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棉花Lea蛋白D-113基因启动子的克隆及序列分析 被引量:13
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作者 罗克明 郭余龙 +2 位作者 肖月华 侯磊 裴炎 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第2期161-165,T001,共6页
为研究植物Lea (lateembryogenesisabundant)蛋白基因启动子在种子中的特异性表达 ,通过PCR扩增 ,从棉花(Gossypiumhirsutumcv .Coker312 )中克隆了Lea蛋白基因家族中D - 113基因上游 10 2 4bp的调控序列。DNA序列分析结果表明 ,该片段... 为研究植物Lea (lateembryogenesisabundant)蛋白基因启动子在种子中的特异性表达 ,通过PCR扩增 ,从棉花(Gossypiumhirsutumcv .Coker312 )中克隆了Lea蛋白基因家族中D - 113基因上游 10 2 4bp的调控序列。DNA序列分析结果表明 ,该片段与已报道的Lea蛋白基因同一家族该基因的对应序列同源性达 90 %以上。将该启动子序列与GUS基因融合 ,构建成表达载体后 ,通过基因枪轰击导入到经ABA诱导处理的棉花胚性愈伤组织和油菜种子以及棉花的根、茎、叶中 ,组织化学分析结果表明 ,D - 113基因启动子在胚中特异性表达。 展开更多
关键词 胚胎后期丰富性蛋白 D-113基因 启动子分析 棉花 克隆 序列分析
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蓝光对不同成熟期紫色彩椒采后果实花青素生物合成的影响 被引量:4
2
作者 王晓通 窦煜炜 +3 位作者 陈晓璐 李仪曼 栾恒 李岩 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期1507-1518,共12页
为探究蓝光对彩椒(Capsicum annuum)花青素合成的作用机理,本研究以紫色彩椒‘紫水晶’为试材,采用便携式色差仪、超高效液相色谱-串联质谱联用法以及实时荧光定量PCR技术对不同成熟时期采后蓝光和白光照射不同时长的彩椒果皮色度值、... 为探究蓝光对彩椒(Capsicum annuum)花青素合成的作用机理,本研究以紫色彩椒‘紫水晶’为试材,采用便携式色差仪、超高效液相色谱-串联质谱联用法以及实时荧光定量PCR技术对不同成熟时期采后蓝光和白光照射不同时长的彩椒果皮色度值、花青素组分和含量以及花青素合成相关基因表达水平进行测定。结果表明,紫色彩椒采后果实富含的主要花青素种类为飞燕草素衍生物,包括飞燕草素-3-O-芸香糖苷、飞燕草素-3-O-鼠李糖苷和飞燕草素-3-O-葡萄糖苷。在绿熟期彩椒果皮中花青素含量最高,且该时期花青素合成下游结构基因表达水平最高;与白光相比,蓝光显著诱导花青素合成相关基因表达并促进花青素积累。通过对绿熟期采后蓝光处理的彩椒果皮花青素含量及其合成基因表达水平进行相关性分析,筛选出CaF3′5′H、CaANS、CaUFGT及CaMYB113为该品种彩椒花青素合成的关键基因。进一步对转录因子CaMYB113进行生物信息学分析,发现该转录因子的启动子区域包含G-box元件和MRE结合位点,推测其可能调控蓝光诱导的紫色彩椒花青素合成。综上,绿熟期紫色彩椒采后果实中CaMYB113能够通过响应蓝光信号,调控其他花青素合成关键基因表达,促进彩椒果皮中飞燕草素积累。 展开更多
关键词 彩椒 蓝光 花青素 基因表达 CaMYB113
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白介素-1β基因-511和+3954多态性与男性煤矿职工慢性阻塞性肺疾病的相关性 被引量:3
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作者 刘运秋 王丽晔 +5 位作者 耿贺梅 刘晓宇 刘小云 兰璇 李宏芬 李倩 《疑难病杂志》 CAS 2014年第10期1004-1007,共4页
