用PCR—测序法对人类线粒体DNA多态区的研究 被引量：14

1

作者 张纯斌 周静 +2 位作者 宋慧娟 倪锦堂 李伯龄 《中国法医学杂志》 CSCD 1995年第3期129-132,共4页

用PCR方法，对线粒体DNA多态区15997至三6401区域进行扩增，产物DNA经纯化处理局直接进行自动化序列测定，得到了准确的序列结果。将得到的中国人mtDNA多态区序列与国外已报道的相应序列进行对比，证实我们所测序列与白种人相应序列之... 用PCR方法，对线粒体DNA多态区15997至三6401区域进行扩增，产物DNA经纯化处理局直接进行自动化序列测定，得到了准确的序列结果。将得到的中国人mtDNA多态区序列与国外已报道的相应序列进行对比，证实我们所测序列与白种人相应序列之间存在碱基差异。 展开更多

关键词 PCR dna序列测定 线粒体dna 多态性

全文增补中

中国人Leber遗传性视神经病家系线粒体DNA突变的研究 被引量：14

2

作者 张丽珊 黄鹰 +4 位作者 李方园 王世浚 朱斌 高静娟 童绎 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1994年第6期349-351,共3页

应用ＰＣＲ技术对１９个Ｌｅｂｅｒ病家系共１０２人进行了分析。结果表明这些家系的４５例患者中有３０例存在线粒体ＤＮＡ特异位点的点突变，其中２例存在杂合性，突变率为６６％。家系中的母系亲属５３名有２９人有突变，突变率为５... 应用ＰＣＲ技术对１９个Ｌｅｂｅｒ病家系共１０２人进行了分析。结果表明这些家系的４５例患者中有３０例存在线粒体ＤＮＡ特异位点的点突变，其中２例存在杂合性，突变率为６６％。家系中的母系亲属５３名有２９人有突变，突变率为５５％。正常个体无一发生该位点的突变。 展开更多

关键词 线粒体 视神经萎缩 基因重排 dna

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浙江宁波大榭遗址一期人骨的古DNA研究 被引量：3

3

作者 文少卿 雷少 +3 位作者 孙畅 杜盼新 熊建雪 王凌翔 《南方文物》 CSSCI 北大核心 2020年第6期261-266,共6页

长江下游地区是南方稻作农业的起源中心之一,该地区的史前人类对于中国南方人群的遗传贡献不容忽视,然其古DNA数据尚属空白。通过成功获取大榭遗址一期小型墓葬出土人骨中的2个样本的线粒体基因组序列,发现大榭古人的母系遗传类型分别... 长江下游地区是南方稻作农业的起源中心之一,该地区的史前人类对于中国南方人群的遗传贡献不容忽视,然其古DNA数据尚属空白。通过成功获取大榭遗址一期小型墓葬出土人骨中的2个样本的线粒体基因组序列,发现大榭古人的母系遗传类型分别属于单倍群M7b下的两个支系M7b1a1、M7b*。检索已发表的古代各地区/考古文化的线粒体数据均未出现大榭古人的遗传类型,这一现象可能和缺乏长江流域稻作人群的古DNA数据有关。通过对大榭古人与现代各语系人群的谱系比较,大榭古人可能与侗台语人群的祖先有关,在一定程度上支持部分良渚古人可能沿海岸线南下的说法。 展开更多

关键词 大榭遗址 古dna 线粒体基因组 良渚人群 侗台语人群

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荧光MGB探针在Leber遗传性视神经病变mtDNA G11778A基因突变检测中的应用 被引量：7

4

作者 李毓敏 王剑勇 +3 位作者 陈瑜 邵俊斌 王竞 童绎 《中华眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期728-732,共5页

目的建立一套快速、准确、简便筛查Leber遗传性视神经病变(LHON)mtDNA C11778A基因突变的新方法,并初步判断其异质性个体中野生和突变比例。方法采用荧光MGB探针实时聚合酶链反应(PCR)技术,在同一个反应体系中引入野生和突变型两种探针... 目的建立一套快速、准确、简便筛查Leber遗传性视神经病变(LHON)mtDNA C11778A基因突变的新方法,并初步判断其异质性个体中野生和突变比例。方法采用荧光MGB探针实时聚合酶链反应(PCR)技术,在同一个反应体系中引入野生和突变型两种探针,应用多荧光通道PCR仪分别检测LHON家系中20例患者血样和17例正常人血样,将检测结果与核酸序列测定结果比较。结果正常人血样检测结果:荧光PCR技术检测VIC通道均为阳性,FAM通道均为阴性,判断为LHON mtDNA野生型,与测序结果完全吻合;临床LHON患者及家系成员测序结果:LHON mtDNA变异型患者12例,荧光PCR技术检测均为LHON mtDNA变异阳性,其中为LHON mtDNA变异株和野生株混合的5例,混合型中变异株与野生株Ct值均大于25％;测序结果显示LHON mtDNA野生型8例,荧光PCR技术检测LHON mtDNA野生型为5例,LHON mtDNA变异株和野生株混合型3例,其中变异株与野生株Ct值均小于25％;荧光定量PCR技术检测LHON mtDNA G11778A基因突变耗时仅为80 min,远短于测序时间。结论荧光MGB探针实时PCR技术能简便、快速、准确地检测LHON mtDNA C11778A基因突变,判断个体异质性中野生和突变比例,对进一步探讨LHON患者是否存在mtDNA基因突变阈值有重要价值。 展开更多

