大籽蒿花粉变应原提取液双向电泳蛋白质组分分析 被引量：6

1

作者 孙劲旅 张宏誉 +1 位作者 应万涛 钱小红 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第S2期21-24,共4页

目的　探讨用双向电泳 (Twodimensionalelectrophoresis,2 DE)对大籽蒿花粉提取液蛋白质组分进行分析的可能性及其实用价值。方法　按常规方法提取大籽蒿花粉变应原 ,经SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳及双向电泳对大籽蒿花粉提取液变应原进行... 目的　探讨用双向电泳 (Twodimensionalelectrophoresis,2 DE)对大籽蒿花粉提取液蛋白质组分进行分析的可能性及其实用价值。方法　按常规方法提取大籽蒿花粉变应原 ,经SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳及双向电泳对大籽蒿花粉提取液变应原进行蛋白质组分分析。结果　单纯聚丙烯酰胺电泳结果可见有 4个较明显的条带 ,分子量分别为 6 2kD ,5 2kD ,4 3kD和 2 5kD。经双向电泳蛋白组分分析 ,发现大籽蒿花粉提取液有 85种蛋白组分。其中 ,第 139点的分子量为 31.4 9kD ,等电点为 5 .39;第14 3点的分子量为 31.86kD ,等电点为 6 .38。这两个点与文献所报道组分A2c的蛋白质分子量为31kD ,等电点分别为 5 .3和 6 .35一致。结论　双向电泳对大籽蒿花粉提取液蛋白质组分进行分析具有实用价值 。 展开更多

关键词 大籽蒿花粉变应原 双向电泳 蛋白质组分分析

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双向电泳分析比较维甲酸诱导HL60细胞分化的蛋白表达差异 被引量：3

2

作者 牟芝蓉 吴玉章 李晋涛 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第10期1153-1155,共3页

目的　以维甲酸诱导急性早幼粒白血病细胞HL60分化为模型 ,用双向电泳技术分析比较维甲酸诱导HL60细胞分化的蛋白表达差异。方法　用细胞生物学的方法分析分化细胞形态上的差异 ,NBT实验检测细胞NBT阳性率。用双向电泳技术分析分化肿瘤... 目的　以维甲酸诱导急性早幼粒白血病细胞HL60分化为模型 ,用双向电泳技术分析比较维甲酸诱导HL60细胞分化的蛋白表达差异。方法　用细胞生物学的方法分析分化细胞形态上的差异 ,NBT实验检测细胞NBT阳性率。用双向电泳技术分析分化肿瘤细胞蛋白表达差异。结果　分化后细胞形态发生明显变化 ,细胞表面出现突起 ,细胞核变小。分化后细胞NBT阳性率达90 %以上 ,而未分化细胞NBT阳性率低于 5 %。双向电泳技术分析发现有 7个蛋白点只未分化细胞检测到表达 ,而分化细胞未检测到 ;有 14个蛋白点只在分化细胞检测到。结论　双向电泳技术可直接反映细胞蛋白表达变化。 展开更多

关键词 HL60细胞 蛋白表达 双向电泳 维甲酸 诱导分化 急性早幼粒白血病 APL

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蛋白质组中蛋白质磷酸化研究进展 被引量：10

3

作者 杨策 王正国 朱佩芳 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期119-124,共6页

随着后基因组时代的到来 ,对生命体器官、组织或细胞的全部蛋白质的表达、修饰及相互作用的研究已成为蛋白质组学的重要任务。蛋白质磷酸化是细胞内信号转导和酶调控最常见的机制之一 ,人类基因组约 2 %的基因编码 5 0 0种激酶和 10 0... 随着后基因组时代的到来 ,对生命体器官、组织或细胞的全部蛋白质的表达、修饰及相互作用的研究已成为蛋白质组学的重要任务。蛋白质磷酸化是细胞内信号转导和酶调控最常见的机制之一 ,人类基因组约 2 %的基因编码 5 0 0种激酶和 10 0种磷酸酶。蛋白质磷酸化和去磷酸化作为原核和真核细胞表达调控的关键环节 ,了解其对功能的影响可以深入理解生命系统在分子水平的调控状况。目前蛋白质组磷酸化研究仍是功能基因组面临的重大课题 。 展开更多

