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疣鼻栖鸭恒定链(MDIi)多克隆抗体制备及鉴定 被引量:2
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作者 刘生杰 朱茂英 +3 位作者 陈德宇 吴超 倪庆胜 余为一 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期623-626,共4页
目的制备抗疣鼻栖鸭恒定链(MDIi)多克隆抗体,鉴定其与组织抗原MDIi的反应性。方法以PCR扩增获得MDIi序列构建原核表达载体pET-32a/MDIi,转化大肠杆菌进行表达;对表达产物鉴定后,免疫小鼠制备抗MDIi多克隆抗体;间接ELISA测定抗体效价,Wes... 目的制备抗疣鼻栖鸭恒定链(MDIi)多克隆抗体,鉴定其与组织抗原MDIi的反应性。方法以PCR扩增获得MDIi序列构建原核表达载体pET-32a/MDIi,转化大肠杆菌进行表达;对表达产物鉴定后,免疫小鼠制备抗MDIi多克隆抗体;间接ELISA测定抗体效价,Western blot鉴定抗体特异性,间接ELISA检测抗体与疣鼻栖鸭组织MDIi的反应强度。结果成功构建了pET-32a/MDIi原核表达载体,诱导表达了相对分子质量(Mr)约40 000的包涵体形式的MDIi重组蛋白,免疫小鼠获得效价为1∶128 000的特异性多克隆抗体,抗体与疣鼻栖鸭组织中的MDIi反应滴度为1∶32 000。结论成功制备了高效价的特异性抗MDIi多克隆抗体,抗体与组织抗原有较强的免疫反应性。 展开更多
关键词 疣鼻栖鸭 恒定链 多克隆抗体 组织抗原
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牛生长激素单克隆抗体的制备
2
作者 于国林 王鹏 《动物医学进展》 CSCD 2002年第4期104-106,共3页
选取 1 8只 BALB/ c小鼠 ,以不同抗原(交联牛生长激素或未交联牛生长激素 ) ,以不同剂量、不同免疫间隔分别进行免疫 ,皆完全弗氏佐剂乳化抗原 ,皮下多点注射 ,三次免疫后 ,检测小鼠血清效价 ,确定免疫方案。从取脾前五天起 ,分别腹腔... 选取 1 8只 BALB/ c小鼠 ,以不同抗原(交联牛生长激素或未交联牛生长激素 ) ,以不同剂量、不同免疫间隔分别进行免疫 ,皆完全弗氏佐剂乳化抗原 ,皮下多点注射 ,三次免疫后 ,检测小鼠血清效价 ,确定免疫方案。从取脾前五天起 ,分别腹腔注射牛生长激素 50、75、1 0 0、1 2 5和 1 50μg,然后进行细胞融合 ,得到了分泌牛生长激素单克隆抗体的杂交瘤两株 ,分别将两株杂交瘤细胞注入小鼠体内生产腹水 ,腹水效价均达 1 :1 0 0 0 0 ( EL ISA) 展开更多
关键词 牛生长激素 单克隆抗体 制备
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荧光假单胞菌疫苗对异育银鲫的免疫保护效应
3
作者 高晓华 肖雨 +3 位作者 张明辉 安伟 邵玲 何正侃 《动物医学进展》 北大核心 2016年第3期42-46,共5页
为探讨荧光假单胞菌疫苗对异育银鲫的免疫保护作用,为其在赤皮病防治上的应用提供理论依据,以福尔马林灭活的荧光假单胞菌(Pseudamonas fluoroscens)全菌疫苗、菌体外膜蛋白(OMP)疫苗作为免疫原,以平均体重100.0g±15.0g的健康异育... 为探讨荧光假单胞菌疫苗对异育银鲫的免疫保护作用,为其在赤皮病防治上的应用提供理论依据,以福尔马林灭活的荧光假单胞菌(Pseudamonas fluoroscens)全菌疫苗、菌体外膜蛋白(OMP)疫苗作为免疫原,以平均体重100.0g±15.0g的健康异育银鲫(Carassius auratus gibelio)为试验对象,通过腹腔注射免疫原(浓度分别为1.0×108/mL、0.2mg/mL)免疫,剂量为0.2mL/尾,对照组注射等量灭菌生理盐水。分别在免疫注射1、2、4、7、14、21、28、35d后对试验鱼尾静脉采血,进行外周血细胞计数、吞噬活性和抗体效价的测定。结果2种免疫原均可诱导异育银鲫外周血液红细胞、白细胞数量增加,吞噬细胞的吞噬活性和血清抗体效价均升高。免疫注射35d后活菌攻毒,福尔马林灭活荧光假单胞菌苗(F-PF)组的免疫保护率为61.1%,OMP组的免疫保护率为72.2%,OMP组的免疫保护效果优于F-PF组。证明2种免疫原均通过促进异育银鲫血细胞增殖,产生特异性抗体的方式提高机体的免疫保护力。 展开更多
关键词 异育银鲫 荧光假单胞菌 外膜蛋白 凝集抗体效价 免疫保护
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Efficacy of cetuximab combination with chemotherapy in non-small cell lung cancer first-line setting:the summary based on publications
4
作者 Liangping Xia Yuming Rong +3 位作者 Guifang Guo Huijuan Qiu Feifei Zhou Fang Wang 《The Chinese-German Journal of Clinical Oncology》 CAS 2010年第3期137-141,共5页
