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里氏木霉QM9414尿嘧啶缺陷型转化体系改进和β-葡萄糖苷酶的过量表达
被引量：
1
1
作者
钟立霞
钱远超
+1 位作者
戴美学
钟耀华
《化工学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2016年第6期2510-2518,共9页
里氏木霉是广泛应用于纤维素酶生产的工业真菌,但高产突变株遗传操作困难,限制了菌种改良。首先利用定点整合策略敲除里氏木霉突变株QM9414的pyr4基因,成功构建尿嘧啶营养缺陷型菌株QP4,其遗传转化效率显著提高,而且产酶能力不受影响。...
里氏木霉是广泛应用于纤维素酶生产的工业真菌,但高产突变株遗传操作困难,限制了菌种改良。首先利用定点整合策略敲除里氏木霉突变株QM9414的pyr4基因,成功构建尿嘧啶营养缺陷型菌株QP4,其遗传转化效率显著提高,而且产酶能力不受影响。进一步在QP4中过量表达β-葡萄糖苷酶(BGL)基因bgl1,经大量平板显色筛选获得2株BGL活力明显增强的工程菌QPB4和QPB5,其酶活分别提高10.01倍和8.26倍。利用发酵酶液对2种不同预处理的玉米芯底物进行水解糖化实验,结果显示以酸处理玉米芯为底物时QPB4和QPB5的葡萄糖得率比QP4分别提高60.98%和52.44%,而以脱木素处理玉米芯为底物时其葡萄糖得率分别提高80.01%和86.00%。研究表明改进里氏木霉高产突变株遗传转化体系可以显著促进菌株改良,提高糖化应用效果。
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关键词
纤维素酶
里氏木霉高产突变株
遗传转化
水解糖化
尿嘧啶营养缺陷型标记
构建和表达
生物技术
生物工程
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职称材料
黑曲霉纤维二糖酶基因的克隆及其在里氏木霉中的表达
被引量：
15
2
作者
王冰冰
夏黎明
杜风光
《化工学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2011年第2期452-457,共6页
引言里氏木霉（Trichoderma reesei）是目前常用的纤维素酶生产菌种,其分泌的纤维素酶是一个多组分的复合体系,主要包括5种内切型-β-葡聚糖酶（endo-β-glucanase,EG,EC3.2.1.4）,
关键词
纤维二糖酶
黑曲霉
里氏木霉
纤维素酶
胞外分泌
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职称材料
酿酒酵母产D-乳酸重组菌的构建与发酵
被引量：
3
3
作者
汪兆峰
石贵阳
张梁
《生物加工过程》
CAS
2015年第6期6-12,共7页
采用基因工程方法对酿酒酵母进行代谢改造,使酵母产生乳酸代谢途径。将来源于L.mesenteroides和E.coli的D-乳酸脱氢酶基因,分别插入带有G418抗性的酵母穿梭质粒p YX212-kan MX上,电转化酵母,得到2株生产D-乳酸的酿酒酵母重组菌S.cerevis...
采用基因工程方法对酿酒酵母进行代谢改造,使酵母产生乳酸代谢途径。将来源于L.mesenteroides和E.coli的D-乳酸脱氢酶基因,分别插入带有G418抗性的酵母穿梭质粒p YX212-kan MX上,电转化酵母,得到2株生产D-乳酸的酿酒酵母重组菌S.cerevisiae WE1510和S.cerevisiae WB1186。进一步摇瓶发酵试验表明:重组菌S.cerevisiae WB1186在YEPD培养基、20 g/L糖、p H 5的条件下生长条件最好,并具有更好的产乳酸能力。经3 L发酵罐条件下验证,S.cerevisiae WB1186分批发酵96 h,最终乳酸积累量达到18.0 g/L;发酵条件为培养基YEPD,接种量10%,溶解氧(DO)30%,转速150 r/min,初始葡萄糖质量浓度10 g/L,控制pH 5.0,通气量3 L/min,OD600最大值转为厌氧发酵。
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关键词
D-乳酸
D-乳酸脱氢酶
LEUCONOSTOC
mesenteroides
酿酒酵母
代谢改造
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职称材料
题名
里氏木霉QM9414尿嘧啶缺陷型转化体系改进和β-葡萄糖苷酶的过量表达
被引量：
1
1
作者
钟立霞
钱远超
戴美学
钟耀华
机构
山东师范大学生命科学学院
山东大学生命科学学院
出处
《化工学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2016年第6期2510-2518,共9页
基金
国家自然科学基金面上项目(31370135)
山东省农业科技成果转化资金项目(2014No.45)
山东大学基本科研业务费专项资金项目(2015CJ005)~~
文摘