目的探讨白细胞介素-1β(IL-1β)基因-511和+3954多态性与男性煤矿职工慢性阻塞性肺疾病(COPD)的相关性。方法收集2009年1月-2013年6月河北联合大学附属开滦总医院呼吸科门诊筛查的234例煤矿职工COPD患者(煤矿职工COPD组)及250例同期健... 目的探讨白细胞介素-1β(IL-1β)基因-511和+3954多态性与男性煤矿职工慢性阻塞性肺疾病(COPD)的相关性。方法收集2009年1月-2013年6月河北联合大学附属开滦总医院呼吸科门诊筛查的234例煤矿职工COPD患者(煤矿职工COPD组)及250例同期健康对照人群(健康对照组),用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清IL-1β水平,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR—RFLP)方法检测-511C/T,+3954C/T位点的基因型。结果煤矿职工COPD组的血清IL-1β水平为(3.98±0.42)ng/ml,健康对照组为(2.76±0.18)ng/ml,2组间差异具有统计学意义(P<0.01)。煤矿职工COPD组IL-1β-511的CC、CT和TT基因型频率分别为20.1%、62.8%和17.1%,健康对照组分别为21.6%、60.4%和18.0%,2组相比差异无统计学意义(P>0.05)。煤矿职工COPD组IL-13+3954 CC、CT和TT基因型频率分别为83.8%、16.2%和0,健康对照组分别为86.8%、13.2%和0,2组相比无统计学意义(P>0.05)。2组人群IL—1β-511,+3954等位基因频率比较差异无统计学差异(P均>0.05)。结论煤矿职工COPD组血清IL-1β水平高于健康对照组,IL—1β-511、+3954的基因型频率与等位基因频率与煤矿职工CC)PD的发生无明显相关性。 展开更多
关键词 煤矿职工 慢性阻塞性肺疾病 白介素-1Β 基因多态性 男性
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‘凤丹’牡丹PoERF113基因的克隆及表达分析
4
作者 魏祯祯 宋程威 +2 位作者 郭丽丽 郭琪 侯小改 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期659-665,共7页
为克隆‘凤丹’(Paeonia ostii)花瓣衰老相关基因PoERF113的序列,分析其编码蛋白性质,探索其在不同发育时期花瓣、不同组织和不同品种的表达模式及对乙烯的响应,采用RT-PCR技术,从‘凤丹’牡丹中克隆到花瓣衰老相关基因PoERF113。该基... 为克隆‘凤丹’(Paeonia ostii)花瓣衰老相关基因PoERF113的序列,分析其编码蛋白性质,探索其在不同发育时期花瓣、不同组织和不同品种的表达模式及对乙烯的响应,采用RT-PCR技术,从‘凤丹’牡丹中克隆到花瓣衰老相关基因PoERF113。该基因属于AP2/ERF家族,其开放阅读框(ORF)为636bp,编码1个由211个氨基酸残基组成的蛋白,含有1个AP2保守结构域,不包含跨膜结构,蛋白相对分子质量约为53000,理论等电点(pI)为5.13,为不稳定蛋白,具有亲水性;qRT-PCR分析结果表明,PoERF113基因在露色期、初开期、半开期、盛开期、始衰期、衰败期均有表达,主要在‘凤丹’露色期的花瓣和叶片中表达;在早花‘凤丹’突变株系中表达量最高;PoERF113基因在早花‘凤丹’突变株系与‘凤丹’中的序列相同,不存在碱基差异;PoERF113基因对乙烯有响应,其表达量随处理时间和生育进程的延长呈逐渐升高的趋势,推测该基因可能与乙烯诱导后导致花衰老进程相关。 展开更多
关键词 ‘凤丹’牡丹 PoERF113 基因克隆 表达分析
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绵羊肺炎支原体p113基因的序列分析及功能预测 被引量:24
5
作者 杨发龙 张焕容 +1 位作者 汤承 岳华 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期117-121,共5页
采用多种软件对p113基因的相似性、跨膜结构、重复序列、信号肽、抗原表位等进行预测,并与同源序列进行比较分析.结果表明,p113基因是猪肺炎支原体黏附素基因p97的直系同源基因,并具有与P97蛋白R2区类似的特征性重复序列.通过综合比较分... 采用多种软件对p113基因的相似性、跨膜结构、重复序列、信号肽、抗原表位等进行预测,并与同源序列进行比较分析.结果表明,p113基因是猪肺炎支原体黏附素基因p97的直系同源基因,并具有与P97蛋白R2区类似的特征性重复序列.通过综合比较分析,推测P113蛋白极可能是绵羊肺炎支原体的黏附素和膜表面免疫原. 展开更多
关键词 绵羊肺炎支原体 p113基因 黏附素 免疫原
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Intestinal toxicity of deoxynivalenol is limited by supplementation with Lactobacillus plantarum JM113 and consequentially altered gut microbiota in broiler chickens 被引量:9
