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猪流感的诊断及防制 被引量：1
1
作者 何芳 《湖南畜牧兽医》 2005年第5期17-18,共2页
猪流感是由正粘病毒科猪流感病毒(SIV)引起的一种急性、高度接触传染性的猪呼吸道疾病.不同年龄、性别和品种的猪对该病均易感染,传染源是病猪和带毒猪.多发于晚秋、寒冷的冬季及早春,呈地方性流行.该病发病率高,潜伏期2～7天,临床以突... 猪流感是由正粘病毒科猪流感病毒(SIV)引起的一种急性、高度接触传染性的猪呼吸道疾病.不同年龄、性别和品种的猪对该病均易感染,传染源是病猪和带毒猪.多发于晚秋、寒冷的冬季及早春,呈地方性流行.该病发病率高,潜伏期2～7天,临床以突发、咳嗽、呼吸困难、发热、衰竭、迅速康复为特征.病理变化主要表现为病毒性肺炎及其它呼吸器官的炎症变化.病猪虽可迅速康复,引起的死亡率也很低,但会导致猪只增重受阻,肉料比降低,生产性能下降,对养猪业造成极大的危害. 展开更多
关键词 猪流感病毒 防制 诊断 正粘病毒科 呼吸道疾病 接触传染性 呼吸困难 呼吸器官 病理变化
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多国科学家首次在韩国发现新的H3N1猪流感病毒
2
《今日养猪业》 2007年第1期55-55,共1页
来自美国和其他几个国家的研究人员首次在韩国的家猪体内分离到了H3N1猪流感病毒。他们的结果发表在2006年11月的《Journal of Clinical Microbiology》杂志上。H3N1是一种高传染性的呼吸道病原，H3N1流感A病毒是2004年在美国的猪中首... 来自美国和其他几个国家的研究人员首次在韩国的家猪体内分离到了H3N1猪流感病毒。他们的结果发表在2006年11月的《Journal of Clinical Microbiology》杂志上。H3N1是一种高传染性的呼吸道病原，H3N1流感A病毒是2004年在美国的猪中首次鉴定出的新遗传类型流感病毒。研究人员已经在鸟类和哺乳动物（包括人类和猪）中发现过这种病毒，但是通常这种病毒在鸟类和人类之间不会直接传播。猪被认为对人来源和鸟来源的这种病毒都敏感的动物，因此被认为是病毒的“混合器”，并最终有可能导致人畜共患疾病和疫情大爆发。在2006年的3月和4月间，研究人员在韩国的两个养猪场的患呼吸道疾病的猪中分离到了H3N1流感A病毒。 展开更多
关键词 猪流感病毒 韩国 科学家 呼吸道疾病 研究人员 人畜共患疾病 哺乳动物 遗传类型
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新城疫特异性转移因子的免疫作用研究 被引量：2
3
作者 王进轶 刘双翼 +2 位作者 刘合义 王红 侯喜林 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第5期45-48,共4页
将新城疫特异性转移因子（Newcastle disease-specific transfer factor，ND-STF）1mL单独或与La Sota弱毒疫苗一起，分别口服和注射试验鸡，然后用MTT法检测各组鸡外周血淋巴细胞转化率；用La Sota疫苗免疫鸡，同时口服或注射0．1、0．... 将新城疫特异性转移因子（Newcastle disease-specific transfer factor，ND-STF）1mL单独或与La Sota弱毒疫苗一起，分别口服和注射试验鸡，然后用MTT法检测各组鸡外周血淋巴细胞转化率；用La Sota疫苗免疫鸡，同时口服或注射0．1、0．5、1mL 3种不同剂量的ND-STF，然后检测血清中新城疫病毒HI抗体效价。在使用ND-STF后第5天，试验组鸡的淋巴细胞转化率达到高峰，刺激指数（stimulation index，SI）可达1．68-1．71，对照组的SI值为1．24～1．34，试验组与对照组差异显著（P〈0．05），各试验组之间差异不显著（P〉0．05）；鸡的HI抗体效价（log2 X）在免疫后第28天达到高峰，口服或注射ND-STF 3种不同剂量组HI抗体效价分别为10、9．25、10和6．3、9、8．3，使用ND-STF各组与未使用组相比较差异显著（P〈0．05），且口服的效果更好。表明ND-STF能够增强鸡的细胞免疫和体液免疫能力。 展开更多
