ChitinBeads亲和层析柱分离纯化 ;SDS PAGE电泳 ,毛细管区带电泳及免疫印迹法等鉴定。结果 重组的Intein Aβ基因在BL2 1中获得高效表达 ,筛选出稳定高效表达的BL2 1(DE3)细胞株 ;融合蛋白表达量可达全菌蛋白的 6 0 % ;表达产物经ChitinBeads亲和层析纯化后 ,其纯度可达 98%以上 ,并具有与Aβ多肽相同的分子量及免疫学活性。结论 Aβ多肽基因在IMPACT TWIN系统中可获得高效表达 ,利用ChitinBeads亲和层析方法可将表达的Aβ多肽进行快速、简便、无酶化的高效分离纯化。
展开更多
关键词
阿尔采末病
Aβ多肽
基因表达
亲和层析
下载PDF
职称材料
牛金属硫蛋白素bMTcin编码区的克隆及其在大肠杆菌中的表达研究
3
作者
袁静
唐兴芳
+1 位作者
刘变芳
李元瑞
《西北农业学报》
CAS
CSCD
2002年第4期28-31,87,共5页
以本实验室由RT—PCR扩增得到的含有牛金属硫蛋白(bMT)cDNA的重组质粒pYJ101为模板,PCR扩增出牛金属硫蛋白素bMTcin的编码区,将其克隆到pGEM—T载体上并进行DNA序列测定。利用融合表达载体pGEX4T—1,在E.coli中诱导表达bMTcin,经过Gluta...
以本实验室由RT—PCR扩增得到的含有牛金属硫蛋白(bMT)cDNA的重组质粒pYJ101为模板,PCR扩增出牛金属硫蛋白素bMTcin的编码区,将其克隆到pGEM—T载体上并进行DNA序列测定。利用融合表达载体pGEX4T—1,在E.coli中诱导表达bMTcin,经过Glutathine Sepharose 4B亲和层析纯化后,SDS—PAGE检测GST:bMTcin的条带。结果表明,所克隆的bMTcin序列全长为141bp,其DNA序列与原模板中的序列完全相同,与GenBank中另外5个bMTcin DNA相比,第31位和86位与Conneely的序列为A和G,导致第11位(Thr)和29位(Arg)的氨基酸不同于其他4个序列(11位为Ala,29位为Lys)。融合表达产物亲和层析纯化后,用SDS-PAGE检测可见融合蛋白GST:bMTcin的条带,紫外分光光度计测定,融合蛋白GST:bMTcin的表达量大约为1.1mg/L发酵液。
展开更多
关键词
牛金属硫蛋白素bMTcin
编码区
克隆
大肠杆菌
表达
pGEM-T载体
DNA序列分析
pGEX4T-1
下载PDF
职称材料
题名
hCuZn-SOD基因的克隆、表达及其产物的初步纯化和表征
被引量：
11
1
作者
陈春
陈躬瑞
刘树滔
卢菀华
饶平凡
机构
福州大学生物工程研究所
出处
《福州大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
2004年第6期763-768,共6页
基金
福建省自然科学基金重点资助项目(2001F009)
福州大学科技发展基金资助项目(XKJ(OD)-0132和2002-XY-11)
福州大学人才基金资助项目(XJY-0214)
文摘
为获得hCuZn-SOD基因,根据GenBank中人铜锌超氧化物歧化酶(hCuZn-SOD)基因碱基序列,设计扩增引物,用RT-PCR方法从人的肝细胞中克隆出hCuZn-SODcDNA序列,并将它插入pUCm-T载体中,经过DNA序列测定证实,该片段序列的一个碱基发生突变(与报道基因相比),引起其编码第116个氨基酸由G变为D.采用定向克隆的方法将hCu Zn-SOD的cDNA片段克隆到表达载体pGEX-2T上,构建表达质粒pGEX-SOD,并转化大肠杆菌BL21(DE3).SDS-PAGE分析证实,经IPTG诱导,融合蛋白GST-SOD获得高效表达.破碎菌体、上清经谷胱甘肽亲和层析初步纯化后,得到纯度达90%的目的蛋白.活性实验表明,GST-SOD具有生物活性.
