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骨髓间充质干细胞分化为血管内皮细胞的实验研究 被引量:79
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作者 方利君 付小兵 +4 位作者 孙同柱 李建福 程飚 杨银辉 王玉新 《中华烧伤杂志》 CAS CSCD 2003年第1期22-24,共3页
目的 探讨骨髓间充质干细胞 (MSCs)分化为肉芽组织中血管内皮细胞的可能性 ,及其参与创面修复的可能机制。 方法 抽取小型香猪的骨髓 ,经密度梯度离心分离、纯化MSCs,体外培养扩增后 ,应用溴脱氧尿嘧啶 (BrdU)标记技术标记细胞。于... 目的 探讨骨髓间充质干细胞 (MSCs)分化为肉芽组织中血管内皮细胞的可能性 ,及其参与创面修复的可能机制。 方法 抽取小型香猪的骨髓 ,经密度梯度离心分离、纯化MSCs,体外培养扩增后 ,应用溴脱氧尿嘧啶 (BrdU)标记技术标记细胞。于已抽取骨髓的小型香猪背部制作全层皮肤缺损创面 ,即刻以纤维蛋白胶为载体 ,将已标记的MSC回植到供体动物创面上。术后 2、4、6、8、12周切取创面组织 ,行BrdU和因子Ⅷ (FⅧ )免疫组织化学染色 ,进行对比观察。 结果 BrdU阳性的MSCs多聚集在创面肉芽组织中的小血管周围 ,且有个别血管内皮细胞也呈现BrdU阳性。部分BrdU阳性的MSCs胞浆中亦有FⅧ表达。 结论 创面愈合过程中 ,MSCs与肉芽组织中小血管的形成密切相关。在创面微环境下 ,MSCs可分化为血管内皮细胞 ,并参与创面修复。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 分化 血管内皮细胞 实验研究 分离 培养 创面 修复
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成人骨髓间质干细胞定向诱导为神经元样细胞的研究 被引量:56
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作者 项鹏 夏文杰 +4 位作者 张丽蓉 陈振光 张秀明 李艳 李树浓 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期385-387,I001,共4页
目的 :体外定向诱导成人骨髓间质干细胞 (MSC)分化为神经元样细胞。方法 :采用Ficoll -Paque液 (1 0 77× 10 3 g/L)离心分离成人MSC ,体外扩增 ,分别采用含巯基乙醇和硫代甘油等试剂的无血清DMEM诱导MSC分化为神经元。免疫组化鉴... 目的 :体外定向诱导成人骨髓间质干细胞 (MSC)分化为神经元样细胞。方法 :采用Ficoll -Paque液 (1 0 77× 10 3 g/L)离心分离成人MSC ,体外扩增 ,分别采用含巯基乙醇和硫代甘油等试剂的无血清DMEM诱导MSC分化为神经元。免疫组化鉴定神经元烯醇化酶 (NSE)、神经丝蛋白 (NF)、胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)的表达。结果 :成人骨髓间质干细胞在体外扩增 5代可获 5× 10 7个细胞。加入巯基乙醇等或硫代甘油等诱导剂诱导后 ,MSC胞体收缩 ,突起伸出 ;免疫组化显示诱导出的神经元样细胞NSE、NF表达阳性 ,GFAP阴性。结论 :成人骨髓间质干细胞在体外可以分化为神经元样细胞。 展开更多
关键词 骨髓间质干细胞 神经元 神经系统疾病 MSC
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Current concepts on osteonecrosis of the femoral head 被引量:96
3
作者 Joaquin Moya-Angeler Arianna L Gianakos +2 位作者 Jordan C Villa Amelia Ni Joseph M Lane 《World Journal of Orthopedics》 2015年第8期590-601,共12页
It is estimated that 20000 to 30000 new patients are diagnosed with osteonecrosis annually accounting for approximately 10% of the 250000 total hip arthroplasties done annually in the United States. Thelack of level 1... It is estimated that 20000 to 30000 new patients are diagnosed with osteonecrosis annually accounting for approximately 10% of the 250000 total hip arthroplasties done annually in the United States. Thelack of level 1 evidence in the