关键词 视神经萎缩 遗传性 Leber dna 线粒体 突变 核酸探针 聚合酶链反应

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一种新发现的线粒体DNA大片段缺失与衰老的关系初探 被引量：3

5

作者 张燕 王学敏 +1 位作者 蒋蕾 沈茜 《中华老年医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期120-123,共4页

目的　在人外周血细胞中筛选新的线粒体DNA(mtDNA)大片段缺失突变 ,探讨mtDNA大片段缺失突变与衰老的关系。　方法　以人外周血细胞DNA为模板 ,进行聚合酶链反应 (PCR)扩增 ,产物克隆、测序。用PCR半定量方法测定 <6 0岁组和≥ 6 0... 目的　在人外周血细胞中筛选新的线粒体DNA(mtDNA)大片段缺失突变 ,探讨mtDNA大片段缺失突变与衰老的关系。　方法　以人外周血细胞DNA为模板 ,进行聚合酶链反应 (PCR)扩增 ,产物克隆、测序。用PCR半定量方法测定 <6 0岁组和≥ 6 0岁组中突变型与野生型的比例。　结果　在人外周血细胞中发现 1条长达 13 1kb的mtDNA缺失突变 ,<6 0岁组和≥ 6 0岁组突变型与野生型的比例 ,差异有显著性。　结论　该突变以前未见报道 ,可能是一种与衰老有关的缺失突变。 展开更多

关键词 线粒体dna 基因缺失 衰老 疾病 基因突变

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家族性糖尿病人群中线粒体ND-1基因点突变的分析研究 被引量：2

6

作者 王遂军 吴松华 +3 位作者 郑泰山 杨震 陆惠娟 项坤三 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期156-158,共3页

目的了解线粒体ND-1基因mt3316G→A、mt3394T→C变异在中国家族性糖尿病人群中的发生率及其临床特点。方法应用PCR-RFLP结合直接测序方法对随机抽取的无亲缘关系的770个糖尿病家系的先证者及309例非糖尿病对照者进行线粒体基因mt3316G→... 目的了解线粒体ND-1基因mt3316G→A、mt3394T→C变异在中国家族性糖尿病人群中的发生率及其临床特点。方法应用PCR-RFLP结合直接测序方法对随机抽取的无亲缘关系的770个糖尿病家系的先证者及309例非糖尿病对照者进行线粒体基因mt3316G→A、mt3394T→C变异的筛查。结果在糖尿病先证者组中发现17例(2.21%)mt3316G→A变异,18例(2.34%)mt3394T→C变异;在正常对照组中分别发现5例(1.62%)和6例(1.94%)变异携带者,变异的发生率在两组间差异无统计学意义。在糖尿病先证者组见到2例同时携带上述两种变异者。伴mt3316G→A或mt3394T→C突变的糖尿病组与无该变异的糖尿病组之间的临床特点(年龄、体质指数、胰岛素抵抗指数)比较差异无统计学意义。结论线粒体ND-1基因mt3316G→A,mt3394T→C变异可能不是中国人线粒体糖尿病发病的致病原因,而是中国人线粒体的基因多态。 展开更多

关键词 糖尿病 dna 线粒体 点突变

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2型糖尿病患者线粒体常见基因突变PCR检测的局限性

7

作者 刘建伟 詹志伟 +7 位作者 王磊 王欣然 崔志辉 吴多彬 刘静 刘玲玲 王士雯 叶玲 《军医进修学院学报》 CAS 北大核心 2006年第1期25-27,共3页

目的:研究北京地区汉族人群中线粒体DNA(m itochondrial DNA,m tDNA)多位点突变频率与2型糖尿病之间的相关性。方法:采用直接PCR、PCR-限制性片段长度多态性(restriction fragm ent length polymorph ism,RFLP)、PCR-时相温度梯度凝胶电... 目的:研究北京地区汉族人群中线粒体DNA(m itochondrial DNA,m tDNA)多位点突变频率与2型糖尿病之间的相关性。方法:采用直接PCR、PCR-限制性片段长度多态性(restriction fragm ent length polymorph ism,RFLP)、PCR-时相温度梯度凝胶电泳(temporal temperature grad ient gel electrophoresis,TTGE)法筛查m tDNA 4977片段缺失、线粒体tRNALeu(UUR)A3243G突变和m tDNA T14577C突变。结果:在250例2型糖尿病患者及142例健康对照外周血基因组总DNA中,未发现m tDNA 4977缺失、线粒体tRNALeu(UUR)A3243G突变及m tDNA T14577C突变。结论:m tDNA 4977缺失、线粒体tRNALeu(UUR)A3243G突变及m tDNA T14577C突变在外周血中没有检出,采用常规PCR法检测2型糖尿病患者外周血线粒体DNA突变具有较大的局限性。 展开更多

