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猪带绦虫丝氨酸蛋白酶抑制分子Ts-serpin-2对人THP-1细胞炎性细胞因子的表达影响 被引量：1
1
作者 毕研丽 刘仲藜 +3 位作者 郭爱疆 张少华 王帅 才学鹏 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第1期16-25,共10页
为了深入研究猪带绦虫丝氨酸蛋白酶抑制分子(Ts-serpin-2)对THP-1细胞炎性细胞因子分泌的调节作用,本实验通过RTPCR从猪带绦虫成虫扩增获得Ts-serpin-2(TsM_000807300)的编码序列CDS,利用毕赤酵母表达Ts-serpin-2重组蛋白。利用发色底... 为了深入研究猪带绦虫丝氨酸蛋白酶抑制分子(Ts-serpin-2)对THP-1细胞炎性细胞因子分泌的调节作用,本实验通过RTPCR从猪带绦虫成虫扩增获得Ts-serpin-2(TsM_000807300)的编码序列CDS,利用毕赤酵母表达Ts-serpin-2重组蛋白。利用发色底物特异性反应检测Ts-serpin-2蛋白对猪胰蛋白酶、胰弹性蛋白酶、牛α-糜蛋白酶、猪胃蛋白酶、木瓜酶、凝血酶和组织蛋白酶G的抑制效果。重组蛋白Ts-serpin-2处理THP-1细胞24 h,应用qRT-PCR和ELISA方法检测各炎性细胞因子差异表达水平。结果显示,真核酵母表达的重组蛋白Ts-serpin-2分子量约为48 kDa,具有蛋白酶抑制活性,对牛α-糜蛋白酶、猪胰弹性蛋白酶及猪胰蛋白酶的活性均有明显的抑制作用。重组蛋白Ts-serpin-2可抑制LPS活化的THP-1细胞促炎性细胞因子IL-1β、IL-6、IL-12α、IFN-γ和iNOS2 mRNA的转录水平,促进IL-4刺激的THP-1细胞抗炎性细胞因子IL-10的表达。ELISA结果显示,Ts-serpin-2能够抑制巨噬细胞分泌致炎因子TNF-α、IL-6和IFN-γ,刺激IL-10的分泌,与qRT-PCR检测结果基本一致。上述研究结果表明猪带绦虫Ts-serpin-2可通过调节宿主巨噬细胞分泌的炎性因子影响虫体入侵过程中宿主的免疫应答。 展开更多
关键词 猪带绦虫 丝氨酸蛋白酶抑制分子 真核表达 THP-1细胞 炎性细胞因子
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犬多头带绦虫感染情况调查 被引量：2
2
作者 许正林 李福寿 《青海畜牧兽医杂志》 2009年第3期28-28,共1页
采用氢溴酸槟榔碱下泻法对天峻地区的犬进行了多头带绦虫感染情况调查。共检查94只犬,检出阳性犬6只,感染率为6.38%,检出虫体88条,平均感染强度14.67条。
关键词 犬 多头带绦虫 感染
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三种鸡瑞利绦虫形态结构差异比较 被引量：1
3
作者 郭海宁 肖永鸿 +3 位作者 黄恩福 黄美峰 王冷眉 吴家斌 《江西畜牧兽医杂志》 2017年第6期23-25,共3页
用挑虫针挑取未经染色的虫体,摊平虫体于载玻片上,测量虫体的长和宽;针对虫体大小,头节、吸盘形态,顶突形态、有无小钩,颈节长短粗细,比较三种鸡瑞利绦虫外部形态;制备脱水、染色、脱色、透明液,胭脂红染色三种瑞利绦虫的成节及孕节标本... 用挑虫针挑取未经染色的虫体,摊平虫体于载玻片上,测量虫体的长和宽;针对虫体大小,头节、吸盘形态,顶突形态、有无小钩,颈节长短粗细,比较三种鸡瑞利绦虫外部形态;制备脱水、染色、脱色、透明液,胭脂红染色三种瑞利绦虫的成节及孕节标本,比较三种鸡瑞利绦虫的内部结构。结果表明,从外形及内部结构来看,棘钩、四角瑞利绦虫间虽有差异,但差异不大;有轮瑞利绦虫较为特殊些。 展开更多
关键词 瑞利绦虫 形态结构 差异
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细粒棘球绦虫在非洲的流行现状
