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海带硫酸多糖的提取、纯化及其理化分析 被引量：42
1
作者 刘轲 王琪琳 +1 位作者 吕辉 王海仁 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 2002年第3期114-116,共3页
目的研究海带硫酸多糖 (LPS)的提取制备及其组分的纯化和理化性质。方法采用酶解法从海带提取制备LPS,海带浆加入纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶和蛋白酶 ,50℃水解 4h。取滤液加入氯化钙 ,离心去除海藻酸钙。取上清液加入十六烷基三甲... 目的研究海带硫酸多糖 (LPS)的提取制备及其组分的纯化和理化性质。方法采用酶解法从海带提取制备LPS,海带浆加入纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶和蛋白酶 ,50℃水解 4h。取滤液加入氯化钙 ,离心去除海藻酸钙。取上清液加入十六烷基三甲基溴化铵 (CTAB)与LPS结合沉淀 ,离心收集CTAB LPS沉淀物。加入氯化钙溶液进行盐解 ,将LPS游离释放出来 ,加入乙醇使LPS析出。离子交换色谱和凝胶过滤色谱法分离纯化其多糖组分。结果酶解提取法的收率为 5‰ ,色谱法分离得到 4个主要多糖组分 ,测定其分子量分别为 2 1 0、1 2 0、40 0和 1 4 0kD。酶解法的提取收率高于水煮法。 展开更多
关键词 海带硫酸多糖 酶解 离子交换色谱 凝胶色谱
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菜籽肽清除自由基作用的研究 被引量：40
2
作者 薛照辉 吴谋成 +2 位作者 罗祖友 严奉伟 周志江 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期71-72,75,共3页
双酶分步水解的菜籽清蛋白粗品肽(RSP-R)经SephadexG-25凝胶层析柱分离纯化,得到分子量依次降低的三个级分(RSP-1,RSP-2和RSP-3)。离体实验结果表明,菜籽肽具有较强的还原能力及抑制·OH的作用;RSP-R和RSP-1对活性氧的产生有抑制作... 双酶分步水解的菜籽清蛋白粗品肽(RSP-R)经SephadexG-25凝胶层析柱分离纯化,得到分子量依次降低的三个级分(RSP-1,RSP-2和RSP-3)。离体实验结果表明,菜籽肽具有较强的还原能力及抑制·OH的作用;RSP-R和RSP-1对活性氧的产生有抑制作用,抑制效果的最佳浓度为0.5mg/mL。 展开更多
关键词 菜籽清蛋白 菜籽肽 凝胶色谱 自由基 体外
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超滤法提取六味地黄汤活性多糖的工艺研究 被引量：31
3
作者 王厚廷 乔善义 +4 位作者 杨明 姚志伟 付艳荣 张永祥 赵毅民 《解放军药学学报》 CAS 2001年第2期69-70,共2页
目的　建立用超滤法快速分离六味地黄汤中免疫活性多糖的工艺。方法　利用两支不同孔径中空纤维超滤柱截留活性多糖部位 ;采用凝胶柱层析结合硫酸 -苯酚显色法 ,测定多糖的分子量 ;利用酸水解和TLC测定多糖的主要糖组成。结果　得到相... 目的　建立用超滤法快速分离六味地黄汤中免疫活性多糖的工艺。方法　利用两支不同孔径中空纤维超滤柱截留活性多糖部位 ;采用凝胶柱层析结合硫酸 -苯酚显色法 ,测定多糖的分子量 ;利用酸水解和TLC测定多糖的主要糖组成。结果　得到相对分子量 3万左右的多糖组分。结论　超滤法分离多糖是一种有效的方法。工艺简单 。 展开更多
关键词 六味地黄汤 超滤法 多糖 凝胶柱层析 中药
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自身对照外标法定量测定β-内酰胺类抗生素中的高分子杂质 被引量：43
4
作者 胡昌勤 金少鸿 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期23-27,共5页