literature makes it difficult to identify optimal treatment protocols to manage patients with pre-collapse avascular necrosis of the femoral head, and early intervention prior to collapse is critical to successful outcomes in joint preserving procedures. There have been a variety of traumatic and atraumatic factors that have been identified as risk factors for osteonecrosis, but the etiology and pathogenesis still remains unclear. Current osteonecrosis diagnosis is dependent upon plain anteroposterior and frog-leg lateral radiographs of the hip, followed by magnetic resonance imaging(MRI). Generally, the first radiographic changes seen by radiograph will be cystic and sclerotic changes in the femoral head. Although the diagnosis may be made by radiograph, plain radiographs are generally insufficient for early diagnosis, therefore MRI is considered the most accurate benchmark. Treatment options include pharmacologic agents such as bisphosphonates and statins, biophysical treatments, as well as joint-preserving and joint-replacing surgeries. the surgical treatment of osteonecrosis of the femoral head can be divided into two major branches: femoral head sparing procedures(FHSP) and femoral head replacement procedures(FHRP). In general, FHSP are indicated at pre-collapse stages with minimal symptoms whereas FHRP are preferred at post-collapse symptomatic stages. It is difficult to know whether any treatment modality changes the natural history of core decompression since the true natural history of core decompression has not been delineated. 展开更多
关键词 OSTEONECROSIS FEMORAL head CONSERVATIVE treatment Core DECOMPRESSION stem cells Total HIP ARTHROPLASTY
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脐血间充质干细胞磁探针标记和MR成像研究 被引量:58
4
作者 居胜红 滕皋军 +4 位作者 毛曦 张爱凤 张宇 马明 顾宁 《中华放射学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期101-106,共6页
目的 应用磁性氧化铁纳米粒子和多聚赖氨酸 (Poly L Lysine ,PLL)的偶联物Fe2 O3 PLL ,体外标记人脐血间充质干细胞 (mesenchymalstemcells,MSCS) ,磁共振进行标记细胞成像。方法 制备Fe2 O3 PLL ,分离人脐血MSCS 进行纯化并传代培... 目的 应用磁性氧化铁纳米粒子和多聚赖氨酸 (Poly L Lysine ,PLL)的偶联物Fe2 O3 PLL ,体外标记人脐血间充质干细胞 (mesenchymalstemcells,MSCS) ,磁共振进行标记细胞成像。方法 制备Fe2 O3 PLL ,分离人脐血MSCS 进行纯化并传代培养 ,标记Fe2 O3 PLL ,普鲁士蓝染色显示细胞内铁 ,四氮噻唑蓝 (MTT)比色试验评价不同浓度Fe2 O3 PLL标记MSCS 后对细胞生长状况的影响 ,Annexin/碘化吡啶 (PI)双染色法检测细胞凋亡 ,应用MR的T1WI、T2 WI、T2 WI3个序列进行细胞群成像。