关键词 糖尿病 非胰岛素依赖型 dna线粒体 突变 遗传学

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线粒体DNA多态性在海洋动物群体遗传结构研究中的应用 被引量：11

8

作者 于旭蓉 仇雪梅 +1 位作者 柳晓瑜 徐丽 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期49-54,共6页

线粒体DNA(mtDNA)分析在揭示物种亲缘关系、遗传比较、系统进化和遗传结构等领域的研究中得到了广泛的应用,尤其是在海洋动物的遗传结构研究中发挥了重要的作用。介绍线粒体DNA的结构特征、多态性研究方法,并对其在海洋动物群体遗传结... 线粒体DNA(mtDNA)分析在揭示物种亲缘关系、遗传比较、系统进化和遗传结构等领域的研究中得到了广泛的应用,尤其是在海洋动物的遗传结构研究中发挥了重要的作用。介绍线粒体DNA的结构特征、多态性研究方法,并对其在海洋动物群体遗传结构研究中的应用进行了综述。 展开更多

关键词 遗传结构 海洋动物 线粒体dna 线粒体dna多态性

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增龄对大鼠心肌线粒体DNA氧化损伤的影响 被引量：9

9

作者 王学美 富宏 刘庚信 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第9期592-593,共2页

目的　探讨增龄对大鼠心肌线粒体 DNA(mt DNA)缺失、线粒体呼吸链酶复合体及 ATP合成的影响。方法　 Wistar雄性大鼠分为 3组 :幼年组 (1月龄 )、青年组 (6月龄 )各 1 2只和老年组 (2 4月龄 ) 1 0只。心肌线粒体 DNA缺失、线粒体呼吸链... 目的　探讨增龄对大鼠心肌线粒体 DNA(mt DNA)缺失、线粒体呼吸链酶复合体及 ATP合成的影响。方法　 Wistar雄性大鼠分为 3组 :幼年组 (1月龄 )、青年组 (6月龄 )各 1 2只和老年组 (2 4月龄 ) 1 0只。心肌线粒体 DNA缺失、线粒体呼吸链酶复合体及腺苷三磷酸 (ATP)合成分别用聚合酶链反应 (PCR)、酶动力学和生物发光技术进行测定。结果　 3组大鼠均有不同程度 mt DNA缺失。老年组 mt DNA缺失 (2 .0 9± 1 .62 )较幼年组 mt DNA缺失 (0 .77± 1 .1 6)明显增高 (P<0 .0 5) ;较青年组 mt DNA缺失 (1 .54± 1 .1 7)也有升高的趋势 (P>0 .0 5)。老年组心线粒体呼吸链复合酶 活力 (2 347.2 1± 62 3.33)均较青年组 (3 859.1 2± 70 3.53)、幼年组 (4776.90± 548.63)明显降低 (P<0 .0 1 )。老年组心线粒体 ATP合成量 (1 96.95± 33.2 6)较青年组 (337.53± 62 .1 8)明显降低 (P<0 .0 1 )。心线粒体呼吸链复合酶 活力 3组间无明显性差异 (P>0 .0 5)。结论　大鼠线粒体 DNA氧化损伤与衰老有一定的相关性。 展开更多

关键词 大鼠 心肌线粒体dna 氧化损伤 衰老 聚合酶链反应 自由基

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线粒体DNA转录表达与胃癌发生关系的研究 被引量：4

10

作者 韩琤波 李凡 +3 位作者 毛晓韵 张淑敏 吴东瑛 辛彦 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2006年第21期1205-1209,共5页