6
作者 Shengru Wu Yanli Liu +5 位作者 Yongle Duan Fangyuan Wang Fangshen Guo Fang Yan Xiaojun Yang Xin Yang 《Journal of Animal Science and Biotechnology》 SCIE CAS CSCD 2019年第1期218-230,共13页
Background: Limited research has focused on the effect of Lactobacillus on the intestinal toxicity of deoxynivalenol(DON).The present study was conducted to investigate the role of Lactobacillus plantarum(L.plantarum)... Background: Limited research has focused on the effect of Lactobacillus on the intestinal toxicity of deoxynivalenol(DON).The present study was conducted to investigate the role of Lactobacillus plantarum(L.plantarum) JM113 in protecting against the intestinal toxicity caused by DON.Methods: A total of 144 one-day-old healthy Arbor Acres broilers were randomly distributed into 3 treatments,including the CON(basal diet),the DON(extra 10 mg/kg deoxynivalenol),and the DL(extra 1 × 109 CFU/kg L.plantarum JM113 based on DON group) treatments.The growth performance,organ indexes,intestinal morphology,pancreatic digestive enzymes,intestinal secreted immunoglobulin A(sIgA),jejunal transcriptome,and intestinal microbiota were evaluated.Results: Compared with the CON and DL groups,the DON supplementation altered intestinal morphology,especially in duodenum and jejunum,where villi were shorter and crypts were deeper(P < 0.05).Meanwhile,the significantly decreased mRNA expression of jejunal claudin-1 and occludin(P < 0.05),ileal rBAT and jejunal GLUT1 of 21-day-old broilers(P < 0.05),as well as duodenal PepT1 and ileal rBAT of 42-day-old broilers were identified in the DON group.Moreover,supplementation with L.plantarum JM113 could increase duodenal expression of IL-10 and IL-12 of 21-dayold broilers,ileal s IgA of 42-day-old broilers,and the bursa of Fabricius index of 21-day-old broilers.Further jejunal transcriptome proved that the genes related to the intestinal absorption and metabolism were significantly reduced in the DON group but a significant increase