结果 普鲁士蓝染色清晰显示蓝色铁颗粒位于MSCS 胞质内 ,MTT比色试验示 5~ 2 0 0 μg/ml等7个铁浓度组 ,Fe2 O3 PLL标记后细胞的光吸收值与未标记MSCS 者比较 ,各组间总体比较差异无统计学意义(Kruskal Wallis秩和检验 ,χ2 =10 35 ,P =0 17)。标记MSCS 时 ,铁浓度采用 2 0 μg/ml较合适。标记MSCS、未标记MSCS 者晚期凋亡及坏死细胞分别为 5 4 3%、2 95 % ,早期凋亡细胞分别为 9 93%、10 14 %。在MR的T1WI、T2 WI、T2 WI中 ,标记 1× 10 6个MSCS 者、标记 5× 10 5个MSCS 者较未标记MSCS 者均有信号降低改变 ,且前者的降低率大于后者 ,3个序列中以T2 WI的信号强度变化率最大 ;标记 1× 10 6个MSCS 者 ,标记后培养 展开更多
关键词 标记 WI MSC 人脐血 间充质干细胞 MR成像 细胞成像 PLL 行标 显示
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黄芪多糖对小鼠骨髓及外周血造血干细胞的增殖及动员作用 被引量:60
5
作者 翁玲 刘学英 +3 位作者 刘彦 张颖 赵林爱 邓筱玲 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2003年第3期306-309,共4页
探讨APS P对正常或化疗后小鼠的骨髓、脾及外周血造血干细胞的促增殖及外周动员作用。给正常或经环磷酰胺化疗后的C5 7BL 6小鼠注射APS P ,然后取骨髓细胞、外周血细胞及脾细胞 ,并用荧光抗体PerCP Sca 1,APC c kit及PE Lineage(CD3,CD4... 探讨APS P对正常或化疗后小鼠的骨髓、脾及外周血造血干细胞的促增殖及外周动员作用。给正常或经环磷酰胺化疗后的C5 7BL 6小鼠注射APS P ,然后取骨髓细胞、外周血细胞及脾细胞 ,并用荧光抗体PerCP Sca 1,APC c kit及PE Lineage(CD3,CD4 ,CD8,Tr119,B2 2 0 CD11b ,Gr 1)进行染色标记 ,用流式细胞仪检测小鼠造血干细胞(Lin c kit+ Sca 1+ )数量变化。注射APS P能使正常及化疗小鼠骨髓、脾及外周血中的造血干细胞有不同程度的增加。这一作用可能是由于APS P促进骨髓造血干细胞的增殖 ,而在外周血及脾中的增加则可能是由于APS P对骨髓造血干细胞的外周动员作用。 展开更多
关键词 黄芪多糖 小鼠 骨髓 外周血 造血干细胞 细胞增殖 癌症
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三七总皂甙诱导骨髓间质干细胞分化为神经元样细胞 被引量:57
6
作者 撒亚莲 李海标 《中山医科大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第6期409-410,437,共3页
【目的】用三七总皂甙 (totalPanaxnotoginsengsaponins)在体外定向诱导SD青年鼠骨髓间质干细胞 (mesenchy malstemcell,rMSC)分化为神经元样细胞。【方法】用低糖DMEM冲洗骨髓腔 ,收集骨髓细胞悬液 ,接种在塑料培养瓶中。经体外扩增、... 【目的】用三七总皂甙 (totalPanaxnotoginsengsaponins)在体外定向诱导SD青年鼠骨髓间质干细胞 (mesenchy malstemcell,rMSC)分化为神经元样细胞。【方法】用低糖DMEM冲洗骨髓腔 ,收集骨髓细胞悬液 ,接种在塑料培养瓶中。经体外扩增、纯化 ,选用第 5代后的间质干细胞进行诱导分化。用 10 μg/LbFGF预诱导 2 4h ,更换成含三七总皂甙的无血清培养基DMEM诱导间质干细胞分化为神经元样细胞。用免疫组化SABC法鉴定神经丝蛋白 (NF M )、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、巢蛋白 (nestin)、微管联合蛋白 2 (MAP 2 )、生长相关蛋白 4 3(GAP 4 3)、胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)的表达。【结果】第5代间质干细胞形态达到均一 ,呈梭形。用三七总皂甙诱导 30min到 5h ,间质干细胞胞体逐渐增大并伸出细长突起 ,形似神经细胞。免疫组化显示NF M、NSE、MAP 2、GAP 4 3、nestin表达阳性 ,而GFAP阴性。【结论】三七总皂甙可诱导骨髓间质干细胞分化为神经元样细胞。 展开更多
关键词 三七总皂甙 骨髓间质干细胞 分化 神经元样细胞
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培养角膜缘干细胞羊膜移植治疗碱烧伤动物的实验研究 被引量:56
7
作者 潘志强 张文华 武宇影 《中华眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期32-35,I003,共5页
