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菠萝叶基原生质体分离与瞬时转化体系的建立
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作者 贺涵 阳习鹏 +3 位作者 赵婉欣 邵雪花 杨凤玺 刘传和 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2024年第7期81-88,98,共9页
【目的】研究菠萝叶基原生质体的高效分离方法,并对制备的原生质体进行瞬时转化,为利用菠萝原生质体进行菠萝基因功能研究提供技术支持。【方法】以‘巴厘’菠萝(Ananas comosus,‘Comtede Paris’)幼嫩叶片的叶基为材料,采用3因素3水... 【目的】研究菠萝叶基原生质体的高效分离方法,并对制备的原生质体进行瞬时转化,为利用菠萝原生质体进行菠萝基因功能研究提供技术支持。【方法】以‘巴厘’菠萝(Ananas comosus,‘Comtede Paris’)幼嫩叶片的叶基为材料,采用3因素3水平正交试验L _(9)(3^(3))分析纤维素酶质量浓度(6,12,20 g/L)、离析酶质量浓度(3,6,9 g/L)和甘露醇浓度(0.4,0.5,0.6 mol/L)对分离原生质体产量与活力的影响;同时,利用单因素试验(设置酶解时间2,4,6 h)筛选制备原生质体的最适酶解时间,确定分离菠萝叶基原生质体的最适条件;在最适条件下制备原生质体,采用聚乙二醇(PEG)介导法转化质粒,建立菠萝原生质体瞬时转化体系。【结果】L 9(33)正交试验结果显示,不同处理分离的原生质体产量为1.01×10^(6)~1.93×10^(6)g^(-1),纤维素酶质量浓度是决定原生质体产量的关键因素;原生质体活力为65.55%~87.00%,甘露醇浓度对原生质体活力的贡献最大。最适酶解条件为:菠萝叶基在含12 g/L纤维素酶、6 g/L离析酶、0.6 mol/L甘露醇的酶液中避光酶解4 h,产量可达1.96×10^(6)g^(-1),活力为85.54%。菠萝叶基原生质体通过PEG介导法转化pAN580-WRKY75质粒后,可在激光共聚焦显微镜下观察到核内的绿色荧光信号。【结论】确定了菠萝叶基原生质体的最适分离条件与瞬时转化方法,建立了适用于菠萝基因功能分析的原生质体瞬时表达体系。 展开更多
关键词 菠萝叶基 原生质体 瞬时转化 绿色荧光蛋白
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剥粒菠萝试管苗二级苗圃育苗技术措施 被引量:1
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作者 黎仕聪 缪泗珍 林钊沐 《热带作物研究》 1990年第3期30-32,共3页
剥粒菠萝二级苗圃的主要育苗技术是搭荫棚、畦面铺椰糠及其它管理措施。应用这些技术措施后,育苗成活率由原来的30%左右提高到96.2%,苗木生长整齐茁壮,出圃率高达92%。
关键词 剥粒菠萝 试管苗 育苗技术
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以花芽和冠芽切段为外植体的菠萝离体繁殖 被引量:10
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作者 洪燕萍 林顺权 +1 位作者 林庆良 吕柳新 《福建农业学报》 CAS 2004年第3期178-180,共3页
以花芽和冠芽的切段为外植体对食用菠萝进行离体培养,结果表明,以MS+NAA 0.5 mg·L-1+BA 5.0 mg·L-1为诱导培养基,以MS+BA 3.0 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1+活性炭1.0%为增殖、生根培养基,可 获得较好增殖、生根壮苗效果... 以花芽和冠芽的切段为外植体对食用菠萝进行离体培养,结果表明,以MS+NAA 0.5 mg·L-1+BA 5.0 mg·L-1为诱导培养基,以MS+BA 3.0 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1+活性炭1.0%为增殖、生根培养基,可 获得较好增殖、生根壮苗效果,同时以椰糠:砂=1:1为基质,移苗的成活率达90%以上。 展开更多
关键词 菠萝 离体培养 快速繁殖 外植体 培养基
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