关键词 蛋白质组 蛋白质 磷酸化 二维电泳 信号转导 质谱

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蒙古沙冬青根蛋白的提取及双向电泳体系的建立 被引量：5

4

作者 刘楠 高飞 +5 位作者 周宜君 张孜宸 隋欣 马冰 张萌 张根发 《北京师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期365-368,共4页

以蒙古沙冬青根为实验材料,采用TCA/丙酮沉淀法和Tris-饱和酚提取法分别提取根可溶性蛋白.用Bradford法测定蛋白质浓度,计算蛋白提取率,并对所提取的蛋白样品进行双向电泳检测及电泳体系优化.结果表明,选择Tris-饱和酚法提取蛋白,采用2... 以蒙古沙冬青根为实验材料,采用TCA/丙酮沉淀法和Tris-饱和酚提取法分别提取根可溶性蛋白.用Bradford法测定蛋白质浓度,计算蛋白提取率,并对所提取的蛋白样品进行双向电泳检测及电泳体系优化.结果表明,选择Tris-饱和酚法提取蛋白,采用24cm、pH5～8的IPG胶条,上样量900μg,可获得分辨率高、重现性好的双向电泳凝胶图. 展开更多

关键词 蒙古沙冬青 根 蛋白质提取 双向电泳

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葱蝇非滞育与夏滞育蛹蛋白的双向凝胶电泳比较分析 被引量：3

5

作者 郝友进 胡文霞 陈斌 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期161-167,共7页

【目的】比较分析葱蝇Delia antiqua非滞育与夏滞育蛹的蛋白表达差异,为进一步揭示昆虫滞育的分子调控机理和昆虫防治提供理论基础。【方法】以非滞育和夏滞育的蛹为材料,提取总蛋白;进行双向凝胶电泳和凝胶图像分析,对并差异蛋白质进行... 【目的】比较分析葱蝇Delia antiqua非滞育与夏滞育蛹的蛋白表达差异,为进一步揭示昆虫滞育的分子调控机理和昆虫防治提供理论基础。【方法】以非滞育和夏滞育的蛹为材料,提取总蛋白;进行双向凝胶电泳和凝胶图像分析,对并差异蛋白质进行MALDI-TOF MS质谱鉴定,获得该点的质量指纹图谱;利用MASCOT软件在NCBI和SWISS PORT蛋白质数据库中进行搜索鉴定。【结果】非滞育和夏滞育蛹的蛋白表达存在显著差异。通过质谱鉴定和生物信息学分析,13个差异表达的蛋白质分别为胶原蛋白、纺锤丝组装非正常蛋白6(SAS6)、5,10-亚甲基四氢叶酸合成酶(MTHFS)、Bnb蛋白(bangles and beads)及其他功能未知蛋白。【结论】葱蝇在夏滞育时期,蛹体内的某些蛋白被上调或下调表达。本研究所鉴定的蛋白中,部分可能是参与滞育相关的蛋白质网络中的成员,它们可能在抗高温、染色体分离、叶酸代谢等生理过程中发挥重要作用。 展开更多

关键词 葱蝇 滞育 总蛋白 双向凝胶电泳 质谱分析 生物信息学分析

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面神经再生液的采集及其蛋白质组学分析和生物活性检测 被引量：2

6

作者 杨慧 梁传余 +2 位作者 高炳庆 卢晓风 李胜富 《临床耳鼻咽喉科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期37-39,共3页

目的 :检测面神经再生液的蛋白质成分及对运动神经元的生物营养活性。方法 :建立面神经再生室的动物模型 ,采集面神经再生液 ,用双向凝胶电泳技术对再生液进行蛋白组学的研究 ,并应用运动神经元培养的方法检验其生物活性。结果 :再生液... 目的 :检测面神经再生液的蛋白质成分及对运动神经元的生物营养活性。方法 :建立面神经再生室的动物模型 ,采集面神经再生液 ,用双向凝胶电泳技术对再生液进行蛋白组学的研究 ,并应用运动神经元培养的方法检验其生物活性。结果 :再生液中检测到 (85 0± 78)个蛋白质斑点 ,实验组培养神经元的胞体面积、突起长度及光密度值总体上大于对照组。结论 :再生液中蛋白含量丰富 ,种类繁多 ,面神经再生液对运动神经元确有营养活性作用。 展开更多