目的 观察培养生长于羊膜的角膜缘干细胞移植治疗角膜缘碱烧伤的效果。方法 将兔角膜缘干细胞原代培养后接种于羊膜 ,对新西兰大白兔角膜缘碱烧伤动物模型行角膜缘干细胞羊膜移植术 ,并对治疗后的角膜进行临床及病理学检查。结果 体... 目的 观察培养生长于羊膜的角膜缘干细胞移植治疗角膜缘碱烧伤的效果。方法 将兔角膜缘干细胞原代培养后接种于羊膜 ,对新西兰大白兔角膜缘碱烧伤动物模型行角膜缘干细胞羊膜移植术 ,并对治疗后的角膜进行临床及病理学检查。结果 体外培养的兔角膜缘干细胞可在羊膜上继续增殖、分化为密集的角膜上皮细胞层 ;角膜缘干细胞移植术后兔角膜缘轻度充血、角膜上皮完整、基质细胞浸润减轻、新生血管减少。组织病理学染色证实 :角膜缘及其周边上皮细胞为多层结构 ,角膜新生血管消失及基质中炎性细胞浸润减轻。结论 角膜缘干细胞羊膜移植术治疗角膜碱烧伤可恢复其角膜上皮结构的完整性 ,减少角膜新生血管的形成 ,维持角膜缘的细胞屏障功能 ,为进一步行角膜移植创造条件。 展开更多
关键词 角膜缘干细胞 羊膜移植 碱烧伤
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表皮细胞生长因子治疗创面出现的干细胞岛现象 被引量:52
8
作者 付小兵 孙晓庆 +4 位作者 孙同柱 董永洪 顾小曼 陈伟 盛志勇 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第12期733-736,共4页
目的 从细胞分化角度研究皮肤干细胞分布与增殖分化特征 ,以及这些特征在加速受创皮肤再生中的作用。方法 取 8例经重组人表皮细胞生长因子 (rhEGF)治疗而愈的溃疡创面皮肤 ,7例经磺胺嘧啶银治疗而愈的创面皮肤以及 3例流产胎儿、3例... 目的 从细胞分化角度研究皮肤干细胞分布与增殖分化特征 ,以及这些特征在加速受创皮肤再生中的作用。方法 取 8例经重组人表皮细胞生长因子 (rhEGF)治疗而愈的溃疡创面皮肤 ,7例经磺胺嘧啶银治疗而愈的创面皮肤以及 3例流产胎儿、3例儿童和 2例正常成人皮肤 ,用过氧化酶标记的链霉卵白素 (SP)免疫组化法研究 β1整合素、角蛋白 19(K19)、角蛋白 14(K14)以及角蛋白 10(K10 )的表达特征。结果 免疫组织化学染色显示 ,经rhEGF治疗的创面表皮干细胞和短暂扩充细胞不仅数量多 ,而且体积增大 ,在再生表皮基底层与角质层之间出现若干干细胞岛。这些干细胞岛的特征是 β1整合素和K19染色阳性 ,在组织学上与基底层干细胞没有直接联系 ,为一类独立的岛状结构。经K14与K10等系列染色鉴别研究表明 ,在正常成人、青少年、胎儿以及未用rhEGF治疗的对照创面皮肤均未发现类似的干细胞岛现象。结论 在经rhEGF治疗的创面表皮中出现的干细胞岛是一种特殊和独立的细胞学结构 ,可能由已经分化成熟的细胞逆分化而来。其机制涉及生长因子对细胞分化调控等诸方面。 展开更多
关键词 皮肤溃疡 干细胞 创伤愈合 表皮细胞生长因子 治疗
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细胞生长因子体外对大鼠肝干细胞的影响 被引量:51
9
作者 姚鹏 胡大荣 +3 位作者 詹轶群 许望翔 李长燕 杨晓明 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 2003年第1期33-36,共4页
目的研究大鼠肝干细胞系WB-F344细胞在体外的生长分化与多种细胞因子的关系.方法用3H掺入法检测细胞因子对WB-F344细胞生长增殖作用.用western blot检测WB-F344细胞因子受体的表达.流式细胞仪检测细胞凋亡.结果发现肝细胞生长因子(HGF)8... 目的研究大鼠肝干细胞系WB-F344细胞在体外的生长分化与多种细胞因子的关系.方法用3H掺入法检测细胞因子对WB-F344细胞生长增殖作用.用western blot检测WB-F344细胞因子受体的表达.流式细胞仪检测细胞凋亡.结果发现肝细胞生长因子(HGF)80ng/ml cpm值为982.95、表皮生长因子(EGF)80 ng/ml cpm值为906.32、胰岛素80 ng/ml cpm值为968.67、成纤维细胞生长因子(FGFα)80 ng/ml cpm值为863.98,促进WBF344细胞的增殖;白细胞介素-6(IL-6)80 ng/ml cpm值为368.67、肿瘤坏死因子α 80 ng/ml cpm值为372.90对WB-F344细胞的生长无明显影响;而转化生长因子(TGF β)能够诱导WB-F344细胞凋亡(80 ng/ml凋亡率为26.89%)并抑制其生长;western blot检测发现WB-F344细胞表面存在HGF、EGF、FGF α、TGF β等细胞因子受体.提示细胞因子可能通过与其受体结合方式调控WB-F344细胞的生长分化.进一步用HGF、EGF、胰岛素等细胞因子组成并添加地塞米松的分化培养体系,在体外对WB-F344细胞进行定向诱导分化.发现WB-F344细胞在体外能够向肝实质细胞分化.此外HGF还具有刺激肝干细胞离散作用.结论肝干细胞的生长分化受多种细胞因子的调控,细胞生长因子可能在严重肝损伤后肝干细胞的动员、增殖及分化调控中起重要作用. 展开更多