4
作者 刘有玉 闫鸿斌 《兽医导刊》 2016年第5期24-26,共3页
棘球蚴病俗称包虫病（hydatidosis; hydatid disease）,是由棘球属绦虫的幼虫——棘球蚴（hydatid cyst）寄生于人和动物的肝、肺等组织器官而引起的一类重要的人兽共患寄生虫病,广泛分布于全球以牧业生产为主的地区。细粒棘球绦虫呈全... 棘球蚴病俗称包虫病（hydatidosis; hydatid disease）,是由棘球属绦虫的幼虫——棘球蚴（hydatid cyst）寄生于人和动物的肝、肺等组织器官而引起的一类重要的人兽共患寄生虫病,广泛分布于全球以牧业生产为主的地区。细粒棘球绦虫呈全球性分布,几乎在所有大洲都有病例报道,对人体健康和畜牧业发展产生很大的危害,仅中亚地区就有2.7亿人遭受本病的威胁,估计全球患者达300万之多, 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 棘球蚴病 棘球属绦虫 畜牧业发展 全球性分布 动物宿主 人体健康 新增病例 流行率 流行病学调查
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亚洲带绦虫基因组密码子使用偏性分析 被引量：3
5
作者 杨兴 刘西 +2 位作者 盛梦诗 刘秋艳 姜丹丹 《动物医学进展》 北大核心 2021年第7期57-63,共7页
为了解亚洲带绦虫基因组的密码子用法及影响密码子使用模式的主要因素,以亚洲带绦虫基因组注释的13323条CDS序列为数据来源,利用CodonW软件对其密码子碱基组成、有效密码子数(ENC)和同义密码子相对使用频率(RSCU)各项指标进行统计分析... 为了解亚洲带绦虫基因组的密码子用法及影响密码子使用模式的主要因素,以亚洲带绦虫基因组注释的13323条CDS序列为数据来源,利用CodonW软件对其密码子碱基组成、有效密码子数(ENC)和同义密码子相对使用频率(RSCU)各项指标进行统计分析。结果显示:①从亚洲带绦虫基因组数据中筛选获得11203条CDS序列,平均长度为1386 bp,GC含量在25.9%~74.1%之间,变化范围较大;②同义密码子第3位出现G或C的频率为50.11%,比出现A或T的频率高;③有效密码子数介于20.64~61.00,平均为51.06;④ENC-plot分析、中性分析、PR2分析及相关性分析结果表明,影响亚洲带绦虫密码子使用偏性的因素除了突变和选择两种力量外,还包括GC含量、基因长度、蛋白质的亲水性和芳香度;⑤最终共有25个密码子被确定为最优密码子,绝大部分以G或C结尾。结果说明,亚洲带绦虫基因组中大部分基因密码子使用偏性较弱,仅少部分基因具有较强偏性,偏好使用以G或C结尾的密码子,且这一现象是由突变、选择、碱基组成等多重因素共同作用形成的,该结果为进一步研究该物种遗传背景和分子进化提供了一定的科学依据。 展开更多
关键词 亚洲带绦虫 基因组 密码子使用偏性 最优密码子
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细粒棘球绦虫三磷酸甘油醛脱氢酶基因的克隆、表达及其分子特征的生物信息学分析 被引量：3
6
作者 王家海 王凝 +5 位作者 胡丹丹 钟秀琴 宋星桔 古小彬 汪涛 杨光友 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1629-1637,共9页
三磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)是糖酵解途径中的关键酶,现已发现该酶可作为一些寄生虫的疫苗候选分子和药物靶标。然而,有关绦虫三磷酸甘油醛脱氢酶的研究报道较少。为探究细粒棘球绦虫GAPDH(EgGAPDH)的分子特征与应用价值,克隆细粒棘球绦... 三磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)是糖酵解途径中的关键酶,现已发现该酶可作为一些寄生虫的疫苗候选分子和药物靶标。然而,有关绦虫三磷酸甘油醛脱氢酶的研究报道较少。为探究细粒棘球绦虫GAPDH(EgGAPDH)的分子特征与应用价值,克隆细粒棘球绦虫的GAPDH基因,并以生物信息学方法对其进行系统的分析。结果显示:EgGAPDH基因全长1 011bp,编码336个氨基酸。EgGAPDH是由4个结构相同的单体蛋白(O、P、Q、R)组成的一个同源四聚体,每个单体蛋白质含有3个活性中心,即NAD+绑定区域(aa 4-151和aa 315-336)、催化结合区域(aa 156-314)和一个酶活性位点(aa 149-156)。通过对EgGAPDH的氨基酸序列的抗原表位预测得到了16个B细胞抗原表位和9个T细胞结合位点;Western blot显示原核表达的重组EgGAPDH能与感染细粒棘球蚴的小鼠血清发生特异性结合;以纯化的重组EgGAPDH蛋白为抗原通过ELISA法检测17份细粒棘球蚴小鼠阳性血清,阳性检出率为100%。试验结果表明:成功克隆并表达细粒棘球绦虫的EgGAPDH基因,EgGAPDH蛋白具有3个酶功能区域和多个免疫结合位点,Western blot和ELISA结果显示,该蛋白质可能具有作为抗细粒棘球蚴的药物靶标和疫苗候选分子的潜力。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH) 分子特征
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细粒棘球蚴SmadA基因的克隆及其功能的初步鉴定 被引量：3
7
作者 李静 张传山 +4 位作者 吕国栋 王俊华 魏绪法 林仁勇 剡根强 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1756-1762,共7页
本研究旨在克隆细粒棘球蚴Smad蛋白家族基因EgSmadA,鉴定其结构及表达部位,并建立酵母双杂交体系。利用生物信息学方法,克隆及分析EgSmadA基因的DNA全长序列,采用免疫组化技术鉴定EgSmadA蛋白的表达及分布,并构建该基因酵母双杂交载体... 本研究旨在克隆细粒棘球蚴Smad蛋白家族基因EgSmadA,鉴定其结构及表达部位,并建立酵母双杂交体系。利用生物信息学方法,克隆及分析EgSmadA基因的DNA全长序列,采用免疫组化技术鉴定EgSmadA蛋白的表达及分布,并构建该基因酵母双杂交载体。结果表明,成功扩增出EgSmadA基因组序列全长4 069bp,包含4个外显子和3个内含子,开放阅读框为957bp,编码318个氨基酸,该蛋白C端含有Smad蛋白家族进化高度保守的典型结构域MH2(Mad homology),并成功构建该基因及其MH2结构域的酵母双杂交载体。免疫组化定位该蛋白主要表达于原头蚴被膜及囊泡生发层。研究结果为进一步研究EgSmadA在细粒棘球蚴生长发育中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 细粒棘球蚴 SmadA 基因克隆 酵母双杂交
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多头带绦虫dUTPase基因的原核表达、组织定位及酶学活性分析
8
作者 黄兴 徐璟 +6 位作者 王宇 杨应东 万洁 郭承 古小彬 谢跃 杨光友 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期2374-2382,共9页