关键词 新城疫 特异性转移因子 淋巴细胞转化 血凝抑制抗体效价
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小反刍兽疫的研究进展 被引量：3
4
作者 杨惠超 黄文峰 《畜牧与饲料科学》 2014年第7期139-142,共4页
小反刍兽疫是严重威胁羊生产的一种重要疫病。主要从小反刍兽疫的流行状况、病原学、流行病学、临床症状、病理变化、诊断和免疫方面对其进行论述,以期为有效防控该病提供参考。
关键词 小反刍兽疫 病原 诊断 免疫
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赤羽病病毒核衣壳蛋白原核表达及单克隆抗体制备 被引量：5
5
作者 魏方 陈冬杰 +1 位作者 林祥梅 吴绍强 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期1398-1403,共6页
为制备赤羽病病毒(Akabane virus,AKAV)核衣壳(N)蛋白单克隆抗体,本研究构建了pET-28aAKAV-N重组质粒,并将其转化至BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达和镍柱纯化获得重组N蛋白。用重组N蛋白4次免疫小鼠后,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞... 为制备赤羽病病毒(Akabane virus,AKAV)核衣壳(N)蛋白单克隆抗体,本研究构建了pET-28aAKAV-N重组质粒,并将其转化至BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达和镍柱纯化获得重组N蛋白。用重组N蛋白4次免疫小鼠后,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合获得杂交瘤细胞,利用亚克隆技术和ELISA方法筛选出4株阳性细胞株,分别命名为2D3、5F10、1F4和5D4,并对其进行特异性分析。免疫印迹(Western-blot)结果显示,2D3仅识别AKAV-N蛋白,5F10、1F4和5D4均能够同时识别AKAV-N和施马伦贝格病毒(Schmallenberg virus,SBV)N蛋白;间接免疫荧光(IFA)结果显示,2D3、1F4和5D4与AKAV感染的BHK21细胞呈阳性反应,而5F10为阴性。亚型检测结果显示,2D3抗体为IgG2a/к型,5F10、5D4抗体为IgG1/к型,1F4抗体为IgG1/λ型。综上所述,本研究获得的单克隆抗体能够为AKAV-N蛋白的相关研究提供支持。 展开更多
关键词 赤羽病病毒 N蛋白 原核表达 单克隆抗体 鉴定
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H1N1亚型猪流感病毒A/Swine/GD/2/12基因特征分析
6
作者 吕艳丽 林文 +3 位作者 黄良宗 刘明杰 罗满林 顾万军 《畜牧与兽医》 北大核心 2014年第1期1-8,共8页
2012年从广东省某猪场的疑似流感猪群采集鼻拭子样品,接种鸡胚并收集尿囊液,通过血凝、血凝抑制和RT-PCR,鉴定出1株H1N1亚型猪流感病毒,命名为A/Swine/GD/2/12。RT-PCR扩增得到全基因8个片段,与GenBank收录的参考毒株比对并构建进化树,... 2012年从广东省某猪场的疑似流感猪群采集鼻拭子样品,接种鸡胚并收集尿囊液,通过血凝、血凝抑制和RT-PCR,鉴定出1株H1N1亚型猪流感病毒,命名为A/Swine/GD/2/12。RT-PCR扩增得到全基因8个片段,与GenBank收录的参考毒株比对并构建进化树,发现本毒株可能是H1N1亚型重组株,其8个片段与我国猪源和北美地区1985—1992年间的猪源、禽源(A/turkey/IA/1992)和人源(A/Maryland/12/1991)流感毒株在同一个大分支上,其中与我国猪源参考株同源性在95.8%以上,与北美地区的H1N1参考株同源性在94%以上。HA受体位点分析表明,本毒株既具备结合Saα2,6Gal型人类流感病毒SA受体的特点,也有结合Saα2,3Gal型禽类流感病毒SA受体的可能。提示本毒株可能是由北美地区猪源、禽源和人源的H1N1亚型流感病毒重排形成的。HA蛋白裂解位点分析、NS和PB2蛋白位点分析表明,本毒株具备低致病性毒株的特点。小鼠致病性试验进一步证实本毒株能够引起小鼠运动减少、食欲欠佳、体重减轻等表现,但不会引起咳嗽和死亡等严重反应。 展开更多