Objective: The combination of cetuximab with standard chemotherapy was not widely studied though it was recommended by NCCN 2009 to apply in non-small cell lung cancer (NSCLC) first-line setting. The aim of this st... Objective: The combination of cetuximab with standard chemotherapy was not widely studied though it was recommended by NCCN 2009 to apply in non-small cell lung cancer (NSCLC) first-line setting. The aim of this study was to summary the efficacy and safety profiles of all the NSCLC patients available in openly published papers treated with above mentioned regimens. Methods: The PubMed database was used to search all the papers on NSCLC associated with cetuximab treatment, and only the clinical trails applied cetuximab combined with doublets cytotoxic chemotherapy in first-line setting till to 30 November 2009 were collected. And the medians and their 95% CI of objective response rate (ORR), progression free survival (PFS), overall survival (OS), and the common adverse events were calculated. Results: (1) Eight papers including 1032 patients were collected, and all cases were at advanced stage. (2) The ratio of male and female patients was 1.6, 50.1% patients were adenocarcinoma and 28.2% patients were squamous cell carcinoma (SCC), 90.0% patients were PS = 0-1, and 78.2% patients were white ethnic. (3) The disease control rate (DCR), ORR, PFS, and OS were 65.2% (95% CI: 60.7%-69.7%), 33.2% (95% CI: 30.3%-36.1%), 5.0 months (95% CI: 4.7-5.3) and 10.9 months (95% Cl: 9.6-12.2), respectively. Conclusion: This is the first study to summarize the efficacy and safety profiles of cetuximab combined with chemotherapy in NSCLC first-line setting based on all available patients. The addition of cetuximab caused promising prognosis and acceptable side effects excepting higher incidence of neutropenia, and febrile neutropenia. 展开更多
关键词 CETUXIMAB non-small cell lung cancer (NSCLC) first-line setting CHEMOTHERAPY EFFICACY adverse event
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鼠源VCAM-1基因TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立 被引量:4
5
作者 王兴陇 包晓婧 +2 位作者 张海霞 李向茸 冯若飞 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期27-33,共7页
为建立一种鼠源VCAM-1基因TaqMan实时荧光定量PCR检测方法,以期为鼠源VCAM-1基因的动态检测提供有效的试验手段。根据GenBank中登录的鼠源VCAM-1基因序列,设计1对荧光定量PCR引物及1条探针,建立一种快速检测鼠源VCAM-1基因的实时荧光定... 为建立一种鼠源VCAM-1基因TaqMan实时荧光定量PCR检测方法,以期为鼠源VCAM-1基因的动态检测提供有效的试验手段。根据GenBank中登录的鼠源VCAM-1基因序列,设计1对荧光定量PCR引物及1条探针,建立一种快速检测鼠源VCAM-1基因的实时荧光定量PCR方法,并对建立的方法进行条件优化与评价。结果显示,建立的实时荧光定量PCR方法线性关系较好,以质粒标准品构建的标准曲线相关系数r2为0.998;灵敏性、重复性及特异性均较高。可用于鼠源细胞中VCAM-1基因的定性鉴别和含量测定。结果表明,成功建立了一种快速准确检测鼠源VCAM-1基因的TaqMan实时荧光定量PCR法。 展开更多