when supplemented with extra L.plantarum JM113.Furthermore,the bacteria related to nutrient utilization,including the Proteobacteria,Escherichia,Cc-115(P < 0.05),Lactobacillus and Prevotella(P < 0.1) were all decreased in the DON group.By contrast,supplementation with L.plantarum JM113 increased the relative abundance of beneficial bacterium,including the Bacteroidetes,Roseburia,Anaerofustis,Anaerostipe,and Ruminococcus bromi(P < 0.05).Specifically,the increased abun 展开更多
关键词 Broiler CHICKENS DEOXYNIVALENOL Gut microbiota LACTOBACILLUS PLANTARUM JM113 mRNA SEQUENCING 16S rRNA gene SEQUENCING
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苹果MdMYB113基因响应高盐胁迫的功能鉴定 被引量:7
7
作者 李星伟 王庆江 +3 位作者 吴宇童 梁伟玲 吴瑞刚 程福厚 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期579-588,共10页
MYB转录因子家族作为植物中主要的转录因子家族之一,在响应非生物胁迫中发挥重要的调节作用。本研究以苹果‘金冠’为试验材料,基于苹果基因组数据库克隆了MYB转录因子家族基因MdMYB113。该基因编码区全长为804 bp,可编码267个氨基酸,... MYB转录因子家族作为植物中主要的转录因子家族之一,在响应非生物胁迫中发挥重要的调节作用。本研究以苹果‘金冠’为试验材料,基于苹果基因组数据库克隆了MYB转录因子家族基因MdMYB113。该基因编码区全长为804 bp,可编码267个氨基酸,等电点为5.12。系统进化树结果表明MdMYB113与拟南芥的AtMYB13/14/15亲缘关系较近。氨基酸序列比对分析显示, MdMYB113蛋白具有R2和R3序列的保守结构域,属于R2R3类型的MYB转录因子。MdMYB113蛋白定位于细胞核,具有一定的转录自激活活性。定量表达分析表明MdMYB113基因会因高盐胁迫显著诱导而上调表达。在苹果愈伤中过表达MdMYB113增强了其对盐胁迫的耐受性。综上所述,证明MdMYB113可能作为正调控因子参与到高盐胁迫反应中。 展开更多
关键词 MdMYB113基因 转录因子 盐胁迫 功能鉴定
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基于p113基因的绵羊肺炎支原体PCR检测方法的建立及应用 被引量:7
8
作者 冯旭飞 张贤宇 +1 位作者 王成龙 杨发龙 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1157-1161,共5页
为建立一种特异、敏感的绵羊肺炎支原体PCR检测技术,根据绵羊肺炎支原体p113基因设计引物,并对其特异性进行了评价,同时,对所建立的PCR方法的敏感性和临床样本中绵羊肺炎支原体的检出率进行了分析,并与现有的基于16SrRNA的PCR方法进行... 为建立一种特异、敏感的绵羊肺炎支原体PCR检测技术,根据绵羊肺炎支原体p113基因设计引物,并对其特异性进行了评价,同时,对所建立的PCR方法的敏感性和临床样本中绵羊肺炎支原体的检出率进行了分析,并与现有的基于16SrRNA的PCR方法进行了比较。结果显示,该方法能特异性扩增绵羊肺炎支原体参考菌株Y-98及临床分离株,对其他羊的致病性支原体和无关病原不检出;检测灵敏性为44fg,为现有的基于16SrRNA基因的PCR技术的1 000倍;对临床采集的肺组织样本和鼻腔拭子中绵羊肺炎支原体的检出率明显高于基于16SrRNA的PCR方法。研究结果表明,所建立的基于p113基因的PCR技术具有特异、敏感等特点,为绵羊肺炎支原体的检测、鉴定以及流行病学调查提供了有用的工具。 展开更多
关键词 绵羊肺炎支原体 p113基因 聚合酶链反应
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绵羊肺炎支原体贵州株P113基因的克隆与生物信息学分析 被引量:6
