(自动)核酸提取仪温度校准的几点建议 被引量：3

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作者 王知 沈亚芹 王灵燕 《计量与测试技术》 2022年第5期5-6,共2页

主要介绍了(自动)核酸提取仪温度校准过程中遇到的一些问题以及针对这些问题的解决方案,同时总结归纳了几种(自动)核酸提取仪温度校准过程中的注意事项。

关键词 (自动)核酸提取仪 温度 校准 注意事项

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人工智能计量软件在自动核酸提取仪校准中的应用 被引量：2

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作者 王勇刚 张旭 《中国检验检测》 2023年第1期27-29,共3页

自动核酸提取仪广泛用于核酸检测实验室,对核酸检测结果的准确性有关键影响。根据核酸提取仪的校准规范要求,在该设备的校准过程中涉及的数据量和计算量巨大,并且由于该设备多放置于生物安全风险等级较高的实验室核心区,因此,手动校准... 自动核酸提取仪广泛用于核酸检测实验室,对核酸检测结果的准确性有关键影响。根据核酸提取仪的校准规范要求,在该设备的校准过程中涉及的数据量和计算量巨大,并且由于该设备多放置于生物安全风险等级较高的实验室核心区,因此,手动校准存在较多困难。根据新校准规范开发的人工智能计量校准软件,利用人工智能技术,自动识别被测设备参数,实现自动生成原始记录和证书报告并进行远程审批,在提高工作效率的同时,还可以降低计量工作人员在生物安全风险等级高的空间暴露的时间,解决了实际工作中的难点。 展开更多

关键词 JJF 1874-2020《(自动)核酸提取仪校准规范》 人工智能 自动计量校准软件 核酸检测

原文传递

4种全自动核酸提取仪提取全血DNA效率的比较 被引量：6

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作者 沙燕华 黄宪章 +5 位作者 黄小亭 曹顺旺 熊玉娟 柯培锋 林海标 陈曲波 《国际医药卫生导报》 2019年第15期2487-2490,共4页

目的比较4种全自动核酸提取仪在全血基因组检测中的核酸提取效果。方法分别用4个厂家的全自动核酸提取仪按预定的提取程序自动执行全血核酸提取,并与本实验室手工提取的核酸进行纯度和浓度比较。结果 4种全自动核酸提取仪提取全血核酸的... 目的比较4种全自动核酸提取仪在全血基因组检测中的核酸提取效果。方法分别用4个厂家的全自动核酸提取仪按预定的提取程序自动执行全血核酸提取,并与本实验室手工提取的核酸进行纯度和浓度比较。结果 4种全自动核酸提取仪提取全血核酸的260/280值均满足纯度1.7~2.0要求,并且核酸提取浓度高于本实验手工提取法或与本实验室手工提取法相当。结论 这4种全自动核酸提取仪提取效果优,自动化程度高,能满足临床标本应用。 展开更多

关键词 全自动核酸提取仪 磁珠分离 分子生物学 全血DNA

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甲型H1N1流感病毒采用不同核酸提取方法的比较研究 被引量：5

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作者 王赤华 曾勇 《临床和实验医学杂志》 2017年第3期230-232,共3页

目的研究甲型H1N1流感病毒核酸提取的比较准确和有效的方法。方法选用2014年12月至2015年12月就诊的甲型H1N1流感患者的咽拭子共40份作为研究对象。对所获得的标本进行10-1~10-4的系列稀释,获得不同浓度的流感病毒标本备检。主要采用三... 目的研究甲型H1N1流感病毒核酸提取的比较准确和有效的方法。方法选用2014年12月至2015年12月就诊的甲型H1N1流感患者的咽拭子共40份作为研究对象。对所获得的标本进行10-1~10-4的系列稀释,获得不同浓度的流感病毒标本备检。主要采用三种试剂盒进行实验:一种是Promega公司的Maxwell16全自动核酸提取仪以及该提取仪的配套试剂盒,为A组,一种是QIAGEN公司的Rneasy Mini Kit,为B组,第三种则是国产的H生物公司的RNA提取试剂盒,为C组。对三种方法的核酸提取情况进行比较。结果对同一份咽拭子的核酸进行提取,A组所提取的总RNA浓度最高,B组的总RNA浓度次之,C组的总RNA浓度最低。A组在各个稀释浓度的流感病毒提取率均较高,差异均具有统计学意义(P<0.05);C组和B组随着稀释浓度的增大,流感病毒的提取率逐渐降低,尤其是C组当稀释浓度为10-4时,提取不到流感病毒。结论全自动核酸提取仪对核酸的提取效果较好,即使在高倍稀释的情况下也能够达到较高的核酸提取率,避免了手工提取的误差,是一种快捷有效的检测方法,值得在临床上推广使用。 展开更多