关键词 肝损伤 分子生物学 表皮生长因子 细胞生长因子 大鼠 肝干细胞
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成人骨髓间质干细胞定向诱导为脂肪细胞的研究 被引量:29
10
作者 项鹏 张丽蓉 +4 位作者 陈振光 夏文杰 张秀明 李艳 李树浓 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第7期598-601,T001,共5页
目的 :体外定向诱导成人骨髓间质干细胞 (MSC)分化为脂肪细胞。方法 :采用Ficoll-Paque淋巴细胞分离液 (1 0 77× 10 3 g/L)离心分离成人MSC ,体外扩增 ,流式细胞仪检测MSC表面抗原表达 ,地塞米松、IBMX、胰岛素、indomethacin定向... 目的 :体外定向诱导成人骨髓间质干细胞 (MSC)分化为脂肪细胞。方法 :采用Ficoll-Paque淋巴细胞分离液 (1 0 77× 10 3 g/L)离心分离成人MSC ,体外扩增 ,流式细胞仪检测MSC表面抗原表达 ,地塞米松、IBMX、胰岛素、indomethacin定向诱导MSC分化为脂肪细胞。油红O检测中性脂肪 ,光镜下细胞计数。结果 :成人骨髓间质干细胞在体外扩增 5代可获得 1× 10 8个细胞。流式细胞仪检测结果显示CD2 9、CD44、CD90、CD10 5、CD16 6表达阳性 ,CD14、CD34、CD45、CD11a为阴性。诱导 48h后 ,细胞内有脂滴出现 ,随着时间延长 ,脂滴逐渐增加并融合为脂泡。细胞由梭形转变为圆形或多角性。细胞计数结果显示 85 %以上细胞转变为脂肪细胞。结论 :成人骨髓间质干细胞在体外可以分化为脂肪细胞。 展开更多
关键词 成人骨髓间质干细胞 脂肪细胞 肥胖症 造血干细胞
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人的类胚胎干细胞的分离和培养 被引量:46
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作者 徐令 黄绍良 +3 位作者 李树浓 周灿权 乔春平 张敏芳 《中山医科大学学报》 CSCD 1998年第1期77-78,共2页
人的类胚胎干细胞的分离和培养①徐令1黄绍良1李树浓2周灿权3乔春平2张敏芳3(中山医科大学1孙逸仙纪念医院儿科2病理生理教研室3附属第一医院生殖中心;广州,510120)主题词胚胎;干细胞中图号R329.1自从Eva... 人的类胚胎干细胞的分离和培养①徐令1黄绍良1李树浓2周灿权3乔春平2张敏芳3(中山医科大学1孙逸仙纪念医院儿科2病理生理教研室3附属第一医院生殖中心;广州,510120)主题词胚胎;干细胞中图号R329.1自从Evans和Kaufman[1,2]于1... 展开更多
关键词 胚胎 干细胞 类胚胎 分离 培养
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麝香多肽体外诱导成年大鼠和人骨髓间充质干细胞定向分化为神经元的研究 被引量:38
12
作者 肖庆忠 李浩威 +4 位作者 温冠媚 黄少华 张秀明 李艳 李树浓 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第10期1179-1182,T003,共5页
目的 :观察麝香多肽体外定向诱导成年大鼠和人骨髓间质干细胞 (Bonemarrowmesenchymalstemcells,BMMSCs)分化为神经元的能力。方法 :采用含 10 0 - 15 0mg/L麝香多肽的无血清L -DMEM培养基诱导成年大鼠和人BMMSCs分化为神经元 ,免疫组... 目的 :观察麝香多肽体外定向诱导成年大鼠和人骨髓间质干细胞 (Bonemarrowmesenchymalstemcells,BMMSCs)分化为神经元的能力。方法 :采用含 10 0 - 15 0mg/L麝香多肽的无血清L -DMEM培养基诱导成年大鼠和人BMMSCs分化为神经元 ,免疫组化鉴定神经元烯醇化酶 (NSE)、神经丝蛋白 (NF)、胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)、神经巢蛋白 (nestin)的表达。结果 :成年大鼠和人BMMSCs在加入含麝香多肽的无血清L -DMEM培养基诱导后 ,BMMSC胞体收缩 ,突起伸出 ,形似神经元 ;免疫组化显示诱导出的神经元样细胞NSE、NF、nestin表达阳性 ,GFAP阴性。结论 :麝香多肽可以在体外诱导成年大鼠和人BMMSCs定向分化为神经元。 展开更多
关键词 骨髓 干细胞 神经元 麝香多肽 细胞分化
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心肌细胞裂解液对骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化诱导作用的研究 被引量:40
13
作者 袁岩 陈连凤 +3 位作者 张抒扬 吴炜 陈浩 严晓伟 《中华心血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期170-173,共4页