9
作者 吴燕 袁海文 +4 位作者 王琦 岳筠 文明 周碧君 程振涛 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期317-327,共11页
为获得绵羊肺炎支原体贵州株P113基因生物信息学特征,应用DNAStar、Mega 5.0、Protparam、Protscale、IEBD等工具对其(GZ-QX1株)P113蛋白特性、结构和功能进行预测分析。结果显示,绵羊肺炎支原体GZ-QX1株P113基因序列大小为3 240bp,编码... 为获得绵羊肺炎支原体贵州株P113基因生物信息学特征,应用DNAStar、Mega 5.0、Protparam、Protscale、IEBD等工具对其(GZ-QX1株)P113蛋白特性、结构和功能进行预测分析。结果显示,绵羊肺炎支原体GZ-QX1株P113基因序列大小为3 240bp,编码1 079个氨基酸,与绵羊肺炎支原体Y98标准株、四川SC01株、猪肺炎支原体P97、丝状支原体山羊亚种、山羊支原体山羊亚种的核苷酸序列同源性分别为99.9%、81.9%、60.4%、3.9%和5.2%。P113蛋白是分子质量约119ku的碱性蛋白,具有较多优势抗原表位;蛋白结构分析显示,P113蛋白无跨膜结构,有9个N糖基化位点,59个丝氨酸、16个苏氨酸的磷酸化位点,14种保守的特异性蛋白质激酶的结合位点;蛋白功能分析认为,P113可能是某信号传导通路的信号分子,也是一种具有良好抗原性的结构蛋白。 展开更多
关键词 绵羊肺炎支原体 P113基因 生物信息学分析
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绵羊肺炎支原体贵州流行株P113基因序列分析 被引量:4
10
作者 吴燕 王琦 +4 位作者 周碧君 文明 王开功 袁海文 程振涛 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期756-762,共7页
为探讨绵羊肺炎支原体贵州流行株P113蛋白基因分子特征,对Mo Y98标准株和Mo贵州流行株(GZ-CS1株、GZ-QX1株)P113基因进行克隆与测序,应用生物信息学软件对测序序列进行变异性、同源性及系统进化关系分析。结果显示,Mo贵州株(GZ-QX1、GZ-... 为探讨绵羊肺炎支原体贵州流行株P113蛋白基因分子特征,对Mo Y98标准株和Mo贵州流行株(GZ-CS1株、GZ-QX1株)P113基因进行克隆与测序,应用生物信息学软件对测序序列进行变异性、同源性及系统进化关系分析。结果显示,Mo贵州株(GZ-QX1、GZ-CS1)与Y98标准株P113基因全长分别为3 240、3 141和3 240bp;推导氨基酸序列比较显示Mo GZ-QX1株与Y98株高度相似,仅存在2个位点差异;GZ-CS1株与Y98株相比,P113蛋白存在27个点突变,缺失41个氨基酸;GZ-QX1株和GZ-CS1株相对Y98标准株存在第111位点突变和共同缺失19个氨基酸;Mo贵州流行株(GZ-CS1株、GZ-QX1株)与Y98标准株核苷酸同源性分别为98.4%和99.9%,贵州流行株间核苷酸同源性为98.3%;其与四川SC01株的核苷酸同源性分别为90.2%和89.1%。此外,种间比较显示Mo P113基因与猪肺炎支原体P97基因的相似性较高,同源性均大于61.7%,亲缘关系亦较近;而其与丝状支原体山羊亚种、山羊支原体山羊肺炎亚种之间的同源性较低,都在39.4%以下,其亲缘性也较远。该研究结果为深入探讨绵羊肺炎支原体的遗传变异及其生物学特性关系奠定基础。 展开更多
关键词 绵羊肺炎支原体 P113基因 序列分析
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恶性疟原虫杂合113肽抗原基因在减毒鼠伤寒沙门氏菌SL3261中的初步表达 被引量:4
11
作者 黄建生 王昌才 +5 位作者 陈仕荣 钟雄林 胡亚芳 陈锦辉 黄扬中 任大明 《中国寄生虫病防治杂志》 CSCD 1995年第3期173-176,共4页
我们先前已经将人工合成的恶性疟原虫杂合113肽基因克隆到表达载体pWR450-1中,获得了重组质粒pWRAB。现将nWRAB先转化到LB5000修饰后,再转化到疫苗菌SL3261,得到重组减毒鼠伤寒沙门氏菌SL326... 我们先前已经将人工合成的恶性疟原虫杂合113肽基因克隆到表达载体pWR450-1中,获得了重组质粒pWRAB。现将nWRAB先转化到LB5000修饰后,再转化到疫苗菌SL3261,得到重组减毒鼠伤寒沙门氏菌SL3261(pWRAB)。pWRAB在SL3261中以β-半乳糖苷酶一杂合多肽抗原AB融合蛋白(GZ-Am形式表达,表达量约13.3%。免疫双扩散发现从SL3261(pWRAB)中纯化的GZ-AB可与抗GZ-AB抗体反应,滴度为1:16。蛋白质印渍技术(Westernblot)显示在GZ-AB相应位置处出现特异条带。上述结果初步说明SL3261表达的GZ-AB具有抗原性。连续传代SL3261(pWRAB)未见质粒pWRAB丢失及明显的毒性,为恶性疟口服活疫苗的制备打下了基础。 展开更多