β-内酰胺类抗生素中高分子杂质的控制问题目前已引起人们的普遍关注，尽管SephadexG－10凝胶色谱系统可用于对高分子杂质的分离，但对分离出的杂质峰如何进行精确定量，仍是质量控制工作中的难点．虽然理论上外标法和面积规一化法均可... β-内酰胺类抗生素中高分子杂质的控制问题目前已引起人们的普遍关注，尽管SephadexG－10凝胶色谱系统可用于对高分子杂质的分离，但对分离出的杂质峰如何进行精确定量，仍是质量控制工作中的难点．虽然理论上外标法和面积规一化法均可用于定量，但由于高分子杂质的不均一性及其含量极微，故不能适用。我们利用特定条件下β-内酰胺类抗生素可以缔合形成表观分子量较大的缔合物，缔合物在SephadexG－10凝胶色谱系统中的色谱行为和高分子杂质一样，都在Kav＝0处表现为单一的色谱峰这一特点，在SephadexG－10凝胶色谱系统中发展了新的定量方法——自身对照外标法。自身对照外标法集外标法和面积规一法的优点为一体，既不需专门的标准品，又可象外标法一样精确对高分子杂质峰进行定量。文中还对自身对用外标法应用中的诸影响因素进行了讨论。 展开更多
关键词 内酰胺类 抗生素 高分子杂质 自身对照外标法
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安美汀中高分子杂质的分离分析与质量控制 被引量：36
5
作者 顾立素 胡昌勤 金少鸿 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期13-15,共3页
目的 :建立对安美汀 (阿莫西林 /克拉维酸钾 )中高分子杂质进行分离分析与质量控制的方法和指标。方法 :采用以SephadexG - 10 ,SephadexG - 15 ,TSK2 0 0 0SW ,TSK2 5 0 0PWXL等为填料的一系列凝胶色谱系统。结果 :确定了TSK2 5 0 0PWX... 目的 :建立对安美汀 (阿莫西林 /克拉维酸钾 )中高分子杂质进行分离分析与质量控制的方法和指标。方法 :采用以SephadexG - 10 ,SephadexG - 15 ,TSK2 0 0 0SW ,TSK2 5 0 0PWXL等为填料的一系列凝胶色谱系统。结果 :确定了TSK2 5 0 0PWXL凝胶分离系统 ,采用对高分子杂质总量 (Kav <0 3)和分子量最大的杂质量 (Kav <0 1)进行联合控制的质控方法 ,其检测指标依据临床免皮试研究用样品的高分子杂质的检验结果而制订。结论 :方法简便 ,结果可靠 ,现已用于我国药品质量标准中对安美汀高分子杂质含量的控制。 展开更多
关键词 安美汀 阿莫西林 克拉维酸 高分子杂质 凝胶色谱 质量控制
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凝胶过滤色谱法测定泥鳅多糖的组成及分子量 被引量：24
6
作者 钦传光 黄开勋 徐辉碧 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2002年第4期411-413,共3页
从泥鳅粘液中分离提取到中性的粗多糖 ,采用凝胶过滤色谱柱在高效液相色谱仪上进行分离和测定 ,结果表明 ,该多糖由一个高聚糖 (MAP ,19 1% )和一个寡糖 (MAO ,80 9% )组成。用标准的Pullulan(P 112 0 0 0 ,P 4 730 0 ,P 2 2 80 0 ,P 5... 从泥鳅粘液中分离提取到中性的粗多糖 ,采用凝胶过滤色谱柱在高效液相色谱仪上进行分离和测定 ,结果表明 ,该多糖由一个高聚糖 (MAP ,19 1% )和一个寡糖 (MAO ,80 9% )组成。用标准的Pullulan(P 112 0 0 0 ,P 4 730 0 ,P 2 2 80 0 ,P 5 90 0 ,P 2 70 0 )作标准曲线 ,测得其重均分子量分别为 130 2 5 2 (约 72 3个糖基 )和 15 39(约 9个糖基 )。粗多糖经SephadexG 10 0凝胶柱 (1cm× 5 0cm)过滤 ,分离得到纯化的MAP和MAO。 展开更多