关键词 面神经再生 运动神经元 蛋白质组 双向凝胶电泳

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二甲基亚砜诱导小鼠红白血病细胞分化的差异蛋白质组学 被引量：2

7

作者 杨祖立 朱晓芳 +3 位作者 施鸣铭 胡繁 赵辅昆 张世馥 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期507-515,共9页

目的利用二甲基亚砜(DMSO)诱导小鼠红白血病(MEL)细胞分化,系统地分析和鉴定诱导分化不同时间的差异蛋白质组学。方法 DMSO诱导MEL细胞分化,通过联苯胺染色、MTT比色法和Ter119免疫荧光等实验检测细胞分化的比率和细胞的活力,并利用双... 目的利用二甲基亚砜(DMSO)诱导小鼠红白血病(MEL)细胞分化,系统地分析和鉴定诱导分化不同时间的差异蛋白质组学。方法 DMSO诱导MEL细胞分化,通过联苯胺染色、MTT比色法和Ter119免疫荧光等实验检测细胞分化的比率和细胞的活力,并利用双向电泳耦联质谱技术,结合生物信息学分析诱导MEL细胞分化过程中差异表达的蛋白质。结果 1.2%DMSO诱导MEL细胞分化,分别培养0h、6h、12h、24h、36h、48h、72h、96h、120h,利用双向电泳和质谱分析,共鉴定出87种蛋白质。1.2%DMSO作用MEL细胞120h后,细胞诱导分化率达到67%。MTT实验显示,1.0%、1.2%、1.4%的DMSO对MEL细胞的活力无明显的抑制作用。结论 DMSO对MEL细胞有诱导分化作用,但无明显地抑制细胞增殖。87种双向电泳差异蛋白质按功能可分为12类,比例最大的前3类分别是:占41%的酶类蛋白、15%的结构蛋白、13%的调节蛋白。 展开更多

关键词 小鼠红白血病细胞 二甲基亚砜 诱导 分化 双向电泳 小鼠

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大鼠血清的4种处理方法对2-DE效果的影响 被引量：1

8

作者 张彬 谭岩 《中国实验诊断学》 2012年第9期1544-1547,共4页

目的比较大鼠血清样本的4种制备方法对血清蛋白质双向凝胶电泳(2-DE)分离效果的影响。方法分别用直接溶解法、试剂盒沉淀除杂质、改良的TCA/丙酮法和采用去白蛋白及免疫球蛋白试剂盒预处理大鼠血清样本,双向电泳分离血清蛋白;硝酸银染色... 目的比较大鼠血清样本的4种制备方法对血清蛋白质双向凝胶电泳(2-DE)分离效果的影响。方法分别用直接溶解法、试剂盒沉淀除杂质、改良的TCA/丙酮法和采用去白蛋白及免疫球蛋白试剂盒预处理大鼠血清样本,双向电泳分离血清蛋白;硝酸银染色;image master5.0软件分析所得蛋白质斑点。结果对直接溶解法、试剂盒沉淀除杂质、改良的TCA/丙酮法和采用去白蛋白及免疫球蛋白试剂盒预处理的大鼠血清样本进行双向电泳分离,经3次重复性检测,凝胶的平均蛋白质点数分别为610±54,683±46,735±42和865±39,平均匹配点数为532±39,543±51,623±42和746±52,匹配率为83.4%,86.2%,82.3%和85.5%,分析不同凝胶间蛋白质点在IEF方向的位置偏差为(0.87±0.31)mm,(0.79±0.23)mm,(0.82±0.33)mm和(0.85±0.30)mm,在SDS-PAGE方向上的偏差为(0.84±0.42)mm,(0.81±0.39)mm,(0.99±0.16)mm和(0.97±0.12)mm。结论采用改良的TCA/丙酮沉淀法及采用去白蛋白及免疫球蛋白试剂盒处理的大鼠血清样本进行双向凝胶电泳均能得到分辨率较高且重复性好的电泳图谱,且应用去白蛋白及免疫球蛋白试剂盒优于改良的TCA/丙酮沉淀法。 展开更多