目的 通过向骨髓间充质干细胞 (MSCs)培养体系中添加心肌细胞裂解液的方法,体外模拟心肌微环境,观察MSCs向心肌细胞分化的诱导作用,并与诱导分化剂 5 氮杂胞苷 ( 5 aza)比较。方法 分离新生乳鼠的心肌细胞并制成心肌细胞裂解液,自成... 目的 通过向骨髓间充质干细胞 (MSCs)培养体系中添加心肌细胞裂解液的方法,体外模拟心肌微环境,观察MSCs向心肌细胞分化的诱导作用,并与诱导分化剂 5 氮杂胞苷 ( 5 aza)比较。方法 分离新生乳鼠的心肌细胞并制成心肌细胞裂解液,自成年大鼠骨髓中分离MSCs,用含有心肌细胞裂解液的培养基(A组)、含有 5 aza的培养基 (B组 )、含有 5 aza和心肌细胞裂解液的培养基(C组)以及普通培养基(对照组)培养。观察细胞形态的改变,并通过免疫组化分析分化后细胞表达α 肌动蛋白、心脏特异性肌钙蛋白T(cTnT)、连接蛋白 43及CD31的情况。结果 A、B组的MSCs在培养 1周后均形成肌细胞形态,并且均表达α 肌动蛋白和cTnT;A组MSCs分化的肌样细胞所含的肌纤维较B组更丰实,细胞生长趋势也优于B组,并且可以表达CD31;B组MSCs分化的肌样细胞不表达CD31;对照组细胞仅表达α 肌动蛋白。结论 心肌细胞裂解液是体外诱导MSCs分化为心肌样细胞的理想条件,优于传统的 5 aza,在心肌细胞移植技术中可以用于体外模拟心肌细胞微环境。 展开更多
关键词 心肌细胞 CD31 表达 分化诱导 骨髓间充质干细胞 Α-肌动蛋白 对照组 成肌细胞 心肌样细胞 培养基
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粒细胞集落刺激因子动员骨髓干细胞治疗大鼠急性心肌梗塞 被引量:43
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作者 陈运贤 欧瑞明 +7 位作者 钟雪云 钟立业 陈惠珍 彭龙云 曾武涛 靳三庆 张希 韩忠朝 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期1-3,I001,共4页
目的 :探讨G -CSF动员的骨髓来源干细胞对急性心肌梗塞动物模型的治疗作用与对缺血濒死心肌的保护作用。方法 :用异丙肾上腺素 (ISO)复制急性心肌梗塞大鼠动物模型 ,于 3h后用G -CSF动员骨髓干细胞释放和迁移至心肌梗塞部位 ,并分别于 2... 目的 :探讨G -CSF动员的骨髓来源干细胞对急性心肌梗塞动物模型的治疗作用与对缺血濒死心肌的保护作用。方法 :用异丙肾上腺素 (ISO)复制急性心肌梗塞大鼠动物模型 ,于 3h后用G -CSF动员骨髓干细胞释放和迁移至心肌梗塞部位 ,并分别于 2 4h、48h和 2周后杀死大鼠 ,取出心脏 ,检测心肌的病理变化情况。结果 :用ISO后 2 4h对照组可见散在心肌梗塞灶 ,坏死区周围有多量以中性粒细胞为主的炎症细胞浸润 ,而治疗组大鼠心肌坏死程度较对照组轻 ,浸润的细胞以单个核细胞为主 ;48h后对照组心肌梗塞灶进一步扩大 ,呈散在片状分布 ,而治疗组心肌梗塞灶扩大不明显 ,呈散在灶性分布 ,并可见成堆或散在分布的淋巴细胞样细胞 ;2周后 ,治疗组未见明显心肌梗塞后疤痕组织 ,可见新生的心肌细胞生长。结论 :G -CSF对缺血濒死心肌有保护作用 ,用G -CSF动员骨髓来源的干细胞进行“自我移植” ,可用于急性心肌梗塞的治疗。 展开更多
关键词 心肌梗塞 骨髓干细胞 粒细胞集落刺激因子 AMI
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创面愈合过程中创缘表皮干细胞的再分布 被引量:41
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作者 李建福 付小兵 +1 位作者 盛志勇 孙同柱 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期228-231,共4页
目的 研究皮肤干细胞在全层皮肤创面愈合过程中的分布与增殖分化特征 ,以及该特征在创面愈合过程中的作用。方法  2 0只Wistar大鼠背部各制备 4个面积为 2 5 4cm2 的全层皮肤缺损创面 ,将创面随机分为 2组 ,即银锌霜治疗组 ( 40个创... 目的 研究皮肤干细胞在全层皮肤创面愈合过程中的分布与增殖分化特征 ,以及该特征在创面愈合过程中的作用。方法  2 0只Wistar大鼠背部各制备 4个面积为 2 5 4cm2 的全层皮肤缺损创面 ,将创面随机分为 2组 ,即银锌霜治疗组 ( 40个创面 ) ,空白对照组 ( 40个创面 )。分别于伤后 3天、1周、2周和 3周以组织学检查动态观察各组治疗效果 ,并以 β1整合素、角蛋白 19(K19)免疫组化法检测表皮干细胞在创面愈合过程中的分布情况。结果 两组创面愈合率在银锌霜组为 80 % ( 32 /40 ) ,对照组为 6 0 % ( 2 4/ 40 )。两组创面肉芽组织于各时相点均未见 β1整合素、K19阳性细胞出现 ,但于创缘表皮的棘层或颗粒层出现了散在的 β1整合素和K19同时染色阳性细胞 ,且越接近创面这些阳性细胞更加密集 ,组织学上与基底层的阳性细胞无直接联系 ;其数量随着创面的缩小渐渐增加 ,直到创面愈合。创面上皮化后 ,这些阳性细胞逐渐减少 ,并随着愈合创面表皮脚的出现而消失 ;而感染创面的阳性细胞数量明显少于未感染创面。结论 表皮干细胞能动的参与创面的修复 ,创缘表皮干细胞再分布的主要功能可能是促进创面再上皮化。 展开更多