关键词 凝胶过滤色谱法 测定 泥鳅多糖 组成分析 分子量 分离 纯化 中药
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β-内酰胺抗生素在Superdex peptide凝胶过滤色谱柱上的色谱行为 被引量：31
7
作者 蔡姗英 胡昌勤 冯芳 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期157-161,192,共6页
目的 :通过研究 β 内酰胺抗生素与Superdexpeptide凝胶介质的相互作用 ,为建立和优化 β 内酰胺抗生素中高分子杂质的分离分析方法提供理论参考。方法 :考察 8种 β 内酰胺抗生素在Superdexpeptide凝胶介质中不同色谱条件下的色谱行为 ... 目的 :通过研究 β 内酰胺抗生素与Superdexpeptide凝胶介质的相互作用 ,为建立和优化 β 内酰胺抗生素中高分子杂质的分离分析方法提供理论参考。方法 :考察 8种 β 内酰胺抗生素在Superdexpeptide凝胶介质中不同色谱条件下的色谱行为 ,并与其在TSKG2 0 0 0SW亲水性多孔硅胶介质中的色谱行为比较。结果 :β 内酰胺抗生素在Superdexpeptide和TSKG2 0 0 0SW介质中的保留行为受到流动相缓冲盐组分、pH值、离子强度的影响。结论 :β 内酰胺抗生素在凝胶介质中受到分子排阻、吸附作用的共同影响 ,不能简单地以保留体积判定 β 展开更多
关键词 Β-内酰胺抗生素 凝胶过滤色谱 分子排阻 吸附作用 速发型过敏反应 药品质量控制
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大豆蛋白水解物中肽分子分布的研究 被引量：21
8
作者 马永强 赵毅 石彦国 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2001年第3期15-17,共3页
研究采用超滤法与凝胶过滤色谱 (GFC)相结合实验方法就大豆蛋白酶解产物寡肽混合物的分子量的分布状况进行了测定。研究结果表明 ,木瓜蛋白酶与Asl .398蛋白酶的酶解物中以分子量在 10 0 0D以下的小肽为主 :木瓜蛋白酶解产物中分子量 10... 研究采用超滤法与凝胶过滤色谱 (GFC)相结合实验方法就大豆蛋白酶解产物寡肽混合物的分子量的分布状况进行了测定。研究结果表明 ,木瓜蛋白酶与Asl .398蛋白酶的酶解物中以分子量在 10 0 0D以下的小肽为主 :木瓜蛋白酶解产物中分子量 10 0 0D以下的占 6 3.9% ,10 0 0～ 2 0 0 0D之间的 4 .6 4 % ,2 0 0 0～ 4 0 0 0D之间的占 8.2 1% ,4 0 0 0～ 10 0 0 0D之间的占 8.2 0 % ,分子量 10 0 0 0D以上的占 15% ;As1.398蛋白酶酶解物中分子量 10 0 0D以下的占 72 .1% ,10 0 0D～ 2 0 0 0D的占 6 .4 2 % ,2 0 0 0D～ 4 0 0 0D之间的占 2 .5% ,4 0 0 0～ 10 0 0 0D之间的占 3.92 % ,10 0 0 0D以上的占 15% 展开更多
关键词 超滤 凝胶过滤色谱 大豆蛋白 分子量分布 大豆多肽 酶解产物
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蜂毒素的纯化方法及体外抗肿瘤作用研究 被引量：14
9
作者 刘岭 凌昌全 黄雪强 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 2003年第4期163-166,共4页
目的从蜜蜂毒中分离纯化蜂毒素 ,观察其体外对多种肿瘤细胞的生长抑制作用。方法用SephadexG 2 5、SephadexG 5 0、SephadexG 75进行 3步色谱法从蜜蜂毒中分离纯化蜂毒素 ,以高效液相色谱法进行含量测定 ;溴化四唑蓝比色法观察蜂毒素对S... 目的从蜜蜂毒中分离纯化蜂毒素 ,观察其体外对多种肿瘤细胞的生长抑制作用。方法用SephadexG 2 5、SephadexG 5 0、SephadexG 75进行 3步色谱法从蜜蜂毒中分离纯化蜂毒素 ,以高效液相色谱法进行含量测定 ;溴化四唑蓝比色法观察蜂毒素对SMMC 772 1、BEL 74 0 2和Hep 3B等 3种肿瘤细胞的生长抑制作用。结果高效液相色谱测定结果显示供试品为单峰 ,保留时间与对照品一致 ;蜂毒素剂量依赖性地抑制 3种受试肿瘤细胞的生长。结论以凝胶过滤色谱可制得高纯度的蜂毒素 。 展开更多