关键词 沙门氏菌 恶性疟原虫 杂合113肽基因 表达
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棉花种子特异性启动子的克隆及表达载体构建 被引量:2
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作者 琦明玉 陆才瑞 +2 位作者 邹长松 王巧莲 宋国立 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2011年第5期427-432,共6页
种子特异性表达启动子是植物种子基因工程改良的重要工具。Lea(Late embryogenesis abundant)蛋白是胚胎发育后期种子中大量积累的一系列蛋白质,因此,其调控序列可能提供一个很好来源的种子特异性表达启动子。为研究植物Lea蛋白基因启... 种子特异性表达启动子是植物种子基因工程改良的重要工具。Lea(Late embryogenesis abundant)蛋白是胚胎发育后期种子中大量积累的一系列蛋白质,因此,其调控序列可能提供一个很好来源的种子特异性表达启动子。为研究植物Lea蛋白基因启动子在种子中的特异性表达,本研究通过PCR扩增,从亚洲棉(Gossypi-um arboreum L.)石系亚1号中克隆了Lea蛋白基因家族中D113基因上游1262 bp的调控序列和D34基因上游1445 bp的调控序列。DNA序列分析结果表明,克隆到的两个片段与已报道的Lea蛋白基因同一家族该基因的对应序列的相似性分别达到97.43%和94.27%。分别用限制性内切酶HindⅢ和xbaI双酶切重组质粒pGEMT-D和改造后的表达载体pBI121-T,分别回收pGEMT-D重组质粒中的小片段和pBI121-T植物表达载体中的大片段,经连接、转化和鉴定,获得由D113基因启动子和D34基因启动子驱动报告基因GUS的新型植物表达载体pBI121-D113、pBI121-D34,为外源基因在棉花种子中的定位表达研究奠定基础。 展开更多
关键词 LEA蛋白 D113基因启动子 D34基因启动子 启动子分析 表达载体
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一例β-地中海贫血病例中罕见基因突变的鉴定 被引量:3
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作者 陈扬 王婵 +3 位作者 冯女 刘海芳 唐小燕 张淑芳 《中国热带医学》 CAS 2020年第6期548-551,共4页
目的对海口市人民医院血液科一例47岁男性经临床检查存在贫血、脾大等症状的疑似β地中海贫血的先证者进行病因确诊,并对其家系成员进一步研究分析。方法采用血常规、脾脏B超、血红蛋白电泳、跨越断点PCR(Gap-PCR)和高通量测序(next gen... 目的对海口市人民医院血液科一例47岁男性经临床检查存在贫血、脾大等症状的疑似β地中海贫血的先证者进行病因确诊,并对其家系成员进一步研究分析。方法采用血常规、脾脏B超、血红蛋白电泳、跨越断点PCR(Gap-PCR)和高通量测序(next generation sequencing,NGS)技术对先证者和5名家系成员进行检测,评估他们贫血、脾脏肿大和基因突变等方面的情况,采用Sanger测序法对高通量测序所检测出的基因突变进行验证,并通过家系连锁分析确定所检测基因突变的遗传方式。结果先证者同时检测出HBB:c.2T>G和HBB:c.-113A>G两种突变,其中HBB:c.2T>G为常见β突变,HBB:c.-113A>G为新的突变,其母亲及儿子均检出HBB:c.-113A>G杂合突变,其女儿检出HBB:c.2T>G杂合突变,除先证者外其他家系成员并未表现出明显的地贫症状。结论HBB:c.2T>G杂合复合HBB:c.-113A>G杂合突变会加重β地贫的临床表现,进而表现出脾大症状,该基因突变的发现,丰富了地贫基因突变数据库。全面的检测技术应用于地贫常规检测对临床病人的病因确诊、治疗和遗传咨询都具有重要意义。 展开更多
关键词 Β-地中海贫血 HBB:c.-113A>G杂合 高通量测序 基因突变
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蒺藜苜蓿MtSAG113基因的转化及表达特征分析 被引量:2