关键词 创面愈合 创缘表皮 干细胞 再分布
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脂肪干细胞HLA分子表达与体外抑制淋巴细胞增殖的实验研究 被引量:34
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作者 崔磊 尹烁 +4 位作者 杨平 刘波 张英 刘伟 曹谊林 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第27期1890-1894,共5页
目的研究脂肪干细胞(adiposederivedstemcells,ADSCs)表面免疫分子的表达以及体外调节淋巴细胞反应的功能,以期为组织工程提供同种异体种子细胞来源。方法从临床脂肪抽吸术丢弃脂肪组织中分离获取脂肪干细胞(共3例),体外培养至第2代,流... 目的研究脂肪干细胞(adiposederivedstemcells,ADSCs)表面免疫分子的表达以及体外调节淋巴细胞反应的功能,以期为组织工程提供同种异体种子细胞来源。方法从临床脂肪抽吸术丢弃脂肪组织中分离获取脂肪干细胞(共3例),体外培养至第2代,流式细胞仪检测免疫分子HLAI、HLAII的表达。1×105个/孔ADSC细胞刺激异体淋巴细胞,观察细胞增殖情况。以植物血凝素(PHA,2μg/ml)刺激淋巴细胞后,分别以(1×102、1×103、1×104、1×105)细胞/孔数量的异体脂肪干细胞加入反应体系中,观察淋巴细胞增殖情况;另一组在刺激同时加入白介素2(IL2,0.5ng/ml),检测脂肪干细胞抑制作用的逆转。分别以1×102~5细胞/孔数量的“第三者”脂肪干细胞或经IFNγ作用后脂肪干细胞加入混合双向淋巴细胞反应体系中,观察淋巴细胞增殖抑制情况。结果脂肪干细胞表达HLAI类分子,但未检测到HLAII类分子阳性表达。人IFNγ刺激48h后,HLAI表达未见明显增高,HLAII类分子表达明显增高。异体或经IFNγ作用的脂肪干细胞均未能刺激淋巴细胞体外增殖。脂肪干细胞可明显抑制PHA刺激的淋巴细胞增殖,IL2可逆转脂肪干细胞的抑制作用。脂肪干细胞可明显抑制双相混合淋巴细胞反应,抑制作用呈脂肪干细胞细胞数量依赖性;经IFNγ作用后抑制作用未见明显减弱。结论ADSC可在体外抑制淋巴细胞增殖反应,具有一定的调节淋巴细胞反应的能力,有可能成为组织工程或细胞治疗中同种异体细胞来源。 展开更多
关键词 脂肪干细胞 体外抑制 分子表达 实验研究 HLAII类分子 混合淋巴细胞反应 淋巴细胞增殖反应 细胞增殖情况 IFN-γ 流式细胞仪检测 细胞抑制作用 细胞增殖抑制 细胞体外增殖 免疫分子 细胞来源 同种异体 组织工程 反应体系
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骨髓干细胞在大鼠肝纤维化形成环境中的分化 被引量:41
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作者 展玉涛 魏来 +3 位作者 陈红松 丛旭 费然 王宇 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 2003年第11期673-675,共3页
目的 研究骨髓干细胞在肝纤维化形成环境中向肝细胞定向分化。 方法 采用四氯化碳皮下注射法诱导大鼠肝纤维化,应用流式细胞仪分选富集Thy+CD3-CD45RA-的骨髓干细胞,采用红色荧光染料PKH26-GL对其标记后进行自体移植,6周后通过免疫组织... 目的 研究骨髓干细胞在肝纤维化形成环境中向肝细胞定向分化。 方法 采用四氯化碳皮下注射法诱导大鼠肝纤维化,应用流式细胞仪分选富集Thy+CD3-CD45RA-的骨髓干细胞,采用红色荧光染料PKH26-GL对其标记后进行自体移植,6周后通过免疫组织化学方法检测大鼠肝组织白蛋白、ck 8、α-平滑肌肌动蛋白表达。 结果 PKH 26-GL标记的细胞在纤维化肝脏中表达白蛋白和ck8,占肝细胞总数的(0.17±0.02)%;未见表达α-平滑肌肌动蛋白。 结论 骨髓干细胞在肝纤维化形成环境中可以向肝细胞定向分化,不向肌成纤维样细胞分化。 展开更多
关键词 骨髓干细胞 大鼠 肝纤维化 肝细胞 细胞分化
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多种中药成分诱导大鼠骨髓间质干细胞转变为神经元样细胞 被引量:32
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作者 刘金保 董晓先 +4 位作者 董燕湘 何慧华 董伟华 梁仲培 肖庆忠 《中国药物与临床》 CAS 2003年第3期234-236,共3页