关键词 甲型H1N1流感 全自动核酸提取仪 核酸提取率

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全自动核酸提取仪与手动提取组织DNA的效率比较 被引量：5

5

作者 林丹义 张科平 +3 位作者 许洁 颜黎栩 骆新兰 刘艳辉 《临床与实验病理学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第12期1398-1399,共2页

近年，随着众多与疾病诊断、预后及治疗相关的分子标志物的出现，以石蜡组织DNA为材料进行分子水平的基因检测及筛查已成为临床诊断及相关研究的常规手段。对于各种基因分析而言，重要的是能够获得足够纯度和数量的DNA。DNA提取是分子... 近年，随着众多与疾病诊断、预后及治疗相关的分子标志物的出现，以石蜡组织DNA为材料进行分子水平的基因检测及筛查已成为临床诊断及相关研究的常规手段。对于各种基因分析而言，重要的是能够获得足够纯度和数量的DNA。DNA提取是分子生物学研究的一项基础技术，其提取的质量好坏及数量的多少直接影响到分子生物学实验的开展。 展开更多

关键词 DNA提取 全自动核酸提取仪 手动提取

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自动核酸提取仪校准结果不确定度评定 被引量：3

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作者 王涛 李彦东 +2 位作者 刘文芳 李岩峰 李杰 《计量与测试技术》 2023年第2期103-105,110,共4页

自动核酸提取仪采用核酸提取试剂完成对样本核酸的提取,在新冠疫情期间,广泛应用于核酸检测实验,其质量直接影响样品核酸提取效率和检测结果的准确性。本文介绍了自动核酸提取仪的定义、结构原理和作用,并对其温度、振动频率和核酸提取... 自动核酸提取仪采用核酸提取试剂完成对样本核酸的提取,在新冠疫情期间,广泛应用于核酸检测实验,其质量直接影响样品核酸提取效率和检测结果的准确性。本文介绍了自动核酸提取仪的定义、结构原理和作用,并对其温度、振动频率和核酸提取回收率进行不确定度评定和分析。 展开更多

关键词 自动核酸提取仪 校准 不确定度评定

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不同全自动核酸提取仪对ASFV、PEDV提取效果的比较

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作者 黄丽娜 陈秀萍 +2 位作者 甘跃灵 谢璐娜 王雪妹 《今日养猪业》 2024年第3期1-3,共3页

【目的】以倍比稀释的ASFV(非洲猪瘟病毒)阳性对照样品以及PEDV(猪流行性腹泻病毒)阳性对照样品为检测对象,对比3款全自动核酸提取仪对DNA和RNA的提取效果,旨在帮助猪场配备的实验室筛选合适、可靠的全自动核酸提取仪。【方法】倍比稀... 【目的】以倍比稀释的ASFV(非洲猪瘟病毒)阳性对照样品以及PEDV(猪流行性腹泻病毒)阳性对照样品为检测对象,对比3款全自动核酸提取仪对DNA和RNA的提取效果,旨在帮助猪场配备的实验室筛选合适、可靠的全自动核酸提取仪。【方法】倍比稀释好的ASFV、PEDV阳性对照样品,每个梯度设置3个平行重复,诺维赞核酸提取仪(VNP-32P)为处理1,西安天隆核酸提取仪(NP968-C)为处理2,博日核酸提取仪(NPA-32P)为处理3,根据3款全自动核酸提取仪及提取试剂盒的说明书将对应阳性样品进行核酸提取,再根据英迪康的virotype?非洲猪瘟病毒2.0 PCR检测试剂盒以及世纪元亨的流行性腹泻病毒实时荧光RT-PCR检测试剂盒的说明书进行体系配制、上样、程序设置,进行核酸扩增。【结果】同一浓度梯度的ASFV、PEDV阳性对照样品,处理3所提核酸的扩增结果 CT值较处理1和处理2的低,而处理1和处理2提取效果不相上下。【结论】3款核酸提取仪的稳定性都满足需求;博日核酸提取仪(NPA-32P)的提取效果优于另外2款,诺维赞核酸提取仪(VNP-32P)和西安天隆核酸提取仪(NP968-C)的提取效果接近。 展开更多