探讨多头带绦虫脱氧尿苷三磷酸酶(Tm-dUTPase)的基因特征,并初步分析Tm-dUTPase的酶学活性。通过原核表达,得到重组Tm-dUTPase蛋白,并对其进行Western blot分析、免疫荧光定位及酶学活性分析。序列分析结果显示,Tm-dUTPase基因ORF框为44... 探讨多头带绦虫脱氧尿苷三磷酸酶(Tm-dUTPase)的基因特征,并初步分析Tm-dUTPase的酶学活性。通过原核表达,得到重组Tm-dUTPase蛋白,并对其进行Western blot分析、免疫荧光定位及酶学活性分析。序列分析结果显示,Tm-dUTPase基因ORF框为447bp,编码148个氨基酸,预测的蛋白质分子大小为16.39ku,等电点为6.263;与猪囊尾蚴和豆状囊尾蚴dUTPase基因的氨基酸序列相似性分别为97%和91%。原核表达的TmdUTPase为可溶性蛋白,纯化后的蛋白质质量浓度为0.907mg·mL^(-1),Western blot分析显示,该蛋白质能够被山羊脑多头蚴阳性血清所识别,具有较强的反应原性。免疫荧光定位显示Tm-dUTPase主要分布于多头带绦虫成虫的体内实质区,同时广泛分布于多头带绦虫幼虫(脑多头蚴)的头节和包囊囊壁外层。酶学活性试验测得重组Tm-dUTPase的比活力为986.29U·mg^(-1),EDTA能够抑制Tm-dUTPase活性,而金属离子Mg^(2+)、Zn^(2+)、Cu^(2+)能够增强Tm-dUTPase活性。上述结果为进一步研究Tm-dUTPase基因的生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 多头带绦虫 dUTPase基因 原核表达 酶学活性分析 免疫荧光定位
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猪带绦虫丝氨酸蛋白酶抑制剂Ts-serpin-1对人巨噬细胞THP-1的免疫调节功能研究 被引量：1
9
作者 毕研丽 刘仲藜 +3 位作者 郭爱疆 张少华 王帅 才学鹏 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期161-168,共8页
主要研究猪带绦虫丝氨酸蛋白酶抑制剂Ts-serpin-1(WormBase:TsM_000065700)对宿主THP-1细胞的免疫调节作用。通过设计特异性引物和RT-PCR扩增技术,获得Ts-serpin-1编码序列,用qRT-PCR分析Ts-serpin-1基因在猪带绦虫成虫和中绦期幼虫的... 主要研究猪带绦虫丝氨酸蛋白酶抑制剂Ts-serpin-1(WormBase:TsM_000065700)对宿主THP-1细胞的免疫调节作用。通过设计特异性引物和RT-PCR扩增技术,获得Ts-serpin-1编码序列,用qRT-PCR分析Ts-serpin-1基因在猪带绦虫成虫和中绦期幼虫的表达情况;构建pCold-Ts-serpin-1原核表达载体,诱导表达纯化重组蛋白Ts-serpin-1;用重组蛋白Ts-serpin-1处理THP-1细胞,采用qRT-PCR和ELISA方法检测Ts-serpin-1处理THP-1细胞后,各炎性细胞因子的变化情况。结果显示:获得的Ts-serpin-1目的基因长度为1149 bp,编码382个氨基酸,含有Serpin家族特有的反应中心环。Ts-serpin-1基因在猪带绦虫成虫和中绦期幼虫均表达,且成虫表达量显著高于幼虫。重组蛋白Ts-serpin-1的分子质量约为43 ku,可抑制THP-1细胞促炎性细胞因子IL-6、IL-1β、IL-12、TNF-α、IFN-γ和iNOS2的表达,促进抗炎性细胞因子IL-10和TGF-β的分泌表达。以上结果提示,Ts-serpin-1在寄生虫-宿主互作过程中可能发挥重要作用。 展开更多
关键词 猪带绦虫 丝氨酸蛋白酶抑制剂 细胞因子 免疫调节
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湖南省山羊脑多头蚴的线粒体nad1和nad4基因的序列测定及种系发育分析 被引量：6
10
作者 何德肆 徐平源 彭运潮 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1763-1767,共5页