目的 体外定向诱导大鼠骨髓间质干细胞 (MSCs)分化为神经元样细胞。方法 通过贴壁法分离大鼠MSCs,体外扩增培养 ,流式细胞仪检测其表面抗原表达 ,中药成分定向诱导MSCs分化为神经元样细胞。光镜下观察细胞形态 ,免疫细胞化学法检测神... 目的 体外定向诱导大鼠骨髓间质干细胞 (MSCs)分化为神经元样细胞。方法 通过贴壁法分离大鼠MSCs,体外扩增培养 ,流式细胞仪检测其表面抗原表达 ,中药成分定向诱导MSCs分化为神经元样细胞。光镜下观察细胞形态 ,免疫细胞化学法检测神经细胞特异性抗原标志。结果 大鼠MSCs可通过贴壁法成功分离并可在体外大量扩增。流式细胞仪检测结果显示CD1 4、CD1 1α、CD34、CD38、CD45、CD80、CD86为阴性 ,CD2 9、CD44、CD90、CD1 0 5、CD1 66呈阳性。黄芪、天麻、人参、当归、脑新舒、人参蜂王浆等多种中药诱导 1~ 3h后大部分MSCs转变为神经元样细胞 ,出现胞体和突起 ,免疫细胞化学染色神经元特异性烯醇酶 (NSE)、巢蛋白 (nestin)呈阳性 ,胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)阴性。 展开更多
关键词 中药成分 诱导 大鼠 骨髓间质干细胞 神经元样细胞
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人间充质干细胞体外扩增及生物学特性的研究 被引量:31
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作者 周敦华 黄绍良 +4 位作者 吴燕峰 魏菁 陈戈煜 黎阳 包蓉 《中华儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第8期607-610,共4页
目的 探讨成人骨髓、胎儿骨髓和人脐血 3种不同来源的人类间充质干细胞 (MSC)体外扩增及其生物学特性。方法 观察 3种来源的MSC的生长、增殖和表面标志的表达 ,从而评价MSC的纯化、增殖能力及其免疫学特性。结果  (1) 3种不同来源的... 目的 探讨成人骨髓、胎儿骨髓和人脐血 3种不同来源的人类间充质干细胞 (MSC)体外扩增及其生物学特性。方法 观察 3种来源的MSC的生长、增殖和表面标志的表达 ,从而评价MSC的纯化、增殖能力及其免疫学特性。结果  (1) 3种不同来源的人MSC的细胞形态、集落数、集落大小均无差异 ;但成人骨髓MSC在集落形成及集落交错融合时间上均早于胎儿骨髓和脐血MSC ;(2 )3种来源的人MSC传代培养增殖速度无差异 ,但脐血和胎儿MSC融合后无接触抑制 ,而成人骨髓MSC存在接触抑制 ;(3)来源于骨髓单个核细胞 (MNC) 8× 10 6或脐血MSC 2 5× 10 6的MSC ,经体外扩增 3代、5代和 10代后 ,细胞数分别为 10 7、10 8和 10 10 个 ;(4)MSC易纯化 ,P2代细胞均一性为 90 % ,P3代细胞均一性为 95 % ,P5代细胞均一性达到 99% ;(5 )不同来源的MSC表面重要标志 :CD2 9、CD44、CD59、CD90 、CD10 5、CD166表达均为阳性 ,其造血细胞表面标志 :CD11a、CD14 、CD3 3 、CD3 4 、CD2 8、CD45、CD117表达均为阴性 ,与移植免疫排斥发生密切相关的表面标志 :HLA DR、B7 1(CD80 )、B7 2 (CD86)、CD40 和CD40L均为阴性。 3种不同来源的人MSC表面标志 ,差异无显著性。 (6 )两种不同培养体系对人MSC的纯化扩增及生物学特性无影响。结论  (1) 展开更多
关键词 人间充质干细胞 体外扩增 生物学特性 成人骨髓 胎儿骨髓 人脐血
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体外诱导骨髓间充质干细胞分化为上皮细胞的研究 被引量:27
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作者 方利君 付小兵 +2 位作者 王玉新 孙同柱 程飚 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期171-172,i002,共3页
目的 探讨表皮生长因子 (EGF)体外诱导骨髓间充质干细胞 (MSCs)分化为上皮细胞的可行性。方法 抽取小型香猪的骨髓 ,经密度梯度离心分离纯化MSCs ,培养扩增后 ,用含EGF的不同介质诱导 ,观察细胞形态的变化 ,免疫组织化学染色和流式细... 目的 探讨表皮生长因子 (EGF)体外诱导骨髓间充质干细胞 (MSCs)分化为上皮细胞的可行性。方法 抽取小型香猪的骨髓 ,经密度梯度离心分离纯化MSCs ,培养扩增后 ,用含EGF的不同介质诱导 ,观察细胞形态的变化 ,免疫组织化学染色和流式细胞仪鉴定角蛋白的表达。结果 免疫组织化学染色显示EGF诱导后 3dMSCs角蛋白表达较弱 ,7d角蛋白表达增强。流式细胞仪检测发现EGF诱导后 3d表达角蛋白的MSCs较少 (3 % ) ,7d表达角蛋白的细胞数量明显增加 (13 % )。结论 MSCs在体外EGF诱导下可能分化为上皮细胞。 展开更多
关键词 体外诱导 骨髓间充质干细胞 上皮细胞 表皮生长因子
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