关键词 VCAM-1基因 TAQMAN探针 实时荧光定量PCR 检测
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肠道粘膜免疫研究进展 被引量:10
6
作者 马玉龙 许梓荣 《中国畜牧兽医》 CAS 2004年第2期27-29,共3页
肠道粘膜不仅是机体消化、吸收营养物质的场所 ,而且还具有重要的免疫功能。分泌型免疫球蛋白 A、上皮内淋巴细胞、微皱褶细胞和细胞因子 ,共同组成肠道粘膜免疫系统 ,以阻止食物大分子和外来微生物抗原的侵入 ,保护肠道的结构和正常生... 肠道粘膜不仅是机体消化、吸收营养物质的场所 ,而且还具有重要的免疫功能。分泌型免疫球蛋白 A、上皮内淋巴细胞、微皱褶细胞和细胞因子 ,共同组成肠道粘膜免疫系统 ,以阻止食物大分子和外来微生物抗原的侵入 ,保护肠道的结构和正常生理功能。 展开更多
关键词 肠道粘膜 免疫 分泌型免疫球蛋白A 上皮内淋巴细胞 微皱褶细胞 细胞因子 抗原
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玉米赤霉烯酮单克隆抗体的制备及间接竞争ELISA检测方法的初步建立 被引量:1
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作者 李东娜 王照鹏 +6 位作者 杨威 刘磊 唐佳佳 张良 丁红研 刘国文 李小兵 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第5期85-86,共2页
为了研究玉米赤霉烯酮的间接竞争ELISA检测方法,试验采用牛血清白蛋白与玉米赤霉烯酮的耦联物(ZEN-BSA)做包被抗原,标准玉米赤霉烯酮(ZEN)做竞争抗原,以制备的可稳定分泌抗ZEN的单克隆抗体为基础,初步建立了ZEN间接竞争ELISA检测方法。... 为了研究玉米赤霉烯酮的间接竞争ELISA检测方法,试验采用牛血清白蛋白与玉米赤霉烯酮的耦联物(ZEN-BSA)做包被抗原,标准玉米赤霉烯酮(ZEN)做竞争抗原,以制备的可稳定分泌抗ZEN的单克隆抗体为基础,初步建立了ZEN间接竞争ELISA检测方法。结果表明:间接竞争ELISA检测方法线性范围为0.363 2~78.985 2μg/L,最低检测限为0.231 9μg/L;曲线回归方程为y=68.711-25.666x,其中R2=0.987 1,批内平均变异系数为3.10%,批间平均变异系数为6.26%,与相似毒素的交叉反应率均小于0.01%。说明建立的检测方法可以用于ZEN的检测。 展开更多
关键词 玉米赤霉烯酮 单克隆抗体 ELISA
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商品化卵黄抗体分类及特点 被引量:1
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作者 魏凤 张文通 苗立中 《养禽与禽病防治》 2020年第1期38-40,共3页
介绍了9种商品化禽病卵黄抗体(有批签发产品)的种类、主要成分与含量、性状、用途、用法与用量、使用注意事项、贮藏与有效期,为了解各种类型的商品化禽病卵黄抗体提供参考。
关键词 禽病卵黄抗体 商品化疫苗 分类 特点
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催化性抗体
9
作者 ichard A.Lerner 武占银 《国外兽医学(畜禽疾病)》 CSCD 1989年第4期46-48,F003,共4页
抗体能否用作酶呢?这二类蛋白功能不同,酶以催化性为特征,能加速化学反应,自身并不耗损,抗体则在识别物质上无与伦此。但是酶和抗体发挥作用的方式是相同的,都结合到别的分子上。酶的表面有一裂隙,在化学转换过程中将反应物结合于其中... 抗体能否用作酶呢?这二类蛋白功能不同,酶以催化性为特征,能加速化学反应,自身并不耗损,抗体则在识别物质上无与伦此。但是酶和抗体发挥作用的方式是相同的,都结合到别的分子上。酶的表面有一裂隙,在化学转换过程中将反应物结合于其中。抗体有与侵入机体的外来生物分子结合的特异部位。免疫系统可造出能与约一亿个抗原决定簇结合的抗体,每种抗体能与一特定的外来物质相结合。 展开更多
关键词 催化性 抗体
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新疆生猪屠宰检疫的现状、存在问题及对策 被引量:3
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作者 李有文 钱剑 《塔里木农垦大学学报》 2002年第2期62-63,共2页
关键词 新疆 生猪屠宰检疫 现状 问题 对策 定点屠宰 集中检疫
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用多聚赖氨酸作载体制备IVM人工抗原的研究 被引量:1
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作者 魏小娟 张继瑜 +4 位作者 张梅 李剑勇 周绪正 李金善 牛建荣 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第1期65-66,共2页