关键词 猪流感病毒 H1N1亚型 全基因组序列 致病性分析
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禽流感病毒检测技术研究 被引量：2
7
作者 王素华 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第6期145-147,共3页
禽流感病毒的检测方法主要分为血清学检测和分子生物学检测两大类。血清学检测方法包括琼脂凝胶扩散试验(AGP)、血凝抑制试验(HI)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、神经氨酸酶抑制试验(NIT)和病毒中和试验(VN)。随着分子生物学的发展,近两年... 禽流感病毒的检测方法主要分为血清学检测和分子生物学检测两大类。血清学检测方法包括琼脂凝胶扩散试验(AGP)、血凝抑制试验(HI)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、神经氨酸酶抑制试验(NIT)和病毒中和试验(VN)。随着分子生物学的发展,近两年国内外学者更加注重对禽流感病毒的分子生物学检测方法的研究。分子生物学检测方法包括RT-PCR、多重RT-PCR、多种改进的RT-PCR和基因探针技术。 展开更多
关键词 禽流感病毒 检测 血清学 分子生物学
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鹅副粘病毒F基因的克隆测序及核苷酸序列分析 被引量：25
8
作者 赵文华 朱建波 +4 位作者 姚龙涛 宋建领 信爱国 何水林 张念祖 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期544-546,共3页
以鹅副粘病毒 (GPV) SF0 2株的基因组 RNA为模板 ,通过 RT- PCR的方法扩增出 F基因片段 ,然后将其克隆至 T载体中。经 PCR鉴定后 ,对阳性克隆进行测序。测序后拼接得出 F基因的全序列。与 Gen Bank下载的 9株参考毒株比较 F基因编码区... 以鹅副粘病毒 (GPV) SF0 2株的基因组 RNA为模板 ,通过 RT- PCR的方法扩增出 F基因片段 ,然后将其克隆至 T载体中。经 PCR鉴定后 ,对阳性克隆进行测序。测序后拼接得出 F基因的全序列。与 Gen Bank下载的 9株参考毒株比较 F基因编码区全核苷酸序列 ,发现所测 GPV- SF0 2毒株与参考毒株 L Z- NDV核苷酸序列同源性为 96 %,与F48E9同源性为 92 .5 %,与 L a Sota为 88%。 展开更多
关键词 核苷酸序列分析 鹅副粘病毒 F基因 基因克隆
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华东地区6株不同年份的H9N2亚型禽流感病毒的遗传进化分析 被引量：4
9
作者 裴宇茹 王晓泉 +4 位作者 刘晓文 胡顺林 顾敏 胡娇 刘秀梵 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2021年第5期83-91,共9页
