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表达barstar基因及bar基因的转基因油菜的研究 被引量:40
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作者 彭仁旺 周雪荣 +3 位作者 王峻岭 方荣祥 陈正华 莽克强 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1998年第1期74-79,共6页
从细菌Bacilusamyloliquefaciens染色体DNA中克隆了barnase抑制剂barstar的基因,构建了带有TA-29基因5′调控区(-1300-+3)与barstar基因编码区、CaMV35S启动... 从细菌Bacilusamyloliquefaciens染色体DNA中克隆了barnase抑制剂barstar的基因,构建了带有TA-29基因5′调控区(-1300-+3)与barstar基因编码区、CaMV35S启动子与除草剂抗性基因bar两个表达框架的植物表达质粒pBBS。以“双低”油菜“5-4”的子叶柄为受体,通过农杆菌介导的遗传转化,获得了在含有10mg/L卡那霉素和20mg/LPPT的筛选培养基上再生的转基因植株。PCR分析结果表明,barstar基因已整合到油菜染色体上;Northernblot检测表明,barstar基因及bar基因在转基因植物中得到了正确的调控与表达。以转基因油菜“5-4”为父本授粉给表达barnase基因的雄性不育植株,不育株能正常结实。 展开更多
关键词 barstar基因 抗除草剂基因 转基因 油菜
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基因枪法转化籼稻胚性愈伤组织获得可育的转基因植株 被引量:33
2
作者 许新萍 卫剑文 +1 位作者 范云六 李宝健 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1999年第3期219-227,共9页
以籼稻胚性愈伤组织作为基因枪法转化的靶材料,建立了可重复的、高效的籼稻转化系统。从籼稻成熟胚诱寻生长3~4周的愈伤组织,经过2~6周继代培养后,可以形成足够量的颗粒状胚性意伤组织。用含有bar基因B.t.δ-内毒素基因的质粒pFWZ1... 以籼稻胚性愈伤组织作为基因枪法转化的靶材料,建立了可重复的、高效的籼稻转化系统。从籼稻成熟胚诱寻生长3~4周的愈伤组织,经过2~6周继代培养后,可以形成足够量的颗粒状胚性意伤组织。用含有bar基因B.t.δ-内毒素基因的质粒pFWZ16轰击转化胚性愈伤组织,在含2~4mg/LBasta的培养基上进行筛选、预再生、再生及长根培养,并通过干燥处理增加再生频率和出苗数。从接种到获得转化小植株只需要4~5个月。供试的两个品种为华南地区推广的优良籼稻品种,共轰击821块胚性愈伤组织,获得48个系的477株Basta抗性植株。经PCR扩增分析和Southernblot杂交分析证实外源的bar基因和B.t.基因己整合到转基因水稻植株基因组中,Basta抗性鉴定和PNA点杂交分析表明这两个基因在转基因植株中得到表达。87.5%的转基因植株可育。Basta喷施实验和Southernblot分析证明bar基因和B.t.基因已遗传至子代,并且主要按孟德尔规律进行分离。 展开更多
关键词 籼稻 胚性愈伤组织 基因枪法转化 育种
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Bar基因和转Bar基因作物的研究进展 被引量:40
3
作者 段发平 梁承邺 黎垣庆 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期166-172,共7页
概述了草丁膦的毒害机理和 Bar基因的抗性机理与表达情况。总结了转 Bar基因作物的来源、抗性遗传特点和其对环境安全性评价等方面的研究进展。展望了 Bar基因和转 Bar基因作物的应用前景。
关键词 bar基因 转基因作物 草丁膦 除草剂 抗性
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利用大白菜小孢子胚状体获得抗除草剂转基因植株 被引量:25
4
作者 刘凡 姚磊 +2 位作者 李岩 曹鸣庆 刘公社 《华北农学报》 CSCD 北大核心 1998年第4期93-98,共6页