采用N-羟基琥珀酰亚胺活性酯法和混合酸酐法,将伊维菌素(IVM)分别与多聚-L-赖氨酸(PLL)和卵清蛋白(OVA)连接制备人工免疫原5-O-(单)琥珀酰IVM-PLL和包被原5-O-(单)琥珀酰IVM-OVA,经非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析证实人工抗原合成成功。
关键词 伊维菌素 人工抗原 多聚-L-赖氨酸
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应用SDS抗原致敏红细胞检测畜禽衣原体抗体 被引量:4
12
作者 姜天童 杨宜生 +1 位作者 孟庆友 方雨玲 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1991年第7期4-5,共2页
用鹦鹉热衣原体和沙眼衣原体参考株B_(11001)和TE_(55)株以及湖北分离的鹦鹉热衣原体CJ_4、BP_(11)和CW_3株制备的十二烷基硫酸钠(SDS)抗原致敏红细胞能与以上菌株的63份高免血清和156份实验感染畜禽(猪、奶牛、绵羊、山羊、兔、豚鼠、... 用鹦鹉热衣原体和沙眼衣原体参考株B_(11001)和TE_(55)株以及湖北分离的鹦鹉热衣原体CJ_4、BP_(11)和CW_3株制备的十二烷基硫酸钠(SDS)抗原致敏红细胞能与以上菌株的63份高免血清和156份实验感染畜禽(猪、奶牛、绵羊、山羊、兔、豚鼠、鸡、鸭、鸽、鹦鹉、鹌鹑等)血清发生间接血凝(IHA)反应,效价达到1∶4096~1∶8192。血凝反应能被致敏用的SDS抗原所抑制。IHA试验与直接和间接补体结合(DCF和ICF)试验比较,IHA比后二者敏感16—32倍。IHA试验对204份人工感染后5—15天的畜禽血清的检出率为100%,而对149份正常卵黄膜免疫血清检测的结果全为阴性。用两种方法同时对湖北九个地区(市)的奶牛、绵羊、猪、鸭和鸡血样1918份检测的结果是:IHA的平均阳性率为17.73%(340/1918),CF的平均阳性率为15.28%(293/1918),二者的总符合率为86.18%。 展开更多
关键词 家畜 家禽 衣原体病 抗体 SDS抗原
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免疫方式对Iss抗体产生的影响
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作者 樊琛 徐旺烨 +2 位作者 曾庆华 王会 郑焕芹 《湖北农业科学》 2017年第7期1307-1309,共3页
为获得抗大肠杆菌Iss蛋白的抗体,将纯化的GST-Iss蛋白分别免疫雏鸡及小鼠。结果显示,无免疫佐剂、弗氏佐剂免疫雏鸡所产生的Iss抗血清效价仅为1∶100,氢氧化铝佐剂免疫小鼠所产生的Iss抗血清效价为1∶60 000。Iss融合蛋白采用氢氧化铝... 为获得抗大肠杆菌Iss蛋白的抗体,将纯化的GST-Iss蛋白分别免疫雏鸡及小鼠。结果显示,无免疫佐剂、弗氏佐剂免疫雏鸡所产生的Iss抗血清效价仅为1∶100,氢氧化铝佐剂免疫小鼠所产生的Iss抗血清效价为1∶60 000。Iss融合蛋白采用氢氧化铝佐剂免疫小鼠,可获得更强的体液免疫应答,抗体效价更高。 展开更多
关键词 Iss抗体 免疫佐剂 免疫动物
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免疫组织化学技术在神经生长因子研究中的应用 被引量:5
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作者 陈文华 张映 《中国畜牧兽医》 CAS 2006年第11期61-64,共4页
神经生长因子是最早发现的细胞生长调节因子,在神经系统和非神经系统中起着十分重要的作用。免疫组织化学技术作为一门传统的技术,在神经生长因子的基础研究方面作出了重要贡献,同时结合新技术的发展也为其进一步研究开辟出了新的思路... 神经生长因子是最早发现的细胞生长调节因子,在神经系统和非神经系统中起着十分重要的作用。免疫组织化学技术作为一门传统的技术,在神经生长因子的基础研究方面作出了重要贡献,同时结合新技术的发展也为其进一步研究开辟出了新的思路。作者简述了免疫组化技术在神经生长因子研究中的应用情况。 展开更多
关键词 免疫组织化学技术 神经生长因子
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ATP-bioluminescence assay indicates the treatment of recurrent non-small cell lung cancer combined with malignant pleural effusion
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作者 Jing Zhu Lixia Ma Ying Cheng 《The Chinese-German Journal of Clinical Oncology》 CAS 2010年第8期441-443,共3页