关键词 全自动核酸提取仪 ASFV PEDV 稳定性效果

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全自动核酸提取仪对不同类型ASFV、PEDV样品的提取效果

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作者 陈秀萍 蒋叶林 +5 位作者 周丽雯 凌勇 陈永贵 张蓉 吴有林 丁能水 《现代畜牧兽医》 2024年第1期21-24,共4页

研究以非洲猪瘟病毒(ASFV)的各类型阳性样品以及流行性腹泻病毒(PEDV)阳性样品为检测对象,评测全自动核酸提取仪对DNA和RNA核酸的提取效果,旨在帮助动物疫病检测实验室了解如何评测全自动核酸提取仪是否满足检测需求。试验选用已经过检... 研究以非洲猪瘟病毒(ASFV)的各类型阳性样品以及流行性腹泻病毒(PEDV)阳性样品为检测对象,评测全自动核酸提取仪对DNA和RNA核酸的提取效果,旨在帮助动物疫病检测实验室了解如何评测全自动核酸提取仪是否满足检测需求。试验选用已经过检测结果为阳性的不同类型ASFV样本和PEDV阳性的粪便拭子样品,进行10倍梯度稀释并将检测结果与已知的检测原值进行对比。结果显示,试验使用的核酸提取仪的稳定性满足需求,但敏感性较差,可能存在环境、人员、车辆等病毒含量低的样品被漏检。在抗干扰方面,试验使用的核酸提取仪对咽喉拭子的核酸提取结果存在假阴性的情况;该仪器对肛门拭子和环境样品的抗干扰性不佳,也可能出现假阴性结果;该仪器不会受样品影响而检测出假阳性结果。 展开更多

关键词 病毒检测 DNA病毒 RNA病毒 全自动核酸提取仪 稳定性 敏感性 抗干扰性

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HBV-DNA全自动检测系统的性能验证 被引量：3

9

作者 张帅 黄静 +1 位作者 李俊如 徐凤姣 《当代医学》 2020年第11期13-16,共4页

目的对国产HBV-DNA全自动核酸提取仪及实时荧光定量PCR试剂(磁珠法)检测性能参数进行验证,评价其是否可应用于临床检测。方法依据CNAS《医学实验室质量和能力认可准则》相关文件对检测系统的精密度、线性范围、检测线、正确度、抗干扰... 目的对国产HBV-DNA全自动核酸提取仪及实时荧光定量PCR试剂(磁珠法)检测性能参数进行验证,评价其是否可应用于临床检测。方法依据CNAS《医学实验室质量和能力认可准则》相关文件对检测系统的精密度、线性范围、检测线、正确度、抗干扰能力、特异性进行性能验证。结果批间及中间精密度CV均<5%,标准差(s)分别<0.24、0.32。线性范围为1.03×102~2.71×107,检测线为100 IU/mL,正确度符合要求(<靶值对数值±0.4)。血红蛋白(≤2 g/dL)、胆红素(≤28 mg/dL)、甘油三脂(≤3000 mg/dL)对检测结果无影响,特异性符合要求。结论本实验室HBV-DNA全自动检测系统符合YY/T 1182—2010《核酸扩增检测用试剂(盒)》要求,可应用于临床检测工作。 展开更多

关键词 全自动核酸提取仪 实时荧光定量PCR 乙型肝炎病毒DNA 性能验证

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全自动核酸提取仪联合真空浓缩仪在法医学中的应用 被引量：1

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作者 李淑侠 沈金建 +1 位作者 曹佩军 李志超 《法医学杂志》 CAS CSCD 2021年第2期220-224,共5页

