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菠萝叶基原生质体分离与瞬时转化体系的建立
1
作者
贺涵
阳习鹏
+3 位作者
赵婉欣
邵雪花
杨凤玺
刘传和
《西北农林科技大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2024年第7期81-88,98,共9页
【目的】研究菠萝叶基原生质体的高效分离方法,并对制备的原生质体进行瞬时转化,为利用菠萝原生质体进行菠萝基因功能研究提供技术支持。【方法】以‘巴厘’菠萝(Ananas comosus,‘Comtede Paris’)幼嫩叶片的叶基为材料,采用3因素3水...
【目的】研究菠萝叶基原生质体的高效分离方法,并对制备的原生质体进行瞬时转化,为利用菠萝原生质体进行菠萝基因功能研究提供技术支持。【方法】以‘巴厘’菠萝(Ananas comosus,‘Comtede Paris’)幼嫩叶片的叶基为材料,采用3因素3水平正交试验L _(9)(3^(3))分析纤维素酶质量浓度(6,12,20 g/L)、离析酶质量浓度(3,6,9 g/L)和甘露醇浓度(0.4,0.5,0.6 mol/L)对分离原生质体产量与活力的影响;同时,利用单因素试验(设置酶解时间2,4,6 h)筛选制备原生质体的最适酶解时间,确定分离菠萝叶基原生质体的最适条件;在最适条件下制备原生质体,采用聚乙二醇(PEG)介导法转化质粒,建立菠萝原生质体瞬时转化体系。【结果】L 9(33)正交试验结果显示,不同处理分离的原生质体产量为1.01×10^(6)~1.93×10^(6)g^(-1),纤维素酶质量浓度是决定原生质体产量的关键因素;原生质体活力为65.55%~87.00%,甘露醇浓度对原生质体活力的贡献最大。最适酶解条件为:菠萝叶基在含12 g/L纤维素酶、6 g/L离析酶、0.6 mol/L甘露醇的酶液中避光酶解4 h,产量可达1.96×10^(6)g^(-1),活力为85.54%。菠萝叶基原生质体通过PEG介导法转化pAN580-WRKY75质粒后,可在激光共聚焦显微镜下观察到核内的绿色荧光信号。【结论】确定了菠萝叶基原生质体的最适分离条件与瞬时转化方法,建立了适用于菠萝基因功能分析的原生质体瞬时表达体系。
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关键词
菠萝叶基
原生质体
瞬时转化
绿色荧光蛋白
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职称材料
剥粒菠萝试管苗二级苗圃育苗技术措施
被引量:
1
2
作者
黎仕聪
缪泗珍
林钊沐
《热带作物研究》
1990年第3期30-32,共3页
剥粒菠萝二级苗圃的主要育苗技术是搭荫棚、畦面铺椰糠及其它管理措施。应用这些技术措施后,育苗成活率由原来的30%左右提高到96.2%,苗木生长整齐茁壮,出圃率高达92%。
关键词
剥粒菠萝
试管苗
育苗技术
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职称材料
以花芽和冠芽切段为外植体的菠萝离体繁殖
被引量:
10
3
作者
洪燕萍
林顺权
+1 位作者
林庆良
吕柳新
《福建农业学报》
CAS
2004年第3期178-180,共3页
以花芽和冠芽的切段为外植体对食用菠萝进行离体培养,结果表明,以MS+NAA 0.5 mg·L-1+BA 5.0 mg·L-1为诱导培养基,以MS+BA 3.0 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1+活性炭1.0%为增殖、生根培养基,可 获得较好增殖、生根壮苗效果...