Objective:This study was aimed to research the feasibility of ATP-bioluminescence assay(ATP-TCA) guiding the treatment on recurrent non-small cell lung cancer(NSCLC) combined with malignant pleural effusion.Methods:We... Objective:This study was aimed to research the feasibility of ATP-bioluminescence assay(ATP-TCA) guiding the treatment on recurrent non-small cell lung cancer(NSCLC) combined with malignant pleural effusion.Methods:We collected 30 pleural fluid samples which were approved to be positive by cytology from recurrent NSCLC patients.These cells were cocultured with chemotherapy medicines,single agent or drugs combination.Five drug concentrations,two parallel holes were examined in vitro for 4 days,the results were measured by adding luciferase-fluorescein working system and luminescence analyzer.We applied chemotherapy medicines according to the results in vitro of ATP-TCA.Results:There were differences among drug sensitivities of individuals.All the samples could be evaluated.Effective single drugs included cisplatinum,mitomycin C,doxorubicin,and pemetrexed disodium;sensitive drugs in the combination therapy were gemcitabine plus cisplatin,vinorelbine plus cisplatin,paclitaxel plus cisplatin,docetaxel plus cisplatin,and mitomycin C,vindesine plus cisplatin,in which gemcitabine + cisplatin(GEM + DDP) in vitro was the most efficient program.Conclusion:ATP-TCA in vitro sensitivity assay is rapid,reliable,and simple to guide the treatment of recurrent NSCLC with malignant pleural effusion,and can help clinicians to make the individual chemotherapy program. 展开更多
关键词 ATP-bioluminescence assay (ATP-TCA) recurrent advanced non-small cell lung cancer (NSCLC) pleural fluid
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Clinical application value of bone turnover markers in non-small-cell lung cancer patients with bone metastases 被引量:3
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作者 Zhiyu Wang Chen Yang Yumei Yang Zan Shen Hui Zhao Yang Yao 《The Chinese-German Journal of Clinical Oncology》 CAS 2011年第2期81-84,共4页
Objective:The purpose of this study was to assess the clinical application value of bone turnover markers in non-small-cell lung cancer(NSCLC) patients with bone metastases.Including diagnosing bone metastases,detecti... Objective:The purpose of this study was to assess the clinical application value of bone turnover markers in non-small-cell lung cancer(NSCLC) patients with bone metastases.Including diagnosing bone metastases,detecting bone metastatic spread.Methods:Alkaline phosphatase(AKP),β-C-terminal telopeptide of type I collagen(β-CTx),osteocalcin(OST) and bone alkaline phosphatase(BALP) were measured in 76 patients with bone metastases from NSCLC and 44 