关键词 血清 蛋白质组学 双向凝胶电泳 高丰度蛋白

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应用二维DNA电泳检测大肠癌错配修复基因hMLH1突变

9

作者 房殿春 杨仕明 +4 位作者 杨建民 刘海峰 彭贵勇 肖天利 刘为纹 《重庆医学》 CAS CSCD 2003年第9期1160-1163,共4页

目的　探讨大肠癌错配修复基因hMLH1突变与微卫星不稳 (MSI)的关系。方法　采用二维DNA电泳和DNA测序技术检测hMLH1突变 ;采用PCR为基础的方法检测MSI。结果　 76例大肠癌中检出hMLH1基因突变 8例 ,突变率为 10 .5% ,检出MSI 2 0例 ,检... 目的　探讨大肠癌错配修复基因hMLH1突变与微卫星不稳 (MSI)的关系。方法　采用二维DNA电泳和DNA测序技术检测hMLH1突变 ;采用PCR为基础的方法检测MSI。结果　 76例大肠癌中检出hMLH1基因突变 8例 ,突变率为 10 .5% ,检出MSI 2 0例 ,检出率为 2 6 .3%。右侧大肠癌hMLH1突变和MSI的检出率显著高于左侧大肠癌 (P <0 .0 5 ) ,hMLH1突变与肿瘤大小、分化程度、组织学类型、浸润深度、淋巴结转移和临床病理分期无显著相关。将MSI分为高频率MSI(MSI H ,≥ 2个位点 ) 10例、低频率MSI(MSI L ,仅为 1个位点 ) 10例和MSI阴性 (MSS) 5 6例 3组 ,8例hMLH1基因突变均发生于MSI H组 ,而MSI L和MSS组未见有突变者。结论　hMLH1基因突变与MSI多发生于右侧大肠癌 。 展开更多

关键词 大肠癌 hMLH1突变 微卫星不稳 二维DNA电泳

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胃癌错配修复基因hMLH1突变与微卫星DNA不稳的关系 被引量：1

10

作者 房殿春 罗元辉 刘为纹 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第9期1012-1014,共3页

目的　探讨胃癌错配修复基因hMLH1突变与微卫星不稳 (MSI)的关系。方法　采用PCR为基础的方法检测MSI ;采用二维DNA电泳和DNA测序技术检测hMLH1突变。结果　 6 8例胃癌中检出hMLH1基因突变 3例 ,突变率为 4.4%。hMLH1突变与肿瘤大小、... 目的　探讨胃癌错配修复基因hMLH1突变与微卫星不稳 (MSI)的关系。方法　采用PCR为基础的方法检测MSI ;采用二维DNA电泳和DNA测序技术检测hMLH1突变。结果　 6 8例胃癌中检出hMLH1基因突变 3例 ,突变率为 4.4%。hMLH1突变与肿瘤大小、分化程度、组织学类型、浸润深度和临床病理分期无显著相关。至少有 1个位点发现MSI者 17例 ( 2 5 .0 % )。将MSI分为高频率MSI(MSI H ,≥ 2个位点 ) 8例、低频率MSI(MSI L ,仅为 1个位点 ) 9例和MSI阴性 (MSS) 5 1例 3组 ,4例hMLH1基因突变均发生于MSI H组 ,而MSI L和MSS组未见有突变者。结论　hMLH1基因突变仅是部分MSI发生的原因 ,MSI的发生可能还涉及到hMLH1以外错配修复基因改变。 展开更多