大白菜小孢子培养获得的子叶期胚状体,经粉碎的玻璃碴摩擦后,与农杆菌共培养,在加筛选剂Basta(含phosphinothricin5mg/L)的培养基上,再生出数株绿苗。自交留种后,对其后代苗期进行的Basta抗性鉴... 大白菜小孢子培养获得的子叶期胚状体,经粉碎的玻璃碴摩擦后,与农杆菌共培养,在加筛选剂Basta(含phosphinothricin5mg/L)的培养基上,再生出数株绿苗。自交留种后,对其后代苗期进行的Basta抗性鉴定显示,有4株抗此除草剂。Southern杂交结果显示,抗性植株的基因组中各有一个bar基因插入位点。对转化株的小孢子进行再培养,后代小孢子植株对Basta抗性的分离比显示。 展开更多
关键词 大白菜 小孢子胚胎 根癌农杆菌 除草剂抗性
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抗除草剂基因导入培矮64S实现杂交水稻制种机械化的初步研究 被引量:32
5
作者 傅亚萍 朱正歌 +4 位作者 肖晗 胡国成 斯华敏 于永红 孙宗修 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期97-100,共4页
利用农杆菌介导的高效遗传转化技术 ,成功地将 Bar基因转入两系杂交稻的不育系培矮 6 4S。转基因植株具有明显的 Basta抗性 ,分子检测进一步证明 Bar基因已整合到水稻染色体上。模拟制种的成功 ,表明机械化制备杂交水稻种子是可行的。
关键词 杂交水稻 bar基因 抗除草剂基因 农杆菌介导 制种机械化
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Bar基因及转Bar基因水稻的研究和利用 被引量:21
6
作者 赵彬 马伯军 薛庆中 《杂交水稻》 CSCD 北大核心 1999年第2期1-2,共2页
Bar基因是广泛应用于基因工程育种中的除草剂抗性基因,也是遗传转化中的标记基因。综述了Bar基因的作用机制、Bar基因在转基因植物中的表达和遗传及其对转基因水稻农艺性状的影响。
关键词 水稻 bar基因 转基因植株 杂种优势 除草剂 抗性
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利用基因枪共转化法获得转bar与P5CS基因黑麦草 被引量:23
7
作者 杨成民 王宏芝 +1 位作者 孙振元 魏建华 《草地学报》 CAS CSCD 2005年第1期34-38,共5页
以多年生黑麦草(LoliumperenneL.)种子成熟胚为外植体进行高效诱导愈伤组织的组培条件,在此基础上用基因 枪法轰击其成熟胚的愈伤组织,共转化分别携带bar基因和P5CS基因表达框架的2种质粒,经1.2‰草丁磷 (Glufosinate)抗性筛选获得... 以多年生黑麦草(LoliumperenneL.)种子成熟胚为外植体进行高效诱导愈伤组织的组培条件,在此基础上用基因 枪法轰击其成熟胚的愈伤组织,共转化分别携带bar基因和P5CS基因表达框架的2种质粒,经1.2‰草丁磷 (Glufosinate)抗性筛选获得了转基因再生植株。经聚合酶链式反应(PCR)检测筛选到整合bar基因的株系18个,遗传转 化率为0.72%,其中5个检测到P5CS,共转化效率为27.8%。 展开更多
关键词 黑麦草 成熟胚 bar基因 P5CS基因
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玉米自交系Ⅱ型胚性愈伤组织诱导及遗传转化初报 被引量:23
8
作者 杜娟 余云舟 +2 位作者 张领兵 季静 王罡 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期41-44,共4页
以玉米自交系 340芽尖、4112未成熟幼胚为试验材料 ,诱导出良好的Ⅱ型胚性愈伤组织 ;用这 2种材料的Ⅱ型胚性愈伤组织为受体 ,通过基因枪轰击法将Bar基因转入玉米细胞 ,然后用GUS基因检测 ,结果为阳性。
关键词 玉米 愈伤组织 基因枪 bar基因 培养配方
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bar基因、PAT蛋白和草丁膦的特性与安全性 被引量:27
9
作者 刘洪艳 弭晓菊 崔继哲 《生态学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期938-942,共5页
在转基因技术得到认同并且给全球带来了巨大的经济和社会价值的同时,也引起了人们对其安全性的关注。目前在转基因作物中抗除草剂作物种植面积最大。本文对除草剂草丁膦及其抗性基因之一——bar基因及其产物PAT蛋白的一些特性和安全性... 在转基因技术得到认同并且给全球带来了巨大的经济和社会价值的同时,也引起了人们对其安全性的关注。目前在转基因作物中抗除草剂作物种植面积最大。本文对除草剂草丁膦及其抗性基因之一——bar基因及其产物PAT蛋白的一些特性和安全性作了阐述。bar基因及筛选剂草丁膦在植物基因工程中发挥着重要作用。bar基因无多效性,与食物中的DNA一样安全。PAT蛋白对小鼠无直接毒性,与已知毒素和过敏原无同源性、无糖基化位点,其热稳定性和消化稳定性无食物过敏原和毒素的特性,对人体和动物安全无毒性。草丁膦是一种生物除草剂,在土壤中易被快速分解,作物收获时未检出残留,对哺乳动物无毒性作用。 展开更多