关键词
人铜/锌超氧化物歧化酶
克隆
RT-PCR
表达
融合蛋白
亲和层析
Keywords
hCuZn-SOD
clone
RT-PCR
expression
fusion
protein
affinity
chromatograghy
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
原文传递
题名
阿尔采末病Aβ多肽基因的高效表达及纯化研究
2
作者
杜洪震
赵雪梅
潘杨杏
张冀民
梁平
机构
中国医学科学院.协和医科大学基础医学研究所病理室
美国哈佛大学医学院神经疾病研究中心
出处
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第6期644-647,共4页
文摘
目的 通过对Aβ多肽基因进行重组克隆 ,构建质粒和高效表达的菌株 ,并研究表达产物快速高效的纯化回收方法。方法 采用IMPACT TWIN表达系统构建Intein Aβ重组基因表达质粒 ,将该质粒转化至BL2 1(DE3) ,筛选高效表达菌株 ;表达产物经ChitinBeads亲和层析柱分离纯化 ;SDS PAGE电泳 ,毛细管区带电泳及免疫印迹法等鉴定。结果 重组的Intein Aβ基因在BL2 1中获得高效表达 ,筛选出稳定高效表达的BL2 1(DE3)细胞株 ;融合蛋白表达量可达全菌蛋白的 6 0 % ;表达产物经ChitinBeads亲和层析纯化后 ,其纯度可达 98%以上 ,并具有与Aβ多肽相同的分子量及免疫学活性。结论 Aβ多肽基因在IMPACT TWIN系统中可获得高效表达 ,利用ChitinBeads亲和层析方法可将表达的Aβ多肽进行快速、简便、无酶化的高效分离纯化。
关键词
阿尔采末病
Aβ多肽
基因表达
亲和层析
Keywords
alzheimers
disease
Aβ
peptide
gene
expression
affinity
chromatograghy
分类号
R341 [医药卫生—基础医学]
R39233
下载PDF
职称材料
题名
牛金属硫蛋白素bMTcin编码区的克隆及其在大肠杆菌中的表达研究
3
作者
袁静
唐兴芳
刘变芳
李元瑞
机构
西北农林科技大学食品科学与工程学院
出处
《西北农业学报》
CAS
CSCD
2002年第4期28-31,87,共5页
文摘
以本实验室由RT—PCR扩增得到的含有牛金属硫蛋白(bMT)cDNA的重组质粒pYJ101为模板,PCR扩增出牛金属硫蛋白素bMTcin的编码区,将其克隆到pGEM—T载体上并进行DNA序列测定。利用融合表达载体pGEX4T—1,在E.coli中诱导表达bMTcin,经过Glutathine Sepharose 4B亲和层析纯化后,SDS—PAGE检测GST:bMTcin的条带。结果表明,所克隆的bMTcin序列全长为141bp,其DNA序列与原模板中的序列完全相同,与GenBank中另外5个bMTcin DNA相比,第31位和86位与Conneely的序列为A和G,导致第11位(Thr)和29位(Arg)的氨基酸不同于其他4个序列(11位为Ala,29位为Lys)。融合表达产物亲和层析纯化后,用SDS-PAGE检测可见融合蛋白GST:bMTcin的条带,紫外分光光度计测定,融合蛋白GST:bMTcin的表达量大约为1.1mg/L发酵液。
关键词
牛金属硫蛋白素bMTcin
编码区
克隆
大肠杆菌
表达
pGEM-T载体
DNA序列分析
pGEX4T-1
Keywords
Bovine
Metallothioneincin
PCR
pGEM-T
vector
Gene
cloning
DNA
sequence
analysis
pGEX4T-1
E.coli
affinity
chromatograghy
SDS-PAGE
GST
:
bMTcin
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
hCuZn-SOD基因的克隆、表达及其产物的初步纯化和表征
陈春
陈躬瑞
刘树滔
卢菀华
饶平凡
《福州大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
2004
11
原文传递
2
阿尔采末病Aβ多肽基因的高效表达及纯化研究
杜洪震
赵雪梅
潘杨杏
张冀民
梁平
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2004
0
下载PDF
职称材料
3
牛金属硫蛋白素bMTcin编码区的克隆及其在大肠杆菌中的表达研究
袁静
唐兴芳
刘变芳
李元瑞
《西北农业学报》
CAS
CSCD
2002
0
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
上一页
1
下一页
到第
页
确定
用户登录
登录
IP登录
使用帮助
返回顶部