为了解H9N2亚型禽流感病毒(AIV)遗传演化趋势,本研究选用6株分布于2011-2019年华东地区H9N2分离株来进行基因组遗传进化分析。6株H9N2分离株均属于S基因型、低致病性,但毒株之间核苷酸和氨基酸同源性低。系统发生树上不同年份毒株各基... 为了解H9N2亚型禽流感病毒(AIV)遗传演化趋势,本研究选用6株分布于2011-2019年华东地区H9N2分离株来进行基因组遗传进化分析。6株H9N2分离株均属于S基因型、低致病性,但毒株之间核苷酸和氨基酸同源性低。系统发生树上不同年份毒株各基因片段虽起源相同,但分布于不同分支。关键氨基酸位点分析表明,6株毒株均具有优先结合哺乳动物α-2、6 Gal受体的关键氨基酸位点:HA 226L、155T;内部基因片段出现多个哺乳动物适应性的关键位点变异,如PB2蛋白的I292V和A588V、PA蛋白的K356R、S409N等;M2蛋白均存在对金刚烷抗性的S31N突变。综上,H9N2亚型AIV近10年基因组相对稳定,但不同蛋白均出现一致的位点变异,使其对哺乳动物宿主适应性增强,提示我们应进一步加强对H9N2亚型AIV的监测。 展开更多
关键词 禽流感病毒 H9N2亚型 遗传进化
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Clade2.3.4 H5亚型禽流感疫苗变异候选株的构建 被引量：3
10
作者 王萱 李群辉 +4 位作者 孙中涛 高照 刘佳佳 王晓泉 刘晓文 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1008-1013,共6页
为应对Clade2.3.4H5亚型禽流感病毒持续发生的抗原性改变及其引发的潜在的地方性流行,需要根据流行监测的抗原分析结果制备疫苗候选株。采用反向遗传操作系统,以A/Puerto Rico/8/34(H1N1)(PR8)AIV的内部基因为骨架,以Clade2.3.4H5N1亚型... 为应对Clade2.3.4H5亚型禽流感病毒持续发生的抗原性改变及其引发的潜在的地方性流行,需要根据流行监测的抗原分析结果制备疫苗候选株。采用反向遗传操作系统,以A/Puerto Rico/8/34(H1N1)(PR8)AIV的内部基因为骨架,以Clade2.3.4H5N1亚型AIV A/chicken/Hebei/2/2011(wt-HB株)的血凝素(HA)基因和神经氨酸酶(NA)基因为供体,并删除wt-HB株HA基因中编码多碱性氨基酸的序列,成功拯救出1株重组病毒rHB/PR8。该病毒在鸡胚和MDCK细胞上均具有较好的繁殖性能,对SPF鸡和鸡胚无致病性。这一研究结果为防控变异的Clade2.3.4H5亚型禽流感提供了良好的疫苗候选株。 展开更多
关键词 H5亚型禽流感病毒 Clade2.3.4 反向遗传 HA基因 NA基因
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意大利H3N1亚型新型猪流感病毒
11
作者 Ana Moreno 王广秀 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第6期147-147,共1页
到目前为止,意大利已经分离到了H1N1、H1N2和H3N2 3个亚型猪流感病毒。2006年,在一例有咳嗽症状的猪上分离到了一种新的猪流感病毒亚型(H3N1)。通过对肺组织的RT-PCR检测,对试验猪人工感染该新亚型流感病毒及利用空斑试验对该毒株的克... 到目前为止,意大利已经分离到了H1N1、H1N2和H3N2 3个亚型猪流感病毒。2006年,在一例有咳嗽症状的猪上分离到了一种新的猪流感病毒亚型(H3N1)。通过对肺组织的RT-PCR检测,对试验猪人工感染该新亚型流感病毒及利用空斑试验对该毒株的克隆鉴定,证实了这一独特的H和N组合的猪流感病毒的存在。同时,对该新型毒株进行了抗原及遗传特性鉴定。基因系统发育分析结果表明,H3N1亚型的完整HA基因序列与3株意大利H3N2亚型具有高度的一致性。这3个意大利亚型中有一株分离于2001年,其它2株分离于2004年,而该毒株的NA序列全长与2004年于意大利分离得到的3株H1N1亚型猪流感病毒极其相似。其余的基因片段也分别与当前意大利流行的H1N1与H3N2猪流感病毒极为相似。这表明,该新亚型猪流感病毒可能是H1N1与H3N2亚型的一个重组体。 展开更多
关键词 猪 H3N1新亚型 遗传特征 意大利
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鲍曼不动杆菌分子流行病学研究进展