里氏木霉是广泛应用于纤维素酶生产的工业真菌,但高产突变株遗传操作困难,限制了菌种改良。首先利用定点整合策略敲除里氏木霉突变株QM9414的pyr4基因,成功构建尿嘧啶营养缺陷型菌株QP4,其遗传转化效率显著提高,而且产酶能力不受影响。进一步在QP4中过量表达β-葡萄糖苷酶(BGL)基因bgl1,经大量平板显色筛选获得2株BGL活力明显增强的工程菌QPB4和QPB5,其酶活分别提高10.01倍和8.26倍。利用发酵酶液对2种不同预处理的玉米芯底物进行水解糖化实验,结果显示以酸处理玉米芯为底物时QPB4和QPB5的葡萄糖得率比QP4分别提高60.98%和52.44%,而以脱木素处理玉米芯为底物时其葡萄糖得率分别提高80.01%和86.00%。研究表明改进里氏木霉高产突变株遗传转化体系可以显著促进菌株改良,提高糖化应用效果。
关键词
纤维素酶
里氏木霉高产突变株
遗传转化
水解糖化
尿嘧啶营养缺陷型标记
构建和表达
生物技术
生物工程
Keywords
cellulases
Trichoderma reesei high-production mutant
genetic transformation
saccharification
uracil auxotroph
construction and expression
biotechnology
biological engineering
分类号
TQ812 [化学工程]
下载PDF
职称材料
题名
黑曲霉纤维二糖酶基因的克隆及其在里氏木霉中的表达
被引量：
15
2
作者
王冰冰
夏黎明
杜风光
机构
浙江大学化学工程与生物工程学系
上海天之冠可再生能源有限公司
出处
《化工学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2011年第2期452-457,共6页
基金
国家高技术研究发展计划项目(2007AA05Z401)
国家科技支撑计划项目(2007BAD66B02)
浙江省自然科学基金重大资助项目(Z407010)~~
文摘
引言里氏木霉（Trichoderma reesei）是目前常用的纤维素酶生产菌种,其分泌的纤维素酶是一个多组分的复合体系,主要包括5种内切型-β-葡聚糖酶（endo-β-glucanase,EG,EC3.2.1.4）,
关键词
纤维二糖酶
黑曲霉
里氏木霉
纤维素酶
胞外分泌
Keywords
cellobiase
Aspergillus niger
Trichoderma reesei
cellulase
extracellular secretion
分类号
TQ812 [化学工程]
下载PDF
职称材料
题名
酿酒酵母产D-乳酸重组菌的构建与发酵
被引量：
3
3
作者
汪兆峰
石贵阳
张梁
机构
江南大学工业生物技术教育部重点实验室粮食发酵工艺与技术国家工程实验室
出处
《生物加工过程》
CAS
2015年第6期6-12,共7页
基金
国家高技术研究发展计划(863计划)(2011AA02A205
2012AA021201)
教育部新世纪优秀人才支持计划(NCET-11-0665)
文摘
采用基因工程方法对酿酒酵母进行代谢改造,使酵母产生乳酸代谢途径。将来源于L.mesenteroides和E.coli的D-乳酸脱氢酶基因,分别插入带有G418抗性的酵母穿梭质粒p YX212-kan MX上,电转化酵母,得到2株生产D-乳酸的酿酒酵母重组菌S.cerevisiae WE1510和S.cerevisiae WB1186。进一步摇瓶发酵试验表明:重组菌S.cerevisiae WB1186在YEPD培养基、20 g/L糖、p H 5的条件下生长条件最好,并具有更好的产乳酸能力。经3 L发酵罐条件下验证,S.cerevisiae WB1186分批发酵96 h,最终乳酸积累量达到18.0 g/L;发酵条件为培养基YEPD,接种量10%,溶解氧(DO)30%,转速150 r/min,初始葡萄糖质量浓度10 g/L,控制pH 5.0,通气量3 L/min,OD600最大值转为厌氧发酵。
关键词
D-乳酸
D-乳酸脱氢酶
LEUCONOSTOC
mesenteroides
酿酒酵母
代谢改造
Keywords
D-lactic acid
DLDH
Leuconostoc mesenteroides
Saccharomyces cerevisiae
metabolically engineered
分类号
TQ812 [化学工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
里氏木霉QM9414尿嘧啶缺陷型转化体系改进和β-葡萄糖苷酶的过量表达
钟立霞
钱远超
戴美学
钟耀华
《化工学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2016
1
下载PDF
职称材料
2
黑曲霉纤维二糖酶基因的克隆及其在里氏木霉中的表达
王冰冰
夏黎明
杜风光
《化工学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2011
15
下载PDF
职称材料
3
酿酒酵母产D-乳酸重组菌的构建与发酵
汪兆峰
石贵阳
张梁
《生物加工过程》
CAS
2015
3
下载PDF
职称材料
已选择
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