目的探讨全自动核酸提取仪联合真空浓缩仪在法医学DNA提取中的应用价值。方法采集人外周静脉血稀释成40、80、120、160、200、240、280和320倍的梯度样本,并对每一梯度的样本分别进行无抑制剂、加黑机油、加铁锈、加果酸、加锡纸、加靛... 目的探讨全自动核酸提取仪联合真空浓缩仪在法医学DNA提取中的应用价值。方法采集人外周静脉血稀释成40、80、120、160、200、240、280和320倍的梯度样本,并对每一梯度的样本分别进行无抑制剂、加黑机油、加铁锈、加果酸、加锡纸、加靛蓝6种处理。应用全自动核酸提取仪对上述样本进行DNA纯化提取,提取后的DNA洗脱液取6μL直接进行扩增,剩余部分使用真空浓缩仪进行浓缩,浓缩前后的DNA均使用Investigator 26plex QS试剂盒进行扩增、检测。结果添加果酸的梯度样本仅在40倍稀释时获得完整STR分型结果,另外5种方式处理的梯度样本在40~160倍稀释时均获得完整的STR分型。DNA浓缩后的STR分型结果显示,平均峰高和基因座检出率均有一定程度的提高,但是效果并不明显。结论全自动核酸提取仪具有高效的抑制剂去除能力和DNA提取效率,真空浓缩仪可在一定程度上浓缩DNA,两者联合使用可提高法医学检材的检验成功率。 展开更多

关键词 法医遗传学 DNA提取 微量DNA STR分型 抑制剂 全自动核酸提取仪 真空浓缩仪

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手动提取与自动化核酸提取对核酸质量影响分析

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作者 邹黎黎 柯琦 《医药前沿》 2023年第31期132-135,共4页

目的:探讨手动提取与全自动核酸纯化仪对分子病理检测中的福尔马林固定石蜡包埋组织(FFPET)提取DNA的核酸质量影响分析。方法:选取2022年3—12月电子科技大学医学院附属绵阳医院<绵阳市中心医院>病理科存档的20份经10%中性福尔马... 目的:探讨手动提取与全自动核酸纯化仪对分子病理检测中的福尔马林固定石蜡包埋组织(FFPET)提取DNA的核酸质量影响分析。方法:选取2022年3—12月电子科技大学医学院附属绵阳医院<绵阳市中心医院>病理科存档的20份经10%中性福尔马林固定石蜡包埋的组织标本,包括手术大标本10份,穿刺小标本10份。手术大组织标本每例连续切片9张,编号1~9,其中编号为单号的切片用人工手动提取(n=5),双号的切片用全自动核酸提取仪提取(n=4),编号9玻片进行HE染色质控。穿刺小组织标本每例连续切片21张,编号1~21,其中编号为单号的切片用人工手动提取(n=11),双号的切片用全自动核酸提取仪提取(n=10),编号21玻片进行HE染色质控。比较手动提取和全自动核酸纯化仪提取石蜡组织DNA的浓度、纯度及PCR可行性。结果:全自动核酸提取仪石蜡组织DNA提取浓度更高(P<0.05),纯度差异不显著,均能满足分子检测需求。结论:全自动核酸纯化仪自动化程高,污染概率低,提取效率高,值得推广。 展开更多

关键词 全自动核酸提取仪 手动提取 分子检测 DNA提取

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三种全自动核酸提取仪提取2019-nCoV RNA性能比较研究 被引量：1

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作者 陈莹 梅勇 +4 位作者 魏张静 吴加平 刘恒辰 苏林帆 杨振宇 《公共卫生与预防医学》 2021年第6期67-70,共4页

目的比较3种全自动核酸提取仪的检测结果,探讨国产全自动核酸提取仪对2019-nCoV RNA的检测性能。方法分别用甲(进口)、乙(国产)、丙(国产)3台全自动核酸提取仪,选用康彻思坦生物2019-nCoV RNA(液体)质控品S5(批号202007002,参考水平1000... 目的比较3种全自动核酸提取仪的检测结果,探讨国产全自动核酸提取仪对2019-nCoV RNA的检测性能。方法分别用甲(进口)、乙(国产)、丙(国产)3台全自动核酸提取仪,选用康彻思坦生物2019-nCoV RNA(液体)质控品S5(批号202007002,参考水平1000 cp/mL)作为实验对象,对该质控品进行10~1000倍系列稀释,配制成不同浓度的质控品作为实验样本。其中甲提取仪使用甲配套试剂,乙、丙属于同一厂家不同型号,均使用其配套试剂和第三方试剂,用以评价防污染能力、精密度、准确性、重复性、检测下限及线性相关性。结果以进口品牌甲作为参考标准进行比较;使用乙配套试剂时,乙、丙与甲的线性相关系数分别为:0.980、0.995(N端);0.991、0.983(ORF1ab端);使用第三方试剂时,乙、丙与甲的线性相关系数分别为:0.999、0.915(N端);0.997、0.825(ORF1ab端)。结论国产品牌乙、丙提取仪提取2019-nCoV RNA可以实现全自动操作,相关性较好,系统性能可与国际水平相当,且提取时间较甲短,在标本数量较多时,有明显优势。 展开更多