关键词 bar基因 PAT蛋白 草丁膦 安全性
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除草剂抗性基因bar导入烟草叶绿体 被引量:17
10
作者 张中林 山松 +3 位作者 陈曦 刘春英 钱凯先 沈桂芳 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期574-578,共5页
将编码Phosphinothricin acetyltransferase的bar基因与水稻叶绿体psbA基因的启动子和终止子构建成表达盒,连同烟草叶绿体基因组同源片段rpl2-trnH-psbA和trnK-ORF509A以及选择标记基因aadA一起构建成烟草叶绿体转化载体pTZBA.基因枪法... 将编码Phosphinothricin acetyltransferase的bar基因与水稻叶绿体psbA基因的启动子和终止子构建成表达盒,连同烟草叶绿体基因组同源片段rpl2-trnH-psbA和trnK-ORF509A以及选择标记基因aadA一起构建成烟草叶绿体转化载体pTZBA.基因枪法转化烟草叶片,经壮观霉素筛选获得转化再生植株.分别以1.0kb的叶绿体同源片段trnK-ORF509A和0.6kb的bar基因为探针,对转基因烟草叶绿体DNA进行Southern杂交检测,证明外源基因已整合入烟草叶绿体基因组中.抗性试验表明,转基因植株具备除草剂(PPT)抗性. 展开更多
关键词 bar基因 同源片段 烟草 aadA基因 除草剂 叶绿体
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用花粉管通道法将bar基因导入水稻获得可遗传的转基因植株 被引量:24
11
作者 王才林 赵凌 +6 位作者 宗寿余 吕川根 邹江石 朱卫民 何小兰 黄骏麒 龚蓁蓁 《江苏农业学报》 CSCD 2002年第3期129-133,共5页
利用花粉管通道法将抗Basta除草剂的bar基因导入水稻品系“E32” ,获得转基因植株。抗性鉴定表明 ,转基因植株能充分表达对Basta除草剂的抗性 ;通过对转基因植株后代进行PCR分析 ,证实bar基因已整合到受体植株的基因组中。遗传分析表明 ... 利用花粉管通道法将抗Basta除草剂的bar基因导入水稻品系“E32” ,获得转基因植株。抗性鉴定表明 ,转基因植株能充分表达对Basta除草剂的抗性 ;通过对转基因植株后代进行PCR分析 ,证实bar基因已整合到受体植株的基因组中。遗传分析表明 ,bar基因能在有性生殖过程中传递给后代 ,并在T3 展开更多
关键词 水稻 花粉管通道法 bar基因 转基因植株 基因转化
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转基因培育抗除草剂水稻 被引量:14
12
作者 吴爱忠 唐克轩 +3 位作者 潘俊松 蔡润 沈大棱 潘重光 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2000年第11期992-998,共7页
以pAHC20(含Bar基因)和pWRG1515(含GUS基因和潮霉素抗性基因)以及含Bar基因和雪莲凝集素(GNA)基因的pCAMBIA3300 RG为供体DNA,选用水稻品系87203、上农香糯及鄂宜105的成熟... 以pAHC20(含Bar基因)和pWRG1515(含GUS基因和潮霉素抗性基因)以及含Bar基因和雪莲凝集素(GNA)基因的pCAMBIA3300 RG为供体DNA,选用水稻品系87203、上农香糯及鄂宜105的成熟胚诱导出的愈伤组织及微不定芽为受体材料,分别采用基因枪和根癌农杆菌(LBA4404,含pAM404)导入法进行基因转化;经抗性筛选、GUS检测和PCR分析。结果表明,外源基因已通过基因枪法导入水稻鄂宜105,并获得再生植株; 展开更多
关键词 水稻 抗除草剂 bar基因 基因枪导入法
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抗除草剂转基因黄瓜的获得及T_1植株抗性鉴定 被引量:21
13
作者 金红 杜胜利 +1 位作者 陈峥 魏爱民 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2003年第1期44-46,共3页