normal people.Results:The level of AKP,β-CTx and BALP in patients with bone metastasis was significantly higher than in the normal people.Significant correlation was observed among bone turnover markers.The levels of BALP and OST were significantly correlated with the extent of bone metastasis.The patients with high-level CTx and low-level BALP had higher risk of pathologic fracture.Conclusion:In NSCLC patients with bone metastases,bone turnover markers can help to make diagnosis and evaluate the severity.It will have a wide range of use in clinical practice. 展开更多
关键词 non-small-cell lung cancer bone metastasis bone turnover markers
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新疆昌吉地区规模化猪场猪瘟免疫抗体水平检测与分析 被引量:2
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作者 李泽宇 《畜牧兽医杂志》 2015年第4期6-10,共5页
为了掌握昌吉地区规模化猪场猪瘟免疫抗体水平的高低及消长规律,同时为养殖户提供一个科学合理的免疫程序,本试验收集2013~2014年不同年龄阶段的猪血清共1350份,采用间接ELISA方法检测其抗体水平并进行分析.结果表明,昌吉地区5个规模... 为了掌握昌吉地区规模化猪场猪瘟免疫抗体水平的高低及消长规律,同时为养殖户提供一个科学合理的免疫程序,本试验收集2013~2014年不同年龄阶段的猪血清共1350份,采用间接ELISA方法检测其抗体水平并进行分析.结果表明,昌吉地区5个规模化猪场共1350份血清间接ELISA方法检测总抗体阳性率为80.07%(1081/1350),平均抗体滴度为8log2;公猪、后备母猪、哺乳母猪、妊娠母猪、7日龄仔猪、14日龄仔猪、21日龄仔猪、30日龄仔猪、40日龄仔猪、55日龄仔猪等不同阶段猪群的血清抗体阳性率分别为92%、69%、86%、93%、72%、82%、88.67%、80.67%、72.66%、82.67%.因此,结合检测结果、临床生产数据及猪场已采用CSF的免疫程序,建议试验区仔猪猪瘟免疫程序为23~25日龄进行首免疫,60日龄时进行第二次免疫,生产公、母猪每年春秋两秋各普免一次,经产母猪每次断奶前跟胎免疫一次. 展开更多
关键词 猪瘟 疫苗 抗体 ELISA
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Gemcitabine plus carboplatin used as induction regimen for elderly patients with locally advanced unresectable non-small cell lung cancer
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作者 Zhihua Sun Hongmin Zheng Linyun Zhang 《The Chinese-German Journal of Clinical Oncology》 CAS 2011年第2期85-87,共3页
Objective:The purpose of this study was to evaluate the efficacy and safety of gemcitabine(GEM) and carboplatin(CBP) used as induction regimen in the treatment of elderly patients with locally advanced unresectable no... Objective:The purpose of this study was to evaluate the efficacy and safety of gemcitabine(GEM) and carboplatin(CBP) used as induction regimen in the treatment of elderly patients with locally advanced unresectable non-small cell lung cancer(NSCLC).Methods:Seventy-eight cases of elderly patients have been cytologically and pathologically confirmed with locally advanced unresectable NSCLC,the age of the patients ranged from 65 to 75 years.The patients were treated with the combined regimen of gemcitabine