12
作者 陈威震 陈良安 《海峡科学》 2011年第10期72-75,共4页
介绍了鲍曼不动杆菌的分子流行病学特征,并比较了鲍曼不动杆菌几种分子分型方法的优缺点。
关键词 鲍曼不动杆菌 分子流行病学 分子分型
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黑猩猩和大猩猩受埃博拉病毒的影响比人类更甚
13
作者 徐芳 夏威 《世界环境》 2015年第2期94-94,共1页
ENN环境新闻网新闻2015年1月25日虽然全世界都知道埃博拉疫情在非洲西部造成众多的人员伤亡,但是你可能还没意识到这种疾病已经在该地区造成了数十万的其他物种的死亡。更不幸的是,最大的受害者黑猩猩和大猩猩的种群伤亡一直在持续。人... ENN环境新闻网新闻2015年1月25日虽然全世界都知道埃博拉疫情在非洲西部造成众多的人员伤亡,但是你可能还没意识到这种疾病已经在该地区造成了数十万的其他物种的死亡。更不幸的是,最大的受害者黑猩猩和大猩猩的种群伤亡一直在持续。人类在感染了埃博拉病毒之后,基本都会得到及时和适当的治疗,但是灵长类动物则没有这么幸运。 展开更多
关键词 埃博拉病毒 大猩猩 黑猩猩 人类 人员伤亡 环境新闻 灵长类动物 受害者
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猪源牛病毒性腹泻病毒1型分离株的鉴定及培养特性研究 被引量：3
14
作者 陶洁 李本强 +2 位作者 程靖华 马玉飞 刘惠莉 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1555-1561,共7页
利用RT-PCR方法从猪场腹泻样品中检测到牛病毒性腹泻病毒(BVDV)核酸阳性样品,测序证实为1型BVDV,命名为SHCM06。遗传进化分析表明,其与ZM-95亲缘性最近,同源性达98.3%;与BVDV-1经典毒株亲缘性较远,仅85.7%~89.8%。免疫荧光、Western-blo... 利用RT-PCR方法从猪场腹泻样品中检测到牛病毒性腹泻病毒(BVDV)核酸阳性样品,测序证实为1型BVDV,命名为SHCM06。遗传进化分析表明,其与ZM-95亲缘性最近,同源性达98.3%;与BVDV-1经典毒株亲缘性较远,仅85.7%~89.8%。免疫荧光、Western-blot和荧光定量RT-PCR检测均表明,SHCM06毒株可感染MDBK、ST和PK15细胞,在MDBK和ST细胞上的增殖效率显著高于PK15细胞。进一步分析SHCM06感染对细胞中Ⅰ型干扰素表达的影响,结果显示,SHCM06感染均能使3种细胞中IFN-α和IFN-β表达量显著下降(P<0.05),且对MDBK细胞IFN-α的抑制效果显著高于对PK15细胞中IFN-α的抑制作用(P<0.05)。结果表明,从猪临床腹泻样品中分离1株BVDV1型,该病毒对MDBK、ST细胞适应性好于PK-15细胞,能显著抑制细胞中Ⅰ型IFN的产生,以发挥抵抗细胞抗病毒免疫效应,本试验为深入研究猪源BVDV的致病作用奠定了基础。 展开更多
关键词 猪源BVDV 同源性分析 生长特性 Ⅰ型干扰素
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表达D型流感病毒HEF蛋白重组新城疫病毒的拯救及其免疫原性研究 被引量：1
15
作者 张鑫 张进进 +2 位作者 贾艳娥 罗建勋 吉艳红 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期1082-1089,共8页