从影响黄瓜转基因体系的外植体类型、农杆菌共浸染时间、是否加入乙酰丁香酮等因素摸索,建立了黄瓜遗传转化体系;将抗除草剂基因bar以农杆菌共浸染法导入到黄瓜父本品种M1子叶中,经历愈伤组织分化、芽诱导和生根等过程获得落地转化株系... 从影响黄瓜转基因体系的外植体类型、农杆菌共浸染时间、是否加入乙酰丁香酮等因素摸索,建立了黄瓜遗传转化体系;将抗除草剂基因bar以农杆菌共浸染法导入到黄瓜父本品种M1子叶中,经历愈伤组织分化、芽诱导和生根等过程获得落地转化株系,通过特异性引物的PCR鉴定,13个株系扩增出bar基因片段。T0自交获得T1转基因植株,经1000倍除草剂巴士达喷施处理,其中84%表现为较高的抗性。 展开更多
关键词 抗除草剂 转基因 黄瓜 T1植株 抗性鉴定 遗传转化
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转基因水稻外源基因的遗传和表达初步研究 被引量:16
14
作者 简玉瑜 陈远玲 +2 位作者 李静 高丽丽 董春 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期56-59,共4页
将天蚕抗菌肽B基因应用基因枪法导入水稻TN1发芽种胚 ,获得转基因植株 2株 .转基因水稻T1~T55个世代不同株系 ,对bar基因、抗菌肽基因的遗传和表达进行初步研究 .结果表明 :转基因后代株系barR∶barS 大部分符合 3∶1分离比率 .T1、T4... 将天蚕抗菌肽B基因应用基因枪法导入水稻TN1发芽种胚 ,获得转基因植株 2株 .转基因水稻T1~T55个世代不同株系 ,对bar基因、抗菌肽基因的遗传和表达进行初步研究 .结果表明 :转基因后代株系barR∶barS 大部分符合 3∶1分离比率 .T1、T4 转基因株系PCR、Southern印迹分析表明 :T18株有抗菌肽B基因 ;T4 仍有 4个株系有抗菌肽基因 ,其他的株系基因丢失 .T3 1个株系Northern印迹证明抗菌肽基因在RNA水平有表达 ;抗菌肽B转基因水稻对白叶枯病的抗病性有提高 ,抗性能传递到高世代 ,在T3 展开更多
关键词 天蚕抗菌肽B基因 bar基因 水稻 转基因植株 白叶枯病 遗传 表达
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水稻叶绿体表达体系的建立及抗PPT叶绿体转化植株的获得 被引量:21
15
作者 李轶女 孙丙耀 +3 位作者 苏宁 孟祥勋 张志芳 沈桂芳 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期1849-1855,共7页
【目的】建立外源基因在水稻叶绿体中的表达体系。【方法】通过分析已公布的水稻叶绿体基因组全序列及其基因分布特点,选择ndhF与trnL的基因间序列作为除草剂PPT抗性基因bar定点整合的位点。以水稻叶绿体基因组DNA为模板,采用PCR方法克... 【目的】建立外源基因在水稻叶绿体中的表达体系。【方法】通过分析已公布的水稻叶绿体基因组全序列及其基因分布特点,选择ndhF与trnL的基因间序列作为除草剂PPT抗性基因bar定点整合的位点。以水稻叶绿体基因组DNA为模板,采用PCR方法克隆了两个适于水稻叶绿体基因组遗传转化的同源片段,构建了含水稻叶绿体16S高效表达启动子、外源基因bar、psbA基因的3′序列(终止子)以及两个同源片段的水稻叶绿体特异表达载体pRB。【结果】采用基因枪法转化水稻品种中花10号幼穗诱导的愈伤组织,并再生植株,获得转化体后代种子。对转化植株进行的分子检测结果表明,外源基因bar可能被整合到水稻叶绿体基因组中。后代种子的遗传学分析显示,外源基因bar可正常表达并遗传。【结论】利用所建立的水稻叶绿体外源基因表达体系,外源基因bar既可在水稻叶绿体基因组中正常表达,还可作为转化体筛选时的除草剂抗性选择标记。 展开更多
关键词 水稻 同源片段 bar基因 叶绿体转化
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bar基因在杂交水稻制种中的应用及其安全性分析 被引量:12
16
作者 林鸿生 华志华 +3 位作者 张祥喜 吴伶莉 章善庆 黄大年 《江西农业学报》 CAS 2000年第2期6-10,共5页
利用水稻基因转化技术 ,将bar基因导入杂交水稻 ,结合除草剂“Basta”的喷施 ,能快速检测并排除杂交水稻制种中的假杂种。对转bar基因杂交稻制种原理。
关键词 bar基因 杂交稻 种子纯度 生物安全性 转基因
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利用电激法转化小麦幼胚的研究 被引量:13
17
作者 柯遐义 黄粤 +1 位作者 石和平 李宝健 《武汉植物学研究》 CSCD 1997年第2期103-107,共5页