关键词 蜂毒素 凝胶过滤色谱 高效液相色谱 抗肿瘤活性
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降血压肽分离的研究现状与展望 被引量：18
10
作者 黄朝明 孔繁东 +3 位作者 祖国仁 孙浩 季瑛 纪宁 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2006年第4期161-164,共4页
通过凝胶过滤色谱、反相高效液相色谱(RP-HPLC)等方法将不同来源的降血压肽进行分离,以得到结构明确的短肽片断,之后进行活性检测,从而为降血压机理的研究以及高血压的治疗提供了途径,并有望开发成降血压类功能食品。本论文概述了不同... 通过凝胶过滤色谱、反相高效液相色谱(RP-HPLC)等方法将不同来源的降血压肽进行分离,以得到结构明确的短肽片断,之后进行活性检测,从而为降血压机理的研究以及高血压的治疗提供了途径,并有望开发成降血压类功能食品。本论文概述了不同食物来源降血压肽国内外分离提纯研究的意义、现状及展望。 展开更多
关键词 降血压肽 分离 凝胶过滤色谱
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高效凝胶过滤色谱法测定玉米蛋白酶解产物寡肽的分子量分布 被引量：14
11
作者 王梅 戴军 谷文英 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 1998年第5期25-27,共3页
利用高效凝胶过滤色谱法（ＧＦＣ）测定玉米蛋白酶解产物寡肽混合物的分子量分布。并利用二极管阵列检测寡肽样品中芳香族氨基酸是否被去除。
关键词 寡肽 分子量分布 淀粉 玉米蛋白 酶解产物
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我国产日本医蛭水蛭素的分离和纯化 被引量：20
12
作者 杨潼 李建秋 尹平 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第2期169-173,共5页
采用离子交换柱层析与凝胶过滤柱层析的方法对从我国产的日本医蛙［Hirudonipponica（whitman）］活体中提取出的唾液腺分泌物进行分离和纯化，获得了较纯净的水蛭素（Hirudin）。测定结果表明：日本医蛭唾液腺分泌物提取液中水蛭素含量... 采用离子交换柱层析与凝胶过滤柱层析的方法对从我国产的日本医蛙［Hirudonipponica（whitman）］活体中提取出的唾液腺分泌物进行分离和纯化，获得了较纯净的水蛭素（Hirudin）。测定结果表明：日本医蛭唾液腺分泌物提取液中水蛭素含量为4AT－U／ml；纯化总得率为15％；纯化后的产物比活力为6708AT－U／mg蛋白。 展开更多
关键词 水蛭 日本医蛭 水蛭素 分离 纯化
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凝胶层析法精制栀子黄色素的研究 被引量：15
13
作者 吕晓玲 姚中铭 姜平平 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期39-42,共4页
研究了凝胶层析法精制栀子黄色素的工艺条件。其较佳的工艺条件是 :以葡聚糖凝胶为支持剂 ,双柱串联层析 (联洗 ) ,单柱高 30cm ,柱径 2cm ,洗脱流速 4mL/min ,以蒸馏水为洗脱剂 ,加样量 1 8mL ,精制得率 4 8 9%
关键词 凝胶层析法 栀子黄色素 精制 工艺条件 食品
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小麦面粉中阿拉伯木聚糖酶解性质的研究(I)——水溶性阿拉伯木聚糖的酶解 被引量：20