关键词 胃癌 hMLH1突变 二维DNA电泳 微卫星不稳 错配修复基因

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蛋白质组学研究方法及应用的研究进展 被引量：7

11

作者 谭伟 黄莉 谢芝勋 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第9期40-46,共7页

蛋白质是细胞生理功能的具体执行者,并常以蛋白复合体或与核酸相互作用的形式来发挥作用。蛋白质组代表在一定时间和特定条件下,1个细胞、组织或生物个体所表达的全部蛋白,因此蛋白质组会随着时间和空间的改变而发生动态变化。蛋白质组... 蛋白质是细胞生理功能的具体执行者,并常以蛋白复合体或与核酸相互作用的形式来发挥作用。蛋白质组代表在一定时间和特定条件下,1个细胞、组织或生物个体所表达的全部蛋白,因此蛋白质组会随着时间和空间的改变而发生动态变化。蛋白质组学从整体水平研究蛋白质组的结构、功能、表达模式及其相互作用的方式。根据研究内容的不同,蛋白质组学可分为表达蛋白质组学、结构蛋白质组学和功能蛋白质组学等。研究蛋白质组学有助于了解蛋白的结构、细胞的功能、生命的本质及活动规律,为疾病的诊断、治疗、疫苗及新药开发提供科学依据。研究蛋白质组学的常用手段主要有:双向聚丙烯酰胺凝胶电泳、质谱、酵母双杂交系统及蛋白芯片法等,文章将对蛋白质组学常用的技术方法及应用进行综述。 展开更多

关键词 蛋白质组学 双向凝胶电泳 质谱 蛋白质分析

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丽江云杉体胚发生过程差异蛋白分析

12

作者 陈少瑜 吴涛 +2 位作者 陈芳 王寅冰 易善军 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期117-122,共6页

以丽江云杉非胚性愈伤组织、胚性愈伤组织以及体胚发育过程的球型胚、鱼雷胚和子叶胚培养物为材料,采用双向电泳技术对体胚发生过程中特异表达蛋白进行分析。结果表明,丽江云杉非胚性、胚性愈伤组织及不同发育阶段体胚的蛋白质种类丰富(... 以丽江云杉非胚性愈伤组织、胚性愈伤组织以及体胚发育过程的球型胚、鱼雷胚和子叶胚培养物为材料,采用双向电泳技术对体胚发生过程中特异表达蛋白进行分析。结果表明,丽江云杉非胚性、胚性愈伤组织及不同发育阶段体胚的蛋白质种类丰富(1 857-2 344个),胚性愈伤及发育体胚蛋白种类多于非胚性愈伤,球型胚蛋白种类最为丰富(2 344个)。非胚性、愈伤组织及各发育阶段体胚共检测到44个差异表达蛋白,它们有明显的变化特点,子叶胚阶段的差异蛋白变化最为显著(23个,占特异蛋白总数的52.3%),鱼雷胚新出现大比例的分子量小于30 kD、pI为6.0左右的弱酸性小分子量特异蛋白(8个,占此阶段特异蛋白总数的88.9%),这些体胚发育晚期特异表达蛋白可能与体胚形态建成有密切关系。 展开更多

关键词 丽江云杉 体细胞胚胎发生 胚性愈伤组织 双向电泳技术 差异蛋白

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沙田柚花粉蛋白质双向电泳分析 被引量：9

13

作者 杨继华 颜承 +1 位作者 薛妙男 秦新民 《广西师范大学学报（自然科学版）》 CAS 2002年第2期73-77,共5页

比较分析沙田柚花粉不同发育时期和自交、异交花粉蛋白质的双向凝胶电泳图谱 .随着花粉的发育 ,其蛋白质格局始终处于变化之中 ,单核期和双核期花粉中相对分子质量小的蛋白质明显增多 ,萌发的花粉中相对分子质量小的蛋白质亦较多 ,是与... 比较分析沙田柚花粉不同发育时期和自交、异交花粉蛋白质的双向凝胶电泳图谱 .随着花粉的发育 ,其蛋白质格局始终处于变化之中 ,单核期和双核期花粉中相对分子质量小的蛋白质明显增多 ,萌发的花粉中相对分子质量小的蛋白质亦较多 ,是与此时花粉生理活动旺盛有关 .自交、异交花粉蛋白质格局无明显差别 ,但是发现异交花粉管中一些蛋白质在自交花粉管中缺失或含量较低 ,说明自交条件下花粉管一些蛋白质表达可能受到了抑制 .该结果为“膜受体假说”提供了一个新的实验证据 . 展开更多

关键词 双向电泳分析 沙田柚 花粉 蛋白质 双向凝胶 电泳图谱 S蛋白 自交不亲和机理

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