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作者 李舒文 李殷睿智 +3 位作者 董笛 王梦迪 晁跃辉 韩烈保 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期108-114,共7页
Senescence Associated Gene 113(SAG113)基因属于PP2Cc超家族,该基因的研究主要集中在植物衰老领域。为分析蒺藜苜蓿(Medicago truncatula)MtSAG113基因的表达特征,探究MtSAG113基因的功能。该基因从蒺藜苜蓿中克隆得到,以烟草(Nicotia... Senescence Associated Gene 113(SAG113)基因属于PP2Cc超家族,该基因的研究主要集中在植物衰老领域。为分析蒺藜苜蓿(Medicago truncatula)MtSAG113基因的表达特征,探究MtSAG113基因的功能。该基因从蒺藜苜蓿中克隆得到,以烟草(Nicotiana tabacum L.)和蒺藜苜蓿R108为实验材料,通过农杆菌介导的叶盘法转化烟草获得具有抗性的转基因植株,并对逆境胁迫和外源激素诱导下蒺藜苜蓿MtSAG113基因的表达情况进行检测。结果显示:PCR检测成功获得5株转基因植株并在在烟草中成功表达,且转基因植株相比于野生型出现矮小和叶片早衰的表型;MtSAG113基因在衰老叶片中表达水平远远高于未衰老叶片;未处理的叶片中,该基因的表达水平随着时间的延长逐渐提高;干旱胁迫下,该基因表达水平随着时间推移显著提高;高盐胁迫下,该基因表达水平明显上调,在12 h达到峰值;该基因对6-BA诱导尤为敏感,表达水平随着时间推移显著提高,在4 h达到峰值,约为未处理的1 000倍;而在ABA和IAA诱导条件下,MtSAG113呈现类似的表达特征,从4 h开始提高,12 h达到峰值;亚细胞定位结果显示,该基因位于细胞核内。以上结果表明:MtSAG113基因可能在蒺藜苜蓿衰老调控上发挥着一定的作用;而高盐、干旱和外源激素对MtSAG113基因表达具有一定的调节作用,以上研究为进一步分析MtSAG113基因的功能提供基础。 展开更多
关键词 MtSAG113基因 蒺藜苜蓿 烟草 逆境胁迫 外源激素
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9株绵羊肺炎支原体内蒙古分离株P113基因克隆及蛋白序列分析
15
作者 戴伶俐 王娜 +7 位作者 白帆 张帆 宋越 张月梅 达来宝力格 李晓艳 王根云 赵世华 《畜牧与饲料科学》 2022年第6期1-6,共6页
[目的]克隆绵羊肺炎支原体内蒙古分离株P113基因,比对、分析不同菌株P113蛋白序列,为研究绵羊肺炎支原体P113蛋白的生物学功能提供参考。[方法]设计绵羊肺炎支原体P113基因特异性引物,采用PCR方法扩增9株绵羊肺炎支原体内蒙古分离株的P... [目的]克隆绵羊肺炎支原体内蒙古分离株P113基因,比对、分析不同菌株P113蛋白序列,为研究绵羊肺炎支原体P113蛋白的生物学功能提供参考。[方法]设计绵羊肺炎支原体P113基因特异性引物,采用PCR方法扩增9株绵羊肺炎支原体内蒙古分离株的P113基因片段;对获得的9株绵羊肺炎支原体P113基因片段进行测序分析,将DNA序列翻译为氨基酸序列,对不同菌株的P113氨基酸序列进行比对。[结果]不同分离株P113基因片段扩增产物大小不同。氨基酸序列分析显示,C末端序列重复区域长度存在差异,以KKAEGA(S)QNQG为主要重复序列单元。不同菌株重复序列单元数量不同,NM01-MO株和CK-MO株的重复序列单元数量最多,为16个;LK-MO株重复序列单元数量最少,为3个;多数菌株之间重复序列单元数量差异较大。[结论]绵羊肺炎支原体内蒙古分离株P113氨基酸序列的C末端重复序列单元数量不同,这些不同数量的重复序列影响P113蛋白结构,进而可能影响其生物学功能。 展开更多
关键词 绵羊肺炎支原体 P113基因 P113蛋白 重复序列 生物学功能
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绵羊肺炎支原体安徽株p113基因PCR检测与序列分析 被引量:1
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作者 侯宏艳 张丹俊 +1 位作者 赵瑞宏 周学利 《畜牧与饲料科学》 2019年第1期101-103,共3页