本研究旨在阐明脑多头蚴湖南分离株线粒体烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)脱氢酶亚单位1基因(nad1)部分序列(pnad1)和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)脱氢酶亚单位4基因(nad4)部分序列(pnad4)的遗传变异情况,并用pnad1和pnad4序列重构脑多头蚴... 本研究旨在阐明脑多头蚴湖南分离株线粒体烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)脱氢酶亚单位1基因(nad1)部分序列(pnad1)和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)脱氢酶亚单位4基因(nad4)部分序列(pnad4)的遗传变异情况,并用pnad1和pnad4序列重构脑多头蚴与其它带科绦虫的种群遗传关系。利用聚合酶链反应(PCR)扩增脑多头蚴的pnad1和pnad4,应用ClustalX 1.81程序对序列进行比对,再用Phylip3.67程序MP法和Mage4.0程序NJ法绘制种系发育树,并用Puzzle5.2程序构建最大似然树,同时利用DNAstar5.0中的Megalign程序进行同源性分析。结果显示所获得的pnad1和pnad4序列长度分别均为666和887bp,湖南分离株与已知多头带绦虫位于同一分枝。由于脑多头蚴pnad1和pnad4序列种内相对保守,种间差异较大,故均可作为种间遗传变异研究的标记,从而为脑多头蚴的分子流行病学和其相关疾病的诊断奠定基础。 展开更多
关键词 多头带绦虫 线粒体DNA nad1基因 nad4基因 种系发育关系
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灌南县域肉羊源人兽共患隐孢子虫的流行病学调查及其类型分析 被引量：1
11
作者 朱刚 孙爱玲 +3 位作者 陈飞飞 朴聪雁 薄学军 徐云 《畜牧兽医杂志》 2024年第2期76-79,共4页
以隐孢子虫(Cryptosporidium spp.)18S rRNA为靶基因,通过巢氏PCR检测发现在采集的101份新鲜粪便样品中18份样本为阳性。不同地区羊场的隐孢子虫感染率分别为:李集镇36%(18/50),新安镇0%(0/30)、堆沟港镇0%(0/21)未检出隐孢子虫。但通过... 以隐孢子虫(Cryptosporidium spp.)18S rRNA为靶基因,通过巢氏PCR检测发现在采集的101份新鲜粪便样品中18份样本为阳性。不同地区羊场的隐孢子虫感染率分别为:李集镇36%(18/50),新安镇0%(0/30)、堆沟港镇0%(0/21)未检出隐孢子虫。但通过对4羊场的分析发现,有2个羊场(50%)为隐孢子虫感染阳性,且不同的羊场感染率差异显著,因此单纯的以地区来评价隐孢子虫的感染率,是值得商榷的。山羊隐孢子虫的感染率为33.3%,湖羊隐孢子虫的感染率为2%。2~6月龄的育肥羊隐孢子虫的感染率为36%,6~10月龄的育成羊(0%)。对检测为阳性的样品进行了隐孢子虫18S rRNA基因片段序列分析,发现18个样品全部为肖氏隐孢子虫(Cryptosporidium xiaoi),不存在泛在隐孢子虫(Cryptosporidium ubiquitum)。在检测隐孢子虫感染阳性的1个山羊场和1个羊湖羊场均存在肖氏隐孢子虫感染,不存在泛在隐孢子虫,更未发现肖氏隐孢子虫和泛在隐孢子虫的混合感染。目前的数据提示肖氏隐孢子虫对2~6月龄山羊(33.3%)和湖羊(2%)具有更高的感染率。这18份样品来源于2个规模羊场,属于李集镇两个羊场。 展开更多
关键词 肉羊 隐孢子虫 感染 检测
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驱绦灭囊的药物治疗研究与应用
12
作者 常相枕 李世财 《中国兽医寄生虫病》 2003年第1期54-56,共3页
　对人与猪的驱绦灭囊工作,是一项涉及面广、工作量大、时间长、根治难度大的科技工程。因此急需探索一种科学、实用、简单易行、经济有效的药物治疗方法,为此,进行本项研究。