目的:检测胃癌组织线粒体DNA的转录表达水平变化,探讨mtDNA转录表达变化与胃癌发生的关系。方法:应用RT-PCR法检测42例配对的胃癌和癌旁正常胃粘膜组织的线粒体编码基因COⅠ、ND4、ND5、cyt-b和ATP-6的转录表达差异,并以β-actin作为定... 目的:检测胃癌组织线粒体DNA的转录表达水平变化,探讨mtDNA转录表达变化与胃癌发生的关系。方法:应用RT-PCR法检测42例配对的胃癌和癌旁正常胃粘膜组织的线粒体编码基因COⅠ、ND4、ND5、cyt-b和ATP-6的转录表达差异,并以β-actin作为定量标准物,最后行琼脂糖凝胶电泳。结果:胃癌组织线粒体COⅠ和ND4的转录水平显著高于远癌正常胃粘膜组织,P<0.01;胃癌COⅠ和ND4的表达水平与胃癌的组织分化程度呈负相关;肠型胃癌ND4和COⅠ的表达高于弥漫型胃癌,P<0.05。结论:胃癌的发生需要线粒体提供的某些转录物和蛋白以维持其恶性表型所需要的能量和(或)其他物质,而且分化程度愈低愈需要这种活动以增强其恶性生物学表型和行为。 展开更多

关键词 胃癌 线粒体基因组 线粒体转录

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线粒体DNA突变合并肾脏损害 被引量：4

11

作者 谢红浪 许书添 +5 位作者 何群鹏 杨柳 郭锦洲 桂兰兰 陈惠萍 刘志红 《肾脏病与透析肾移植杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期519-523,535,共6页

目的:探讨3例线粒体病合并慢性肾脏病(CKD)患者的临床特点及预后。方法:2011年5月至2012年9月在南京军区南京总医院全军肾脏病研究所住院的CKD患者中共3例经线粒体DNA(mtDNA)基因检测确诊线粒体病,分析其肾外受累及肾脏损害的临床表现... 目的:探讨3例线粒体病合并慢性肾脏病(CKD)患者的临床特点及预后。方法:2011年5月至2012年9月在南京军区南京总医院全军肾脏病研究所住院的CKD患者中共3例经线粒体DNA(mtDNA)基因检测确诊线粒体病,分析其肾外受累及肾脏损害的临床表现和肾活检病理特点,并观察其预后。结果:(1)3例患者中2例青少年(14岁),另1例30岁,全部患者均消瘦(体质量指数13～17kg/m2)。例1生长发育迟缓,例3为早产儿。例1、例2有糖尿病家族史,例2有尿毒症家族史。(2)3例患者病程3～7月,临床均表现为水肿、蛋白尿和胱抑素C增高,肾小管损伤明显,均无高血压和镜下血尿。例1和例3组织学示局灶节段性肾小球硬化(FSGS),例2肾小球轻度系膜增生伴小动脉节段透明变性。(3)3例患者中糖尿病(2例)、高乳酸血症(2例)、听力消失或下降(3例)、癫痫发作(1例)、脑梗塞(1例)、智力障碍(2例)、视野缺失(1例),心律失常(1例)。(4)3例患者均经基因测序并证实mtDNA3243A>G突变位点,例2母亲和弟弟也检出与患者相同突变位点。(5)经治疗3例均停免疫抑制剂,补充辅酶Q10和左卡尼汀等治疗,蛋白尿部分缓解,血清肌酐稳定。结论:本文首次在国内报道3例伴肾脏损害的线粒体病患者,提示这类患者并非罕见,临床除肾脏受累外均伴明显的心脏和中枢神经系统损害。临床医师应加强对此类疾病的认识。 展开更多

关键词 线粒体dna点突变线粒体病肾脏损害

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肾病综合征、糖尿病、癫痫、预激综合征和神经肌源性损害 被引量：2

12

作者 许书添 谢红浪 刘志红 《肾脏病与透析肾移植杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期295-298,254,共5页

青年女性患者,肾病综合征起病,病程中逐渐出现糖尿病、癫痫、预激综合征及神经肌源性损害等多系统病变;经外周血细胞线粒体基因组检测证实线粒体DNA8969位点G→A发生点突变,它是线粒体病的一个新基因位点突变。提示一旦高度疑似线粒体病... 青年女性患者,肾病综合征起病,病程中逐渐出现糖尿病、癫痫、预激综合征及神经肌源性损害等多系统病变;经外周血细胞线粒体基因组检测证实线粒体DNA8969位点G→A发生点突变,它是线粒体病的一个新基因位点突变。提示一旦高度疑似线粒体病,虽未发现经典位点基因突变,仍需检测整个线粒体基因组。警示临床医师应根据患者肾外多系统受累并结合相关实验室检查综合分析,不要仅限于肾活检病理诊断,以免误诊、漏诊。青年女性患者,肾病综合征起病,病程中逐渐出现糖尿病、癫痫、预激综合征及神经肌源性损害等多系统病变;经外周血细胞线粒体基因组检测证实线粒体DNA8969位点G→A发生点突变,它是线粒体病的一个新基因位点突变。提示一旦高度疑似线粒体病,虽未发现经典位点基因突变,仍需检测整个线粒体基因组。警示临床医师应根据患者肾外多系统受累并结合相关实验室检查综合分析,不要仅限于肾活检病理诊断,以免误诊、漏诊。 展开更多

关键词 线粒体突变 肾病综合征 线粒体病

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