and cisplatin.GEM 1000 mg/m2 intravenously injected by drip on the 1st,8th day and the dosage of CBP was AUC 4 that was used on the 1st day,21 days apart to each cycle,most patients received 2 cycles.Treatment response was evaluated according to the criteria of RECIST(Response Evaluation Criteria in Solid Tumor),the side effect of the regimen was judged based on WHO criteria.Results:Seventy-eight patients were evaluated and received a total of 156 cycles chemotherapy.There were no complete regression that could be observed,but 32 cases had partial regression(PR),37 cases with no change(NC) and 9 cases with progression disease(PD).The overall response rate was 41.0%.The main side effects were hematological toxicity.Conclusion:The GC regimen could be used as induction treatment for elderly patients with locally advanced unresectable NSCLC,and the regimen could be well tolerated and is safe in terms of side effects. 展开更多
关键词 elderly patient non-small cell lung cancer GEMCITABINE CARBOPLATIN induction chemotherapy
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猪传染性胃肠炎病毒S蛋白主要抗原位点在昆虫细胞中的表达 被引量:1
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作者 李菁 何孔旺 杨倩 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期171-174,共4页
用RT-PCR方法扩增出猪传染性胃肠炎病毒S基因主要抗原位点A、D,将其亚克隆至供体质粒pFastBac1,得到重组转移质粒pFastBac1-TS1,转化到Escherichia coliDH5α中,提取阳性克隆质粒再转化到含穿梭载体bacmid的E.coliDH10Bac中,发生转座作... 用RT-PCR方法扩增出猪传染性胃肠炎病毒S基因主要抗原位点A、D,将其亚克隆至供体质粒pFastBac1,得到重组转移质粒pFastBac1-TS1,转化到Escherichia coliDH5α中,提取阳性克隆质粒再转化到含穿梭载体bacmid的E.coliDH10Bac中,发生转座作用,经蓝白斑筛选得到重组穿梭载体Bacmid-TS1,经PCR鉴定后再转染Sf9昆虫细胞,经空斑筛选得到纯化的重组病毒rAcV-Bac-TS1,经IFA、SDS-PAGE和Western-blot鉴定,重组杆状病毒TS1蛋白(相对分子质量约43 000)在Sf9昆虫细胞中得到表达。 展开更多
关键词 猪传染性胃肠炎病毒 S蛋白 重组杆状病毒 表达
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微囊藻毒素人工完全抗原制备与鉴定
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作者 高阳 林超 +9 位作者 郭一平 王菡 潘悦 聂红霞 任洪林 胡盼 李岩松 周玉 柳曾善 卢士英 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第5期1-4,共4页
为了研究微囊藻毒素-LR(MC-LR)的免疫学检测方法,试验制备了MC-LR人工完全抗原,采用水溶性碳二亚胺法将微囊藻毒素的羧基与牛血清白蛋白(BSA)的氨基偶联,同时利用琼脂糖凝胶电泳、非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、紫外扫描分析及ELISA等技术... 为了研究微囊藻毒素-LR(MC-LR)的免疫学检测方法,试验制备了MC-LR人工完全抗原,采用水溶性碳二亚胺法将微囊藻毒素的羧基与牛血清白蛋白(BSA)的氨基偶联,同时利用琼脂糖凝胶电泳、非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、紫外扫描分析及ELISA等技术对偶联结果进行鉴定与分析。结果表明:微囊藻毒素的羧基与BSA的氨基偶联成功。说明人工完全抗原制备成功,可用于MCLR的免疫学检测。 展开更多
关键词 微囊藻毒素(MCs) 碳二亚胺法 偶联 人工完全抗原 免疫学检测
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