关键词 驱绦灭囊 药物治疗 研究 应用 绦虫病 猪囊虫病
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去氢骆驼蓬碱衍生物H-2-104对细粒棘球蚴活性及小鼠T淋巴细胞的影响
13
作者 卡地尔亚·库尔班 段永只 +3 位作者 卡力比夏提·艾木拉江 何荣东 高惠静 滕亮 《中国兽医科学》 CSCD 北大核心 2023年第12期1600-1608,共9页
探讨去氢骆驼蓬碱衍生物H-2-104对细粒棘球蚴活性及小鼠T淋巴细胞的影响。用不同浓度梯度的H-2-104干预细粒棘球蚴,伊红染色法检测细粒棘球蚴活力,扫描电镜观察超微结构变化情况;采用MTT法确定H-2-104对小鼠T淋巴细胞的安全浓度;流式细... 探讨去氢骆驼蓬碱衍生物H-2-104对细粒棘球蚴活性及小鼠T淋巴细胞的影响。用不同浓度梯度的H-2-104干预细粒棘球蚴,伊红染色法检测细粒棘球蚴活力,扫描电镜观察超微结构变化情况;采用MTT法确定H-2-104对小鼠T淋巴细胞的安全浓度;流式细胞术检测H-2-104对T淋巴细胞凋亡及细胞亚群分化的影响;ELISA法检测H-2-104对T淋巴细胞及细粒棘球蚴培养液上清中IL-9表达水平的影响。伊红染色结果显示,H-2-104干预3 d后细粒棘球蚴存活率为0;扫描电镜结果显示,药物组细粒棘球蚴超微结构被破坏,H-2-104组破坏程度强于阳性药组;流式细胞术结果显示,高浓度H-2-104干预小鼠T淋巴细胞后总凋亡率为30.25%,显著高于空白组(P<0.05),且高浓度的H-2-104能够促进CD4^(+)T细胞的分化;ELISA检测结果显示,与空白组相比,H-2-104组能够显著下调T淋巴细胞及细粒棘球蚴培养液上清中IL-9的表达(P<0.05)。结果表明,H-2-104能够促进小鼠T淋巴细胞凋亡、促进CD4^(+)T细胞分化的趋势,降低T淋巴细胞及细粒棘球蚴培养液上清中IL-9的表达水平,从而增强和促进宿主的免疫杀伤作用,抑制棘球蚴在宿主体内生存发育。 展开更多
关键词 骆驼蓬 H-2-104 细粒棘球蚴 T淋巴细胞 免疫
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人工感染细粒棘球蚴犬粪中蛋白质组的分析 被引量：1
14
作者 李双男 闫鸿斌 +7 位作者 李立 姚刚 田文俊 李文卉 张念章 吴燕涛 付宝权 贾万忠 《动物医学进展》 北大核心 2018年第1期7-15,共9页
收集感染细粒棘绦虫原头蚴后不同时间的犬粪,分离和提取蛋白质,对蛋白质在胶内酶切后,依次进行质谱分析、生物信息学和蛋白质功能富集分析。结果发现,在犬粪中共鉴定出蛋白质3 242个,其中宿主(犬)蛋白有3 107个、细粒棘球绦虫蛋白有135... 收集感染细粒棘绦虫原头蚴后不同时间的犬粪,分离和提取蛋白质,对蛋白质在胶内酶切后,依次进行质谱分析、生物信息学和蛋白质功能富集分析。结果发现,在犬粪中共鉴定出蛋白质3 242个,其中宿主(犬)蛋白有3 107个、细粒棘球绦虫蛋白有135个。蛋白质功能富集结果显示,犬感染细粒棘球绦虫后,寄生虫与宿主相互作用,虫体在不同时间分泌特定蛋白,而蛋白质的分子生物学功能存在一定差异。研究结果对建立粪抗原诊断方法和研究细粒棘球绦虫感染宿主后的代谢途径及其生活机制提供了重要依据。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 犬粪 不同时间 蛋白质组 生物信息学分析
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绦虫催乳素基因cDNA克隆及序列分析 被引量：5
15
作者 陈泽良 刘波 +2 位作者 刘明远 欧阳红生 安铁洙 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期157-159,共3页