D型流感病毒是近年来新发现的一种流感病毒,宿主范围、地域分布广泛,可与其它呼吸道病毒一起引起严重的牛呼吸道疾病,给家畜养殖业造成了威胁,并存在跨越种间屏障向人类传播的风险。国外的D型流感疫苗研究结果虽然并不理想,但已经在灭... D型流感病毒是近年来新发现的一种流感病毒,宿主范围、地域分布广泛,可与其它呼吸道病毒一起引起严重的牛呼吸道疾病,给家畜养殖业造成了威胁,并存在跨越种间屏障向人类传播的风险。国外的D型流感疫苗研究结果虽然并不理想,但已经在灭活苗和DNA疫苗两个方向都有所涉及,而国内对于D型流感疫苗的研究尚未有报道。D型流感病毒基因组由7个RNA片段组成,共编码9种蛋白。血凝素酯酶融合蛋白(hemagglutinin-esterase-fusion,HEF)是D型流感病毒唯一的糖蛋白,具有A型流感病毒血凝素(hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶(neuraminidase,NA)蛋白的功能,同时有较强的免疫原性,是开发预防性疫苗的关键免疫原。本研究采用反向遗传学技术拯救了表达HEF蛋白的重组新城疫病毒,命名为rNDV-F-HEF(NDV97 F裂解位点替换为Lasota裂解位点的突变病毒);传代测序验证重组病毒的遗传稳定性,结果显示HEF基因在重组新城病毒rNDV-F-HEF中可以稳定遗传;Western-blot试验和间接免疫荧光试验表明rNDV-F-HEF能成功表达外源蛋白HEF;rNDV-F-HEF在鸡胚和雏鸡体内的毒力和生长能力与其亲本毒株NDV-F基本一致;rNDV-F-HEF肌肉注射免疫BALB/c小鼠的血清中含有HEF特异性Ig G抗体,其含量在三免后的第7天既能达到较高水平(约1800 ng/m L),说明rNDV-F-HEF具有防控IDV的潜质。重组病毒株rNDV-F-HEF可以用于IDV的预防性疫苗研发。 展开更多
关键词 D型流感病毒 HEF蛋白 新城疫病毒 反向遗传学 免疫原性
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新城疫流行病学变化及综合防制进展 被引量：1
16
作者 刘怀然 孔宪刚 《兽医导刊》 2008年第6期27-30,共4页
新城疫（ND）是由新城疫病毒（NDV）引起的一种禽类急性、高度接触性、致死性传染病，被国际动物卫生组织（OIE）列为危害禽类的两种A类传染病之一。尽管世界各国对ND采取了严格的防控措施，如对强毒感染的扑杀措施、限制使用中等毒力... 新城疫（ND）是由新城疫病毒（NDV）引起的一种禽类急性、高度接触性、致死性传染病，被国际动物卫生组织（OIE）列为危害禽类的两种A类传染病之一。尽管世界各国对ND采取了严格的防控措施，如对强毒感染的扑杀措施、限制使用中等毒力疫苗及强制性免疫等措施，但它仍然是危害禽类的主要传染病，并且呈现新的流行趋势，使防制工作变得复杂化。 展开更多
关键词 新城疫病毒 综合防制 流行病学 国际动物卫生组织 传染病 防控措施 强毒感染 中等毒力
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鸽Ⅰ型副粘病毒的分离与鉴定 被引量：1
17
作者 贺东生 姜峥荣 +1 位作者 陈学杰 龙洪光 《中国动物检疫》 CAS 2001年第9期26-28,共3页
采用鸡胚接种的方法从病死鸽中分离到了一株病毒，其血凝效价（ＨＡ）平均为２８，该病毒株能凝集鸡红细胞的作用可被新城疫标准阳性血清所抑制，所分离的病毒林为Ⅰ型副粘病毒。该病毒对１日龄雏鸡脑内致死指数（ＩＣＰＩ）为０．３９... 采用鸡胚接种的方法从病死鸽中分离到了一株病毒，其血凝效价（ＨＡ）平均为２８，该病毒株能凝集鸡红细胞的作用可被新城疫标准阳性血清所抑制，所分离的病毒林为Ⅰ型副粘病毒。该病毒对１日龄雏鸡脑内致死指数（ＩＣＰＩ）为０．３９，肌肉注射１日龄雏鸡不发病，该毒株对雏鸡和鸡胚来说为弱毒力株。用３０日龄的幼鸽做人工发病试验时可复制此病，并使其 ＨＩ平均抗体滴度由第 １５ ｄ的 ２． ９ ｌｏｇ２上升到第 ２５ ｄ的 ７． ２５ ｌｏｇ２。 展开更多
关键词 鸽 Ⅰ型副粘病毒 分离 鉴定 鸡胚接种
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小反刍兽疫免疫荧光诊断技术研究 被引量：1
18
作者 蒋梅 赵文华 杨仕标 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第4期102-105,174,共5页