旨在应用基于p113基因特异性的PCR方法对绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,Mo)安徽流行株进行分子生物学鉴定。利用已报道的Mo p113基因引物,采用PCR方法对前期分离的Mo安徽流行株AH-01、AH-02、AH-03和AH-04进行p113基因扩增,... 旨在应用基于p113基因特异性的PCR方法对绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,Mo)安徽流行株进行分子生物学鉴定。利用已报道的Mo p113基因引物,采用PCR方法对前期分离的Mo安徽流行株AH-01、AH-02、AH-03和AH-04进行p113基因扩增,并对菌株的p113基因扩增产物进行序列测定及分析。结果表明,利用建立的PCR方法,4株Mo临床分离株均可扩增到大小约为287 bp的特异性目的片段;安徽流行株AH01、AH02、AH03和AH04的p113基因序列两两之间的相似性均在95%以上,与Mo ATCC 29419和Mo贵州流行株GZ-QX1的p113基因序列相似性在88.6%~89.3%。提示基于p113基因的PCR方法可以用于绵羊肺炎支原体的分子生物学鉴定,为开展由Mo引起的绵羊和山羊肺炎的流行病学调查和科学防控提供了新方法。 展开更多
关键词 绵羊肺炎支原体 p113基因 PCR 序列分析
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紫花苜蓿MsSAG113基因的克隆及对拟南芥的转化
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作者 宿强 曾会明 +1 位作者 许立新 晁跃辉 《北方园艺》 CAS 北大核心 2018年第6期10-15,共6页
以紫花苜蓿为试材,采用RT-PCR技术克隆出一个与拟南芥SAG113同源的基因,利用无缝连接酶将其与3302Y连接构建过量表达的植物表达载体,通过花序浸泡法转化拟南芥获得具有草铵膦抗性的植株,以期为研究MsSAG113的功能提供参考依据。结果表明... 以紫花苜蓿为试材,采用RT-PCR技术克隆出一个与拟南芥SAG113同源的基因,利用无缝连接酶将其与3302Y连接构建过量表达的植物表达载体,通过花序浸泡法转化拟南芥获得具有草铵膦抗性的植株,以期为研究MsSAG113的功能提供参考依据。结果表明:MsSAG113基因编码区长849bp,编码283个氨基酸,PCR和RT-PCR检测显示成功获得了转MsSAG113基因拟南芥植株,初步证明在转基因拟南芥中外源SAG113基因能够转录表达。 展开更多
关键词 紫花苜蓿 SAG113基因 拟南芥 转化
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载脂蛋白E基因编码区及其转录调控区+113G/C多态在中国正常人群中的分布
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作者 赵晓萍 谢惠君 +3 位作者 郑惠民 汤国梅 丁素菊 任大明 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 2004年第2期111-113,共3页
目的 :探讨中国正常人群中载脂蛋白E(ApoE)基因编码区及其转录调控区 +113G/C多态的分布。方法 :采用聚合酶链反应 (PCR)和限制性片段长度多态 (RFLP)方法 ,检测ApoE基因编码区及其转录调控区 +113G/C多态各等位基因及基因型的频率分布... 目的 :探讨中国正常人群中载脂蛋白E(ApoE)基因编码区及其转录调控区 +113G/C多态的分布。方法 :采用聚合酶链反应 (PCR)和限制性片段长度多态 (RFLP)方法 ,检测ApoE基因编码区及其转录调控区 +113G/C多态各等位基因及基因型的频率分布。结果 :正常人群中ApoE基因及转录调控区 +113G/C多态基因型的分布符合Hardy Weinberg平衡。按是否含ApoEε4基因分层后 ,ε4与非ε4型人群等位基因和基因型频率分布差异均无显著意义 (基因型 χ2 =1.819,P =0 .178;等位基因 χ2 =4 .95 2 ,P =0 .0 85 )。按 +113G/C多态各基因型分层后 ,各人群间ApoE基因型差异无统计学意义 (G/G与非G/Gχ2 =1.14 5 ,P =0 .95 ;C/C与非C/Cχ2 =3.997,P =0 .5 5 )。但ε4等位基因与C/C基因型连锁分离的概率为 0 ,ε4纯合基因型与 +113G纯合基因型共分离的概率亦为 0。结论 :中国正常人群中ε4等位基因与 +113C纯合基因型及ε4纯合基因型与 +113G纯合基因型共分离相当罕见 。 展开更多
关键词 裁脂蛋白E 基因多态 编码区 转录调控区+113G/C 正常人群
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