根据文献报道的脊椎动物催乳素基因 c DNA序列的保守区 ,设计 1对引物。提取绦虫总 RNA,采用 RT- PCR扩增绦虫催乳素基因 ,琼脂糖凝胶电泳分析 PCR产物 ,将回收产物连接到 p MD- 18T克隆载体 ,对待选克隆进行 PCR和酶切鉴定。阳性克隆... 根据文献报道的脊椎动物催乳素基因 c DNA序列的保守区 ,设计 1对引物。提取绦虫总 RNA,采用 RT- PCR扩增绦虫催乳素基因 ,琼脂糖凝胶电泳分析 PCR产物 ,将回收产物连接到 p MD- 18T克隆载体 ,对待选克隆进行 PCR和酶切鉴定。阳性克隆进行序列测定 ,获得全长 893bp的 c DNA序列 ,共编码 2 2 2个氨基酸 ,其中前 2 2个氨基酸为信号肽 ,成熟蛋白共编码 2 0 0个氨基酸。将测序结果与 Gen Bank中已知序列比较 ,推导氨基酸序列并进行活性位点分析 ,所得序列与脊椎动物催乳素同源性最高 ,含有催乳素的 2个活性区域 ,证明所得到的序列就是催乳素序列。 展开更多
关键词 绦虫 催乳素基因 克隆 序列分析 CDNA
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应用TmAdh3重组蛋白建立绵羊脑多头蚴病间接ELISA诊断方法的研究
16
作者 刘垠鞠 李文卉 +6 位作者 岳龙 张念章 金启旺 秦洪涛 贾万忠 姚强 付宝权 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期1082-1088,共7页
为评价多头带绦虫TmAdh3重组蛋白作为脑多头蚴病诊断抗原的潜力,根据多头带绦虫TmAdh3基因组序列,人工优化合成TmAdh3基因ORF序列并连接至表达载体pGEX-4T-1,转化至大肠杆菌BL21中诱导表达,利用Western-blot分析纯化的重组蛋白的反应原... 为评价多头带绦虫TmAdh3重组蛋白作为脑多头蚴病诊断抗原的潜力,根据多头带绦虫TmAdh3基因组序列,人工优化合成TmAdh3基因ORF序列并连接至表达载体pGEX-4T-1,转化至大肠杆菌BL21中诱导表达,利用Western-blot分析纯化的重组蛋白的反应原性,优化检测条件,建立脑多头蚴病间接ELISA诊断方法并进行评价。结果显示,成功表达了分子质量大小为39.0 ku的重组蛋白rTmAdh3。间接ELISA检测的最适反应条件为:5.00μg/m L重组蛋白rTmAdh3在4℃包被过夜;1∶100稀释血清在37℃孵育30min;1∶10 000稀释的HRP标记的酶标二抗在37℃孵育45 min,底物避光显色10 min。应用建立的方法可检测到人工感染脑多头蚴后第3~8周的绵羊血清;对40份自然感染脑多头蚴的绵羊(剖检确认脑部有包囊)血清的阳性检出率为22.5%(9/40)。与细粒棘球蚴感染绵羊血清和细粒棘球蚴Eg95免疫绵羊血清交叉反应率为5%(4/80)。结果表明,本研究建立的以TmAdh3重组蛋白作为检测抗原的间接ELISA诊断方法可用于绵羊脑多头蚴感染早期的筛选。 展开更多
关键词 多头带绦虫 脑多头蚴病 TmAdh3 间接ELISA
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内毒素脂多糖及氨基胍对体外培养山羊肝细胞脂质过氧化损伤的影响
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作者 胡莲美 余文兰 +2 位作者 李雅枫 李英 唐兆新 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1526-1528,1542,共4页