14
作者 周素梅 王璋 许时婴 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2000年第3期13-17,共5页
用水作溶剂从“特一粉”中提取水溶性阿拉伯木聚糖 (WEAX)进行酶解试验 :在较高的木聚糖酶水平下酶解 2h(酶 底物为 1.0× 10 - 3) ,WEAX被显著降解 ,粘度下降 80 % ;低的酶用量条件下 (酶 底物为 0 .1× 10 - 3)降解速率明... 用水作溶剂从“特一粉”中提取水溶性阿拉伯木聚糖 (WEAX)进行酶解试验 :在较高的木聚糖酶水平下酶解 2h(酶 底物为 1.0× 10 - 3) ,WEAX被显著降解 ,粘度下降 80 % ;低的酶用量条件下 (酶 底物为 0 .1× 10 - 3)降解速率明显降低 ,延长作用时间至 4h ,粘度仅下降 45 %。由WEAX及其酶解产物的凝胶过滤图谱可知 :WEAX具有多分散性 ,分子量分布范围从几万到几十万 ;WEAX中有一部分蛋白质是和多糖结合在一起的 。 展开更多
关键词 阿拉伯木聚糖 凝胶过滤色谱 酶解 小麦面粉
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玉米降血压肽的分离纯化研究 被引量：17
15
作者 李世敏 张丽君 +1 位作者 刘冬 黄国清 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第7期69-71,共3页
以玉米蛋白为原料酶解得到的酶解液具有降血压活性,为了得到高活性的降血压肽单体,本文采用了离子交换层析法、凝胶层析和RP-HPLC对酶解液进行了的分离纯化,得到了五个降血压多肽单体。
关键词 玉米降血压肽 离子交换层析 凝胶层析 RP-HPLC
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凝胶过滤法分离纯化大豆蛋白肽 被引量：13
16
作者 邹存媛 郑永杰 卢鹤 《齐齐哈尔大学学报（自然科学版）》 2006年第1期27-30,共4页
本文采用中性蛋白酶AS1.398水解大豆蛋白,通过正交实验确定最佳水解条件:水解温度、pH值分别为48℃和7.5,底物浓度为5%(W/V),酶用量为6%,酶解时间为4h,此时水解度(DH)达到24.57%。并对水解产物进行脱苦脱色,然后采用超滤以及凝胶过滤色... 本文采用中性蛋白酶AS1.398水解大豆蛋白,通过正交实验确定最佳水解条件:水解温度、pH值分别为48℃和7.5,底物浓度为5%(W/V),酶用量为6%,酶解时间为4h,此时水解度(DH)达到24.57%。并对水解产物进行脱苦脱色,然后采用超滤以及凝胶过滤色谱法分离分子量1200以下的小肽并收集。 展开更多
关键词 大豆肽 酶水解 超滤 凝胶过滤
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头孢噻肟、头孢曲松、头孢他啶中高分子杂质的含量测定 被引量：19
17
作者 余泽民 陈宁 +1 位作者 杨世铮 陈重 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期348-352,共5页
以建立头孢噻肟、头孢曲松、头孢他啶中高分子杂质含量的快速测定方法为目的 ,对不同离子对试剂、洗脱剂 p H、洗脱剂类型、离子对浓度、洗脱速度等因素进行了研究。所建立的测定头孢噻肟、头孢曲松中高分子杂质含量的测定方法为 Sephad... 以建立头孢噻肟、头孢曲松、头孢他啶中高分子杂质含量的快速测定方法为目的 ,对不同离子对试剂、洗脱剂 p H、洗脱剂类型、离子对浓度、洗脱速度等因素进行了研究。所建立的测定头孢噻肟、头孢曲松中高分子杂质含量的测定方法为 Sephadex G- 10 (粒度 40～ 12 0 μm)凝胶柱 ,内径 1.5 cm,柱长 45 cm,Vt5 0 ml;洗脱剂采用 p H7.0的 0 .1mol/ L 磷酸盐缓冲液 ;洗脱速度为 1.8ml/min。上样量 2 0 0 μl;检测器 :BP- 930 0高分子杂质分析仪。所建立的测定头孢他啶中高分子杂质含量的测定方法为 Sephadex G- 10 (粒度 40～ 12 0 μm)凝胶柱 ,内径1.5 cm,柱长 45 cm,Vt5 0 ml;洗脱剂采用 p H7.0的 1.0 mol/ L 磷酸盐缓冲液 ;洗脱速度 1.8ml/ min。上样量2 0 0 μl;检测器 :BP- 930 0高分子杂质分析仪。 展开更多