为了建立小反刍兽疫(PPR)荧光抗体诊断方法,研究选用小反刍兽疫病毒(PPRV)Nigeria75/1减毒疫苗株制备抗原,免疫试验山羊,制备小反刍兽疫高免血清,用硫酸铵盐析法粗提免疫球蛋白(IgG),再应用提取的IgG制备异硫氰酸荧光素标记抗体。结果表... 为了建立小反刍兽疫(PPR)荧光抗体诊断方法,研究选用小反刍兽疫病毒(PPRV)Nigeria75/1减毒疫苗株制备抗原,免疫试验山羊,制备小反刍兽疫高免血清,用硫酸铵盐析法粗提免疫球蛋白(IgG),再应用提取的IgG制备异硫氰酸荧光素标记抗体。结果表明:所制备的荧光抗体对试验用Vero细胞组织抗原和犬瘟热病毒(CDV)抗原无反应性,对小反刍兽疫病毒感染细胞的检出敏感性为1×106稀释度。 展开更多
关键词 小反刍兽疫(PPR) 诊断方法 荧光抗体
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应用逆转录套式PCR检测新城疫病毒核酸 被引量：12
19
作者 黄庚明 辛朝安 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期295-299,共5页
选择NDV融合蛋白保守的编码区域 ,设计并合成了一对外引物和一对内引物 ,建立并优化了检测新城疫病毒核酸的逆转录套式PCR法 ,通过检测NDV感染的实验室病料和临床病料。结果表明 ,逆转录套式PCR法最低能鉴别出约 0 .3pg的NDVRNA ,攻毒后... 选择NDV融合蛋白保守的编码区域 ,设计并合成了一对外引物和一对内引物 ,建立并优化了检测新城疫病毒核酸的逆转录套式PCR法 ,通过检测NDV感染的实验室病料和临床病料。结果表明 ,逆转录套式PCR法最低能鉴别出约 0 .3pg的NDVRNA ,攻毒后第 8天还能从非免疫鸡和SPF鸡泄殖腔拭子中检出NDV ,第 8天非免疫鸡泄殖腔拭子中NDV的最大检出率为 5 / 10 ,第 8天SPF鸡泄殖腔拭子中NDV的最大检出率为 6/ 10。对非免疫鸡和SPF鸡的泄殖腔中NDV最佳检出时间均在攻毒后第 5天。逆转录套式PCR方法对临床样品中NDV的最大检出率为 6/ 7。经核酸杂交验证 ,该法具有很高的特异性和敏感性 ,也比较简便快速 ,为从分子水平探讨NDV的发病机理、临床早期快速诊断提供了新的研究手段。 展开更多
关键词 新城疫病毒 融合蛋白基因 逆转录套式PCR 检测 病毒核酸
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鸭坦布苏病毒和产蛋下降综合征病毒二重PCR检测方法的建立 被引量：5
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作者 孙敏华 李林林 +3 位作者 董嘉文 袁建丰 邝瑞欢 胡奇林 《广东畜牧兽医科技》 2015年第1期29-33,共5页
参考Gen Bank上已发表的鸭坦布苏病毒(DTMUV)NS5基因序列和产蛋下降综合征病毒(EDSV)五邻体(penton)基因序列,分别设计了检测DTMUV和EDSV的特异性引物,扩增目的片段大小分别为242 bp和181 bp。通过退火温度及引物浓度的优化,建立了针对... 参考Gen Bank上已发表的鸭坦布苏病毒(DTMUV)NS5基因序列和产蛋下降综合征病毒(EDSV)五邻体(penton)基因序列,分别设计了检测DTMUV和EDSV的特异性引物,扩增目的片段大小分别为242 bp和181 bp。通过退火温度及引物浓度的优化,建立了针对这两种病毒的二重PCR检测方法。特异性试验结果表明,该方法可以同时检测DTMUV和EDSV,且不与鸭肝炎病毒、鸭瘟病毒、番鸭呼肠孤病毒、小鹅瘟病毒、番鸭细小病毒、H9亚型禽流感病毒、新城疫病毒以及大肠杆菌的核酸发生交叉反应;敏感性试验表明,该方法对DTMUV的最低检出限为590个拷贝,对EDSV的最低检出限为3 260个拷贝;该方法重复性良好,对不同批次的样品扩增效果良好。通过检测两种病毒感染的阳性病料各10份,结果显示,该二重PCR检测方法对阳性样品的检出率可达100%。这表明该方法可以用于鸭坦布苏病毒和产蛋下降综合征病毒的检测。 展开更多
关键词 鸭坦布苏病毒 产蛋下降综合征病毒 二重PCR
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