本试验探讨了内毒素脂多糖(LPS)诱导体外培养肝细胞脂质过氧化损伤机制及氨基胍(AG)对体外培养的肝细胞脂质过氧化的保护作用。随机分为两组:LPS处理组(不同LPS浓度处理);LPS+AG处理组(1mg/L LPS处理的同时加入不同浓度AG),分析了不同... 本试验探讨了内毒素脂多糖(LPS)诱导体外培养肝细胞脂质过氧化损伤机制及氨基胍(AG)对体外培养的肝细胞脂质过氧化的保护作用。随机分为两组:LPS处理组(不同LPS浓度处理);LPS+AG处理组(1mg/L LPS处理的同时加入不同浓度AG),分析了不同处理的山羊肝细胞中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的变化。结果发现LPS处理导致山羊肝细胞MDA含量明显增加和SOD活性降低;LPS处理的同时加入AG能明显降低LPS导致的MDA含量的增加和SOD活性的降低。说明内毒素明显引起肝组织脂质过氧化作用,而合并应用AG则可以明显减轻肝组织脂质过氧化作用,提示AG可拮抗LPS对肝细胞造成的过氧化损伤,对内毒素血症有治疗价值。 展开更多
关键词 山羊肝细胞 脂多糖 氨基胍 脂质过氧化 内毒素血症
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绵羊包虫病的诊断方法和防治措施
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作者 乌冬其木格 《当代畜牧》 2021年第12期93-94,共2页
绵羊包虫病是一种常见的人兽共患寄生虫病,由棘球绦球黝感染引发,严重时会引起宿主死亡。我国拥有许多规模较大的绵羊养殖地,包虫病问题也一直是影响绵羊养殖的大问题。笔者重点介绍绵羊包虫病的诊断方法,以期为预防包虫病提供帮助。
关键词 包虫病 预防 诊断
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羊绦虫蚴病免疫学诊断研究进展 被引量：6
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作者 李文卉 付宝权 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期885-888,共4页
羊绦虫蚴病是以羊为中间宿主、犬为终末宿主的绦虫蚴病,常见的有羊棘球蚴病、羊囊尾蚴病、羊脑多头蚴病、羊细颈囊尾蚴病。这些羊绦虫蚴病免疫学诊断方面如ELISA取得一些进展,但仍然缺乏高敏感性和特异性的诊断抗原,尸体剖检依然是临床... 羊绦虫蚴病是以羊为中间宿主、犬为终末宿主的绦虫蚴病,常见的有羊棘球蚴病、羊囊尾蚴病、羊脑多头蚴病、羊细颈囊尾蚴病。这些羊绦虫蚴病免疫学诊断方面如ELISA取得一些进展,但仍然缺乏高敏感性和特异性的诊断抗原,尸体剖检依然是临床诊断的金标准。 展开更多
关键词 羊 绦虫蚴病 免疫学诊断
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多房棘球绦虫感染的检测方法研究进展
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作者 游杰 李立 +6 位作者 孙继文 詹舒懿 逯文颖 周蜓蜓 殷宏 贾万忠 闫鸿斌 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期946-954,共9页
棘球蚴病是由棘球绦虫的幼虫(中绦期)——棘球蚴引起的一类人兽共患寄生虫病。感染棘球绦虫的终末宿主(犬、狐狸等)是传染源,及时准确检测终末宿主感染状况是防控棘球蚴病的关键环节。本文综述了多房棘球绦虫感染的病原学、分子生物学... 棘球蚴病是由棘球绦虫的幼虫(中绦期)——棘球蚴引起的一类人兽共患寄生虫病。感染棘球绦虫的终末宿主(犬、狐狸等)是传染源,及时准确检测终末宿主感染状况是防控棘球蚴病的关键环节。本文综述了多房棘球绦虫感染的病原学、分子生物学和免疫学检测方法的研究进展,以期为终末宿主多房棘球绦虫感染的检测方法研究和试剂盒研发提供指导。 展开更多
关键词 多房棘球绦虫 犬科动物 粪DNA 粪抗原 分子生物学检测 免疫学诊断
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