关键词 头孢噻肟 头孢曲松 头孢他啶 高分子杂质 质量
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高效液相色谱法在合成多肽分离与纯化中的应用 被引量：13
18
作者 韩香 顾军 《天津药学》 2003年第6期42-44,共3页
近年来 ,多肽药物化学形成并迅速发展成为药物化学的重要分支。而随着分离纯化技术的进展 ,又大大加快了新活性多肽的发现和合成速度。在多肽合成中 ,许多杂质显示与产物类似的性质 ,随着肽链的增长 ,分离的难度也增大 ,因此纯化的方法... 近年来 ,多肽药物化学形成并迅速发展成为药物化学的重要分支。而随着分离纯化技术的进展 ,又大大加快了新活性多肽的发现和合成速度。在多肽合成中 ,许多杂质显示与产物类似的性质 ,随着肽链的增长 ,分离的难度也增大 ,因此纯化的方法和工艺显得异常重要。本文综述了凝胶过滤色谱。 展开更多
关键词 高效液相色谱法 多肽 凝胶过滤色谱 离子交换色谱 反相高效液相色谱
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离子对凝胶色谱法分离头孢菌素中高分子杂质 被引量：17
19
作者 胡昌勤 金少鸿 孙学兰 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 1990年第5期357-362,共6页
利用头孢菌素和反离子HPO_4^(2-)的相互作用,在匍聚糖凝胶Sephadex G-10色谱柱中,对12种不同结构的头孢菌素中的高分子杂质进行了分离。 离子对试剂可以明显改变头孢菌素在葡聚糖凝胶Sephadex G-10中的色谱行为,使其Kav值增大,改变幅度... 利用头孢菌素和反离子HPO_4^(2-)的相互作用,在匍聚糖凝胶Sephadex G-10色谱柱中,对12种不同结构的头孢菌素中的高分子杂质进行了分离。 离子对试剂可以明显改变头孢菌素在葡聚糖凝胶Sephadex G-10中的色谱行为,使其Kav值增大,改变幅度和头孢菌素的侧链结构有关。依据实验结果,对反离子HPO_4^(2-)和头孢菌素作用,改变头孢菌素在Sephadex凝胶中色谱行为的机制进行了讨论。 展开更多
关键词 离子对色谱 头孢菌素 杂质
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凝胶过滤层析分离蛋白质实验中三种过滤介质分离效果的比较 被引量：15
20
作者 杨歌德 姜玉梅 周宏博 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 2002年第3期242-243,共2页
目的　探讨凝胶过滤层析分离蛋白质的最佳实验效果。方法　分别采用不同规格的凝胶过滤层析介质SephadexG 5 0、G 75、G 10 0 ,通过凝胶过滤层析法分离已知分子量的混合蛋白质。结果　混合样品得到分离 ,呈现三组分离样品的层析图。结... 目的　探讨凝胶过滤层析分离蛋白质的最佳实验效果。方法　分别采用不同规格的凝胶过滤层析介质SephadexG 5 0、G 75、G 10 0 ,通过凝胶过滤层析法分离已知分子量的混合蛋白质。结果　混合样品得到分离 ,呈现三组分离样品的层析图。结论　从大分子物质中除去小分子物质时应选用交联度大的介质G 5 0。进行中等蛋白质分离时 ,选用G 75较为合适。将小分子物质浓缩而除去大分子物质时 ,应选用交联度小的介质 ,如G 10 0或G 2 0 0。 展开更多
关键词 过滤介质 凝胶过滤层析 葡聚糖凝胶 洗脱液 蛋白质
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