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人生长激素基因组DNA在家蚕BmN细胞中的瞬时表达
1
作者
张昕泂
胡惠民
+1 位作者
董良
陆长德
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第7期765-768,共4页
目的 :探讨内含子对外源基因在真核细胞中表达的作用。 方法 :直接将含有 4个内含子和自身信号肽的 1.5 kb全长人生长激素基因直接克隆至真核表达载体 pc DNA3.0 ,然后利用脂质体转染家蚕 Bm N细胞 ,收取细胞上清 ,PAGE电泳和Western印...
目的 :探讨内含子对外源基因在真核细胞中表达的作用。 方法 :直接将含有 4个内含子和自身信号肽的 1.5 kb全长人生长激素基因直接克隆至真核表达载体 pc DNA3.0 ,然后利用脂质体转染家蚕 Bm N细胞 ,收取细胞上清 ,PAGE电泳和Western印迹分析鉴定表达产物 ;将全长基因序列、缺失第 1内含子基因序列和 c DNA序列的表达载体 ,分别转染细胞后检测各片段表达产物之间的差异。结果 :测序结果表明人生长激素基因组 DNA在细胞内正确转录、剪接。蛋白质电泳分析和免疫学检测证明转染细胞能够有效合成并分泌蛋白质。 EL ISA检测发现 3种基因片段中 ,全长的基因序列在表达效果上要高于后两者 (P<0 .0 5 ) ,其中缺失第 1内含子的序列表达效率较 c DNA序列明显降低 (P<0 .0 5 )。结论 :在家蚕细胞中能够正确表达带有自身内含子和信号肽的人源蛋白基因 ;
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关键词
人生长激素基因组
D
n
A
家蚕
Bm
n
细胞
瞬时表达
基因表达
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职称材料
题名
人生长激素基因组DNA在家蚕BmN细胞中的瞬时表达
1
作者
张昕泂
胡惠民
董良
陆长德
机构
第二军医大学基础医学部生物化学和分子生物学教研室
中国科学院上海生命科学研究院生物化学和细胞生物学研究所
出处
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第7期765-768,共4页
基金
国家"8 63"计划资助项目 ( 10 3 -12 -0 2 -0 6)
文摘
目的 :探讨内含子对外源基因在真核细胞中表达的作用。 方法 :直接将含有 4个内含子和自身信号肽的 1.5 kb全长人生长激素基因直接克隆至真核表达载体 pc DNA3.0 ,然后利用脂质体转染家蚕 Bm N细胞 ,收取细胞上清 ,PAGE电泳和Western印迹分析鉴定表达产物 ;将全长基因序列、缺失第 1内含子基因序列和 c DNA序列的表达载体 ,分别转染细胞后检测各片段表达产物之间的差异。结果 :测序结果表明人生长激素基因组 DNA在细胞内正确转录、剪接。蛋白质电泳分析和免疫学检测证明转染细胞能够有效合成并分泌蛋白质。 EL ISA检测发现 3种基因片段中 ,全长的基因序列在表达效果上要高于后两者 (P<0 .0 5 ) ,其中缺失第 1内含子的序列表达效率较 c DNA序列明显降低 (P<0 .0 5 )。结论 :在家蚕细胞中能够正确表达带有自身内含子和信号肽的人源蛋白基因 ;
关键词
人生长激素基因组
D
n
A
家蚕
Bm
n
细胞
瞬时表达
基因表达
Keywords
huma
n
growth
hormo
n
e
ge
n
e
expressio
n
bombyx
nori
n
cell
i
n
tro
n
s
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人生长激素基因组DNA在家蚕BmN细胞中的瞬时表达
张昕泂
胡惠民
董良
陆长德
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003
0
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