利用我们实验室自制的脉冲放电式电激仪HPES-3,我们将合bar基因即PAT酶(phosphinothricinacetyltransferase)基因的pDM302质粒DNA导入了一个春小麦品种(TriticumaestivumL.)“T2003”的幼胚中。经过在含有ppt(phosphinothricin... 利用我们实验室自制的脉冲放电式电激仪HPES-3,我们将合bar基因即PAT酶(phosphinothricinacetyltransferase)基因的pDM302质粒DNA导入了一个春小麦品种(TriticumaestivumL.)“T2003”的幼胚中。经过在含有ppt(phosphinothricin)的选择培养基上筛选,得到了抗ppt的愈伤组织和再生小苗。PCR检测与DNA点杂交结果显示,外源bar基因已整合进了转基因的小麦植株中。 展开更多
关键词 小麦 幼胚 电激 转基因植株 基因工程
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农杆菌介导转化小麦幼胚获得抗除草剂再生植株 被引量:11
18
作者 梁雪莲 孙毅 +5 位作者 郭平毅 刘惠民 刘少翔 王景雪 解志红 孙丹琼 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 2003年第6期501-506,共6页
采用农杆菌介导法转化小麦品种G5 4授粉 1 0d后的幼胚 ,经 5‰和 2‰PPT筛选获得 83株正常再生植株。PCR及Southern杂交检测证明其中 8株再生苗为转bar基因植株 ,这些植株对除草剂Basta的抗性明显提高。实验结果还证明 ,高糖浓度的培养... 采用农杆菌介导法转化小麦品种G5 4授粉 1 0d后的幼胚 ,经 5‰和 2‰PPT筛选获得 83株正常再生植株。PCR及Southern杂交检测证明其中 8株再生苗为转bar基因植株 ,这些植株对除草剂Basta的抗性明显提高。实验结果还证明 ,高糖浓度的培养基对愈伤组织诱导、植株再生及生根都有显著的促进作用 ;在感染液和共培养基中添加乙酰丁香酮有利于转化株的筛选。 展开更多
关键词 小麦 幼胚 农杆菌介导 遗传转化 bar基因
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γ-维生素E甲基转移酶基因转化花生研究 被引量:11
19
作者 刘风珍 万勇善 王洪刚 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第1期61-64,68,共5页
采用携带γ-TMT和bar基因表达载体pGBVE的根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)菌 株GV3101对花生栽培品种鲁花11和丰花2号的成熟胚小叶片及胚生长点进行遗传转化。受体基因型及外 植体类型对转化效率影响很大,以鲁花11胚生长点的转化... 采用携带γ-TMT和bar基因表达载体pGBVE的根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)菌 株GV3101对花生栽培品种鲁花11和丰花2号的成熟胚小叶片及胚生长点进行遗传转化。受体基因型及外 植体类型对转化效率影响很大,以鲁花11胚生长点的转化率最高。试验获得14株PPT抗性苗,经PCR检测 证明,γ-TMT基因已整合在花生基因组中。 展开更多
关键词 花生 bar基因 外植体类型 成熟胚 栽培品种 根癌农杆菌 遗传转化 甲基转移酶 维生素E 酶基因
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农杆菌转化小麦幼胚获得转bar基因再生植株 被引量:11
20
作者 梁雪莲 孙毅 +4 位作者 郭平毅 刘惠民 刘少翔 王景雪 解志红 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2003年第1期12-16,共5页
用农杆菌转化小麦授粉10d后的幼胚,经5‰PPT筛选获得大量正常再生植株。PCR及PCR Southern杂交检测证明其中23%(18株)再生苗为转化bar基因植株,这些植株可明显提高对basta的抗性。还总结了农杆菌转化小麦幼胚高效获得转基因再生植株的... 用农杆菌转化小麦授粉10d后的幼胚,经5‰PPT筛选获得大量正常再生植株。PCR及PCR Southern杂交检测证明其中23%(18株)再生苗为转化bar基因植株,这些植株可明显提高对basta的抗性。还总结了农杆菌转化小麦幼胚高效获得转基因再生植株的处理程序。 展开更多
关键词 农杆菌 小麦 幼胚 bar基因 再生植株
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