关键词 新型冠状病毒 全自动核酸提取仪 性能验证

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乙肝病毒DNA检测2种不同核酸提取方法的性能验证情况分析 被引量：9

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作者 董剑 许小华 《医疗卫生装备》 CAS 2019年第6期40-43,共4页

目的:对乙肝病毒DNA(HBV-DNA)检测的2种不同核酸提取方法,即手工法(煮沸法)和全自动核酸提取仪法(磁珠法),在使用相同的检测试剂和核酸扩增仪的条件下进行性能验证,以评价其验证结果。方法:依据《医学实验室质量和能力认可准则》《全国... 目的:对乙肝病毒DNA(HBV-DNA)检测的2种不同核酸提取方法,即手工法(煮沸法)和全自动核酸提取仪法(磁珠法),在使用相同的检测试剂和核酸扩增仪的条件下进行性能验证,以评价其验证结果。方法:依据《医学实验室质量和能力认可准则》《全国临床检验操作规程》等相关文件,由同一操作人员应用中山达安公司生产的HBV-DNA检测试剂盒和ABI7500实时荧光核酸扩增仪,分别采用手工法和全自动核酸提取仪法提取HBV-DNA进行临床样本的批内精密度、批间精密度、正确度、线性范围性能验证实验。结果:手工法的高值血清批内精密度为2.18%,低值血清批内精密度为3.76%;高值质控品批间精密度为3.29%。全自动核酸提取仪法的高值血清批内精密度为1.78%,低值血清批内精密度为2.44%;高值质控品批间精密度为2.84%。正确度验证分别取浓度为2.0×10^3、2.0×10^4、2.0×10^5、2.0×10^6copies/ml的可溯源标准品进行验证,手工法偏倚分别为-4.88%、-2.51%、-2.46%,-2.12%,全自动核酸提取仪法偏倚分别为-2.37%、-0.95%、0.74%、-1.33%。线性范围验证中,手工法和全自动核酸提取仪法的相关系数分别为0.9660、0.9858,均能满足临床检测的需求。结论:全自动核酸提取仪法较手工法提取核酸有利于简化HBV-DNA提取流程,实现分子生物实验室自动化提取核酸。 展开更多

关键词 乙型肝炎病毒DNA定量检测 手工(煮沸法) 全自动核酸提取仪法(磁珠法) 性能验证 血清

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不同核酸提取方法对HBV-DNA检测性能验证情况分析 被引量：1

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作者 周文娟 林真 徐建萍 《现代医药卫生》 2024年第4期575-580,共6页

目的评估2种乙型肝炎病毒(HBV)-DNA提取方法及2家检测试剂的性能,有助于选择优化提取试剂和检测试剂。方法2023年4月采用达安全自动核酸提取仪提取法(磁珠法)和手工提取法(一步法),并用达安和圣湘2种HBV-DNA试剂检测,对其进行精密度、... 目的评估2种乙型肝炎病毒(HBV)-DNA提取方法及2家检测试剂的性能,有助于选择优化提取试剂和检测试剂。方法2023年4月采用达安全自动核酸提取仪提取法(磁珠法)和手工提取法(一步法),并用达安和圣湘2种HBV-DNA试剂检测,对其进行精密度、正确度、线性范围、检出限及抗干扰能力等性能进行验证和评价。结果达安全自动核酸提取仪提取达安试剂检测、手工提取达安试剂检测和手工提取圣湘试剂检测在精密度、正确度、线性范围、检出限方面验证结果均达标;达安全自动核酸提取仪提取圣湘试剂检测在低值检测中变异系数大于5%,最低检测限验证不合格;抗干扰能力方面,全自动核酸提取仪提取的2.0 g/dL血红蛋白浓度的样本用达安和圣湘试剂检测结果均不受影响。手工提取甘油三酯浓度达3000 mg/dL的样本用达安和圣湘试剂检测的结果均不受影响。结论不同厂家的提取和检测试剂避免混用,达安和圣湘试剂对HBV-DNA定量检测的结果均符合要求。 展开更多

关键词 乙型肝炎病毒-DNA定量检测 全自动核酸提取仪法 手工提取法 性能验证

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