以花芽和冠芽的切段为外植体对食用菠萝进行离体培养,结果表明,以MS+NAA 0.5 mg·L-1+BA 5.0 mg·L-1为诱导培养基,以MS+BA 3.0 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1+活性炭1.0%为增殖、生根培养基,可 获得较好增殖、生根壮苗效果,同时以椰糠:砂=1:1为基质,移苗的成活率达90%以上。
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关键词
菠萝
离体培养
快速繁殖
外植体
培养基
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职称材料
题名
菠萝叶基原生质体分离与瞬时转化体系的建立
1
作者
贺涵
阳习鹏
赵婉欣
邵雪花
杨凤玺
刘传和
机构
广东省农业科学院果树研究所
广东省农业科学院环境园艺研究所
出处
《西北农林科技大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2024年第7期81-88,98,共9页
基金
广东省农业科学院协同创新中心项目(XTXM202203)
国家自然科学基金青年基金项目(32002018)
广东省现代农业产业技术体系创新团队建设专项(2023KJ109)。
文摘
【目的】研究菠萝叶基原生质体的高效分离方法,并对制备的原生质体进行瞬时转化,为利用菠萝原生质体进行菠萝基因功能研究提供技术支持。【方法】以‘巴厘’菠萝(Ananas comosus,‘Comtede Paris’)幼嫩叶片的叶基为材料,采用3因素3水平正交试验L _(9)(3^(3))分析纤维素酶质量浓度(6,12,20 g/L)、离析酶质量浓度(3,6,9 g/L)和甘露醇浓度(0.4,0.5,0.6 mol/L)对分离原生质体产量与活力的影响;同时,利用单因素试验(设置酶解时间2,4,6 h)筛选制备原生质体的最适酶解时间,确定分离菠萝叶基原生质体的最适条件;在最适条件下制备原生质体,采用聚乙二醇(PEG)介导法转化质粒,建立菠萝原生质体瞬时转化体系。【结果】L 9(33)正交试验结果显示,不同处理分离的原生质体产量为1.01×10^(6)~1.93×10^(6)g^(-1),纤维素酶质量浓度是决定原生质体产量的关键因素;原生质体活力为65.55%~87.00%,甘露醇浓度对原生质体活力的贡献最大。最适酶解条件为:菠萝叶基在含12 g/L纤维素酶、6 g/L离析酶、0.6 mol/L甘露醇的酶液中避光酶解4 h,产量可达1.96×10^(6)g^(-1),活力为85.54%。菠萝叶基原生质体通过PEG介导法转化pAN580-WRKY75质粒后,可在激光共聚焦显微镜下观察到核内的绿色荧光信号。【结论】确定了菠萝叶基原生质体的最适分离条件与瞬时转化方法,建立了适用于菠萝基因功能分析的原生质体瞬时表达体系。
关键词
菠萝叶基
原生质体
瞬时转化
绿色荧光蛋白
Keywords
pineapple leaf base
protoplast
transient expression
GFP
分类号
S668.304.3 [农业科学—果树学]
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职称材料
题名
剥粒菠萝试管苗二级苗圃育苗技术措施
被引量:
1
2
作者
黎仕聪
缪泗珍
林钊沐
机构
华南热帶作物科学研究院橡胶栽培研究所
出处
《热带作物研究》
1990年第3期30-32,共3页
文摘
剥粒菠萝二级苗圃的主要育苗技术是搭荫棚、畦面铺椰糠及其它管理措施。应用这些技术措施后,育苗成活率由原来的30%左右提高到96.2%,苗木生长整齐茁壮,出圃率高达92%。
关键词
剥粒菠萝
试管苗
育苗技术
分类号
S668.304.3 [农业科学—果树学]
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职称材料
题名
以花芽和冠芽切段为外植体的菠萝离体繁殖
被引量:
10
3
作者
洪燕萍
林顺权
林庆良
吕柳新
机构
龙岩学院生物系
华南农业大学园艺学院
福建农林大学园艺学院
出处
《福建农业学报》
CAS
2004年第3期178-180,共3页
基金
福建省科技厅重大课题子项目的部分内容
文摘
以花芽和冠芽的切段为外植体对食用菠萝进行离体培养,结果表明,以MS+NAA 0.5 mg·L-1+BA 5.0 mg·L-1为诱导培养基,以MS+BA 3.0 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1+活性炭1.0%为增殖、生根培养基,可 获得较好增殖、生根壮苗效果,同时以椰糠:砂=1:1为基质,移苗的成活率达90%以上。
关键词
菠萝
离体培养
快速繁殖
外植体
培养基
Keywords
Pineapple
In vitro culture
Micropropagation
分类号
S668.304.3 [农业科学—果树学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
菠萝叶基原生质体分离与瞬时转化体系的建立
贺涵
阳习鹏
赵婉欣
邵雪花
杨凤玺
刘传和
《西北农林科技大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2024
0
下载PDF
职称材料
2
剥粒菠萝试管苗二级苗圃育苗技术措施
黎仕聪
缪泗珍
林钊沐
《热带作物研究》
1990
1
下载PDF
职称材料
3
以花芽和冠芽切段为外植体的菠萝离体繁殖
洪燕萍
林顺权
林庆良
吕柳新
《福建农业学报》
CAS
2004
10
下载PDF
职称材料
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